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1、 藥物血漿半衰期的測定藥物血漿半衰期的測定 遼寧醫(yī)學(xué)院【藥品【藥品】 10%水楊酸鈉,水楊酸鈉, 10三氯醋酸三氯醋酸4ml, 0.5肝素生理鹽水,肝素生理鹽水, 10%三氯化鐵三氯化鐵【動物【動物】 家兔家兔【目的【目的】 學(xué)習(xí)藥物學(xué)習(xí)藥物血漿半衰期血漿半衰期測定方法。測定方法。血中藥物濃度隨時間推移呈規(guī)律性血中藥物濃度隨時間推移呈規(guī)律性(一級一級動力學(xué)消除)下降。動力學(xué)消除)下降。 ktteCC0tkCCt303. 2loglog0【原理【原理】【方法、步驟【方法、步驟 】1取取3支支離心管離心管標記標記1、2、3,加入,加入10三氯醋酸三氯醋酸4ml ; 取取9支支試管試管標記:標記:A
2、1,A2,A3 B1,B2,B3 C1,C2,C3備用。備用。2取家兔一只取家兔一只,稱重,麻醉稱重,麻醉(20烏烏拉坦拉坦5 ml/kg,2/3耳耳 iv,1/3 ip)向心端向心端離心端離心端動脈夾動脈夾3分離頸總動脈,頭端用線結(jié)扎,分離頸總動脈,頭端用線結(jié)扎,心端用動脈夾夾閉。心端用動脈夾夾閉。4肝素化:肝素化:0.5肝素肝素生理鹽水生理鹽水2 ml/只,只,IV5. 動脈插管,備取血用。動脈插管,備取血用。6取血取血: 開啟動脈夾取血約開啟動脈夾取血約11.5 ml, 放入放入A1號試管,再從號試管,再從A1號試管準確吸取號試管準確吸取1 ml移入移入1號離心管,充分搖勻,以沉號離心管
3、,充分搖勻,以沉淀血漿蛋白。淀血漿蛋白。 7給藥:給藥:10%水楊酸鈉水楊酸鈉2 ml/kg,IV。每次移入離心管的每次移入離心管的血量務(wù)必準確血量務(wù)必準確開啟動脈夾取血時,不開啟動脈夾取血時,不要將動脈夾抽離動脈要將動脈夾抽離動脈8 取血取血: 在給藥后在給藥后20分鐘和分鐘和40分鐘時,分鐘時,開啟動脈夾取血約開啟動脈夾取血約11.5 ml20分鐘分鐘A2準確取準確取1 ml2號離心管號離心管40分鐘分鐘A3 準確取準確取1 ml3號離心管。號離心管。每次取血前應(yīng)先將每次取血前應(yīng)先將動脈插管內(nèi)殘余血動脈插管內(nèi)殘余血放掉!放掉!移入離心管的血移入離心管的血液搖勻或攪拌均液搖勻或攪拌均勻,以充
4、分沉淀勻,以充分沉淀血漿蛋白血漿蛋白 9離心:離心:3000 rpm,3分鐘。分鐘。 漫漫傾倒上清液入漫漫傾倒上清液入對應(yīng)對應(yīng)編號的編號的B1、B2、B3號試管中。號試管中。從從B組管精確吸取上清液組管精確吸取上清液3 ml C組管組管 A1B1 C1 A2B2 C2 A3B3C3 10顯色:各管加入顯色:各管加入10%三氯化鐵三氯化鐵(FeCl3)0.5 ml,顯色。,顯色。比色杯必須配套,擦干凈比色杯必須配套,擦干凈;721分光光度計調(diào)零點時至少三次分光光度計調(diào)零點時至少三次后再測;清洗比色杯后用衛(wèi)生后再測;清洗比色杯后用衛(wèi)生紙紙單向單向擦拭透光面,擦拭透光面, 11比色、測光密度值:以比
5、色、測光密度值:以C1號管為號管為對照管,用對照管,用721分光光度計在分光光度計在520 nm波長下讀取波長下讀取C2、C3號管的光密度值。號管的光密度值。12計算:計算: /log301.0212/1ODODtOD1和和OD2分別為分別為2、3號管的光密度值。號管的光密度值。 ktetCC.0KtCCt0lnlntCCKtlnln0KCCtt0ln21693.0tK210t693.0lntCCt 公式推導(dǎo)公式推導(dǎo)tODOD/ln693.0t2121/log301.0212/1ODODt時間時間時間時間零級零級一級一級零級零級一級一級對數(shù)濃度對數(shù)濃度濃度濃度血血11.5ml三氯醋酸三氯醋酸4ml離心(離心(3000rpm.3min)傾入傾入吸取上清液3ml三氯化氯化鐵鐵0.5mlA1號試管號試管B1號試管號試管C1號試管號試管1號號離心管離心管操作流程圖操作流程圖標標記記管管稱稱重重麻麻醉醉分分離離動動脈脈肝肝素素化化動動脈脈插插管管取取血血1給給藥藥離離心心取取血血2、3顯顯色色
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