腎病綜合征兒童淋巴細(xì)胞表型及細(xì)胞因子變化

1、腎病綜合征兒童淋巴細(xì)胞表型及細(xì)胞因子變化    【關(guān)鍵詞】  腎病綜合征 摘要: 目的:通過對原發(fā)性腎病綜合征(PNS)兒童外周血T淋巴細(xì)胞表型及細(xì)胞因子（白細(xì)胞介素-6、腫瘤壞死因子-）監(jiān)測，探討不同患病時期PNS兒童T淋巴細(xì)胞表型及白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-(TNF-)變化的臨床意義。方法：選取我院兒科門診及住院診斷為PNS患兒共40例，年齡在215歲，分活動期組及緩解期組，活動期及緩解期各檢測一次。對照組為經(jīng)過體格檢查為正常健康兒童，年齡在214歲，共20例。流式細(xì)胞儀檢測淋巴細(xì)胞表型CD3、CD4、CD8的陽性細(xì)胞百分率

2、；酶聯(lián)免疫技術(shù)對細(xì)胞因子（IL-6、TNF-）監(jiān)測，組間進行比較t檢驗。結(jié)果：活動期與緩解期、對照組比較，CD4細(xì)胞數(shù)量明顯降低(P<0.01)，CD8細(xì)胞數(shù)量明顯升高(P<0.01)，CD4/CD8比值顯著降低(P<0.01)，IL-6、TNF-含量均顯著升高(P<0.01)。緩解期IL-6與對照組比較顯著性(<0.01)。結(jié)論：PNS患兒免疫功能明顯下降,免疫的輔助功能降低，CD4、CD8、IL-6、TNF-含量變化可作為判斷PNS患兒病變活動或緩解和估計預(yù)后及治療效果的一項參考指標(biāo)。 關(guān)鍵詞: T淋巴細(xì)胞表型；IL-6；TNF-；  &#

3、160;                                      PNS The Variety Analysis of T-lymphocyte Type and Cell Factor of Nephropa

4、thy Syndrome Child Abstract:Objective：examineing the outer blood T-lymphocyte type and cell factor(interleukin 6,tumor necrosis factor)  of  the primordial nephropathy syndrome(PNS) infant,to study the clinic meaning when T-lymphocyte type and interleukin 6(IL-6),tumor necrosis factor(TNF-

5、a)  change  of the different sicken period children.Method： 40 PNS children in the policlinic and be in hospital,age 215 years,were selected and  divided into active period group and alleviative period group, examine T-lymphocyte type and cell factor once in different period.The norma

6、l group were composed of 20 healthy children checked in the policlinic,age 214 years. Use the cell hydro-apparatus examine the masculine percent of T-lymphocyte type CD3、CD4、CD8 cell, ELISA  (enzyme linked immunosorbant assay)to examine cell factor,and compared different group with t-test. Resu

7、lt: Compare the normal group、 active period group and alleviative period group,CD4 cell  amount obviously depress (P<0.01),CD8 cell amount obviously raise(P<0.01),CD4/CD8 ratio obviously depress (P<0.01), IL-6、TNF-content obviously raise(P<0.01),. IL-6 be markedly raise compared the

8、 normal group to alleviative period group(<0.01). Conclusion: PNS child immunity function obviously depress, immunity assistant function also depress. The  content change of CD4、CD8、IL-6、TNF- should be a referenced index to estimate the PNS clinic period and prognosis or cure effect.Key word

9、s：T-lymphocyte type;IL-6；TNF-；PNS                                            

10、60;                                     腎病綜合征(NS)是兒童泌尿系統(tǒng)病中發(fā)病率比較高的一種疾病，它的發(fā)病、治療及預(yù)后與淋巴細(xì)胞及細(xì)胞因子有直接的聯(lián)系 。因此，對PNS患兒活動期和緩解期體外T淋巴細(xì)

11、胞亞型（CD3、CD4、CD8）及細(xì)胞因子中的白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-(TNF-)進行檢測，探討淋巴細(xì)胞及細(xì)胞因子變化的在PNS中的臨床意義。 1 材料和方法 1.1 研究對象：我院兒科門診及住院診斷為原發(fā)性腎病綜合征(PNS)患兒共40例，年齡在214歲，分活動期組及緩解期組，活動期及緩解期各檢測一次。對照組為經(jīng)過體格檢查為正常健康兒童，年齡在213歲，共20例。 1.2 淋巴細(xì)胞表型分析方法：分析方法參照陳英玉等的方法進行1,2。專用試管，每一管加經(jīng)肝素(0.5ml)抗凝的靜脈新鮮血3.0ml，用BPS 1：4稀釋待用，每支離心管加淋巴細(xì)胞分離液2.0ml，處理標(biāo)本3.0

12、ml，18002000r/min離心20min。吸淋巴細(xì)胞層于另一管，用BPS沖洗三次，制淋巴細(xì)胞懸液2ml。取500l的血細(xì)胞懸液，標(biāo)記單抗（FITC-CD3、FITC-CD4、PE-CD8美國試劑），染色15min，溶解紅細(xì)胞后上機。每份樣本測定2min，計算淋巴細(xì)胞表面分化抗原CD3、CD4、CD8的總數(shù)、陽性細(xì)胞數(shù)和陽性細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)。緩解期依上述方法。1.3 細(xì)胞因子測定：血IL-6、TNF-含量測定采用酶聯(lián)免疫法(ELISA法)(IL-6、TNF-美國試劑),所有患兒均清晨空腹靜脈血，分離血清在-20以下儲存以備統(tǒng)一檢測。緩解期依上述方法留取標(biāo)本檢測。 1.4 統(tǒng)計學(xué)處理：陽性細(xì)胞的

13、統(tǒng)計用百分?jǐn)?shù)表示，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較用t檢驗。 2 結(jié)果 PNS活動期與緩解期、對照組比較，CD4細(xì)胞數(shù)量明顯降低(P<0.01)，CD8細(xì)胞數(shù)量明顯升高(P<0.01)，CD4/CD8比值顯著降低(P<0.01)，IL-6、TNF-含量均顯著升高(P<0.01)。緩解期IL-6與對照組比較顯著性(<0.01)，檢測結(jié)果見表1： 表1 血T淋巴細(xì)胞亞型陽性細(xì)胞及細(xì)胞因子的變化比較略 3 討 論 小兒原發(fā)性腎病綜合征的發(fā)病及病情的進展、預(yù)后與T淋巴細(xì)胞及細(xì)胞因子的異常有著密切的關(guān)系、兩者的失衡導(dǎo)致免疫系統(tǒng)功能的混亂。在細(xì)胞免疫方面，T淋巴細(xì)胞

14、亞群在細(xì)胞免疫中起非常重要作用，是機體的重要效應(yīng)細(xì)胞3，研究結(jié)果表明，PNS活動期的CD4細(xì)胞數(shù)量明顯地低于對照組(P<0.01)，CD8細(xì)胞數(shù)量比對照組明顯升高(P<0.01)，CD4/CD8比值比對照組兒童顯著降低(P<0.01)，說明PNS活動期患兒免疫功能明顯下降；其免疫的輔助功能降低，變態(tài)反應(yīng)減弱導(dǎo)致的免疫損傷的發(fā)生，表現(xiàn)為CD4/CD8比值降低。PNS緩解期與對照組比較沒有顯著性（P>0.05）,說明PNS治療效果良好，患兒免疫細(xì)胞功能有所改善，免疫力不斷增強，對病情的預(yù)后有一定的幫助。通過探討T淋巴細(xì)胞亞群在其中的異常分布，對該病的病情預(yù)后，療效判定有一定

15、的參考價值；提示可以通過改善細(xì)胞免疫來影響該病的進程。 在細(xì)胞因子作用方面，IL-6和TNF-在PNS的發(fā)病中同時起著重要的作用。研究結(jié)果表明，PNS活動期的IL-6和TNF-的水平顯著高于對照組，IL-6水平升高尤為明顯, 說明PNS發(fā)病機制中有多種細(xì)胞因子參與，IL-6是重要的炎癥因子。緩解期IL-6的水平仍高于對照組,顯示體內(nèi)免疫細(xì)胞的活化仍存在,產(chǎn)生各種炎性因子與自身抗體繼續(xù)在起作用,與病情的慢性遷延、復(fù)發(fā)有一定的關(guān)系。TNF-水平與對照組差別無顯著意義。因此對IL-6和TNF-的檢測，有助于監(jiān)測腎小球疾病急性期或進展期4。IL-6和TNF-作為一種重要的炎癥介質(zhì)，它們之間的作用主要通過誘導(dǎo)、促進、刺激等發(fā)揮作用，作用于腎小球，促進腎小球系膜的增生及系膜基質(zhì)的生成，導(dǎo)致腎小球硬化發(fā)生和系膜細(xì)胞的增殖與硬化。 在治療上，可通過測量細(xì)胞因子的變化,間接反應(yīng)淋巴細(xì)胞亞群的變化5。PNS患兒IL-6和TNF-升高和細(xì)胞免疫功能異常有關(guān),它們的濃度變化可作為PNS活動、療效的指標(biāo)。 參考文獻： 1陳英玉，馬樹俊，劉白，等FITC 直標(biāo)單抗及應(yīng)用免疫學(xué)雜志，1993，9(1):封3 2陳英玉，馬樹俊，劉白，等PHA對人扁桃體T細(xì)胞CD4