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1、水質(zhì)-五日生化需氧量定測(cè)的)5D0B(中華人民共和國(guó)國(guó)家環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)HJ 5052009代替GB/T 7488-1987水質(zhì)五日生化需氧量(B0D)的測(cè)定5稀釋與接種法警告:丙烯基硫腺屬于有化合物,操作時(shí)應(yīng)按規(guī)定要求佩帶防護(hù)器具,避免接觸皮膚和衣服;標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制應(yīng)在通風(fēng)柜內(nèi)進(jìn)行操作;檢測(cè)后的殘?jiān)鼩堃簯?yīng)做妥善的安全處理。1適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定水中五日生化需氧量(B0D)的稀釋與接種的方法。5本標(biāo)準(zhǔn) 適用于地表水、工業(yè)廢水和生活污水中五日生化需氧量(B0D)的測(cè)定。方法的檢出限為0 5ing/L,方法的測(cè)定下限為2ing/L,非稀釋法和非稀釋接種法 的測(cè)定上限為6mg/L,稀釋與稀釋接種法的
2、測(cè)定上限為6000mg/Lo2規(guī)范性引用文件本標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容引用了下列文件中的條款。凡是不注日期的引用文件,其有效版本適 用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/TGB/TGB/THJ/T3方法原理收ttFttF網(wǎng)如有 ft 權(quán)睛聯(lián)系 ff 理員除.1 1加A A文W W生化需氧量是指在規(guī)定的條件下,微生物分解水中的某些可氧化的物質(zhì),特別是 分解有機(jī)物的生物化學(xué)過(guò)程消耗的溶解氧。通常悄況下是指水樣充滿完全密閉的溶解氧瓶中, 在(201)C的暗處培養(yǎng)5d4h或(2+5)d4h(先在04C的暗處培養(yǎng)2d,接著在(20土1)C的暗處培養(yǎng)5d,即培養(yǎng)(2+5)d),分別測(cè)定培養(yǎng)前后水樣中溶解氧的質(zhì)量濃度,山培養(yǎng)前后溶解 氧的質(zhì)量
3、濃度之差,計(jì)算每升樣品消耗的溶解氧量,以BOD形式表示。5若樣品中的有機(jī)物含量較多,B0D的質(zhì)量濃度大于6mg/L,樣品需適當(dāng)稀釋后測(cè) 定;對(duì)不含或含微生物少的工業(yè)廢水,如酸性廢水、堿性廢水、高溫廢水、冷凍保存的廢 水或經(jīng)過(guò)氯化處理等的廢水,在測(cè)定BOD時(shí)應(yīng)進(jìn)行接種,以引進(jìn)能分解廢水中有機(jī)物的微生5物 0 當(dāng)廢水中存在難以贏一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有機(jī)物或含有劇毒物質(zhì)時(shí), 應(yīng)將馴化后的微 生物引入水樣中進(jìn)行接種。4試劑和材料本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑除非另有說(shuō)明,分析時(shí)均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的分析純化學(xué)試劑。收集于網(wǎng)如有 ft 權(quán)睛聯(lián)系 ff 理員除.1 1加A A文W W6682分析實(shí)驗(yàn)室用
4、水規(guī)格和試驗(yàn)方法7489水質(zhì)溶解氧的測(cè)定碘量法11913水質(zhì)溶解氧的測(cè)定電化學(xué)探頭法91地表水和污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范4.1水:實(shí)驗(yàn)用水為符合GB/T 6682規(guī)定的3級(jí)蒸水,且水中銅離子的質(zhì)量濃度不大于0. 01mg/L,不含有氯或氯胺等物質(zhì)。4.2接種液:可購(gòu)買接種微生物用的接種物質(zhì),接種液的配制和使用按說(shuō)明書的 要求操作。也可按以下方法獲得接種液。4. 2.1未受工業(yè)廢水污染的生活污水:化學(xué)需氧量不大于300mg/L,總有機(jī)碳不 大于lOOmg/L;4. 2.2含有城鎮(zhèn)污水的河水或湖水;4. 2.3污水處理廠的出水;4. 2.4分析含有難降解物質(zhì)的工業(yè)廢水時(shí),在其排污口下游適當(dāng)處取水樣作為廢
5、水的馴化接種液。也可取中和或經(jīng)適當(dāng)稀釋后的廢水進(jìn)行連續(xù)曝氣,每天加入少量該種廢水, 同時(shí)加入少量生活污水,使適應(yīng)該種廢水的微生物大量繁殖。當(dāng)水中出現(xiàn)大量的絮狀物時(shí),表明 微生物S繁殖,可用作接種液。一般馴化過(guò)程需38 do4. 3鹽洛液4.3.1磷酸鹽緩沖溶液:將&5g磷酸二氫鉀(KHP0)、21.8g磷酸氫二鉀MKHPO)、33. 4g七彳水合磷酸氫二鈉(NaHP0 7H0)和1. 7g氯化銀(NHC1)溶于水中, 稀釋至HzzlOGOmlT此溶液收干M M taflfSRWtaflfSRW聯(lián)系 ft 理員除.梢胡文W W在04C可穩(wěn)定保存6個(gè)月此溶液的pH值為7. 2。4.3. 2
6、硫酸鎂溶液,P (MgSO) = 11. Og/L:將22. 5g七水合硫酸鎂-i (MgSO 7H0)溶于水中,稀釋至lOOOmb此溶液在04C可穩(wěn)定保存6個(gè)月,若發(fā)現(xiàn)任何 沉淀或微生物生長(zhǎng)應(yīng)棄去。4.3.3氯化鈣溶液,P (CaCl)= 27. 6g/L:將27. 6g無(wú)水氯化鈣(CaCl)溶于二; 水中,稀釋至lOOOmb此溶液在04C可穩(wěn)定保存6個(gè)月,若發(fā)現(xiàn)任何沉淀或微生物生長(zhǎng)應(yīng)棄去。4.3.4氯化鐵溶液,P (FeCl)=O. 15g/L:將0. 25g六水合氯化鐵s(FeCl 6H0)溶于水中,稀釋至lOOOmb此溶液在04C可穩(wěn)定保存6個(gè)月,若發(fā)現(xiàn)任何 沉淀或微生物生長(zhǎng)應(yīng)棄去。4
7、.4稀釋水:在520L的玻璃瓶中加入一定量的水,控制水溫在(20l)C,用曝氣裝置(5.9)至少曝氣1小時(shí),使稀釋水中的溶解氧達(dá)到8nig/L以上。使用前每升水中加入 上述四種鹽溶液(4.3)各l.Omb混勻,209保存。 在曝氣的過(guò)程中防止污染, 特別是防止帶 入有機(jī)物、金屬、 氧化物或還原物。2稀釋水中氧的濃度不能過(guò)飽和,使用前需開口放置1小時(shí),且應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)使 用。剩余的稀釋水應(yīng)棄去。收集干網(wǎng)熱.如有權(quán)W聯(lián)系e理員除.梢紬文W4.6鹽酸溶液,c(HCl)=0. 5mol/L:將40nil濃鹽酸(HC1)溶于水中, 稀釋至1000ml,4.7氫氧化鈉溶液,c(NaOH)=0. 5mol/
8、L:將20g氫氧化鈉溶于水中,稀釋至1000mlO4.8亞硫酸鈉溶液,c(NaSO)=0. 025mol/L:將1. 575g亞硫酸鈉(RS0)溶3匕3于水中,稀釋至lOOOmlo此溶液不穩(wěn)定,需現(xiàn)用現(xiàn)配。4.9葡萄糖-谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液:將葡萄糖(CHO,優(yōu)級(jí)純)和谷氨酸6銃(H0X-CH-CH-CHNH-C00H,優(yōu)級(jí)純)在130干燥1小時(shí),各稱取150陽(yáng) 溶于 水中。在1000ml容量瓶中稀釋至標(biāo)線。此溶液的BOD為21020 mg/L,現(xiàn)用現(xiàn)配。該溶液也可少量冷凍保存,融化后立刻使用。4. 10丙烯基硫K硝化抑制劑,P (CHNS) = l.Og/L:溶解0. 20g丙烯基硫豚,is (C
9、HNS)于200inl,.9水中混合,4C保存,此溶液可穩(wěn)定保存Md。收集干網(wǎng)熱.如有權(quán)W聯(lián)系e理員除.梢紬文W4.11乙酸溶液,1+1。4. 12碘化鉀溶液,P (KI)=100 g/L:將lOg碘化鉀(KI)溶于水中,稀釋至lOOmlo4.13淀粉溶液,P=5 g/L:將0. 50g淀粉溶于水中,稀釋至lOOmlo5儀器和設(shè)備本標(biāo)準(zhǔn)除非另有說(shuō)明,分析時(shí)均使用符合國(guó)家A級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的玻璃量器。本標(biāo)準(zhǔn)使 用的玻璃儀器須清潔、無(wú)毒性和可生化降解的物質(zhì)。5.1濾膜:孔徑為1. 6 unio4.5接種稀釋水,根據(jù)接種液的來(lái)源不同,每升稀釋水(4.4)液(4.2):城市生活污水和污水處理廠出水加110 mb
10、河水或湖水加10100水存放在(201)C的環(huán)境中,當(dāng)天配制當(dāng)天使用。接種的稀釋水pH值為7. 2,1. omg/Lo中加入適量接種ml,將接種稀釋BOD應(yīng)小于55.2溶解氧瓶:帶水封裝置,容積250300 mlo5.3稀釋容器:1000-2000 ml的 ft 筒或容量瓶。虹吸管:供分取水樣或添加稀釋水。 溶解氧測(cè)定儀。冷藏箱:04C。冰箱:有冷凍和冷藏功能。帶風(fēng)扇的恒溫培養(yǎng)箱:(201) C。6樣品6.1采集與保存樣品采集按照地表水和污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范(HJ/T 91)的相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。采集的樣品應(yīng)充滿并密封于棕色玻璃瓶中,樣品量不小于1000 mb在04C的 暗處運(yùn)輸和保存,并于24 h內(nèi)盡
11、快分析。24 h內(nèi)不能分析,可冷凍保存(冷凍保存時(shí)避 免樣品瓶破裂),冷收集干網(wǎng)?如有聯(lián)糸 tt 理員除.榆胡文凍樣品分析前需解凍、均質(zhì)化和接種。6.2樣品的詢處理2. 1 pH值調(diào)節(jié)若樣品或稀釋后樣品pH值不在68范W內(nèi),應(yīng)用鹽酸溶液(4.6)或氫氧化鈉 溶液(4.7)調(diào)節(jié)其pH值至68。C 9 9卒勾和姑厶勾的主眸若樣品含有樂(lè) fi 余氯,二般在采樣后放置12h,游離氯即可消失。對(duì)在短時(shí) 間內(nèi)不能消失的余氯,可加入適量亞硫酸鈉溶液去除樣品中存在的余氯和結(jié)合氯,加入的亞 硫酸鈉溶液的量山下述方法確定。取已中和好的水樣lOOmb加入乙酸溶液(4. 11) 10ml.碘化鉀溶液(4. 12) I
12、mb混勻,暗處?kù)o置5inin。用亞硫酸鈉溶液滴定析出的碘至淡黃色,加入Iml淀粉溶液(4. 13)呈藍(lán)色 O 再繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛剛褪去,即為終點(diǎn),記錄所用亞硫酸鈉溶液體積,山亞硫酸鈉溶 液消耗的體積,計(jì)算出水樣中應(yīng)加亞硫酸鈉溶液的體積。2.3樣品均質(zhì)化含有大量顆粒物、需要較大稀釋倍數(shù)的樣品或經(jīng)冷凍保存的樣品,測(cè)定前均需將樣品攪拌均收集干網(wǎng)?如有聯(lián)糸 tt 理員除.榆胡文5.45.55.65.75.8勻6. 2.4樣品中有藻類若樣品中有大量藻類存在,B0D的測(cè)定結(jié)果會(huì)偏高。當(dāng)分析結(jié)果精度要求較高5時(shí),測(cè)定前應(yīng)用濾孔為1.6mn的濾膜(5.1)過(guò)濾,檢測(cè)報(bào)告中注明濾膜濾孔的大小。6. 2.5含鹽a
13、低的樣品4若樣品含鹽量低,非稀釋樣品的電導(dǎo)率小于125uS/cm時(shí),需加入適量相同體 積的四種鹽溶液(4.3),使樣品的電導(dǎo)率大于125 y S/cmo每升樣品中至少需加入各種鹽的體 積V按公式(1)計(jì)算:V = (AK?12. 8) /113.6(1)樣品需要提高的電導(dǎo)率值,M S/cmo7分析步驟1非稀釋法非稀釋法分為二種情況:非稀釋法和非稀釋接種法。如樣品中的有機(jī)物含量較少,B0D的質(zhì)量濃度不大于6ing/L,且樣品中有足夠的 微生物,用非稀釋法測(cè)定。若樣品中的有機(jī)物含量較少,B0D的質(zhì)量濃度不大于5 6mg,/L,但樣品中無(wú)足收tCTMWt.tCTMWt.如權(quán)講聯(lián)系S S理員除榆胡文夠
14、的微生物,如酸性廢水、堿性廢水、高溫廢水、冷凍保存的廢水或經(jīng)過(guò)氯化處 理等的廢水,采用非稀釋接種法測(cè)定。1. 1試樣的準(zhǔn)備7.1. 1. 1待測(cè)試樣測(cè)定前待測(cè)試樣的溫度達(dá)到(202) C,若樣品中溶解氧濃度低,需要用曝氣 裝置(5. 9)曝氣15inin,充分振搖趕走樣品中殘留的空氣泡:若樣品中氧過(guò)飽和,將容器2/3體積充滿樣品,用力振蕩趕出過(guò)飽和氧,然后根據(jù)試樣中微生物含量情況確定測(cè)定方法。非稀釋 法可直接取樣測(cè)定;非稀釋接種法,每升試樣中加入適量的接種液(4.2),待測(cè)定。若試樣中含 有硝化細(xì)菌,有可式中:V需加入各種鹽的體積,ml;能發(fā)生硝化反應(yīng),需在每升試樣中加入2 ml丙烯基硫脈硝化
15、抑制劑(4.10)。7. 1. 1.2空白試樣非稀釋接種法,每升稀釋水中加入與試樣中相同量的接種液(4. 2)作為空0試樣, 需要時(shí)每升試樣中加入2 ml丙烯基硫腺硝化抑制劑(4.10)。7. 1.2試樣的測(cè)定7. 1. 2. 1碘量法測(cè)定試樣中的裕解氧將試樣(7.1.1.1)充滿二個(gè)溶解氧瓶(5.2)中,使試樣少量溢出,防止試樣中 的溶解氧質(zhì)量收干M M taflfSRWtaflfSRW聯(lián)系 ft 理員除.梢胡文W W濃度改變,使瓶中存在的氣泡黑瓶壁排除。將一瓶蓋上瓶蓋9加上水封,在瓶蓋 外罩上一個(gè)密封5罩,防止培養(yǎng)期間水封水蒸發(fā)干,在恒溫培養(yǎng)箱(5.8)中培養(yǎng)5d4h或(2+5) d土4h
16、后測(cè)定試樣中溶解氧的質(zhì)量濃度。另一瓶min后測(cè)定試樣在培養(yǎng)前溶解氧的質(zhì)量濃度。溶解氧的測(cè)定按GB/T 7489進(jìn)行操作。7. 1. 2. 2電化學(xué)探頭法測(cè)定試樣中的溶解氧將試樣(7.1.1.1)充滿一個(gè)溶解氧瓶(5.2)中,使試樣少量溢出,防止試樣中 的溶解氧質(zhì)量濃度改變,使瓶中存在的氣泡靠瓶壁排除。測(cè)定培養(yǎng)前試樣中的溶解氧的質(zhì)量濃 度。蓋上瓶蓋,防止樣品中殘留氣泡,加上水封,在瓶蓋外罩上一個(gè)密封罩,防止培 養(yǎng)期間水封水蒸發(fā)干。將試樣瓶放入恒溫培養(yǎng)箱(5.8)中培養(yǎng)5d4h或(2+5) d4h。測(cè)定培養(yǎng)后試樣中溶解氧的質(zhì)量濃度。洛解氧的測(cè)定按GB/T 11913進(jìn)行操作??瞻自嚇拥臏y(cè)定方法同7
17、. 1.2. 1或7. 1. 2. 2o7. 2稀釋與接種法稀釋與接種法分為二種悄況:稀釋法和稀釋接種法。收干M M taflfSRWtaflfSRW聯(lián)系 ft 理員除.胡文若試樣中的有機(jī)物含量較多,BOD的質(zhì)量濃度大于6mg/L,且樣品中有足夠的微 生物,采用稀釋法測(cè)定:若試樣中的有機(jī)物含量較多,B0D的質(zhì)量濃度大于6mg/L,但試樣中無(wú)足夠的微生物,采用稀釋接種法測(cè)定。7. 2. 1試樣的準(zhǔn)備7. 2.1.1待測(cè)試樣待測(cè)試樣的溫度達(dá)到(202)C,若試樣中溶解氧濃度低,需要用曝氣裝置(5.9)曝氣ISminr充分振搖趕走樣品中殘留的氣泡;若樣品中氧過(guò)飽和,將容器的2/3體積充滿 樣品,用力
18、振蕩趕出過(guò)飽和氧,然后根據(jù)試樣中微生物含量悄況確定測(cè)定方法。稀釋法測(cè)定,稀釋 倍數(shù)按表1和表2方法確定,然后 ffl 稀釋水(4. 4)稀釋。稀釋接種法測(cè)定,用接種稀釋水(4.5)稀釋樣品 0 若樣品中含有硝化細(xì)菌,有可能發(fā)生硝化反應(yīng),需在每升試樣培養(yǎng)液中加入2 ml丙 烯基硫IK硝化抑制劑(4. 10)。稀釋倍數(shù)的確定:樣品稀釋的程度應(yīng)使消耗的溶解氧質(zhì)量濃度不小于2nig/L,培 養(yǎng)后樣品中剩余溶解氧質(zhì)量濃度不小于2mg/L,且試樣中剩余的溶解氧的質(zhì)量濃度為開始濃 度的1/32/3為最佳。收集于網(wǎng)如有 ft 權(quán)請(qǐng)聯(lián)系S理員制除.胡文稀釋倍數(shù)可根據(jù)樣品的總有機(jī)碳(TOC)、高S酸鹽指數(shù)(1)或
19、化學(xué)需氧量MCOD)的“測(cè)定值,按照表1列出的BOD與總有機(jī)碳(TOC).高S酸鹽指數(shù)(T)或化需氧量(CODc).的比值R估訃BOD的期望值(R與樣品的類型有關(guān)),再根據(jù) 表2確定稀釋因5子。按照確定的稀釋倍數(shù),將一定體積的試樣或處理后的試樣用虹吸管(5.4)加入 已加部分稀釋水或接種稀釋水的稀釋容器中(5.3),加稀釋水或接種稀釋水至刻度,輕輕混合避免殘留氣泡,待測(cè)定。若稀釋倍數(shù)超過(guò)100倍,可進(jìn)行兩步或多步稀釋。若試樣中有微生物毒性物質(zhì),應(yīng)配制兒個(gè)不同稀釋倍數(shù)的試樣,選擇與稀釋倍數(shù) 無(wú)關(guān)的結(jié)果,并取其平均值。試樣測(cè)定結(jié)果與稀釋倍數(shù)的關(guān)系確定如下:當(dāng)分析結(jié)果精度要求較高或存在微生物毒性物質(zhì)
20、時(shí),一個(gè)試樣要做2個(gè)以上不 同的稀釋倍數(shù),式中:P五日生化需氧量質(zhì)量濃度,mg/L;每個(gè)試樣每個(gè)稀釋倍數(shù)做平行雙樣同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。測(cè)定培養(yǎng)過(guò)程中每瓶試樣氧的 消耗量,并畫出氧消耗量對(duì)每一稀釋倍數(shù)試樣中原樣品的體積曲線。若此曲線呈線性,則此試樣中不含有任何抑制微生物的物質(zhì),即樣品的測(cè)定結(jié)果 與稀釋倍數(shù)收集FM如有 ft 權(quán)i#聯(lián)糸理員除.梢皿文W無(wú)關(guān);若曲線僅在低濃度范圉內(nèi)呈線性,取線性范W內(nèi)稀釋比的試樣測(cè)定結(jié)果計(jì) 算平均BOD值。57. 2. 1.2空白試樣稀釋法測(cè)定,空口試樣為稀釋水(4.4),需要時(shí)每升稀釋水中加入2 ml丙烯基 硫腺硝化抑制劑(4. 10)。稀釋接種法測(cè)定,空白試樣為接種稀
21、釋水(4.5),必要時(shí)每升接種稀釋水中加入2 ml內(nèi)烯基硫K硝化抑制劑(4. 10)。7. 2.2試樣的測(cè)定試樣和空白試樣的測(cè)定方法同7. 1.2. 1或7. 1. 2. 2。8結(jié)果計(jì)算& 1非稀釋法非稀釋法按公式(3)計(jì)算樣品B0D的測(cè)定結(jié)果:5式中:P五日生化需氧量質(zhì)量濃度,mg/L;P水樣在培養(yǎng)前的溶解氧質(zhì)量濃度,mg/L;上一水樣在培養(yǎng)后的溶解氧 質(zhì)量濃度,mg/L。8 2非稀釋接種法非稀釋接種法按公式4) 11-算樣品B0D的測(cè)定結(jié)果:5p= (p?p) ? (p ?P ) (4)pg 式中:P-五日生化需氧量質(zhì)量濃度,mg/L;Pl -接種水樣在培養(yǎng)前的溶解氧質(zhì)量濃度,mg
22、/L;P2 -接種水樣在培養(yǎng)后的溶解氧質(zhì)量濃度,mg/L;P一空白樣在培養(yǎng)前的溶解氧質(zhì)a濃度,mg/L;,收集于網(wǎng)如有 ft 權(quán)請(qǐng)聯(lián)系S理員制除.梢皿文WP空口樣在培養(yǎng)后的洛解氧質(zhì)量濃度,mg/Lo ;& 3稀釋與接種法稀釋法和稀釋接種法按公式(5) il算樣品B0D的測(cè)定結(jié)果:5(PPP2)?(P3P4)?fl P = f2P8接種稀釋水樣在培養(yǎng)前的溶解氧質(zhì)量濃度,mg/L;:P一接種稀釋水樣在培養(yǎng)后的溶解氧質(zhì)量濃度,mg/L;=P空白樣在培養(yǎng)詢的溶解氧質(zhì)量濃度,mg/L:,P空白樣在培養(yǎng)后的溶解氧質(zhì)量濃度,mg/L; -接種稀釋水或稀釋水在培養(yǎng)液中所占的比例;企 -原樣品在培養(yǎng)液中所占的比例。f:BOD測(cè)定結(jié)果以氧的質(zhì)量濃度(mg/L)報(bào)出。對(duì)稀釋與接種法,如果有兒個(gè)稀5釋倍數(shù)的結(jié)果滿足要求,結(jié)果取這些稀釋倍數(shù)結(jié)果的平均值。結(jié)果小于l
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