植物生理生化精彩試題材料

1、植物生理生化實(shí)驗(yàn)習(xí)題一、名詞解釋：1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線：用標(biāo)準(zhǔn)溶液制成的曲線。先配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在溶液吸收最大波長 下,?逐一測定吸光度，然后用坐標(biāo)紙以溶液濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，若被測物質(zhì) 對光的吸收符合光的吸收定律 ,必然得到一條通過原點(diǎn)的直線 ,即標(biāo)準(zhǔn)曲線2、 斐林（Folin ）酚試劑法：也稱lowry法，它結(jié)合了雙縮脲試劑和酚試劑與蛋白質(zhì)的反應(yīng)，是雙縮脲方法的進(jìn)一步發(fā)展，可利用其在650nm波長下的特定吸收進(jìn)行比色測定。3、 茚三酮顯色法：游離氨基酸與茚三酮共熱時，能定量生成紫色的二酮茚-二酮茚胺。其吸收峰在570nm,而且在一不定期圍吸光度與游離氨基酸濃度成正比，

2、因此可用分光光度法測定其含量。4、氮素代謝：氮素及含氮的活體物質(zhì)的同化異化和排泄，總稱為氮素代謝5、淀粉酶：是水解淀粉和糖原的酶類總稱。6、 真空滲入：指將葉片打孔放入注射器中，加水浸沒，排出空氣后用手指堵住前端小孔，同時把 活塞向外抽拉，即可造成減壓而排出組織中的空氣，輕放活塞，水液即進(jìn)入組織的方法。7、離心技術(shù)：是根據(jù)物質(zhì)顆粒在一個離心場中的沉降行為而發(fā)展起來的。它是分離細(xì)胞器和生物分子大分子物質(zhì)必備的手段之一，也是測定某些純品物質(zhì)的部分性質(zhì)的一種方法。8、電泳：各種生物大分子在一定 pH條件下，可以解離成帶電荷的顆粒，這種帶電顆粒在電場的作用 下向相反電極移動的現(xiàn)象稱為電泳9、同工酶：凡

3、能催化同一種化學(xué)反應(yīng)但其分子結(jié)構(gòu)和帶電性質(zhì)不同的一組酶稱為同工酶10、遷移率：指帶電顆粒在單位電場強(qiáng)度下的泳動速度。11、 聚丙烯酰胺凝膠 ：是一種人工合成凝膠，是以丙烯酰胺為單位，由甲叉雙丙烯酰胺交 聯(lián)成的，經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀，控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號的凝膠12、濃縮膠13、分離膠14、 酶活力、比活力：也稱為酶活性，是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。15、種子生活力：指種子發(fā)芽的潛在能力或種胚所具有的生命力。16、 抗逆性：植物對逆境的抵抗和忍耐能力，簡稱為抗性。17、 呼吸速率：單位時間鮮重或干重植物組織或原生質(zhì)釋放的CO2或吸收02的量來表示18、 光合速率：單位時間、單位

4、葉面積吸收CO2或放出。2的量。19、無土培養(yǎng)：不用土壤，用溶液培養(yǎng)植物的方法，包括水培和沙培等。20、 超氧化物歧化酶（SOD）:普遍存在動，植物體，是一種清除超氧陰離子自由基O2的酶。21、硝酸還原還原酶：是植物氮素同化的關(guān)鍵酶，它催化植物體的硝酸鹽還原為亞硝酸。22、 誘導(dǎo)酶：又稱適應(yīng)酶，指植物體本來不含有，但在特定外來物質(zhì)的誘導(dǎo)下誘導(dǎo)生成的酶。如硝酸 還原酶可為N0 3-所誘導(dǎo)生成。23、 活性氧：較O2的化學(xué)性質(zhì)更為活潑的 O2的代謝產(chǎn)物或由其衍生的含氧物質(zhì)，包括.O2-、.0H、 H2O2 等24、 生物自由基：泛指通過生物體自身代謝產(chǎn)生的一些不穩(wěn)定的、帶有多余電子的、化學(xué)活性很

5、高的基團(tuán)或分子。二、填空：1、 測定植物可溶性蛋白質(zhì)含量時，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線是標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)濃度 為橫坐標(biāo)，以_吸光值 為縱 坐標(biāo)。2、 常用的測定植物可溶性蛋白質(zhì)含量的方法有：Folin-酚試劑法（Lowry法）、考馬斯亮藍(lán)法 和 紫外分光光度法3、 用茚三酮顯色法測定植物組織氨基酸含量時，茚三酮溶液與氨基酸共熱生成氨， 氨與茚三酮和還原性茚三酮反應(yīng)，生成 藍(lán)紫色的二酮茚胺。該化合物顏色的深淺與氨基酸的含量成_正比_，可通過測定 570 nm處的光密度，求出氨基酸的含量。4、 用滴定法測 V含量時，若樣品本身帶有顏色，則需先將樣品用 處理。5、 測定淀粉酶活性時，3，5 二硝基水酸試劑（DNS ）的

6、作用是與還原糖顯色生成棕紅色的3- 氨基-5-硝基水酸和終止酶活性。6、 在測定淀粉酶的活性時：a淀粉酶不耐_酸_,3淀粉酶不耐熱 。7、 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中，電泳存在三大效應(yīng)，分別是濃縮效應(yīng)、分子篩效應(yīng)和電荷效應(yīng)8測定硝酸還原酶活性的方法有 _活體法 和 離體法 。9、 用活體法測定硝酸還原酶的材料，取樣前葉子需進(jìn)行一段時間的光合作用，以積累光合產(chǎn)物，產(chǎn)生更多NADH 加速硝酸鹽的還原。10、 植物呼吸速率常用的測定方法有紅外線法CO2氣體分析法 和改良半葉法 等。11、 葉綠素吸收光譜有 紅光和藍(lán)紫光區(qū)兩個最強(qiáng)吸收區(qū)。12、 類蘿卜素吸收光譜最強(qiáng)吸收區(qū)在藍(lán)紫光區(qū)，它

7、不僅可以吸收傳遞光能， 還具有 保護(hù)葉綠素 _ 的作用。13、 葉綠素溶液在透射光下呈綠色，在反射光下呈暗紅色。14、缺N和缺Fe都能引起缺綠病，二者區(qū)別在于缺氮 老葉發(fā)病，缺鐵 嫩葉發(fā)病。15、 水培時要選用黑色容器裝營養(yǎng)，這是為了防止藻類滋生。16、 常用_水溶液培養(yǎng)法法確定植物生長的必需元素。17、 缺鈣癥首先會表現(xiàn)于植物的嫩 葉上。18、缺乏必需元素 鎂、氮、 鉀 等，均可引起植物產(chǎn)生缺綠病。19、 植物光合速率測定方法有該良半葉法和CO2氣體分析法等。三、選擇：1、 某蛋白質(zhì)pl為7.5,在pH6.0的緩沖液中進(jìn)行自由界面電泳，其泳動方向?yàn)椋ǎ〢、向負(fù)極移動 B、向正極移動 C、不運(yùn)

8、動 D、同時向正極和負(fù)極移動2、 進(jìn)行酶活力測定時：（A ）A、底物濃度必須極大于酶濃度B、酶濃度必須極大于底物濃度，D、酶能提高反應(yīng)的平衡點(diǎn)C、與底物濃度無關(guān)3、蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它們具有吸收紫外光的性質(zhì)， 其吸收高峰在（D ）波長處A、260nm B、650nmC、540nmD、280nm4、Folin-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質(zhì)濃度時，用（ B ）波長比色，測定光密度值。A、260nmB、650nmC、540nmD、280nm5、 不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳比一般電泳的分辨率高，是因?yàn)榫哂邢铝心姆N效應(yīng)？（ABC ）A、濃縮效應(yīng)B、電荷效應(yīng)C、分

9、子篩效應(yīng)D、粘度效應(yīng)6硝酸還原酶與亞硝酸還原酶（D ）A.都是誘導(dǎo)酶B.硝酸還原酶不是誘導(dǎo)酶，而亞硝酸還原酶是C.都不是誘導(dǎo)酶D.硝酸還原酶是誘導(dǎo)酶，而亞硝酸還原酶不是7、酶的分離提純過程中，不正確的操作是（C ）。A、 需在低溫下進(jìn)行，一般在05 C之間B、 酶制劑制成干粉后可保存于4C冰箱中C、需經(jīng)常使用巰基乙醇以防止酶蛋白二硫鍵發(fā)生還原D、提純時間盡量短8在提取葉綠素時，研磨葉片時加入少許CaC03，其目的是（D ）A.使研磨更充分B.加速葉綠素溶解C.使葉綠素a、b分離D.保護(hù)葉綠素10、一般而言，正常植物葉片的葉綠素與類蘿卜素的比值為（B ）A.2:1B.3:1C.1 :2D.1:3

10、11、測定葉綠素總量時，分光光度計(jì)選用的波長是（B錯）應(yīng)（D 652nm）A.663nmB.645nmC.430nm D.652nm12、葉綠素卟啉環(huán)的中心原子是（ C ）A. Cu B. Fe C. Mg D. Mn13、 植物的幼嫩部分，虧缺下列哪種元素時，缺素癥首先表現(xiàn)出來。（B ）A. KB. Ca C. P D. N14、下列元素中，屬于必需的大量元素有（B ）A、鐵 B、氮 C、硼 D、鋅15、高等植物的老葉由于缺少某一種元素而發(fā)病，下面元素屬于這一類的有（A ）A、氮B、鈣C、鐵16、呼吸作用的底物為（A ）。A、有機(jī)物和O2B、CO2 和 H2OC、有機(jī)物和CO217、光合作用

11、的底物為（B）。A、有機(jī)物和O2B、 CO2 和 H2OC、有機(jī)物和CO218、在95%提取液中，葉綠素a在紅光區(qū)的最大吸收峰為（D）。A、470 nmB、649 nmC、656 nmD、665 nm19、 小藍(lán)子法測定呼吸強(qiáng)度生成的白色沉淀是（A ）A、 BaCO3 B、Ba（COO）2 C、Ba（OH）2 D、CaCO320、 TTC法測定種子生活力的試驗(yàn)中，活種子的現(xiàn)象為（A）。A、種胚全部染成紅色B、種胚全部未染色C、種胚全部染成黑色D、種胚非關(guān)鍵部位染色，而胚根和胚芽的尖端都不染色21、小籃子法測定呼吸強(qiáng)度中， 若在滴定時，外界CO2進(jìn)入呼吸測定裝置，會使測得的結(jié)果（A ）。A、偏大

12、B、偏小C、不變D、不一定三、簡答題1、怎樣提高樣品測定的準(zhǔn)確性答：正確采集代表性樣品選擇合適的測定方法減少測定誤差正確記錄和處理測定數(shù)據(jù)。2、植物材料的取樣有哪些方法？答：原始樣品的取樣法：隨機(jī)取樣、對角線取樣。平均樣品的采樣法：混合取樣法、按 比例取樣法。3、簡述分光光度計(jì)的使用方法。答：檢查721A型分光光度計(jì)的旋鈕和開關(guān)，使其回復(fù)零點(diǎn)。 按要求接通電源，按下“ T鍵”，打開暗盒蓋和電源開關(guān)，指示燈亮。預(yù)熱20分鐘。 調(diào)節(jié)波長旋鈕至所需波長。 取比色皿分別盛裝 B、S、U液，置入檢測室（比色皿先用蒸餾水洗后，再用比色液潤洗才能裝比色 液）。B液對準(zhǔn)光路。 調(diào)節(jié)面板“零位細(xì)調(diào)”，使指示為0

13、0.0,即透射比“ T”的零點(diǎn)，同時“一”號閃躍。 合下檢測室蓋調(diào)節(jié)“光量粗、細(xì)調(diào)”電位器，使指示為100.0,須反復(fù)5、6兩點(diǎn)操作達(dá)到穩(wěn)定。 按下“ A”鍵，指示為“ .000同時“一”閃躍，如果指示讀數(shù)不是比值時，應(yīng)調(diào)節(jié)“消光調(diào)零“電 位器，使其達(dá)到要求。 拉出或推入拉桿，使 U、S液分別置于光路讀取 A值，然后移動拉桿，讀 B管A值，如為0,則前述 A值有效。 在穩(wěn)定時，重復(fù)讀數(shù)一次，并按下“T”鍵。 打開檢測室蓋，取出比色皿，傾去比色液于水槽中，用自來水沖洗干凈，倒置于表面皿（鋪有濾紙） 中。（11）關(guān)上電源開關(guān)，拔出電源插頭，取出比色皿架，檢查檢測室是否有液體濺出，并擦凈。檢測 室放

14、入硅膠袋，合上蓋，套上儀器罩。4請介紹3種常用的可溶性蛋白質(zhì)的測定方法。答：目前常用的有以下幾種方法：雙縮脲法、Lowry法（Folin-酚試劑法）、Bradford法（考馬斯亮藍(lán)法）、紫外吸收法。（-194頁）5、簡述斐林-酚試劑法測定植物可溶性蛋白質(zhì)的原理。（188頁）答：Folin-酚試劑法也稱Lowry法，斐林（Folin） 酚試劑法結(jié)合了雙縮豚試劑和酚試劑與蛋白質(zhì)的 反應(yīng)，其中包括兩步反應(yīng)：第一步是在堿性條件下，蛋白質(zhì)中的肽鍵與銅試劑作用生成紫紅色的蛋白 質(zhì)一銅絡(luò)合物（雙縮脲反應(yīng)）；第二步是此絡(luò)合物以及蛋白質(zhì)中酪氨酸和苯丙氨酸等芳香族氨基酸的 殘基使磷鉬酸-磷鎢酸試劑（Folin試劑

15、）還原，產(chǎn)生磷鉬藍(lán)和磷鎢藍(lán)的深藍(lán)色混合物質(zhì)，在一定的條件 下，顏色深淺與蛋白含量成正相關(guān)。因此，可利用其在650nm波長下的特定吸收進(jìn)行比色測定。6、 植物組織可溶性蛋白質(zhì)含量的測定中，斐林-酚試劑法、考馬斯亮藍(lán)法兩種方法各有何優(yōu)缺點(diǎn)？答：斐林酚試劑法其優(yōu)點(diǎn)是：由于加入了Foli n-酚試劑后使蛋白質(zhì)肽鍵顯色效果增強(qiáng)，從而減少了因蛋白質(zhì)種類引起的偏差。其靈敏度比雙縮豚法高100倍。此法操作簡便，適于蛋白質(zhì)含量較微小的樣品測定?？蓹z測的最低蛋白質(zhì)含量達(dá)5ug，通常測定圍5100ug。0.020.50mg/mL蛋白質(zhì)，也可用于酪氨酸和色氨酸的定量測定。缺點(diǎn)是操作煩瑣，耗時較長，要精確控制操作時間，

16、標(biāo)準(zhǔn)曲線不是 嚴(yán)格的直線形式，且專一性差，干擾物質(zhì)（酚類、檸檬酸、Tris緩沖液、甘氨酸、糖類、甘油等）較多。（189頁的注意事項(xiàng)） 考馬斯亮藍(lán)法是靈敏度更高的一種方法，優(yōu)點(diǎn)有：靈敏度高，比lowry法高4倍左右，最低檢測達(dá)1 5微克；測定快速、簡便，染色穩(wěn)定；干擾物質(zhì)少。缺點(diǎn)是用于不同蛋白質(zhì)測定時有較大的偏差； 仍有干擾，如SDS、去污劑、Triton x100等；標(biāo)準(zhǔn)曲線有輕微的非線性。7、Folin-酚試劑法測定植物可溶性蛋白質(zhì)時受哪些因素的干擾？答：Foli n-酚試顯色反應(yīng)是由絡(luò)氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起的，因此樣品中若含有酚類、檸檬酸 和巰基類化合物均有干擾作用。此外，不同蛋白質(zhì)音

17、絡(luò)氨酸、色氨酸含量的不同而使顯色強(qiáng)度稍有差 異。8用茚三酮顯色法測定植物組織氨基酸時，加入Vc的作用是什么？答：由于該反應(yīng)的第一步是茚三酮的還原，而還原型茚三酮在含氧量高的情況下很容易再氧化， 對反應(yīng)有干擾，因此，常在反應(yīng)體系中加入還原劑，以阻止還原型茚三酮的再氧化。所以，9、 茚三酮顯色法測定植物組織氨基酸時為什么要除去蛋白質(zhì)？用10%乙酸除去蛋白質(zhì)的原理是什 么？答：由于蛋白質(zhì)和多肽中的游離氨基酸也會產(chǎn)生同樣反應(yīng)，因此，對于含大量蛋白質(zhì)和多肽的樣 品，應(yīng)先用蛋白質(zhì)沉淀劑將其除去。常用的蛋白質(zhì)沉淀劑有 10%乙酸、磺基水酸（SSA）、三氯乙酸（TCA）、過氯酸（PCA）等，其中以乙酸提取總氨

18、基酸的效果較好。原理:10%乙酸和蛋白質(zhì)反應(yīng) 使之沉淀下來（?）10、用茚三酮顯色法測定植物組織氨基酸時，為什么要用無氨蒸餾水？答：氨基酸與茚三酮反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是還原型茚三酮與另一分子茚三酮和一分子氨的縮合脫水反應(yīng)。 故，若蒸餾水中含有氨將使氨基酸含量增大。帶來誤差。11、測定植物組織中游離氨基酸總量有何生理意義？答:測定植物體游離氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時期氮代謝變化、 植物對氮素的吸收、運(yùn)輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。12、 測定淀粉酶活性時，3, 5二硝基水酸試劑（DNS ）的作用是什么？答：淀粉酶水解淀粉生成的麥芽糖，可用3, 5 -二硝基水酸試劑測定。由于麥芽糖能

19、將后者還原生成3-氨基-5-硝基水酸的顯色基團(tuán)，在一定圍其顏色的深淺與糖的濃度成正比，故可求出 麥芽糖的含量。13、測定（a + 3）-淀粉酶總活力時，為什么要將淀粉酶原液稀釋成淀粉酶稀釋液后進(jìn)行反應(yīng)。答：淀粉酶原液主要是用于鈍化B -淀粉酶，從而測定 a旋粉酶的活力。而淀粉酶稀釋液主要 是用于測出（a + 3）-淀粉酶總活力，從而可得出B -淀粉酶的活力。14、 測定淀粉酶活性時，為什么要將酶提取液和淀粉溶液分別放在40C水浴中預(yù)保溫？答:因?yàn)閍旋粉酶的最適溫度在 40C50C之間，在這一溫度圍 a旋粉酶的活性最強(qiáng)，催化淀粉的 能力最強(qiáng)。因此，將酶提取液和淀粉溶液分別放在40C水浴中預(yù)保溫，

20、有利于淀粉酶活性的測定，減少誤差。15、 測定硝酸還原酶活性的離體法和活體各有何特點(diǎn)？（125頁）答：活體法步驟簡單，適合快速、多組測定，重復(fù)性不好，應(yīng)在4C離體法步驟復(fù)雜，但重復(fù)性較好。需要在低溫和NADH的條件下進(jìn)行。16、為什么用活體法測定硝酸還原酶的材料，在取樣前要進(jìn)行一段時間的光合作用？ 答：因?yàn)闇y定前材料在進(jìn)行光合作用，會積累能量物質(zhì)，可促進(jìn)硝酸還原酶的產(chǎn)生。17、活體法測植物體硝酸還原酶活力實(shí)驗(yàn)中，硝酸鹽還原過程為何在黑暗中進(jìn)行？答：硝酸鹽還原過程應(yīng)在黑暗中進(jìn)行，以防亞硝酸鹽還原為氨。18、活體法測植物體硝酸還原酶活力實(shí)驗(yàn)中，如何判斷真空抽氣的終點(diǎn)？答：真空抽氣時，葉片完全軟化沉

21、入杯底，則代表葉片組織間隙的氣體得以全部排除，那么就是 真空抽氣的終點(diǎn)。19、 用2,6-二氯酚靛酚滴定法測定維生素C含量時，為什么強(qiáng)調(diào)滴定時間不超過2分鐘？答：維生素C具有很強(qiáng)的還原性，如果滴定時間過長，維生素C就會被空氣中的氧氣氧化，從而減少維生素C的含量，最終影響到維生素C含量的測定。000000000020、 為什么用2,6-二氯酚靛酚滴定法測定維生素C含量時，要在測定的同時進(jìn)行2,6-二氯酚靛酚溶液的標(biāo)定？答：是為了知道此時 2，6-D染料的滴定度（每 ml染料相當(dāng)于抗壞血酸的 mg數(shù)）。是因?yàn)?, 6-D染料很不穩(wěn)定，隨著時間的推移，其滴定度一直在變化中，因此只能現(xiàn)測現(xiàn)用。21、簡

22、述滴定法測定 Vc含量的實(shí)驗(yàn)原理。（267頁）答：還原型抗壞血酸還原染料2, 6-二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原后紅色消失。還原型抗壞血酸還原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜質(zhì)干擾時，一定量的樣品提 取液還原標(biāo)準(zhǔn)2，6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。22. 為了準(zhǔn)確測定果蔬的抗壞血酸含量，在測定過程應(yīng)注意些什么？答：驗(yàn)所用的蒸餾水必須是無氨水。濾必須用干燥濾紙。格掌握加入抗壞血酸的含量。 準(zhǔn)曲線應(yīng)在測定樣品的同時做，以減少操作及反應(yīng)條件的誤差。定要水沸騰后才能將試管放入加熱， 而且水浴鍋的水位一定要高于試管試劑的高度。管從沸水浴中取出，一定要冷水迅速

23、冷卻后才能加 入乙醇。（因加熱時形成的紅色還原型茚三銅，在冷卻過程被空氣的氧氧化而褪色，而茚三銅和氨基 酸的藍(lán)紫色反應(yīng)物仍留著，并變得更加明顯。）銅和氨基酸反應(yīng)生成的顏色在1小時保持穩(wěn)定，所以要抓緊時間比色。靈敏度在很大程度上與H離子濃度有關(guān)，最適 pH4.5，應(yīng)嚴(yán)格控制。23. 簡述“過氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳”實(shí)驗(yàn)中所用的過硫酸銨、四甲基乙二胺、蔗糖、溴酚藍(lán)、H2O2等試劑的作用是什么？（181頁）答：過硫酸銨的作用： 使丙烯酰胺（Acr）和交聯(lián)劑甲叉丙烯酰胺（Bis）聚合成聚丙烯酰胺凝膠。 四甲基乙二胺（TEMED ）的作用：作為丙烯酰胺（ Acr）和交聯(lián)劑甲叉丙烯酰胺（Bis）

24、聚合的 加速劑。 蔗糖的作用：使同工酶沉在點(diǎn)樣孔底部，防止同工酶漂浮。 溴酚藍(lán)的作用：可以作為電泳進(jìn)度的指示分子，起指示作用。 H2O2的作用：作為氧化物，使過氧化物酶同工酶催化H2O2分解，從而來進(jìn)行植物過氧化物酶同工酶的測定。24. 什么叫同工酶？測定同工酶有什么意義？ （181頁）答：同工酶：能催化同一種化學(xué)反應(yīng)但其分子結(jié)構(gòu)和帶電性質(zhì)不同的一組酶。（由于同一種酶可分布于多種臟器組織，它們之中的任何一個發(fā)生病變，都可引起酶在血清中的活 力變化。除了少數(shù)組織專一性的酶以外，大多數(shù)血清酶不能特異地反映某個特定組織的病變。）而不 同臟器或組織的同工酶譜型不同，當(dāng)其發(fā)生病變后，釋放到血清中的各種同

25、工酶的比例也不一致，所 以血清酶的同工酶譜型的改變能精確地反映出患病的部位和損傷的程度，提高了血清酶測定在反映組 織病變上的專一性。25、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中，電泳結(jié)束后如何進(jìn)行染色？電泳完畢，將電泳槽取出，倒去緩沖液，取下凝膠管，放入培養(yǎng)皿中。用一個帶有長針頭的注射 器，吸滿水，將針頭沿管壁插入，同時慢慢地將注射器中的水推出，并不斷轉(zhuǎn)動凝膠管，將凝膠管擠 脫出來，也可用洗耳球擠壓。取0.5ml聯(lián)苯胺母液+ H2O 9.3ml + 0.2ml3% H2O2，混勻后倒入盛有凝膠條的培養(yǎng)皿。此時可以看到膠條上出現(xiàn)藍(lán)色或棕褐色環(huán)，即過氧化物酶帶，約十min后用自來水沖洗，這時藍(lán)

26、色帶也慢慢變成棕褐色。26、簡述聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)的原理？聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合而成，具有三維網(wǎng)狀結(jié) 構(gòu)，其網(wǎng)孔大小可由凝膠濃度和交聯(lián)度加以調(diào)節(jié)。凝膠電泳兼有電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)。被分離物質(zhì) 由于所載電荷數(shù)量、分子大小和形狀的差異，因此在電泳時產(chǎn)生不同的泳動速率而相互分離。利用特 異性的顏色反應(yīng)使待測酶著色，這樣就可在凝膠中展現(xiàn)出酶譜。過氧化物酶是植物體常見的氧化酶。 植物體許多生理代謝過程常與它的活性及其同工酶的種類有關(guān)。利用過氧化物酶能催化H2O2把聯(lián)苯胺氧化成藍(lán)色或棕褐色產(chǎn)物的原理，將經(jīng)過電泳后的凝膠置于有H2O2及聯(lián)苯胺的溶液染色，出

27、現(xiàn)藍(lán)色或棕褐色部位即為過氧化物酶同工酶在凝膠中存在的位置，多條有色帶即構(gòu)成過氧化物酶同工酶譜。27、 為什么說無土培養(yǎng)是研究礦質(zhì)營養(yǎng)的重要方法？無土栽培是指不用天然土壤、而用營養(yǎng)液來栽培作物的方法，當(dāng)前主要用于蔬菜、花卉和樹木育苗。 目前生產(chǎn)上常用有水培、砂礫培等。無土栽培與常規(guī)栽培的區(qū)別，就是不用土壤，直接用營養(yǎng)液來栽 培植物。為了固定植物，增加空氣含量，大多數(shù)采用礫、沙、泥炭、蛭石、珍珠巖、巖棉、鋸木屑等 作為固定基質(zhì)。其優(yōu)點(diǎn)可以有效地控制花卉在生長發(fā)育過程中對溫度、水分、光照、養(yǎng)分和空氣的最 佳要求。由于無土栽培花卉不用土壤，可擴(kuò)大種植圍，加速花卉生長，提高花卉質(zhì)量，節(jié)省肥水，節(jié) 省人工

28、操作，節(jié)省勞力和費(fèi)用。缺點(diǎn)是，一次性投資較大，需要增添設(shè)備，如果營養(yǎng)源受到污染，容 易蔓延，營養(yǎng)液配制需要技術(shù)知識。無土栽培的裝置無土栽培所需裝置主要包括栽培容器、貯液容器、 營養(yǎng)液輸排管道和循環(huán)系統(tǒng)。28、比較溶液培養(yǎng)和砂基培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn)。29、進(jìn)行溶液培養(yǎng)或砂基培養(yǎng)有時會失敗，主要原因何在？溶液培養(yǎng)時溶液是水，沒有固定性，無法給根系提供支撐作用；溶液PH值會發(fā)生變化，抑制根吸收礦質(zhì)元素；容易造成污染，影響實(shí)驗(yàn)。沙基培養(yǎng)常出現(xiàn)無充足的水分供應(yīng)，而且沙基中容易含有 礦質(zhì)元素影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。30、葉綠素a、b在藍(lán)光區(qū)也有吸收峰，能否用這一吸收峰波長進(jìn)行葉綠素a、b的定量分析？為什么？不能，因?yàn)轭愄}卜

29、素的最大吸收帶在400500的藍(lán)紫光區(qū)，不吸收紅光，為了排除類蘿卜素的干擾，所以選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸收峰；并且葉綠素的溶液呈綠色，易與藍(lán)紫光產(chǎn)生遮光效果， 混淆實(shí)驗(yàn)效果。31、 為什么提取葉綠素時干材料一定要用 80%的丙酮，而新鮮的材料可以用無水丙酮提?。?因?yàn)槿~綠素分子結(jié)構(gòu)的“頭部”是親水的，與蛋白質(zhì)結(jié)合很牢，需經(jīng)過水解作用才可被提取出來。而干材料中沒有水分，故提取葉綠素時干材料一定要用80%丙酮或95%乙醇提取，而新鮮的材料總含有水分，可以贏無水丙酮或乙醇提取。32、測定呼吸速率有何意義？33、影響呼吸速率測定的因素有哪些？（同課本P136）答：1 部因素。不同種類植物的呼吸速率不

30、同，凡是生長快的植物呼吸速率就高，生長慢的呼吸速 率就低；一般旱生植物，生長緩慢，呼吸速率比水生植物低；陰生植物所處的光強(qiáng)度較弱，呼吸也較 弱，呼吸速率比陽生植物低。同一種植物在不同的生長發(fā)育時期，呼吸速率也不同，一般在幼苗期、 開花期等生長旺盛期，呼吸速率增高。同一種植物的不同器官，呼吸速率也不同，一般生殖器官比營 養(yǎng)器官高，幼嫩組織器官比衰老的組織器官高，種子胚的呼吸速率比胚乳高。多年生植物的呼吸速率 還表現(xiàn)出季節(jié)周期性變化，在溫帶生長的植物，春天呼吸速率最高，夏天略降低，秋天又上升，以后 一直下降，到冬天降到最低點(diǎn)，這種周期性變化除了外界環(huán)境的影響外，與植物體的代謝強(qiáng)度、酶活 性及呼吸底

31、物的多寡也有密切關(guān)系。2外界因素對呼吸速率的影響。（1）溫度：溫度呼吸作用的影響主要表現(xiàn)為溫度對呼吸酶活性的影響。呼吸速率在一定圍隨溫度的增高而增高，達(dá)到最高值后，繼續(xù)增高溫度，呼吸速率反而下降。一般植物在0C以下，呼吸作用很弱或幾乎停止，呼吸作用的最適溫度一般在 25C35C之間，呼吸作用的最高溫度，一般在 35C45C。 呼吸作用的最低溫度因植物種類不同有很大差異。呼吸作用的最適溫度總是比光合作用的最適溫度高。（2）氧氣：氧是有氧呼吸途徑運(yùn)轉(zhuǎn)的必要因素。從有氧呼吸來看，在氧濃度較低情況下，呼吸速率與 氧濃度成正比，達(dá)到氧飽和點(diǎn)以后，則無促進(jìn)作用。氧濃度過高或過低都會對植物產(chǎn)生毒害。根系缺

32、氧會抑制根尖細(xì)胞分裂，影響根系物質(zhì)的運(yùn)輸，對植物生長發(fā)育造成嚴(yán)重危害。（3）二氧化碳二氧化碳是呼吸作用的最終產(chǎn)物，當(dāng)外界環(huán)境中二氧化碳濃度增高時，脫羧反應(yīng)減慢，呼吸作用受到抑制。一些植物（如豆科）的種子由于種皮限制 ，使呼吸作用釋放的 CO2難以釋出，種皮積聚起 高濃度的CO2抑制了呼吸作用，從而導(dǎo)致種子休眠。（4）水分植物組織的含水量與呼吸作用有密切的關(guān)系。在一定圍，呼吸速率隨組織含水量的增加而升高。 干燥種子的呼吸作用很微弱，當(dāng)種子吸水后，呼吸速率迅速增加。因此，種子含水量是制約種子呼吸 作用強(qiáng)弱的重要因素。對于整體植物來說，接近萎蔫時，呼吸速率有所增加，如萎蔫時間較長，細(xì)胞 含水量則成為

33、呼吸作用的限制因素。影響呼吸作用的外界因素除了溫度、氧氣、二氧化碳、水分之外，呼吸底物的含量（如可溶性糖）、機(jī)械損傷、一些礦質(zhì)元素（如磷、鐵、銅等）對呼吸也有顯著影響。此外病原菌感染可使寄主的線粒 體增多，多酚氧化酶活性提高，抗氰呼吸和PPP途徑增強(qiáng)。在呼吸速率測定中哪些步驟容易出現(xiàn)誤差？應(yīng)怎樣避免。1） 實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)該不時輕輕的搖動，使溶液表面的BaCO薄膜破壞，有利于 CO的充分吸收2）實(shí)驗(yàn)過程中還要防止口中呼出的氣體進(jìn)入瓶3）應(yīng)該用無CO蒸餾水或煮沸過的冷開水洗滌廣口瓶35、廣口瓶橡皮塞上加一堿石灰管有何作用？36、測定電解質(zhì)外滲量時，為何要對材料進(jìn)行真空滲入？37、在SOD測定中為什么

34、設(shè)照光對照管和暗中空白管？設(shè)照光對照管是為了消除日光燈的光質(zhì)差異；暗中空白管是在測定吸收峰時用來做空白對照的。38、影響SOD活力測定準(zhǔn)確性的主要因素是什么？應(yīng)如何克服？主要因素是：1試管，所用試管的玻璃質(zhì)量要一樣，包括厚度，直徑，質(zhì)量2 光照條件，光照條件要求一致，即照光時試管放的高度，背景等各外界條件因素要一致39. 植物缺鎂和缺鐵表現(xiàn)癥狀有何異同？為什么？答：相同點(diǎn)：缺鎂和缺鐵都呈現(xiàn)缺綠癥。不同點(diǎn)：缺鎂出現(xiàn)的缺綠癥狀首先從下部老葉上表現(xiàn)出來，而缺鐵的缺綠癥狀首先從上部新生葉表現(xiàn)出來。原因是鎂是參與循環(huán)的元素，即可再利用元素，而鐵是不參與循環(huán)的元素，即不可再利用元素。40簡要介紹測定光合速率的三種方法及原理？測定光合速率的方法：（1）改良半葉法：主要是測定單位時間、單位面積葉片干重的增加量；（2）紅外線C02分析法，其原理是C02對紅外線有較強(qiáng)的吸收能力，C02量的多少