分子生物學(xué)考試復(fù)習(xí)題及答案

1、第一章 綺論一.簡述分子在轉(zhuǎn)學(xué)妁上要汆。1 .DNA重組技術(shù)(又稱象團(tuán)工理)2 .基因表達(dá)調(diào)拉研究3 .生物大分孑的結(jié)構(gòu)功能的研究結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)4,基因組、功能基因組與生物信息學(xué)研究二.什金是迨傳學(xué)的中心決町和反中心族時？遺傳學(xué)中心法則：楮述從一個基因到相應(yīng)蛋質(zhì)的信息流的逾狡。遺傳信息后存在DNA中，DNA波復(fù)制 傳給孑代細(xì)的，信息被拷貝或由DNA拈滎成RNA,然后RNA初澤成多肽。反中心法則：由RNA逆樣滎到DNA,再由DNAW專錄到RNA,然后RNA初譯成多肽、蛋6灰。第二一 一包體與DNA一、名詞等價年保復(fù)制：DNA復(fù)制時，以余代DNA的每一條鏈作為模板，合成完金扣同的兩個雙鏈自帝DNA

2、分孑， 每個孑代DNA分孑中都含有一條京代DNA隹的復(fù)制方式。國號片盤：在DNA復(fù)制過貍中，訴導(dǎo)鏈能連續(xù)合成，而沛后任只能是新埃的合成53 的多個短片段，這些不連續(xù)的小片段稱為岡崎片段。復(fù)制孑：從復(fù)制原點(diǎn)列終點(diǎn)，組成一個復(fù)制單位，叫復(fù)制子。爾人序列：及簡單的轉(zhuǎn)座孑，不含方任何府主基因，它們是細(xì)菌殺色體或質(zhì)檢DNA的正常姐成部分。DNA的支柱和更性：支柱：汨DNA雙錢的氮絨新裝，免全變成單鏈。復(fù)性：希熱變性的DNA級慢冷卻， 單鏈恢復(fù)成風(fēng)銃。風(fēng)向復(fù)制：復(fù)制從一個固定的起始點(diǎn)開始，同時向兩個方向等速或行。引物陳：一種浩珠的RNA聚合酶，在DNA模版上合成一段RNA銃，這段RNA鏈?zhǔn)荄NA復(fù)制起始時

3、必 需的引物。種代子：存在與殺色體DNA上可自主復(fù)制和蒞移的基本單住。被基切除修復(fù)：管完由穗答水辨輯識別特定受損核薦暇上的NB掂苔鍵，在DNA上形成AP位點(diǎn)，由AP 核暇切酶把受指的核谷歌的提薦-璘酸鈍切開，移去包括AP核點(diǎn)在的小片段DNA,由聚合酶I合成新片段， DNA連接薛景終把兩考連接成新的DNA在。DNA重組修復(fù)：即“復(fù)制后修復(fù)"。機(jī)體細(xì)胞對在復(fù)制起始時得未修復(fù)的DNA部可先復(fù)制再修復(fù)。在復(fù) 制時，先跳過損傷部依，在和成鏈中錮下一個缺。對該缺。的修復(fù)即“DNA重姐修復(fù)”：先從同源DNA 母鏈上將相應(yīng)核答駛序列片段移至子鏈缺。處，然后再用新合成的序列補(bǔ)上母鏈空缺。解發(fā)*:通過水

4、群ATP扶得能量來斛開雙鏈DNA的酶。單在結(jié)合方6:與解開的DNA單鏈緊電結(jié)合，歷止重新形成雙鏈，并免受核改酶降解。在復(fù)制中維持模板 處于單鏈狀態(tài)。DNA連接峰：連接DNA < 3X-OH木瑞和相鄰DNA < 5f-P末端，形成磷啖二酯鍵，從而杷兩段粕鄰的DNA 在連接成完整的健。種莊子：一段DNA順序可以從原住上單獨(dú)復(fù)制或新裝下來，環(huán)化后插入另一位點(diǎn)，并對其后的基因起調(diào)技 作用。P和左孑：是一種能夠誘發(fā)雜種不育的果地枯度孑，果蠅中幾乎所有的雜種不育都由P轉(zhuǎn)座孑引起。二、理解題1. DNA和RNA分孑的基本組龍青分。1 . DNA由4種主要的脫氧核苓破(dAMP、dGMP. dCM

5、T和dTMP)通過3', 5'-有破二醋鍵連接而成。2、RNA是由核虢核苔酸經(jīng)磕酯鍵結(jié)合而成長銃狀分子。一個核掂核薦改分孑由磷酸，核抵和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種，即A腺嗦吟，G鳥噤吟，C胞嘯味，U尿啥味。2 .DNA分孑妁一級結(jié)構(gòu)：定義、組成和森示分族。1.定義：然DNA分孑中多個脫氧核答暇的排列順序。即數(shù)目龐大的叩種或基的排列順序。2、DNA的堿基組成符合Chargaff定則：(1)在所有的DNA中，A=T, G = C即A+G=T+C(2) DNA的堿基姐成其有種的特異性，即不同生物物種的DNA具有fi乙獨(dú)特的成基組成，但沒有如織和爆曾的特異性。表示方法：()結(jié)構(gòu)式

6、表示法:(2)線條式表示出:5 " pHp 匚JpCpAptZQH 三；5 pTGCAC： 0M 3 (3)字母式表示出:3.DNA雙螺族結(jié)構(gòu)的基本特A ?1 .螺旋直往2nm；堞族周期包含10對減基；觀距3.4nm；相4p堿基對平面的間距0.34nm。2 .嗦吟和喻喊堿基對層疊于雙螺旋的倒。順著螺旋軸心從上商下看，可見或基平面與縱軸垂直，且螺旋的 軸心先過氫鈍的中皮。3、而隹上的減基以氮健扣連.，C與G, A與T配對。4、由兩條反商平行的多核薦酸鏈囹繞同一中心軸構(gòu)成的右手螺旋結(jié)構(gòu)。一條由5'端到3端，另一條從 3'痛到5'端。鏈間有螺淡形的s糟，其中一個較淺

7、的叫小溝(約1.2nmJ 一個較深的叫大溝(約2.2nm)。4.DNA復(fù)制體余包招呷些要素？底物：dNTP (dATP. dGTP、 dCTP、dTTP)；聚合酶(polymerase)：依賴DNA的DNA聚合酶，簡寫為DNA-pol；模板(template)：解開成單鏈的DNA母鏈；引物(primer)：提供3-OH末瑞的去核薦改；其他的酶和姿右加因孑5.原核生物DNA聚臺峰的葉囊和弁同？ 原核生物DNA聚合晦種類的比較pol-1pol-llpol-lll5 -3最合曙港性+3 -5外切味活性+5 -3外切*活性+一+構(gòu)成（亞基效）單體不詳多亞基體外鏈延長速度（核谷酸/ 分）60030900

8、0分孑效/細(xì)胞400不詳10 20功能修復(fù)合成 去除引物 埴補(bǔ)會陵 校對不詳復(fù)制校對6.DNA更由的基本it在和終止機(jī)觀21. DNA雙螺旋的群旋：DNA在復(fù)制時，其雙鏈?zhǔn)紫冉忾_，形成復(fù)制又，這是一個有多種條質(zhì)以及酶參與復(fù)制的過程。2、DNA復(fù)制的引發(fā)：所有的DNA聚合酶都從3'羥基痛起始DNA合成。DNA復(fù)制時，往往先由引發(fā)每A DNA復(fù)制時，往往先由引發(fā)聒在DNA模板上合成一段RNA鏈，它提供引發(fā)未滿（即引物人 接著由DNA聚合酶從RNA聚合酶從RNA引物3'端開始合成新的DNA鏈。3、在DNA聚合孱的作用下，水屏切除RNA引物，埴補(bǔ)藝抉。4、在DNA連接孱的作用下，連接扣

9、4RDNA片段。5 .終止機(jī)理：當(dāng)復(fù)制又前移送到22個堿基的重復(fù)性終止序列（TERJ時，Ter.Tus復(fù)合物能使DnaB不再 將DNA解鏈，皿拈復(fù)制又的繼續(xù)迂格，等到相反方商的復(fù)制又到達(dá)石，停止復(fù)制。期間，人后50lOObp 未被復(fù)制，由修復(fù)方式填補(bǔ)無缺，而后兩條鏈斛開。7 .DNA復(fù)制保真布的多現(xiàn)？至少依賴三種機(jī)制：L 遵守產(chǎn)格的堿及配對規(guī)律；2.聚合酶在復(fù)制延長中對或及的選擇功能；3.復(fù)制中 的即時校讀功能。8 .什幺是RNA反總錄，以及他的生物學(xué)意義？定義：以RNA為摸板以四種dNTP為原料，在PBA指導(dǎo)的DNA聚合酶的儂化下，樓賬或及互補(bǔ)初對的原 則合成DNA的過:桂。意義：對分孑生物

10、學(xué)的中心法則叱行了修正和補(bǔ)充；在實際工作中，有助于基因工作的實在，可用于目的 基因的制備。9 .什金是DNA 4發(fā)性損傷？復(fù)制過程中或基紀(jì)對時產(chǎn)生的誤差，經(jīng)DNA聚合酶校正和SSB等舔合校對，任未破校正的DNA損傷。包 括：DNA復(fù)制中的錯諼；DNA的自發(fā)性化學(xué)變化(或息的異構(gòu)互變、或基的脫氮及作用、脫嚓冷與嘲味、 堿基修飾與鏈新4U ;10 .DNA修復(fù)包括丹些奧型？DNA修復(fù)條燒功能錯初修復(fù)恢復(fù)錯比堿基切除修復(fù)切除突變的堿基核甘酸切除修復(fù)修復(fù)被破壞的DNADNA直接修復(fù)修復(fù)喻味二體或甲基化DNA第三季RNA的合成一.名碼一樣有義一：與mRNA序列相同的那條DNA在，也稱為編均在。反義。：根

11、據(jù)堿基互補(bǔ)原則指導(dǎo)mRNA合成的DNA鏈，也稱為模板鏈?？磩幼樱褐改鼙籖NA聚合酶識別.結(jié)合并點(diǎn)動基因轉(zhuǎn)滎的一段DNA序列。因于：原核生物RNA聚合酶的一個亞基，是枯滎起始所必冷的因孑，主要影響RNA聚合酶對科錄起始住點(diǎn)的識別O剪接體：是在其核生物中，mRNA首體在剪接過程中組裝形成的多組分復(fù)合物，主要由細(xì)胞核小分孑RNA 和多種蛋白質(zhì)因子組成?？其浧鹗键c(diǎn)：是指與新生RNA鏈第一個核首酸相對應(yīng)DNA鏈上的堿息.三元起必復(fù)合物：又稱三元起始復(fù)合物。為全酶、媒板DNA和新生RNA形成的復(fù)合物，亦可理解為擊全 酶、DNA和核薦三磷戰(zhàn)(NTP)構(gòu)成。于RNA聚合酶正確機(jī)別DNA模板上的點(diǎn)動子后形成。帶

12、錄終止子：在DNA分子上(基因未用)提供檔錄停止信號的DNA序列稱為終止孑,它能使RNA聚合酶 停止合成RNA并粹放出RNAo科錄單元：是一段從點(diǎn)動孑開始至終止孑結(jié)束的DNA序列。RNA聚合酶從轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)開始漕著模板前段， 直到終止子為止，后滎出一條RNA鏈.稱為與專錄單元。Pribnow 4ft： Pribnow分離了 fd嚏苗體等被障保護(hù)的區(qū)城，在被保護(hù)區(qū)有一個由5個核薦驗如成的共同序 列，是RNA聚合酶的緊電結(jié)合點(diǎn)，現(xiàn)在稱為Pribnow區(qū)。金孑7外尺子：真核基因表達(dá)往往伴隨著RNA的剪接過程.從mRNA前體分孑中切除彼稱為金孑的非煽瑪區(qū)， 并使基因中被稱為外顯孑?？设F機(jī)：由DNA轉(zhuǎn)錄生成

13、的原始域?qū)ｄ洰a(chǎn)物核不均一 RNA(hnRNA),經(jīng)過5加"例"和3'晦切加多聚腺答破，再經(jīng)過RNA的剪接，煽為條質(zhì)的外顯孑部分就連接成為一個連鎮(zhèn)的可拱框RNA編輯：RNA的病輯是祟些RNA,特別是mRNA的一種加工方式，如插入。刪除或取代一些核答驗戌 基；它導(dǎo)致了 DNA所編均的遺傳信息的改變。RNA拼接：將含子部分切除，將外顯孑卻分遂行拼接或選擇性拼接而成為成就的mRNA,這個過程波稱為RNA的拼接過程。核味：是具有依化功能的RNA分孑,是生物依化制。二、理斛題L黃述RNA的種類和生物學(xué)功能。1 .種類：mRNA（信使 RNA） . rRNA（核掂體 RNA） .

14、 tRNA（拈運(yùn) RNA）、snRNA2、功能：rRNA：是核技體的組成成分，由細(xì)胞核中的核仁合成，而mRNAtRNA在委由質(zhì)合成的不同階段分別執(zhí)行 著不同功能。mRNA：是以DNA的一條隹為模板，以或基互補(bǔ)必對原則，轉(zhuǎn)滎而形成的一條單鏈，主要功能是實現(xiàn)遺傳 信息在條質(zhì)上的表達(dá)，是遺符信息傳遞,過程中的機(jī)架tRNA：功能是攜帶符合要求的氨基破，以連接成收隹，再經(jīng)過加工形成蛋令加snRNA： 一直存在于細(xì)胞核中，與40種左右的核蛋白質(zhì)共同組成RNA剪接體，在RNA料滎后加工中起支 要作用。另外，還有端體酶RNA（telomeraseRNA）,它與物色體求痛的復(fù)利有關(guān)；以及反義 RNA（antis

15、enseRNA）,它參與基因表達(dá)的調(diào)拉。2 .簡述RNA樣錄的述敘的主委步臊和梏點(diǎn)。1.起始位點(diǎn)的次別：RNA聚合酶與啟動子DNA雙鏈相互作用并與之相結(jié)合的過程。2、射錄的起其：RNA鏈上第一個核甘瞠鍵的產(chǎn)生3、RNA鏈的延伸：。亞基脫攆，RNA-pol聚合酶核心酶變構(gòu)，與短板結(jié)合松弛，沿著DNA媒板訴移；在核心酶作用下，NTP不斷聚合，RNA在不新延長。4、耳專錄終止：當(dāng)RNA鏈延伸到的錄終止核點(diǎn)時，RNA聚合晦不再形成新的磷酸二酯純，RNA-DNA雜合 物分禹,后滎泡死解，DNA帙復(fù)雙鏈狀態(tài)，RNA聚合酶和RNA拔絳放。3 .簡述RNA最合陳的結(jié)枸和各北東功能。1 ,結(jié)構(gòu)：由核心酶和o因子

16、組成。核心酶由：兩個a丑基，一個，亞基，一個0亞基，一個3亞基姐成。2、丑某功能：a：核心酶組裝，啟動子識別P： 0和3共同形成RNA合成的活性中心a：有在多種。因孑，用于識別不同的啟動孑4 .需動孑的基本結(jié)構(gòu)。啟動孑：是一段位于結(jié)構(gòu)基因5,滿上游的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準(zhǔn)確的結(jié)合，并具有轉(zhuǎn)滎起始特異性。例：基因的注異性枯滎取決于薄與啟動子能否有效的形成二元復(fù)合物，所以，RNA聚合酶如何有效的找到 啟動子并與之結(jié)合，是科錄起始過程中首先要解決的問題。5,壟核生物和真核生物的mRNA特征區(qū)別©1.原核生物mRNA常以多順反子的形式存在。真核生物mRNA一般以單

17、項反子的形式存在。2、原核生物mRNA的科錄與初中一般是偶聯(lián)的，真核生物轉(zhuǎn)滎的mRNA首體則需經(jīng)耳專錄后加工，加工為 成熟的mRNA與委右質(zhì)結(jié)合生成信息體后才開始工作。3、原核生物mRNA率壽期很短，一般為幾分鐘。真核生物mRNA的豐壽期較長，有的可達(dá)數(shù)日。4、原核與其核生物mRNA的結(jié)構(gòu)竹皮也不同。其核生物mRNA由5'轉(zhuǎn)帽孑結(jié)構(gòu)、5'端不初澤區(qū)、初澤區(qū)、3'房不初澤區(qū)和3'痛聚腺谷破尾巴姐成，原核生物mRNA無5'端帕孑結(jié)構(gòu)和3'痛聚腺尊破尾巴。6.什©是mRNA5'加幅和它的生物學(xué)奇義？資料定義：5,端的一個核薦改總是7.

18、甲基其核谷三磷啖Cm7GpppJo mRNA5'端的這種結(jié)構(gòu)稱為帕孑。意義：1、能被核斑體小亞基識別，促使mRNA和核林體的結(jié)合；2. m7Gppp結(jié)構(gòu)能有效地封閉mRNA 5'末滿，以保護(hù)mRNA免受5'核酸外切酶的降群，增強(qiáng)mRNA的稔定。3、是初中所必須的。7、什幺是mRNApolyA兒巴和它的生物學(xué)專義？定義：真核生物mRNA的3'端都有poly A序列通常位于mRNA上的15O-2OO個股答敢戌及（又稱為特 殊的尾巴結(jié)構(gòu)）。意義：1、poly A是mRNA隊細(xì)胞核此人細(xì)胞質(zhì)所必、需的形式，大大的提高了 mRNA在細(xì)胞質(zhì)中的穩(wěn)定性。 2、這一特性已被廣汰

19、用于分子克隆。作為反枯滎幅合成的第一條cDNA鏈的引物。Poly A佳點(diǎn)及AATAAA 的存在對于基因的射滎終止和成熟意義重大。8 .樣錄終止孑的美熨和終止原理是什4?類型：強(qiáng)終止孑一部終止子；弱終止子O弱終止孑可分為兩類：一類不依賴于蛋白質(zhì)柿因子就能實現(xiàn)終止作用；另一類則依賴蛋6琳i因孑才能實現(xiàn)終止作用，這種條右質(zhì)硬因子稱為奔放因子，通常又稱P因子。原理：不依賴P因子的終止：終止住或上游一般存在一個需含GC堿基的二型對稱區(qū)，RNA形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)；在終止位點(diǎn)訴面有一段由4.8個A組成的序列，RNA的3,用為誨聚U。依賴p因孑的終止：六聚體參、水價冬種核甘三磷瞠促使新生RNA鏈從三元耳專錄復(fù)合物中

20、群方出來，從 而終止帶滎。9 .什©是RNA編科，它力和生構(gòu)學(xué)意義21,是指科錄后的RNA在煽瑪區(qū)發(fā)生堿基的突變、加入或丟失等現(xiàn)象。2、意義：校正作用：有些基因在突變過現(xiàn)中丟失的遺傳佶息可能通11RNA的編輯得以恢復(fù)。調(diào)拉翻譯：通過塌堀可以構(gòu)求或去除起始物種子和終止電瑪孑，是基因表達(dá)的調(diào)拉的一種方式。獷無遺傳信息：能使基因產(chǎn)物獲得新的結(jié)構(gòu)核功能，有利于生物的段化。第皿一:委白一的合成一：基本機(jī)念命帝：科爐形成的mRNA在蛋質(zhì)合成機(jī)制下施導(dǎo)蛋加合成的過程。起用由巧孑：是蛋白質(zhì)初澤的起始核點(diǎn)。終止融巧子：條質(zhì)初中終止的魚點(diǎn)。巧子：mRNA上每3個核答破翻譯成委的加多肽鏈上的一個氨基酸，這

21、三個核答改被稱為鎊均子。反文由巧孑：tRNA上與mRNA上物嗎孑初對的三個核薦敵序列。技正tRNA：通過改變反電弓子區(qū)校正姿白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因的無義突變或通過反卷均子區(qū)的改變，把正確的氨 及酸加到肽鏈上，合成正常條質(zhì)來校正錯義交變。同工RNA：由于一種氨基酸可能有多個電嗎孑，因此有多個tRNA來區(qū)別這些電嗎孑，即多個tRNA代表 一種氨基酸，這類氨基酸諛稱為同工RNA。裾老臾文：由于結(jié)構(gòu)基因祟個核薦酸的變化使一種氨基酸的密碼變成另一種氨基改的電嗎。覲展tRNA合龍晦：是一類依化氨基酸與tRNA結(jié)合的特異性酶，反應(yīng)如下：資料AA+tRNA+ATPAAtRNA+AMP+PPi°更長因孑：對于

22、原核生物然：EF-Tv. EF-Ts. EF-Go對于真核生物撲：eEF-k eEF2。終止因孑：對于原核生物物：RFL RF2、RF3。對于其核生物：eRFL eRF2。蛋白質(zhì)前體：新生的,沒有功能的，必須繪過加工修飾才能耳專變?yōu)橛谢钚缘淖擞沂?。二：思考題I，遑傳金馬的特性包括哪些才受？1 .連續(xù)性：初澤由mRNA的5端的起始電瑪孑開始，一個卷均子接一個電巧子連續(xù)的閱校直列3'端的 終止熱嗎子，卷碼間無間新，沒有重疊。2、簡并性：由一種以上卷嗎子編碼同一個氨基酸的現(xiàn)象。3、物均的通用性與沾珠性：在生物界,物碼子是通用的，但是有少數(shù)浩例存在。4、盤動性：在熱為子與反寺巧子的萌對中，/兩

23、對嚴(yán)格逆冷堿基初對原則，第三對堿基有一定的自擊度， 可以“拄動”，因而使某些tRNA可以竊別1個以上的密為孑。2 .簡述安白質(zhì)合成的主要步朦和各階段的主要事件。1 .初澤起始：核掂體與mRNA結(jié)合并與氨基乳-tRNA生成起始復(fù)合物。2、肽鏈的延伸：由于核掂體沿mRNA5'端向3'端移動，開始了從N端向C端的多肽合成，這是蛋團(tuán)質(zhì) 合成過貍中速度是快的階段。3、肽鏈的終止及絳放。核絨體從mRNA上解需，準(zhǔn)備新一輪合成反應(yīng)。3、司述tRNA的結(jié)構(gòu)特征及其功能。2 .結(jié)構(gòu)特征：三葉草型，其中：a.受體臂：主要由鏈面端或基配對序列形成的桿狀結(jié)構(gòu)和3'端未自已對的34個或基組成。b

24、、T(pC臂：根據(jù)3個核答段命名的，其中。表示擬尿嗑比，是tRNA分子所擁有的不常見核薦改。c、反電嗎子臂：是根據(jù)住于套索中央的三灰灰卷嗎子命名的。d、D臂：根據(jù)其含二貪尿嗨火命名的。3 .功能：攜帶氮及酸叱人核掂體，在mRNA指導(dǎo)下合成蛋臺質(zhì)。即以mRNA為掇板，將其中具有物碼意 義的核答酸序?qū)Ψg成委句質(zhì)中的氨基酸序列。4、參與備慶合成的陳和因子有哪些？釐述其作用。晦和因孑作用跳膠-tRNA合成售用于活化氨基酸肽基后移酶依化氮基改之間形成肽鍵20種氨基酸蛋白質(zhì)合成的基本原料tRNA攜帚RNA進(jìn)入核秋體的射運(yùn)器mRNA科錄模板核糖體蛋白質(zhì)合成的場所起始因孑蛋質(zhì)合成起始延長國孑放錢的廷伸存放因

25、孑蛋質(zhì)合成的終止ATP、GTP提供能量Mg+硬幼委質(zhì)的合成5.簡述方后質(zhì)譯后加工修佛美曼1, N篇fMet或Met的切除：蛋令質(zhì)氨基端的甲跣基在肽鏈合成的板脫甲跳化除水解。2、二琉使的形成：蛋質(zhì)合成后，一些半胱氮液氧化生成胱氨酸，百個胱氮改之間形成二碗使。3、浩定氨基瞠的修飾：a、磕酸化：主要由多種蛋白激酶值化，發(fā)生在絲氨酸，氮暇，骼氮暇等氨及啖的倒在。b、糠基化：是真核細(xì)胞蛋白質(zhì)的特征之一。主要由質(zhì)網(wǎng)中的糖基化酶依化進(jìn)行。c、甲基化：主要由細(xì)胞質(zhì)中的N甲基忖移酶儂化叱行。4.切除非功能片段：例如：新合成的胰島素前體是的胰島素原，必須切除信號肽變成胰島素原，再切去C-肽才變成有活性的胰 島素。

26、6、比較原核生物和真核生物核於體結(jié)構(gòu)的組成。核掂體小亞基大亞氐蛋白質(zhì)含量RNA含量原核生物70s30s50s2/31/3真核生物80s40s60s2/53/57、什&是SD序列，其功能是什俟2定義：原核生物mRNA上的一個5' -AGGAGGU-3'序列，它與30s正基上16s rRNA 3'房的窗嗑啖區(qū)序列 5' -GAUCACCUCCUUA-31 相互補(bǔ)。功能：能與細(xì)菌16srRNA3'端識別，精肋姿質(zhì)初澤東蛇隊起始AUG處開始加譯。第五*、第六*:分孑生物學(xué)的研究決1 .簡述PCR護(hù)增的原理和過板。1 .原料：耐熱DNA聚合海；模板DNA；

27、兩種引物；四種脫氧核掂核首酸、徼沖沼液。2、過程：a、嫩版DNA的變性：旗版DNA經(jīng)加熱至93攝氏度左右一定時間后，使模板DNA雙使蟹需成為單鏈；b、模版DNA與引物退火復(fù)性：攜板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55攝&度左右，引物與模版 DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合；c、引物的延伸：DNA模板.引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，抱序列為模板， 樓照堿基互補(bǔ)配對的原理，合成一條新的與模板DNA使互補(bǔ)配對的子在DNAod、疑照要求重復(fù)上述步朦。2、基因如DNA丈序和cDNA丈4在構(gòu)左原理和用途上有什0區(qū)別？1.基因組DNA文庫：杷祟種生物的基因組DNA切成適

28、當(dāng)大小，分別與我體姐合，導(dǎo)人微生物細(xì)胞，形成 克呸。用途：分需特定基因片段.分析特定柒因結(jié)構(gòu).研究基因表達(dá)調(diào)拉，用于基因如物理圖潴的構(gòu)定和 全基因組序列測定。2、cDNA文庫：人工以mRNA為模板反布錄出cDNA后，與我體組合導(dǎo)入微生物中，形成克隆。用途： 年造目的基因、大規(guī)饃測序、基因芯片雜交等功能基因組學(xué)研究。3 .簡述墓因克展療法主要種類和冬觀及其應(yīng)用。1. RACE技術(shù)：原理：依賴于RNA連接酶連接和索聚帕孑的快速“增。應(yīng)用：在已知cDNA序列的基礎(chǔ)上克唉5'端或3'端缺失序列。2. cDNA差示分析比：原理：降低cDNA群體復(fù)雜性和更換從DNA而轉(zhuǎn)接頭。應(yīng)用：充分發(fā)揮

29、PCR能以 指數(shù)形式廣增雙鏈DNA模板，而以愛性形式"增單鏈模板的特性，特異性護(hù)增目的基因片段。3、Gateway大規(guī)?？寺〖夹g(shù)：原理：利用九嚏菌體近行位點(diǎn)將異性DNA片段重姐，實現(xiàn)了不需要傳統(tǒng)的 酶切逢接過程的基因快速充險和我體間平行科移。應(yīng)用：大規(guī)?？寺』蚪M注釋的可譯柜架。4、圖住克窿法：原理：1.構(gòu)定遺傳連鎖酉：將目的基固定住內(nèi)某個殺色體的特定住皮，并在其兩側(cè)確定 緊卷連鎖的RFLP或RAPD分孑林記。2,通過一條列分析，找出與目的基因花雪及近的RFLP林記，通過 某些技術(shù)將&于這兩個標(biāo)記之間的基因片段克隆并分禹出來。3、根據(jù)基因功能互作原理鑒定目的基因。底 用：分宵

30、未知性狀日的基因。4 .簡速 Southern blot,Northern blot 和 Western blot 技術(shù)度理和用途1. southern blot：原理：具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下，可按堿基互補(bǔ)的原則形成風(fēng)隹， 此雜交過程是高度特異的。由于核酸分子的高皮特異性及檢測方法的靈敏性，綜合凝膠也永和核酸切限制 酶分析的結(jié)果，便可繪制出DNA分孑的F艮制固話。用途：城行基因如DNA特定序列定位。2、Northern blot：原理：通過電的方法將不同的RNA分子依據(jù)其分孑量大小加以區(qū)分，然后通過與特 定基因互補(bǔ)配對的探針雜交來檢測目的片段。作用：通過檢測RNA的表達(dá)水平

31、來檢測基因表達(dá)。3、Western blot：原理：根據(jù)諛測姿質(zhì)能與特異性抗體結(jié)合的特性和該條令質(zhì)的相對分子施量。作用： 檢測樣舄中是否含有姿白質(zhì)抗原。5、基因裊達(dá)余列分析技術(shù)CSAGEJ的點(diǎn)理和用途。1 .原理：以DNA序列測定為基礎(chǔ)定量分析全基因組表達(dá)模式。2、用途：五接校出任何一種細(xì)胞類型或姐織的基因表達(dá)信息。6、箱述基因芯片技術(shù)妁方法和原理以及在分子生物學(xué)研究的意義。1 .方由原理：能同時監(jiān)測大量利基因表達(dá)的實噲手段，從而風(fēng)速準(zhǔn)確的在基因組水平上鬧述不同生物姐底 或者細(xì)胞中各種轉(zhuǎn)錄體的變化規(guī)律。2、2 用:基因芯片可用手段行基因分析。先建立正常人的特定組織，器曾的基因芯片，冷出彩準(zhǔn)雜文

32、信號圖，用可 母病人的cDNA做探針雜文，確定哪些基因的表達(dá)拔抑制或激活。將芯片玉帶研究的cDNA或其他樣品雜交，經(jīng)過計算機(jī)掃描和故據(jù)處理，便可以現(xiàn)察到大規(guī)媒的基因群在 不同組織或同一組織不同發(fā)育時期或不同生理條件下的表達(dá)饃式。7、什俟T RNAi和他的應(yīng)用？1,定義：利用雙錢小RNA高效.玨異性降薜細(xì)胞同源mRNA從而見新靶基因表達(dá)，使細(xì)胞出現(xiàn)利基因缺 夫的表理。2、應(yīng)用：用于特異性降解已經(jīng)耳專錄產(chǎn)生的mRNA,從而使某個基因表現(xiàn)為沉默。8、什基因故除和它的基本原理。1.定義：又稱“某團(tuán)打包' 該技術(shù)通過外源DNA與染色體DNA之間的同源重組，此行精確的定點(diǎn)修飾 和基因改造，具有專一

33、性強(qiáng)、殺色體DNA可與日的片段共同稔定遺傳等將點(diǎn)。2、基本原理：免全息因故除：通過同源重組出完全訪除細(xì)胞或者動物個體中的利基因活性。條件型基因放除：通過定位重組余琉實現(xiàn)特定時 間和空間的基因故除。9、什俟T博春雙雜交東院和他的應(yīng)用。1,其核生物的錄調(diào)拉因子具方組件式結(jié)構(gòu)特征，這些蛋往往由兩個或兩個以 上相互獨(dú)立的結(jié)構(gòu)城，其中 DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)城和轉(zhuǎn)滎激活結(jié)構(gòu)或是轉(zhuǎn)滎激活因子發(fā)壞 功能所必須的。2.BD能與特定基因啟動區(qū)結(jié)合，但不能激活基因轉(zhuǎn) 滎，由不同轉(zhuǎn)錄詡拉因子的BD和AD所形成的雜合 委 白和能行使激活枯滎的功能。第七一:，杖生物泉因一達(dá)調(diào)拉:基本就念基因裊達(dá)：是指錯存遺傳佶息的基因經(jīng)過一條

34、列步驟表現(xiàn)出其生物功能的整個過程。基因表達(dá)的拉：從DNA到蛋令灰的過程秣為息團(tuán)表達(dá)，對這個過：程的確節(jié)就稱為基因表達(dá)調(diào)拉。組成型表達(dá)：指不大受環(huán)境支動而變化的一類基因表達(dá)。亞成型裊達(dá)：適應(yīng)性表達(dá)（adaptiveexpression）指環(huán)境的變化袞易使其表達(dá)水平變動的一類基因表達(dá)。管表基因：指一類基因，這類基因的友達(dá)產(chǎn)物是細(xì)胞或生物體整個生命過貍中都拘續(xù)需要而必不可少的。 然伙子：是基因表達(dá)的訪確羊位，由啟動子.操縱基因及其所掛制的一組功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因所組成。 操縱基因受調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物的掛制。正林錄碼拉：調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物是激泳蛋白。根據(jù)激活蛋白的作用性質(zhì)分為正拉誘導(dǎo)和正拉皿謾。負(fù)樣錄制注:調(diào)節(jié)

35、基因的產(chǎn)物是血謾蛋，起著阻止結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)滎的作用。根據(jù)其作用竹征又可分為負(fù)拉 誘導(dǎo)和負(fù)拉皿遢。弱化子：當(dāng)操縱孑波也遢，RNA合成破終止時，起終止射錄信號作用的那一段核答段極稱為弱化孑。皙尋序列：在原核生物中多順反孑mRNA的頭一條多肽鏈合成的起點(diǎn)，同RNA分子的5,P末瑞間的花雪可達(dá)數(shù)百個核答綾，這段媼碼區(qū)之首的不科滎的mRNA區(qū)段，叫做前導(dǎo)序列。二:愿考題：1 .簡述代將對基因裊達(dá)初拉的兩種療或？1、在負(fù)*專錄調(diào)拉東就中，碉節(jié)基因的產(chǎn)物是弘道蛋6,起著皿止結(jié)構(gòu)基因種滎的作用。根據(jù)其作用消征又 可分為負(fù)拉誘導(dǎo)和負(fù)拉血通：在負(fù)拄誘導(dǎo)余饒中，血遏條自不與效應(yīng)物（誘導(dǎo)物）結(jié)合時，結(jié)構(gòu)基因不錯滎； 在負(fù)

36、拉阻遏條院中，防遢條與效應(yīng)物（林弘遏物）結(jié)合時，結(jié)構(gòu)基因不料滎。2 .在正轉(zhuǎn)錄調(diào)校祭院中，調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物是激活姿factivatorjo根據(jù)激活蛋的作用性質(zhì)分為正拉誘導(dǎo) 和正校ftl i§.：在正拉誘導(dǎo)條院中，效應(yīng)物分子（誘導(dǎo)物）的存在使激活姿處于活性狀態(tài).結(jié)構(gòu)基因楮錄；在正拉風(fēng)通條院中，效底物分子（械電謾物）的存在使激活條6處于非活性狀態(tài)，結(jié)構(gòu)基因枯滎。3 .什么是小伙子學(xué)說？操縱子學(xué)說是關(guān)于原核生物基因結(jié)構(gòu)及基因表達(dá)國校的學(xué)說，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)色氮破操縱孑，姐氨酸操縱子，率 乳林操縱子，阿拉伯掂操縱子等。3、司國金出乳魅舔蚊子的基本結(jié)構(gòu)以及環(huán)節(jié)也,。4、什幺是D萄於效我？在大腸桿菌中，B

37、半乳耗尊陳在乳林代中的作用是杷乳斑分解成匐藥掂和半乳掂。若同時在培某墓中加入 匐萄糠和乳掂，則在匐萄掂訪耗完金之的，不會誘發(fā)lac操縱孑。5、簡述色氫改然蚊孑結(jié)構(gòu)和詞節(jié)機(jī)制。1.結(jié)構(gòu)將點(diǎn)：trpR和trpABCDE不緊電連鎖；操縱基因在啟動子；有衰減孑；啟動孑和結(jié)構(gòu)及因不直接相 連；二者被前導(dǎo)順序所暗開。2、結(jié)構(gòu)以及調(diào)校：騏基數(shù)：什P操縱子間隔區(qū)，“才601%/ 史6。L?S" 119683空I I ILZJiIiI UP o| L I EDCBA,I& 1間隔區(qū)I|（弱化聲）隔節(jié)作用一I結(jié)構(gòu)基因1I高色氨酸時| I前導(dǎo)rnK 低色氨酸時La?gr-約 7kb mRNA圖4T

38、o大腸桿麟i卬操縱于6、藥述廉核生物種錄后留校的不同才或。1. mRNA自身結(jié)構(gòu)元件對初譯起始的調(diào)節(jié)。2、mRNA穩(wěn)定性對將錄水平的號響。3、調(diào)節(jié)條向的調(diào)拉作用。4 .反義RNA的調(diào)節(jié)作用。5 .稀有&瑪孑對翻譯的影響。6、重疊基因?qū)Ψg的影響。7、魔斑粒琴啖水平對萩澤的影響。8、加澤的阻遏。第八*:真達(dá)司拉一：基本就念：基因女族：真核生物的基因姐中有很多來源相同、結(jié)構(gòu)扣仞、功能融關(guān)的基因，將這些基因稱為基因家族。 薪矍墓園：基因的編碼序列在DNA分子上是不連續(xù)的，為非煽瑪庫列所隔開，其中短碼的序列稱為外顯子， 非編均序列稱含孑?；钚匀旧|(zhì)：轉(zhuǎn)錄發(fā)生之旅，殺色質(zhì)常常會在特定的區(qū)域波努族

39、松弛，形成4由DNA。燈制條色質(zhì)：只有在西梅動物印細(xì)胞發(fā)生減救分裂時才能諛現(xiàn)察到的一種殺色體充分伸展的形態(tài)，一般表 現(xiàn)為血抹殺色體通過文又或連成一體。樂園步增：某些基因的拷貝數(shù)當(dāng)一性增大的現(xiàn)象，它使得細(xì)胞在我期產(chǎn)生大量的基因產(chǎn)物以滿足生長發(fā)育 的密要,是基因活性調(diào)校的一種方式。墓因重排：將一個基因從遠(yuǎn),禹啟動子的地方格列距它很近的位點(diǎn)從而啟動枯滎。感人作用星件：其核生物DNA序列（非強(qiáng)嗎序?qū)Γ┖捅豢蒌浀慕Y(jié)構(gòu)基因能雷較近，和枯滎斜拉有關(guān)。反式作用因子：是能直接或間接地也別或結(jié)合在各類順式作用元件核心序列上，參與調(diào)拉包基因轉(zhuǎn)錄效率 的蛋質(zhì)。增玨子：能使和它連鎖的基因后錄頻率明顯增加的DNA序列。件

40、徜購構(gòu)：是一個姿質(zhì)結(jié)構(gòu)城，由重復(fù)的率胱氨暇和組氨酸或重復(fù)的半胱氮酸在一個金屬鋅肉子周形 成一個叩面體的排列。二：思考題：L 真核生物基因裊達(dá)的詞節(jié)精點(diǎn)是什0?多層次；無操縱孑和哀戒孑；個體發(fā)育復(fù)雜；受環(huán)境影響較小。2、真核生物用胞中基因組一艦構(gòu)造特點(diǎn)是什森？1 .在真核細(xì)胞中，一條成熟的mRNA鏈只能匐澤出一條多肽銃；2 .真核細(xì)胞DNA都與如蛋白和大量非組姿結(jié)合，只有一小部分DNA是裸盒的；3、嵩等真核細(xì)胞DNA很大部分是不轉(zhuǎn)滎的，大部分其核細(xì)胞中的基因中還存在不被初譯的含孑。4、其核生物能夠有序的根據(jù)生長發(fā)言階段的需要進(jìn)行DNA片段的重排，還能在需要時增加細(xì)胞慕些柒因 的拷貝數(shù)。5、許多真

41、核生物的基因只有經(jīng)過復(fù)雜的成熟的剪接過程，才能順利的初澤成姿自質(zhì)。6 .其核生物中，基因楮錄的調(diào)節(jié)區(qū)相對較大。7、真核細(xì)胞的RNA在細(xì)胞核中合成，只有經(jīng)桔運(yùn)毋過核臏，到達(dá)細(xì)胞質(zhì)后，才能波都澤成蛋白質(zhì)。3、簡單率例基因護(hù)增及其去構(gòu)學(xué)意義。1,定義：基因步增是指祟些基因的拷貝致專一性增大的現(xiàn)象，它使得細(xì)胞在短期產(chǎn)生大量的基因產(chǎn)物以滿 足生長發(fā)育的常要，是基因話性調(diào)拉的一種方式。2、舉例：如非洲爪蟾體細(xì)胞中rDNA的基因步增是因發(fā)育需要而出現(xiàn)的基因方增現(xiàn)象。4, DNA的甲條化優(yōu)皮和美曼有呻些？1.DNA甲基化主要形成5甲基胞嘯嘖/5m。和少量的N6甲基腺嗦吟（N6mA）及7.甲基烏嚓吟（7mG）。

42、2、類型：日常型甲基耳專格犀主要在甲基化母隹（饃板在）指導(dǎo)下使處于半基化的DNA雙鏈分孑上與平基胞喏啖扣 對應(yīng)的胞喏啖甲基化。從頭合成型平基轉(zhuǎn)移酶:催化未甲基化的CpG成為mCpG,它不需要母錢指導(dǎo)，但速度很慢。5、簡析DNA下基化抑電宗因總錄的機(jī)理。1. DNA甲基化導(dǎo)致某些區(qū)域DNA構(gòu)象變化，從而影響了蛋質(zhì)與DNA的氣互作用，抑制了科錄因孑與 啟動區(qū)DNA的結(jié)合效率。2、甲基的引人不利于摸板與RNA聚合酶的結(jié)合，降低了其體外桔滎活性。3、甲基化密度越大，則越不求易發(fā)生后滎；在同等平基化電度下，科錄落性受啟動孑強(qiáng)度和增強(qiáng)子的影響。 若平基化電皮很大，即使存在增強(qiáng)子也不袞務(wù)發(fā)生科錄。6、什&a

43、mp;T增強(qiáng)子以及他對基因樣錄的作用。1.增強(qiáng)孑是指能使和它連鉞的基因耳專錄頻率明顯增加的DNA序列。2、影響模板附近的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致DNA雙螺旋專折或在反式因孑的參與下，以條質(zhì)之間的 相互作用為媒介形成增強(qiáng)子與啟動孑之間“成環(huán)”連接，活化基因轉(zhuǎn)錄；將饃板圖定在細(xì)胞核沽定位 賽,如連接在核基質(zhì)上，有利于DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶改變DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的力，促叱RNA聚合酶II在 DNA隹上的結(jié)合和滑動；增強(qiáng)子區(qū)可以作為反式作用因孑或RNA聚合酶II之人染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的“人d”。7.黃圖出道安質(zhì)的硯晚化粕發(fā)硯*化。1.姿質(zhì)的磷啖化和姿合質(zhì)脫磷酸化：是指山蛋白質(zhì)激孱催化的 杷ATP或GTP上丫位的燧酸基括移到 底物委質(zhì)丸基酸戌基上述貍；其迂括過程是由委右質(zhì)磷酸酶依化的，條質(zhì)脫磷酸化。2、uNTP硒DP明H20一白白鼻岫圖HI8、反尤作用因子省哪幾大羹，興一柒的基本特底是什4?1.通用反式作用因子：主要識別啟動子的核心啟動成分；2、特殊組織與細(xì)胞中的反式作用因子：與某團(tuán)上達(dá)的組織竹異性有很大關(guān)系。3、和反應(yīng)性元件才日結(jié)合的反式作用因子：活性能被特異的