高中生物選修一知識點(diǎn)填空含答案

1、word 專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1 果酒和果醋的制作1果酒制作的原理1人類利用微生物發(fā)酵制作果酒，該過程用到的微生物是 ，它的代謝類型是 ，與異化作用有關(guān)的方程式有 。生活狀態(tài)：進(jìn)行發(fā)酵，產(chǎn)生大量 。2果酒制作條件傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源是 。酵母菌生長的最適溫度是 ； PH呈 ；3紅色葡萄酒呈現(xiàn)顏色的原因是：酒精發(fā)酵過程中，隨著 的提高，紅色葡萄皮的 進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈 色。4在 、 的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其它微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。2果醋的制作原理1果醋發(fā)酵菌種是 ，新陳代謝類型 。 2當(dāng)氧氣和糖源充足時醋酸菌將糖分解成 ，當(dāng)糖源缺乏時

2、醋酸菌將 變?yōu)?再變成醋酸，其反響式 。3操作過程應(yīng)注意的問題1為防止發(fā)酵液被污染，發(fā)酵瓶要用 消毒。2葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留出大約 的空間。3制作葡萄酒時將溫度嚴(yán)格控制在 ，時間控制在 d左右，可通過 對發(fā)酵的情況進(jìn)行及時的監(jiān)測。4制葡萄醋的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在 ，時間控制在 d，并注意適時在 充氣。4酒精的檢驗(yàn)1檢驗(yàn)試劑： 。2反響條件及現(xiàn)象：在 條件下，反響呈現(xiàn) 。5.制作果酒、果醋的實(shí)驗(yàn)流程挑選葡萄 果酒 果醋P4旁欄思考題1你認(rèn)為應(yīng)該先洗葡萄還是先除去枝梗，為什么？應(yīng)該先沖洗葡萄，然后再除去枝梗，以防止除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的時機(jī)。2你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵

3、液被污染？需要從發(fā)酵制作的過程進(jìn)行全面的考慮，因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如：榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈；每次排氣時只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。3制作葡萄酒時，為什么要將溫度控制在18250C？制作葡萄醋時，為什么要將溫度控制在30350C？溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。200C左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30350C，因此要將溫度控制在30350C。4制葡萄醋時，為什么要適時通過充氣口充氣？ 醋酸菌是好氧菌，再將酒精變成醋酸時需要養(yǎng)的參與，因此要適時向發(fā)酵液中充氣。P4:A同學(xué)：每次排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全揭

4、開瓶蓋；制醋時，再將瓶蓋翻開，蓋上一層紗布，進(jìn)行葡萄醋的發(fā)酵。來防止發(fā)酵液被污染，因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌B同學(xué)：分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接？充氣口：是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進(jìn)行充氣用的；排氣口：是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的；出料口：是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置制酒時，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時，應(yīng)將充氣口連接氣泵，輸入氧氣。課題2 腐乳的制作1.制作原理1經(jīng)過微生物的發(fā)酵，豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的 和 ，脂肪被分解成 和 ，因而

5、更利于消化吸收。2腐乳的發(fā)酵有多種微生物參與，如 、 、 、 等，其中起主要作用的是 。它是一種絲狀 ，常見 、 、 、 上。3現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的 條件下，將優(yōu)良 菌種直接接種在豆腐上，這樣可以防止其他菌種的 ，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。2. 腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程：讓豆腐長出 密封腌制。3.實(shí)驗(yàn)考前須知1在豆腐上長出毛霉時，溫度控制在 ，自然條件下毛霉的菌種來自空氣中的 。2將長滿毛霉的豆腐塊分層加鹽，加鹽量要隨著擺放層數(shù)的加高而 ，近瓶口的表層要 。加鹽的目的是使豆腐塊失水，利于 ，同時也能 的生長。鹽的濃度過低， ；鹽的濃度過高， 。3鹵湯中酒精的含量應(yīng)控制在 左右，它能 微生物的生長，同時也與

6、豆腐乳獨(dú)特的 形成有關(guān)。酒精含量過高， ；酒精含量過低， 。香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味，同時也有 作用。4瓶口密封時，最好將瓶口 ，防止瓶口污染。P6旁欄思考題1.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識，解釋豆腐長白毛是怎么一回事？ 豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲，在豆腐中還有匍匐菌絲。2.王致和為什么要撒許多鹽，將長毛的豆腐腌起來？鹽能防止雜菌污染，防止豆腐腐敗。3你能總結(jié)出王致和做腐乳的方法嗎？ 讓豆腐長出毛霉加鹽腌制密封腌制。P7旁欄思考題1.我們平常吃的豆腐，哪種適合用來做腐乳？含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形。2.吃腐乳時，你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部

7、有一層致密的“皮。這層“皮是怎樣形成的呢？它對人體有害嗎？它的作用是什么？ “皮是前期發(fā)酵時在豆腐外表上生長的菌絲匍匐菌絲，它能形成腐乳的“體，使腐乳成形?！捌θ梭w無害。P8練習(xí)1. 腌制腐乳時,為什么要隨豆腐層的加高而增加鹽的含量？為什么在接近瓶口的外表要將鹽厚鋪一些？越接近瓶口，雜菌污染的可能性越大，因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量，在接近瓶口的外表，鹽要鋪厚一些，以有效防止雜菌污染。2怎樣用同樣的原料制作出不同風(fēng)味的腐乳？可以不看在酒和料上作變動紅腐乳：又稱紅方，指在后期發(fā)酵的湯料中，配以著色劑紅曲，釀制而成的腐乳。白腐乳：又稱白方，指在后期發(fā)酵過程中，不添加任何著色劑，湯料以黃酒、

8、白酒、香料為主釀制而成的腐乳，在釀制過程中因添加不同的調(diào)味輔料，使其呈現(xiàn)不同的風(fēng)味特色，目前大致包括糟方、油方、霉香、醉方、辣方等品種。青腐乳：又稱青方，俗稱“臭豆腐，指在后期發(fā)酵過程中，以低度鹽水為湯料釀制而成的腐乳，具有特有的氣味，外表呈青色。醬腐乳：又稱醬方，指在后期發(fā)酵過程中，以醬曲大豆醬曲、蠶豆醬曲、面醬曲等為主要輔料釀制而成的腐乳。課題3 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量1乳酸菌代謝類型為 ，在 情況狂下，將葡萄糖分解為乳酸。在自然界中分布廣泛，在 、 、 、 內(nèi)都有分布。常見的乳酸菌有 和 兩種，其中 常用于生產(chǎn)酸奶。2亞硝酸鹽為 ，易溶于 ，在食品生產(chǎn)中用作 。一般不會危害人體健康，

9、但當(dāng)人體攝入硝酸鹽總量達(dá) g時，會引起中毒；當(dāng)攝入總量到達(dá) g時，會引起死亡。在特定的條件下，如 、 和 的作用下，會轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)亞硝胺，亞硝胺對動物有致畸和致突變作用。3泡菜制作大致流程：原料處理 裝壇 成品1配制鹽水：清水和鹽的比例為 ，鹽水 后備用。2裝壇：蔬菜裝至 時參加香辛料，裝至 時加鹽水，鹽水要 ，蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水槽中 ，保證壇內(nèi) 環(huán)境。3腌制過程種要注意控制腌制的 、 和 。溫度過高、食鹽用量缺乏10%、 過短，容易造成 ， 。4測亞硝酸鹽含量的原理是 。將顯色反響后的樣品與濃度的 進(jìn)行比擬，可以大致 出泡菜中亞硝酸鹽的含量。測定步驟：配定溶液 制備樣品處理液 P9旁欄思

10、考題：為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶？酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用?？股啬軌驓⑺阑蛞种迫樗峋纳L，因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。P10旁欄思考題：1為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜，不宜多吃腌制蔬菜？有些蔬菜，入小白菜和蘿卜等，含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過久發(fā)生變質(zhì)發(fā)黃、腐爛或者煮熟后存放太久時，蔬菜中的硝酸鹽會被微生物復(fù)原成亞硝酸鹽，危害人體健康。2為什么泡菜壇內(nèi)有時會長一層白膜？你認(rèn)為這層白膜是怎么形成的？形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物，泡菜發(fā)酵液營養(yǎng)豐富，其外表氧氣含量也很豐富，適合酵母菌繁殖。P12練習(xí)：2你能總結(jié)果酒、果醋、腐乳、泡菜這

11、幾種發(fā)酵食品在利用微生物的種類和制作原理方面的不同嗎？你能總結(jié)出傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的共同特點(diǎn)嗎？果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵，果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸的代謝，腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類，泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。傳統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)都巧妙的利用了天然菌種，都為特定的菌種提供了良好的生存條件，最終的發(fā)酵產(chǎn)物不是單一的組分，而是成分復(fù)雜的混合物。專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基可以分為 和 。2培養(yǎng)基一般都含有 、 、 、 四類營養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長對 、 以及 的要求。3獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵

12、是 。4消毒是指 滅菌是指 5日常生活中常用的消毒方法是 ，此外，人們也常使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用 、 等。常用的滅菌方法有 、 、 ，此外，實(shí)驗(yàn)室里還用 或 進(jìn)行消毒。6制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟是 ， ， ， ， 。7微生物接種的方法中最常用的是 和 。平板劃線是指 。稀釋涂布平板法指 。8菌種的保藏：1臨時保藏：將菌種接種到試管的 ，在適宜的溫度下培養(yǎng)， 長成后，放入 冰箱中保藏，以后每36個月，轉(zhuǎn)移一次新的培養(yǎng)基。缺點(diǎn)是：保存時間 ，菌種容易被 或產(chǎn)生變異。2長期保存方法： 法，放在 冷凍箱中保存。P15旁欄思考題：無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，

13、還有什么目的？無菌技術(shù)還能有效防止操作者自身被微生物感染。P16旁欄思考題：請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請選擇適宜的方法。1 培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿2 玻棒、試管、燒瓶和吸管3 實(shí)驗(yàn)操作者的雙手1、2需要滅菌；3需要消毒。P17倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 左右時，才能用來倒平板。你用什么方法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固

14、后的培養(yǎng)基外表的濕度也比擬高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基外表的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。P18平板劃線操作的討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌

15、種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。P19涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2

16、步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？應(yīng)從操作的各個細(xì)節(jié)保證“無菌。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要適宜、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。P20六、課題成果評價(jià)1.培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12 d后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否那么需要重新制備。2.接種操作是否符合無菌要求如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小根本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn)，那么說明接種操作是符合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，那么說明接種過程中，無菌操作還未到達(dá)要求，需要分析原因，再次練習(xí)。3.是否進(jìn)行了及時細(xì)致的觀察與記錄培養(yǎng)12 h與24 h后的大腸桿菌菌落的大小會有

17、明顯不同，及時觀察記錄的同學(xué)會發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn)，并能觀察到其他一些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。P20練習(xí)1.提示：可以從微生物生長需要哪些條件的角度來思考。例如，微生物的生長需要水、空氣、適宜的溫度，食品保存可以通過保持枯燥、真空的條件，以及冷藏等方法來阻止微生物的生長。2.提示：可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)行總結(jié)歸納。例如，這三種培養(yǎng)技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營養(yǎng)，但無土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無菌的條件，而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無菌條件。3.提示：這是一道開放性的問題，答案并不惟一，重點(diǎn)在于鼓勵學(xué)生積極參與，從不同的角度思考問題。例如，正

18、是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的，微生物學(xué)才可能開展成為一門獨(dú)立的學(xué)科；巴斯德實(shí)驗(yàn)中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn)，而這一滅菌原理也適用于食品的保存等。課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的別離與計(jì)數(shù)1尿素只有被 分解成 之后，才能被植物吸收利用。選擇分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基特點(diǎn)： 惟一氮源，按物理性質(zhì)歸類為 培養(yǎng)基。2PCR 是一種在體外將 。此項(xiàng)技術(shù)的自動化，要求使用耐高溫的DNA聚合酶。3實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是：人為提供有利于 生長的條件包括 等，同時抑制或阻止其他微生物生長。4選擇培養(yǎng)基是指 。5常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是 。即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基外表生長

19、的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的 。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)公式是 。利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是 。另外， 也是測定微生物數(shù)量的常用方法。6一般來說，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目 。這是因?yàn)?。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用 而不是活菌數(shù)來表示。7設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)的主要目的是 ，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對照實(shí)驗(yàn)是 。滿足該條件的稱為 ，未滿足該條件的稱為 。8實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括的內(nèi)容有： 、 、 和 ，具體的實(shí)驗(yàn)步驟以及時間安排等的綜合考慮和安排。9不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng) 和培養(yǎng) 。在實(shí)驗(yàn)過程

20、中，一般每隔24小時統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以 。10土壤有“ 之稱，同其他生物環(huán)境相比，土壤中微生物 、 。11土壤中的微生物約 是細(xì)菌，細(xì)菌適宜在酸堿度接近 潮濕土壤中生長。土壤中微生物的數(shù)量不同，別離不同微生物采用的 的稀釋度不同。12一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落的 、 、 和 等方面。13在進(jìn)行多組實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)注意做好標(biāo)記，其目的是 。14對所需的微生物進(jìn)行初步篩選，只是別離純化菌種的第一步，要對別離的菌種進(jìn)行一步的鑒定，還需要借助 的方法。15在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響中，細(xì)菌合成的 將尿素分解成了

21、。氨會使培養(yǎng)基的堿性 ，PH 。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基 變化來判斷該化學(xué)反響是否發(fā)生。在以 為唯一氮源的培養(yǎng)基中參加 指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果PH升高，指示劑將變 ，說明該細(xì)菌能夠 。P22旁欄思考題1.想一想，如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)？答：統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)3個平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值，然后按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算。P22兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)106的培養(yǎng)集中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果：1.第一位同學(xué)在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230；2.第二位同學(xué)在該濃度下涂布了三個平板第一位同

22、學(xué)只涂布了一個平板，沒有設(shè)置重復(fù)組，因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問題，涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將3個平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值。P22設(shè)置對照A同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同，可能的解釋有兩種。一是由于土樣不同，二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤。究竟是哪個原因，可以通過實(shí)驗(yàn)來證明。實(shí)驗(yàn)方案有兩種。一種方案是可以由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與A同學(xué)一致，那么證明A無誤；如果結(jié)果不同，那么證明A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題。另一種方案是將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)

23、行培養(yǎng)，作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染。通過這個事例可以看出，實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有說服力，對照的設(shè)置是必不可少的。P24旁欄思考題為什么別離不同的微生物要采用不同的稀釋度？測定土壤中細(xì)菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍相同嗎？這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量單位：株/kg是不同的，例如在干旱土壤中的上層樣本中：好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2 185萬，放線菌數(shù)約為477萬，霉菌數(shù)約為23.1萬。因此，為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)行別離，同時還應(yīng)當(dāng)有針對性地提供選擇培養(yǎng)的條件。P25 結(jié)果分析與評價(jià)1培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落對照的培養(yǎng)

24、皿在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。2樣品的稀釋操作是否成功如果得到了2個或2個以上菌落數(shù)目在30300的平板，那么說明稀釋操作比擬成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)。3重復(fù)組的結(jié)果是否一致如果學(xué)生選取的是同一種土樣，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn)，教師需要引導(dǎo)學(xué)生一起分析產(chǎn)生差異的原因。P26練習(xí)2.提示：反芻動物的瘤胃中含有大量的微生物，其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌，接觸空氣后會死亡，因此別離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外，還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進(jìn)行

25、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。課題3 分解纖維素的微生物的別離1纖維素是 類物質(zhì)， 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。2纖維素酶是一種 酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即 、 和 ，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成 。正是在這三種酶的協(xié)同作用下，纖維素最終被水解成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)，同樣，也可以為人類所利用。3篩選纖維素分解菌可以用 法，這種方法能夠通過 直接對微生物進(jìn)行篩選。 可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成 ，但并不和水解后的 和 發(fā)生這種反響。纖維素分解菌能產(chǎn)生 分解纖維素，從而使菌落周圍形成 。4別離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程圖如

26、下： 梯度稀釋 。5為確定得到的菌是否是纖維素分解菌，還學(xué)進(jìn)行 的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵方法有 發(fā)酵和 發(fā)酵。測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的 進(jìn)行定量測定。P28旁欄思考題1.本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同？本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，直接別離得到菌落。本課題通過選擇培養(yǎng)，使纖維素分解菌得到增殖后，再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟根本一致。2.為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌？由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對提高，因此從這種土樣中

27、獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。3.將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深？將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10 cm左右腐殖土壤中。P29旁欄思考題1想一想，這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與缺乏？你打算選用哪一種方法？兩種剛果紅染色法的比擬方法一是傳統(tǒng)的方法，缺點(diǎn)是操作繁瑣，參加剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反響根本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，不存在菌落混雜問題，缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反響。但這種只

28、產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊，因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位，因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)是：有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。2.為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮所需的微生物？在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮的作用。P29六、課題成果評價(jià)1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落：對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長那么說明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落，那么說明可能獲得

29、了分解纖維素的微生物。2.別離的結(jié)果是否一致：由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量，因此最容易別離得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同，學(xué)生也可能得到真菌和放線菌等不同的別離結(jié)果。P30練習(xí)2.答：流程圖表示如下。土壤取樣選擇培養(yǎng)此步是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定梯度稀釋將菌懸液涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上挑選單菌落發(fā)酵培養(yǎng)專題三 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題1 菊花的組織培養(yǎng)1有某種生物全套 的任何一個活細(xì)胞，都具有發(fā)育成 的能力，即每個生物細(xì)胞都具有 。但在生物體的生長發(fā)育過程中并不表現(xiàn)出來，這是因?yàn)樵?條件下，通過基因的 ，構(gòu)成不同組織和器官。2. 植物組織培養(yǎng)

30、技術(shù)的應(yīng)用有：實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的 ；培育 作物；制作 種子；培育作物 以及細(xì)胞產(chǎn)物的 等。3. 細(xì)胞分化：個體發(fā)育中細(xì)胞在 上出現(xiàn) 差異的過程。4. 愈傷組織是通過 形成的，其細(xì)胞排列 ，高度 呈 狀態(tài)的 細(xì)胞。5. 植物組織培養(yǎng)的過程可簡單表示為：脫分化 愈傷組織組織生長新個體6.材料：植物的種類、材料的 和 等都會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇 作材料。7. 營養(yǎng)：常用的培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基，其中含有的大量元素是 ，微量元素是 ，有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。8.激素：在培養(yǎng)基中需要添加 和 等植物激素，其 、 、 等都影響結(jié)果。9.環(huán)境條件：PH、 、 等環(huán)境條件。菊花組培所需

31、PH為 ，溫度為 ，光照條件為 。10. 配制各種母液：將各種成分按配方比例配制成的濃縮液。使用時根據(jù)母液的 ，計(jì)算用量，并加 稀釋。11. 配制培養(yǎng)基：應(yīng)參加的物質(zhì)有瓊脂、 、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液，并用 定容到 毫升。在菊花組織培養(yǎng)中，可以不添加 ，原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比擬容易。12.滅菌：采取的滅菌方法是 。13發(fā)酵操作13.1前期準(zhǔn)備：用 消毒工作臺，點(diǎn)燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進(jìn)行，器械使用前后都要用火焰灼燒 。13.2接種操作：接種過程中插入外植體時 朝上，每個錐形瓶接種 個外植體。外植體接種與細(xì)菌接種相似之處是 。13.3培養(yǎng)過程應(yīng)該放在 中

32、進(jìn)行，并定期進(jìn)行消毒，保持適宜的 和 。13.4移栽前應(yīng)先翻開培養(yǎng)瓶的 ，讓其在培養(yǎng)間生長幾日，然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到 等環(huán)境中生活一段時間，進(jìn)行壯苗。最后進(jìn)行露天栽培。課題成果評價(jià)一對接種操作中污染情況的分析接種34 d后，在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)物會表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。請學(xué)生適時統(tǒng)計(jì)污染率，分析接種操作是否符合無菌要求。二是否完成了對植物組織的脫分化和再分化觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，看看是否培養(yǎng)出了愈傷組織，記錄多長時間長出愈傷組織。統(tǒng)計(jì)更換培養(yǎng)基后愈傷組織進(jìn)一步分化成根和芽的比例和時間。三是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對照與記錄做好統(tǒng)計(jì)和對照，填好結(jié)果記錄表，培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度。從實(shí)驗(yàn)的第

33、一步開始就要求學(xué)生做好實(shí)驗(yàn)記錄，可以讓學(xué)生分組配制不同培養(yǎng)基，如誘導(dǎo)愈傷或直接分化叢芽的培養(yǎng)基，然后做不同配方的比擬。四生根苗的移栽是否合格生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵是既要充分清洗根系外表的培養(yǎng)基，又不能傷及根系。一般使用無土栽培的方法。培養(yǎng)基質(zhì)要提前消毒，可以向培養(yǎng)基質(zhì)噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的高錳酸鉀，并用塑料薄膜覆蓋12 h。掀開塑料薄膜后24 h才能移栽。新移栽的組培苗要在溫室過渡幾天，等壯苗后再定植大田或進(jìn)行盆栽。學(xué)生可以在課后統(tǒng)計(jì)自己移栽的成活率，看看移栽是否合格。答案和提示一旁欄思考題1.你能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？答：微

34、量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，同時能夠維持細(xì)胞的滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基那么需提供大量無機(jī)營養(yǎng)，無機(jī)鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。2.你打算做幾組重復(fù)？你打算設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)嗎？答：教師可以安排學(xué)生分組，做不同的材料或配方，最后分別匯報(bào)成果。但每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)可以取用一個經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。二練習(xí)

35、1.答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長，如一些細(xì)菌、真菌等的生長。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染，就會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄，因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。2.答：外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。課題2 月季的花藥培養(yǎng)1.小孢子母細(xì)胞2n 時期n單核 期n雙核期 細(xì)胞核n 細(xì)胞核n 細(xì)胞n 細(xì)胞n 個精子(n) 分裂 分裂單核 期n 分裂2. 育被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷 、 和 等階段?；ǚ凼怯苫ǚ勰讣?xì)胞經(jīng)過 而形成的，因此花粉是 。3. 在正常情況下，

36、一個小孢子母細(xì)胞可以產(chǎn)生 個精子；在一枚花藥中可以產(chǎn)生 個花粉。4. 產(chǎn)生花粉植物的兩種途徑花藥中的花粉花藥中的花粉 叢芽叢芽 誘導(dǎo)生根移栽脫分化脫分化 5. 誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的上下，受多種因素影響，其中影主要因素是： 和 等。6. 材料的選擇：從花藥來看，應(yīng)中選擇初花期、盛花期、晚花期的花藥；從花粉來看，應(yīng)中選擇四分體期、單核期、雙核期、萌發(fā)期的花粉；從花蕾來看，應(yīng)中選擇完全未開放、略微開放、完全盛開的花蕾。7. 選擇花藥時一般通過 確定花粉發(fā)育時期，此時需要對花粉細(xì)胞核進(jìn)行染色，最常用的染色劑是 和 ，它們分別可以將細(xì)胞核染成 色和 色。8. 在使用焙花青鉻釩溶液時，需要首

37、先將花藥用 處理20min。該試劑的配制方法是將 按體積比為 的比例混合均勻。9. 消毒后的花蕾，要在 條件下除去花萼、花瓣。剝?nèi)』ㄋ帟r，一是注意不要損傷花藥，原因是 ；二是要徹底除去花絲，原因是 。10. 剝?nèi)〉幕ㄋ幰⒖探臃N到 上。每個培養(yǎng)瓶接種 個花藥?；ㄋ幣囵B(yǎng)利用的培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基，pH為 ，溫度為 ，幼苗形成之前需要、不需要光照。在花藥培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 ；在誘導(dǎo)叢芽或胚狀體培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 ；在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 。11. 培養(yǎng)2030d后，花藥開裂，長出 或釋放出胚狀體。前者還要轉(zhuǎn)移到 上進(jìn)行分化培養(yǎng)成再生植株；后者要盡快 并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上

38、。通過愈傷組織形成的植株，常常會出現(xiàn) 的變化，因而需要鑒定和篩選。課題成果評價(jià)一選材是否恰當(dāng)選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。學(xué)生應(yīng)學(xué)會通過顯微鏡觀察處于適宜發(fā)育期的花粉。二無菌技術(shù)是否過關(guān)如果出現(xiàn)了污染現(xiàn)象，說明某些操作步驟，如培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒或接種等有問題。三接種是否成功如果接種的花藥長出愈傷組織或釋放出胚狀體，花藥培養(yǎng)的第一步就成功了。要適時轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基，以便愈傷組織或胚狀體進(jìn)一步分化成再生植株。答案和提示一旁欄思考題為什么花瓣松動會給材料的消毒帶來困難？答：花瓣松動后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來困難。二練習(xí)1.答：F2代紫色甜玉米的基因型組成可能為Aasusu或AAsu

39、su。如果運(yùn)用常規(guī)育種方法，將F2代中的紫色甜玉米與白色甜玉米aasusu進(jìn)行測交，可以選擇出基因型為AAsusu純種紫色甜玉米。但這種方法比擬繁瑣，耗時也較長，需要至少三年的選種和育種時間。如果利用花藥培養(yǎng)的技術(shù)，在F1代產(chǎn)生的花粉中就可能有Asu的組合，再將花粉植株進(jìn)行染色體加倍，就可以直接得到紫色甜玉米的純合體AAsusu。這種方法可以大大縮短育種周期。2.答：植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的相同之處是：培養(yǎng)基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等根本相同。兩者的不同之處在于：花藥培養(yǎng)的選材非常重要，需事先摸索時期適宜的花蕾；花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時更換培養(yǎng)基；花藥培養(yǎng)對培養(yǎng)基

40、配方的要求更為嚴(yán)格。這些都使花藥培養(yǎng)的難度大為增加。原理：細(xì)胞的全能性概念：根底：條件：植物組織培養(yǎng)的根本過程：外植體愈傷組織胚狀體幼苗脫分化再分化影響植物組織培養(yǎng)的因素：外植體的選擇營養(yǎng)、環(huán)境等植物激素的用法溫度、pH、光照等實(shí)驗(yàn)操作：制備MS培養(yǎng)基外植體消毒培養(yǎng)接種移栽栽培植物組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)被子植物花粉的發(fā)育：花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂小孢子母細(xì)胞四分體時期單核期雙核期精子產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：花藥中的花粉花藥中的花粉胚狀體 叢芽叢芽愈傷組織 誘導(dǎo)生根移栽脫分化脫分化分化 再分化影響花藥培養(yǎng)的因素：主要因素：材料的選擇與培養(yǎng)基的組成重要因素：選擇適宜的花粉發(fā)育時期影響因素：

41、親本植株的生長條件、低溫處理和接種密度等實(shí)驗(yàn)操作：材料的消毒：材料的選?。捍_定花粉發(fā)育時期的方法接種和培養(yǎng)：鑒定和篩選： 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)一DNA的粗提取與鑒定1. 實(shí)驗(yàn)原理提取生物大分子的根本思路是。對于DNA的粗提取而言，就是要利用與、等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。1DNA的溶解性DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的溶液中溶解度不同，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以到達(dá)別離目的。DNA不溶于溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)那么溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的別離。2DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解，但是對沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080oC的高溫，而DNA在才會變性。洗滌劑能夠瓦解，但對DNA沒有影響。3DNA的鑒定在條件下，DNA遇會被染成色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1實(shí)驗(yàn)材料的選取但凡含有的生物材料都可以考慮，但是使用的生物組織，成功的可能性更大。2破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液破碎動物細(xì)