熱休克蛋白70對供心一氧化氮及一氧化氮合酶表達的影響 醫(yī)學(xué)論文_第1頁
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1、    熱休克蛋白70對供心一氧化氮及一氧化氮合酶表達的影響 醫(yī)學(xué)論文              本文由中國論文范文收集整理?!菊?#160; 目的 探討熱休克蛋白70 (HSP70) 對供心一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的 影響 。 方法 Wistar 大鼠18只,分為2組:對照組(C,n = 9),腹腔注射生理鹽水0.5 ml,24 h后取離體心臟灌注康斯特保護液(HTK液),4保存3 h后建立Langendorff離

2、體心臟灌注模型,灌注KH液2 h;實驗組(E,n = 9)腹腔注射重酒石酸去甲腎上腺素(溶于生理鹽水中)3.1mol/kg(0.53mg/kg),腹腔注射24 h后取離體心臟,處理方法同C組。測定心肌HSP70含量、NO、NOS的含量以及相關(guān)生化指標并做統(tǒng)計學(xué)處理比較。 結(jié)果 HSP70含量E組較C組明顯增高(P<0.01) ,NO、NOS的含量E組較C組明顯增多(P<0.01) ,生化指標E組明顯優(yōu)于C組。結(jié)論 心肌HSP70高表達對供心具有明顯的保護效應(yīng),并且其促進心肌NO、NOS的表達,可能是HSP70發(fā)揮心肌保護作用的因素之一。 【關(guān)鍵詞】  熱休克蛋白70;一氧

3、化氮;一氧化氮合酶Abstract: OBJECTIVE   To investigate the protection of heat shock protein 70 on donor heart and the effects on expression of myocardial cell nitric oxide (NO) and nitric oxide synthase (NOS) of isolated rat heart. METHODS  18 Wistar rats were randomly divided into 2 groups. C

4、ontrol group (C,n = 9) ,Normal saline 0.5ml was injected intraperitoneally and 24 hours later isolated hearts were stored in 4 for 3 hours with Histidine-tryptophan-ketoglutarate (HTK) solutions, and then isolated hearts were perfused for 2 hours by Langendorff model. Experimental group (E,n = 9), N

5、oradrenaline Bitartrate 3.1mol/kg(0.53mg/kg) was injected intraperitoneally and 24 hours later isolated hearts were stored in 4 for 3 hours with HTK,and then isolated hearts were perfused for 2 hours with Krebs-Henseleit (K-H) solutions by Langendorff model. Myocardial HSP70 content , the expression

6、 of NO,NOS and related biochemical indicators were detected. RESULTS   HSP70 ,NO and NOS in E group are higher than those in C group and biochemical indicators in E group is better than that in C group . CONCLUSION  This study demonstrated that the high expression of HSP70 has obvious

7、 protection on donor heart ,and it can markedly affect the expression of NO,NOS of isolated rat heart and it is perhaps one of important factors for myocardial protection.Key words:  Heat shock protein 70;Nitric oxide;Nitric oxide synthase熱休克蛋白(heat shock protein,HSP)是一組所有的細胞能在應(yīng)激情況下由熱休克基因所編碼合成的

8、序列高度保守的伴隨細胞蛋白, 并能對抗更為嚴重的應(yīng)激損傷, 研究 發(fā)現(xiàn)在高溫、缺氧、再灌注、局部損傷或感染等多種有害因素1刺激均可產(chǎn)生熱休克蛋白。HSP70是HSP中最保守、最主要、含量最豐富的一類。實驗表明一氧化氮(NO) 、一氧化氮合酶(NOS) 作為效應(yīng)因子可介導(dǎo)心肌缺血再灌注損傷的保護作用, HSP70心肌保護作用是否與供心缺血再灌注后NO、NOS表達有關(guān)尚未可知,本實驗的目的是探討HSP70在發(fā)揮供心心肌保護作用時與NO、NOS的關(guān)系。1  資料與方法 1.1  實驗動物和分組  雄性Wistar大鼠18只,體重250350 g,由青島市藥檢所

9、動物中心提供,隨機分為2組(n=9):對照組(C組):腹腔注射生理鹽水0.5 ml,注射后24 h取離體心臟,灌注Histidine-tryptophan-ketoglutarate(HTK)心臟保護液,儲存于4保存液中3 h,然后心臟行Langendorff灌注Krebs-Henseleit(K-H)液2 h;實驗組(E組),腹腔注射重酒石酸去甲腎上腺素(溶于生理鹽水中)3.1mol/kg(0.53mg/kg),24 h后取離體心臟,余處理步驟同C組。心臟灌流結(jié)束后取左室心肌組織測定。HTK液和KH液自行配制2,配制試劑購自上?;菖d生化試劑有限公司。1.2  測定指標 1

10、.2.1   心肌肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)10min漏出率測定。復(fù)灌后10min ,留取冠脈流出液,置于-20冰箱中保存,以備測定心肌酶漏出量。全自動生化 分析 儀測定CK、LDH濃度。單位: IU/(10min·g)。CK(LDH)漏出率=CK(或LDH)(IU/L)×10min漏出液 1000×心肌濕重(g)1.2.2   心肌含水量(MWC)測定。實驗結(jié)束后在固定部位取心室肌約100 mg,先用濾紙吸干心肌表面水分,使用 電子 天平稱心肌濕重。然后將心肌置入100恒溫烤箱烘烤5 h,待恒重后稱干重, 計算 MWC。單位:%。MWC= 心肌濕重-心肌干重心肌濕重×100% 。1.2.3  心肌NO、NOS含量測定。試驗結(jié)束后在同一部位取心肌組織約200 mg,吸干水漬后置入液氮保存。測定前稱重,剪取100 mg左右心肌組織塊,研磨成10 %勻漿,低溫離心,取上清液,測定上清液中NO、NOS含量(化學(xué)法,試劑盒由南京建成生物工程研究所提供,嚴格按操作步驟進行測定)。 關(guān)鍵詞:影響,表達,蛋白,心肌,HSP70,NO,醫(yī)學(xué)論文,熱休克蛋白70對供心一氧化氮及一氧化氮合酶表達的影響 內(nèi)容摘要:本文由中

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