農業(yè)微生物配套實驗---實驗一 細菌革蘭氏染色法

1、 農業(yè)微生物學實驗農業(yè)微生物學實驗微生物教研室2021秋季學期植物生產類各專業(yè)實驗內容實驗內容n實驗一實驗一 細菌革蘭氏染色法細菌革蘭氏染色法n實驗二實驗二 培養(yǎng)基的制備及滅菌培養(yǎng)基的制備及滅菌n實驗三實驗三 稀釋平板分離計數法稀釋平板分離計數法n實驗四實驗四 微生物菌落特征微生物菌落特征觀察觀察及描述及描述實驗報告書寫和實驗要求實驗報告書寫和實驗要求1 1 一個實驗技術內容寫一份報告。一個實驗技術內容寫一份報告。2 2 實驗內容包括實驗目的、原理、操作步驟及實驗實驗內容包括實驗目的、原理、操作步驟及實驗結果，強調的是不能將書本上的搬到實驗報告中，結果，強調的是不能將書本上的搬到實驗報告中，必

2、須是你真實完成的步驟及對應每步的結果反映必須是你真實完成的步驟及對應每步的結果反映在你的報告中。在你的報告中。3 3 要求繪圖時必須用鉛筆描繪，用一個圓表示從顯要求繪圖時必須用鉛筆描繪，用一個圓表示從顯微鏡看到的視野，標明菌名、放大倍數等。微鏡看到的視野，標明菌名、放大倍數等。大腸桿菌大腸桿菌 101004 實驗結束后要求每位同學將自己使用過的儀器和玻璃器皿打實驗結束后要求每位同學將自己使用過的儀器和玻璃器皿打掃干凈，并放回原處，保持實驗室整潔，每次實驗全班留一組掃干凈，并放回原處，保持實驗室整潔，每次實驗全班留一組同學打掃實驗室衛(wèi)生。同學打掃實驗室衛(wèi)生。農業(yè)微生物學實驗農業(yè)微生物學實驗實驗一

3、實驗一 細菌革蘭氏染色法細菌革蘭氏染色法n1本實驗的目的和要求本實驗的目的和要求n了解革蘭氏染色的原理，學習并掌握了解革蘭氏染色的原理，學習并掌握革蘭氏染色的方法革蘭氏染色的方法。 n2實驗內容和原理實驗內容和原理n革蘭氏染色法（革蘭氏染色法（Gram stain）不僅能觀察到細菌的形態(tài)）不僅能觀察到細菌的形態(tài)而且還可將所有細菌區(qū)分為兩大類：染色反應呈藍紫色的而且還可將所有細菌區(qū)分為兩大類：染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌，用稱為革蘭氏陽性細菌，用G+表示；染色反應呈紅色（復表示；染色反應呈紅色（復染顏色）的稱為革蘭氏陰性細菌，用染顏色）的稱為革蘭氏陰性細菌，用G-表示。細菌對于革表示。細

4、菌對于革蘭氏染色的不同反應，是由于它們細胞壁的成分和結構不蘭氏染色的不同反應，是由于它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結構組成的成的網狀結構組成的 ，在染色過程中，當用乙醇處理時，在染色過程中，當用乙醇處理時，由于脫水而引起網狀結構中的孔徑變小，通透性降低，使由于脫水而引起網狀結構中的孔徑變小，通透性降低，使結晶紫結晶紫-碘復合物被保留在細胞內而不易脫色，因此，呈碘復合物被保留在細胞內而不易脫色，因此，呈現藍紫色；革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量低，而現藍紫色；革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量

5、低，而脂類物質含量高，當用乙醇處理時，脂類物質溶解，細胞脂類物質含量高，當用乙醇處理時，脂類物質溶解，細胞壁的通透性增加，使結晶紫壁的通透性增加，使結晶紫-碘復合物易被乙醇抽出而脫碘復合物易被乙醇抽出而脫色，然后又被染上了復染液（番紅）的顏色，因此呈現紅色，然后又被染上了復染液（番紅）的顏色，因此呈現紅色。色。 n3需用的儀器和試劑等需用的儀器和試劑等n大腸桿菌，枯草芽孢桿菌；革蘭氏染大腸桿菌，枯草芽孢桿菌；革蘭氏染色液，載玻片，接種環(huán)、顯微鏡等。色液，載玻片，接種環(huán)、顯微鏡等。n4實驗步驟實驗步驟n樣品涂片樣品涂片干燥干燥固定固定草酸銨結晶紫草酸銨結晶紫初染約初染約1min水洗水洗碘液媒染約碘液媒染約1min水洗水洗95酒精脫色酒精脫色2030s立即水立即水洗洗番紅液復染番紅液復染12min水洗水洗干干燥燥鏡檢鏡檢2022-1-2892022-1-2810n5實驗報告要求實驗報告要求n在你所作的革蘭氏染色制片中，大腸桿菌和枯在你所作