果糖二磷酸鈉

1、果糖二磷酸鈉Guotang ErlinsuannaFructose Sodium DiphosphateC6HiiNa30i2P2 406.06C6H11Na3012P2 ? 8H2O 550.17本品為果糖-1,6-二磷酸三鈉鹽或果糖-1,6-二磷酸三鈉鹽八水合物。按無水物計(jì)算，含C6H11Na3012P2不得少于 95.0% o【性狀】本品為白色或類白色的結(jié)晶性粉末；微有特臭，味微咸；果糖二磷酸鈉（CeHnNa3012P2）極具引濕性。本品在水中易溶，在乙醛、乙醇或丙酮中幾乎不溶?！捐b別】 （1）取本品適量，加水制成每 1ml中含50mg的溶液，作為供試品溶液。另取果 糖二磷酸鈉對照品適量

2、，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版二部附錄V B）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10注 分別點(diǎn)于同一微晶纖維素薄層板（板厚約0.5mm）上，以正丁醇-冰醋酸-水-丙酮-10%氨溶?夜（35:20:22.5:15:7.5 ）為展開劑， 展開后晾干，噴以鹽酸間苯二胺乙醇溶液（取鹽酸間苯二胺0.36g,加76%乙醇溶液10ml使溶解），在105 c加熱30分鐘使顯色，供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的顏色與位置應(yīng)與對照品溶液的主斑 點(diǎn)相同；繼續(xù)再噴以丙酮 -12.5%鋁酸錢溶液-鹽酸-高氯酸（86:8:3:3）混合溶液，供試品溶液所 顯斑點(diǎn)的顏色與位置應(yīng)與對照品溶

3、液的主斑點(diǎn)相同。（2）取本品約50mg,置堪期中，加無水碳酸鈉2g,混合后，熾灼至灰化，放冷，加水10ml 使溶解，加硝酸使成酸性，濾過，濾液加鋁酸錢試液，加熱，即發(fā)生黃色沉淀；加過量氨試液， 沉淀溶解。（3）本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照品的圖譜一致（中國藥典 2010年版二部附錄IV C）。（4）本品的水溶液顯鈉鹽的鑒別反應(yīng)（中國藥典2010年版二部附錄出）?！緳z查】 酸度 取本品1.0g （以CeHnNa3012P2計(jì)算），加水10ml溶解后，依法測定（中 國藥典2010年版二部附錄V1 H）, pH值應(yīng)為5.56.5。溶液的澄清度與顏色取本品1.5g （以CbHnNa3012P2計(jì)算），

4、加水10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清無色。如顯色，與黃色、橙黃色或黃綠色2號標(biāo)準(zhǔn)比色液（中國藥典 2010年版二部附錄IX A第一法）比較，不得更深。游離磷酸鹽 取本品20mg （以C6H11Na3012P2計(jì)算），精密稱定，置25ml量瓶中，加水15ml 使溶解；另精密量取標(biāo)準(zhǔn)磷酸鹽溶液精密稱取經(jīng)105c干燥2小時的磷酸二氫鉀0.1433g,置1000ml量瓶中，加硫酸溶液（3- 10） 10ml與水適量使溶解，并加水稀釋至刻度，搖勻，臨用 時再加水稀釋10倍，即每1ml相當(dāng)于10Mg的PO48ml,置另一 25ml量瓶中，各精密加鋁酸錢 硫酸試液2.5ml與1-氨基-2-泰酚-4-磺酸溶液（取無

5、水亞硫酸鈉5g,亞硫酸氫鈉94.3g與1-氨基-2-蔡酚-4-磺酸0.7g,充分混合，臨用前取此混合物1.5g,加水10ml使溶解，必要時濾過）1ml,加水至刻度，搖勻，在 20c放置3050分鐘，照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版二部附錄IV A）,在740nm的波長處測定吸光度，按無水物計(jì)算，含游離磷酸鹽（以PO4計(jì)）不得大于0.4%。氯化物 取本品0.10g （以C6H11Na3012P2計(jì)算），依法檢查（中國藥典 2010年版二部附錄 VMA）,與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液 3.0ml制成的對照液比較，不得更濃（0.03%）。硫酸鹽 取本品0.50g （以C6H11Na3012P2計(jì)算）

6、，依法檢查（中國藥典 2010年版二部附錄 WB）,與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液 2.5ml制成的對照液比較，不得更濃（0.05%）。有關(guān)物質(zhì) 取本品，加水制成每 1ml中含0.1g （以CeHnNa3012P2計(jì)算）的溶液，作為供試 品溶液；精密稱取 6-磷酸果糖對照品適量，加水制成每 1ml中含0.5mg的溶液，作為雜質(zhì)對照 品溶液（1）;精密稱取果糖對照品適量，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，作為雜質(zhì)對照品溶液（2）;精密稱取6-磷酸葡萄糖對照品適量，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，作為雜質(zhì)對照品溶液（3）;另取6-磷酸果糖對照品、果糖對照品、6-磷酸葡萄糖及本品適量，加水制成每1ml中

7、各含6-磷酸果糖0.25mg、果糖0.25mg、6-磷酸葡萄糖0.25mg與本品2mg的混合對照溶 液。照薄層色譜法（中國藥典 2010年版二部附錄V B）試驗(yàn)，吸取上述 5種溶液各5 口分別點(diǎn) 于同一微晶纖維素薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水-丙酮-10%氨溶?夜（35:20:22.5:15:7.5）為展開劑，展開，晾干，噴以間苯二酚乙醇鹽酸溶液（取間苯二酚 0.5g,力口 80%乙醇溶液100ml使溶 解，加鹽酸5ml,搖勻），在105c加熱5分鐘使顯色，立即檢視?；旌蠈φ杖芤簯?yīng)顯示四個清晰 分離的斑點(diǎn)。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得多于 3個，并分別應(yīng)與雜質(zhì)對照品溶液（1）、（2） 或（3）

8、主斑點(diǎn)的位置相同，其斑點(diǎn)顏色與相應(yīng)的對照品溶液主斑點(diǎn)比較，不得更深（0.5%）。水分 取本品，照水分測定法（中國藥典2010年版二部附錄皿M第一法）測定，含水分不得過 10.0% （CeHnNa3012P2 ）或應(yīng)為 24.0%27.0% （CeHnNa3012P2 ? 8H2O）。鐵鹽 取本品1.0g （以C6H11Na3012P2計(jì)算），加水35ml溶解后，力口稀鹽酸溶液3ml,過硫酸錢30mg與30%硫氟酸俊溶液 3ml,加水稀釋至 50ml,搖勻，加正丁醇 10ml,振搖，放置， 醇層如顯色，與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0ml制成的對照液比較，不得更深（0.001%）。重金屬 取本品1.0g （以

9、C6HnNa3012P2計(jì)算），加醋酸鹽緩沖液（pH3.5） 2ml與水適量使 溶解成25ml,依法檢查（中國藥典 2010年版二部附錄皿H第一法），含重金屬不得過百萬分之 十。神鹽 取本品2.0g （以C6H11Na3012P2計(jì)算），加鹽酸5ml與水23ml溶解后，依法檢查（中 國藥典2010年版二部附錄皿J第一法），應(yīng)符合規(guī)定（0.0001%）。蛋白質(zhì) 取本品1.0g （以C6H11Na3012P2計(jì)算），加水10ml溶解后，逐滴加入 30%磺基水楊 酸溶液2ml,不得產(chǎn)生渾濁。異常毒性 取本品，力口注射用水制成每1ml中含16mg （以QHnNa3012P2計(jì)算）的溶液，依法檢查（中國

10、藥典2010年版二部附錄XI C）,按靜脈注射法緩慢注射，應(yīng)符合規(guī)定（供注射用）。降壓物質(zhì) 取本品，加滅菌注射用水制成每1ml中含50mg （CbHnNa3012P2計(jì)算）的溶液，依法檢查（中國藥典2010年版二部附錄XI G）,劑量按貓?bào)w重每1Kg注射1ml,應(yīng)符合規(guī)定。（供 注射用）熱原 取本品，加注射用水制成每1ml中含100mg （以CeHiiNa3012P2計(jì)算）的溶液，依法檢查（中國藥典2010年版二部附錄XI D）,劑量按家兔體重每1kg緩緩注射6ml,應(yīng)符合規(guī)定（供 注射用）。過敏反應(yīng) 取本品，加滅菌注射用水制成每1ml中含100mg （以C6HliNa3012P2計(jì)算）的溶液

11、，依法檢查（中國藥典2010年版二部附錄XI K）,應(yīng)符合規(guī)定。（供注射用）無菌 取本品7.0g,加滅菌水50ml使溶解，用薄膜過濾法處理后， 依法檢查（中國藥典2010 年版二部附錄XI H）,應(yīng)符合規(guī)定（供注射用）。可見異物 稱取本品5份，每份5g （以C6H11Na3012P2計(jì)算），分別置潔凈透明的適宜玻璃 容器內(nèi)，加水溶解并稀釋至 50ml,依法檢查（中國藥典2010年版二部附錄IX H）5份供試品中， 均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細(xì)可見異物，應(yīng)不得過10個。如僅有1份不符合規(guī)定，另取10份同法復(fù)試，均應(yīng)符合規(guī)定（供注射用）?！竞繙y定】取本品適量，采用適宜的酶法測定（附件1或2

12、）?！绢悇e】心血管系統(tǒng)疾病輔助用藥；水電解質(zhì)平衡類藥?！举A藏】密封，在陰涼處保存?！局苿浚?）果糖二磷酸鈉口服溶液（2）果糖二磷酸鈉片（3）果糖二磷酸鈉注射液（4）果糖二磷酸鈉膠囊（5）注射用果糖二磷酸鈉附件1.混懸液酶試劑法（1）試劑 鹽酸三乙醇胺緩沖液（0.4mol/L , pH7.6）:取鹽酸三乙醇胺 18.6g,加水200ml溶 解，加乙二胺四乙酸二鈉3.7g,溶解后，用2mol/L氫氧化鈉溶液（約18ml）調(diào)節(jié)pH值至7.6,加水稀釋至250ml?；蛉∪掖及?7.5g,加水約200ml,加鹽酸4ml,混勻，加乙二胺四乙酸二鈉 3.7g,溶解后，用2mol/L氫氧化鈉溶液或 2mo

13、l/L鹽酸溶液調(diào)節(jié) pH值至7.6,加水稀釋至250ml。 濾過后4 c保存，一周內(nèi)使用。還原型輔酶I （NADH ）溶液：取NADH二鈉鹽7mg,溶于2ml鹽酸三乙醇胺緩沖液 （pH7.6） 中。4c保存。3-磷酸甘油脫氫酶-磷酸丙糖異構(gòu)酶混懸液 （GDH/TIM ）:取3-磷酸甘油脫氫酶混懸液 （GDH ） 與磷酸丙糖異構(gòu)酶混懸液 （TIM ）適量，用3.2mol/L硫酸錢溶液（pH6）稀釋成每1ml約含GDH310U 和TIM1550U 的溶液。4c保存。醛縮酶混懸液（ALD）:取醛縮酶混懸液（ALD）適量，用3.2mol/L硫酸錢溶液（pH6）稀 釋成每1ml中約含ALD90U的溶液。

14、（2）供試品溶液的制備 取本品適量，精密稱定，加水溶解并制成每1ml約含0.2mg （按無水物計(jì)算）的溶液。（3）測定法精密量取鹽酸三乙醇胺緩沖液（pH7.6） 3.0ml,供試品溶液0.1ml,還原型輔酶I溶液0.05ml,甘油磷酸脫氫酶/磷酸丙糖異構(gòu)酶混合混懸液0.02ml,置1cm吸收池中，搖勻，放置15分鐘；另取鹽酸三乙醇胺緩沖液（pH7.6） 3.15ml,甘油磷酸脫氫酶/磷酸丙糖異構(gòu)酶混合混懸液0.02ml,置另一吸收池中，搖勻，作為空白，照紫外-可見分光光度法（中國藥典2005年版二部附錄IV A）,在340nm波長處測定供試品溶液的吸光度A1，再在每池中加醛縮酶混懸液0.02m

15、l,搖勻，于20c25c放置約5分鐘，在340nm波長處測定供試品池的吸光度，直至吸 光度基本不變讀取吸光度A?。求出吸光度差值 AA （ AA=0.9937AA2）,按下式計(jì)算，即得。c八 AA 3.19M406.06M稀釋倍數(shù) 彳”果糖二磷酸鈉含量%):3- 1006.29 1 03 20.1 W式中 0.9937 為 3.17/3.19;3.19為樣品池中溶液的最終體積（ml）;6.29父103為還原型輔酶I （NADH）的摩爾吸收系數(shù)；2為果糖二磷酸鈉反應(yīng)系數(shù)；406.06為果糖二磷酸鈉（C6H11Na3012P2）的分子量；0.1為供試品溶液加入體積（ml）;W為供試品的取樣量（mg

16、）（以CeHnNa3012P2計(jì)算）。附件2固體復(fù)合酶試劑法(1)試劑 空白酶溶液：取固體復(fù)合酶(酶活力測定方法見注1,活力應(yīng)符合規(guī)定)60mg,用鹽酸三乙醇胺緩沖液(取三乙醇胺17.5g,加水約200ml,加鹽酸4ml,混勻，加乙二胺四乙酸二鈉3.7g,溶解后，用2mol/L氫氧化鈉溶液或 2mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié) pH值至7.6,加水稀釋 至250ml。濾過后4c保存，一周內(nèi)使用。)溶解并稀釋至20ml。垂熔漏斗過濾，4c保存，兩天 內(nèi)使用。測定酶溶液：取空白酶溶液10ml,加還原型輔酶I ( NADH ) 3.0mg,溶解后4c保存，兩天內(nèi)使用。(2)供試品溶液的制備取本品適量，精密稱定

17、，加水溶解并制成每1ml約含0.4mg (按無水物計(jì)算)的溶液。(3)測定法精密量取鹽酸三乙醇胺緩沖液2ml,測定酶溶液 1ml,置石英吸收池中；另精密量取上述緩沖液 2ml,空白酶溶液1ml置另一吸收池，作為空白，搖勻，靜置15分鐘，照紫外-可見分光光度法(中國藥典2010年版二部附錄IV A),在340nm波長處測定吸光度 A1。各池再分別精密加入供試品溶液0.1ml,搖勻，于20c25c放置10分鐘，在340nm的波長處測定，直至吸光度基本不變，讀取吸光度A2。求出吸光度差值 AA (AA= A1 1.0333A2K按下式計(jì)算，即得。果糖二磷酸鈉含量(%) = 3.0 406.06稀釋倍

18、數(shù)1006.29 103 20.1 W式中 3.0為加入供試品溶液前樣品池中溶液的體積( ml);6.29 * 103為還原型輔酶I (NADH)的摩爾吸收系數(shù)；2為果糖二磷酸鈉反應(yīng)系數(shù)；406.06為果糖二磷酸鈉(C6H11Na3012P2)的分子量；0.1為供試品溶液加入體積(ml);W為供試品的取樣量(mg)(以C6H11Na3012P2計(jì)算)。注1：固體復(fù)合酶的活力測定固體復(fù)合酶 系指供果糖二磷酸鈉含量測定專用的復(fù)合酶試劑，含醛縮酶(ALD , Aldolase)、磷酸丙糖異構(gòu)酶 (TIM , Triose-phosphate isomerase)和磷酸甘油脫氫酶 (GDH , Glycerinphosphate dehydrogenase)。復(fù)合酶活力系指每1mg酶每1分鐘催化果糖二磷酸鈉的pg數(shù)。每1mg固體復(fù)合酶活力應(yīng)不得低于40/試劑的制備(1)鹽酸三乙醇胺緩沖液(0.4mol/L , pH7.6):見含量測定項(xiàng)下。(2)復(fù)合酶溶液：取固體復(fù)合酶0.1g,用鹽酸三乙醇胺緩沖液(p