鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵

1、鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解分光光度法測定物質(zhì)含量的一般條件及其選定方法 。2掌握 鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的方法3了解 722型分光光度計的構(gòu)造和使用方法2 實(shí)驗(yàn)原理1光度法測定條件:分光光度法測定物質(zhì)含量時應(yīng)注意的條件主要是顯色反應(yīng)的條件和測量吸光度的條 件。2鄰二氮雜菲 -亞鐵配合物:鄰 二氮雜菲是測定鉄的一種很好的試劑在 ph=2-9條件下,鉄與 鄰二氮雜菲 生成極穩(wěn)定的橘紅色配合物,此配合物的 lgK 穩(wěn) =21.3,摩爾吸光系數(shù)為 11000。在顯色前首先用鹽酸羥胺把三價鐵離子還原為二價鐵離子,其反應(yīng)式為2Fe3+2NH2OH.HCl=2Fe2+N2+2H2O+4

2、H+2Cl-3儀器與試劑儀器:分光光度計,容量瓶,移液管,洗瓶。試劑:(1 100 ug/mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(2 20 ug/mL的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液4實(shí)驗(yàn)步驟1條件實(shí)驗(yàn)(1 吸收曲線的測繪 用吸量管移取 20 ug/mL 鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液 5.00 mL 于 50 mL 容量瓶中, 用吸量管依次加入 5% 的鹽酸羥胺溶液 1 mL,搖勻,加 1 mol/L NaAc 溶液 5 mL和 0.1% 鄰二氮菲溶 液 3 mL,以水稀釋至刻度,搖勻。在分光光度計上用 l cm 比色皿,以水為參比溶液,在 570-430 nm 之 間,每隔 10 nm 測定一次吸光度,以波長為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制吸收曲線,找

3、出最大吸收波 長 max 。(2 鄰二氮雜菲 -亞鐵配合物的穩(wěn)定性在最大吸收波長處每隔一定時間測定其吸光度然后以時間為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)繪制曲線(3 顯色劑濃度實(shí)驗(yàn)取 7 只 50 mL 容量瓶,并且對其編號用吸量管依次加入 20 ug/mL的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液 5mL 與容量瓶中 和 5% 鹽酸羥胺溶液 1 mL, 搖勻, 經(jīng)二分鐘后, 加入 1 mol/L NaAc 溶液 5 mL, 然后分別加入 0.1% 的 鄰二氮菲溶液 0.3 mL, 0.6 mL, 1.0 mL, 2.0 mL, 3.0 mL ,4.0 mL,以水稀釋至刻度,搖勻。在分光光 度計上,用 l cm 比色皿,在適宜波長下,

4、以水為參比溶液,測定以上七個溶液的吸光度。以鄰二氮菲的 體積 (mL 為橫座標(biāo),相應(yīng)的吸光度為縱座標(biāo),繪制吸光度 -顯色劑用量曲線,找出在測定中應(yīng)加人的顯色 劑的體積 (mL。(7 鐵含量的測定標(biāo)準(zhǔn)曲線的測繪:去 50 mL容量瓶 6只,分別移取(務(wù)必準(zhǔn)確移取 20 ug/mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液 2.0 mL, 4.0 mL, 6. 0mL , 8.0 mL , 10.0 mL于五只容量瓶中不加鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液醅空白液作參比, 然后各加 1MOL5%鹽酸羥胺溶液,搖勻經(jīng)二分鐘后,再各加 5ML1MOL.L-1NaAc 溶液及 3ML0.1%鄰二氮雜菲溶液,用水稀 釋至刻度搖勻在分光光度計上,一同 1cm 比

5、色皿在最大吸收波長 510nm 處測定各溶液吸光度, 以鐵含量 為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。未知液中鐵含量的測定 ,吸取 5ML 未知液代替標(biāo)準(zhǔn)溶液,其他步驟均同上,測定吸光度,由未知液吸 光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出 5ML 未知液中鐵含量然后以每毫升未知液中含鐵多少微克表示結(jié)果。五:(1 吸收曲線的測繪吸收曲線 0.10.20.3 0.40.5450 500550 600波長吸光度從吸收曲線可以看出 鄰二氮雜菲 -亞鐵配合物在波長 510nm 處吸光度最大, 因此測定鐵時宜用波長 為 510nm 。 。(4標(biāo)準(zhǔn)曲線的測繪與鐵含量的測定圖中標(biāo)準(zhǔn)曲線是一條直線,從該曲線可以測定未知液中鐵的含量。六