血細(xì)胞染色體檢查

1、血液學(xué)檢驗(yàn)第四章 血細(xì)胞染色體檢查血細(xì)胞染色體檢查授課教師：馬雪蓮授課教師：馬雪蓮第四章 骨髓其他檢查血液病診斷要求【內(nèi)容銜接】形態(tài)學(xué)： 骨髓象 骨髓病理活檢免疫學(xué)檢驗(yàn)： 流式細(xì)胞術(shù)（CD抗原）遺傳學(xué)與分子生物學(xué)：染色體、基因臨床資料臨床資料形態(tài)學(xué)形態(tài)學(xué)免疫分型遺傳、分生第四章 骨髓其他檢查血液病診斷要求第四章 骨髓其他檢查血液病診斷要求第四章 骨髓其他檢查血細(xì)胞染色體檢驗(yàn)【染色體檢驗(yàn)?zāi)康摹?.白血?。涸\斷、分型 治療方案制定 復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè) 預(yù)后判斷 舉例：急性早幼粒細(xì)胞白血?。∕3型） 90%會(huì)出現(xiàn)t（15，17），形成PML-RARa融合基因。第四章 骨髓其他檢查血細(xì)胞染色體檢驗(yàn)第四章 骨髓其

2、他檢查血細(xì)胞染色體檢驗(yàn)【染色體檢驗(yàn)?zāi)康摹?.診斷遺傳性血液病: 血友病-X染色體隱性遺傳 鐮刀狀紅細(xì)胞貧血常染色體顯性遺傳 蠶豆病- X染色體第四章 骨髓其他檢查血細(xì)胞染色體檢驗(yàn)【染色體】 光鏡下染色體 電鏡下染色體第四章 骨髓其他檢查血細(xì)胞染色體檢驗(yàn)【染色體】第四章 骨髓其他檢查血細(xì)胞染色體檢驗(yàn)【染色體】染色體：雙股DNA長(zhǎng)鏈反復(fù)折疊形成 染色體結(jié)構(gòu)展開(kāi)圖第四章 骨髓其他檢查第四章 骨髓其他檢查血細(xì)胞染色體檢驗(yàn)【起始】時(shí)間：1960年人物：諾維爾Nowell和亨格福德Hungerford地點(diǎn)：美國(guó)費(fèi)城Philadelphia事件：發(fā)現(xiàn)慢粒特異染色體即Ph染色體（費(fèi)城染色體）意義：開(kāi)啟了血液遺

3、傳學(xué)時(shí)代，推動(dòng)了分物發(fā)展。第四章 骨髓其他檢查血細(xì)胞染色體檢驗(yàn)【發(fā)展史】血細(xì)胞染色體檢查經(jīng)歷了4個(gè)階段第四章 骨髓其他檢查血細(xì)胞染色體核型分析技術(shù)一.【染色體非顯帶技術(shù)】(一)原理:骨髓液分裂中期血細(xì)胞染色體為對(duì)象,根據(jù)形態(tài)特征進(jìn)行分析，排序，編號(hào)在骨髓液中加入秋水仙素，破壞紡錘絲，使細(xì)胞停留在分裂中期。然后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行固定，制片，染色前期中期后期末期第四章 骨髓其他檢查一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名 中著絲粒染色體 著絲粒 亞中著絲粒染色體.形態(tài)特征 近端著絲粒染色體 隨體：近端著絲粒染色體 短臂的球形小體第四章 骨髓其他檢查一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名 2.染色體識(shí)

4、別的指標(biāo)：染色體相對(duì)長(zhǎng)度 臂率：短臂（p）與長(zhǎng)臂（q）比例 有無(wú)隨體 3 染色體分組 第四章 骨髓其他檢查一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名第四章 骨髓其他檢查一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名 3 染色體分組 人類(lèi)染色體數(shù)目：46條（23對(duì)） 根據(jù)染色體識(shí)別指標(biāo)把染色體從小到大編號(hào)：1-22號(hào)， 并分為AG七組。 第四章 骨髓其他檢查一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名4. 染色體核型：通過(guò)顯微攝影技術(shù)給單個(gè)細(xì)胞中所有染色體拍照并編號(hào)分析得到其核型 染色體正常核型：正常男性核型表示：46，XY正常女性核型表示：46，XX正常男性染色體模式圖（非顯帶）第四章 骨髓其他檢查

5、二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)(一)原理：染色體經(jīng)過(guò)特殊處理或用熒光染料染色，可是染色體顯示明暗相間的條紋稱(chēng)顯帶染色體。臨床上最常用的顯帶技術(shù)是G顯帶法，R顯帶法。G帶帶型分析第四章 骨髓其他檢查二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)(二)顯帶染色體命名 顯帶技術(shù)有利于染色體的更好識(shí)別，為深入研究染色體異常和基因定位奠定了基礎(chǔ)。 染色體區(qū)：以著絲粒為起始向臂端延伸，依次編號(hào)為1區(qū)，2區(qū)，3區(qū)； 染色體帶：染色體上明暗條紋第四章 骨髓其他檢查二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)(二)顯帶染色體命名顯帶染色體表示需四項(xiàng)內(nèi)容：染色體號(hào)、臂號(hào)、區(qū)號(hào)、帶號(hào)第四章 骨髓其他檢查三.染色體核型分析系統(tǒng)自動(dòng)染色體核型分析系統(tǒng)為臨床提供了簡(jiǎn)單、高效

6、的細(xì)胞遺傳學(xué)檢測(cè)手段。第四章 骨髓其他檢查二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)第四章 骨髓其他檢查四.常規(guī)顯帶技術(shù)的應(yīng)用（一）染色體數(shù)目異常（常見(jiàn)于血液?。?1.多倍體：成倍增加，如三倍體69條 （3n） 2.非整倍體：增減不成倍 亞二倍體（少于46條）- 見(jiàn)于3% ALL 超二倍體（多于46條）- 見(jiàn)于32% ALL 3.嵌合體：多見(jiàn)于先天性異?；颊摺Ｈ?45,X/46,XY數(shù)目異常描述：染色體前寫(xiě)“+”或“-” 表示該整條染色體增加或減少， 如 47,xy,+8 69,XXY第四章 骨髓其他檢查四.常規(guī)顯帶技術(shù)的應(yīng)用第四章 骨髓其他檢查四.常規(guī)顯帶技術(shù)的應(yīng)用（二）染色體結(jié)構(gòu)異常 原因：染色體斷裂及重排

7、常見(jiàn)結(jié)構(gòu)異常： 缺失del 倒位inv 易位t 重復(fù)dup 結(jié)構(gòu)異常描述：染色體后寫(xiě)“+”或“-” 表示染色體部分獲得或缺失。如 46,XY,3p-第四章 骨髓其他檢查異常核型舉例及練習(xí)46，XY, del 6q47, XX, ? +2146, XY, +18, -2146, XY, inv (3) (q21;q26)46，XY, t (9;11) (q21;q26)第四章 骨髓其他檢查血細(xì)胞染色體檢驗(yàn)【課堂小結(jié)】 1.了解：血細(xì)胞染色體檢驗(yàn)?zāi)康募鞍l(fā)展史 2.掌握：常見(jiàn)異常核型的表示方法及意義第四章 骨髓其他檢查四.常規(guī)顯帶技術(shù)應(yīng)用常規(guī)顯帶技術(shù)不足之處： 1 只能分析分裂中期細(xì)胞 2 染色體質(zhì)

8、量差，顯帶不佳 3 難于識(shí)別微小異常（104kb） 4 無(wú)法確定的異常分裂像來(lái)自哪種細(xì)胞第四章 骨髓其他檢查五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）FISH FISH 技術(shù)技術(shù) 是20世紀(jì)80年代在，細(xì)胞遺傳學(xué)，分子生物學(xué)，免疫學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的新技術(shù)。工具為工具為“探針探針”： 標(biāo)記熒光素，可與目的基因通過(guò)堿基互補(bǔ)結(jié)合的一段DNA或RNA片段。檢測(cè)對(duì)象：分裂中期或分裂間期的細(xì)胞第四章 骨髓其他檢查五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）原位熒光雜交原理第四章 骨髓其他檢查五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）Bcr/abl 融合基因陽(yáng)性融合基因陽(yáng)性46， XY， t（9；22)(q34；q11)第四章 骨髓其他檢查五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）染色體染色體t t（3 3；5 5）第四章 骨髓其他檢查六. 多色熒光原位雜交技術(shù)（FISH）染色