益胃消增膠囊對(duì)慢性萎縮性胃炎模型大鼠胃粘膜病理組織學(xué)的影響

1、益胃消增膠囊對(duì)慢性萎縮性胃炎模型大鼠胃粘膜病理組織學(xué)的影響         07-10-15 11:04:00     編輯：studa20                            &#

2、160;      作者：龔占悅 范 明 龔其淼 郅扶 王玲玲 【關(guān)鍵詞】  益胃【摘要】 目的 觀察益胃消增膠囊對(duì)慢性萎縮性胃炎（CAG）模型大鼠胃粘膜病理組織學(xué)的影響。方法 將78只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為6組:正常對(duì)照組、模型組、自然恢復(fù)組、維酶素對(duì)照組、益胃消增膠囊低劑量組及益胃消增膠囊高劑量組。應(yīng)用2%水楊酸溶液及150g/L、55熱鹽水灌胃、20mmol/L脫氧膽酸鈉溶液自由飲用方法對(duì)正常對(duì)照組以外的其他各組大鼠進(jìn)行造模60天，造模成功后，將模型組大鼠處死，留取胃粘膜標(biāo)本待測(cè)，另五組大鼠施加相關(guān)因素30天后處死，同樣留

3、取胃粘膜標(biāo)本，分別用光鏡和電鏡觀察胃粘膜組織學(xué)方面的改變。結(jié)果 益胃消增膠囊治療組大鼠胃粘膜炎癥、萎縮、腸化等各項(xiàng)病理指標(biāo)與模型組比較P均<0.01，不典型增生的改變與模型組比較P均<0.05，病理組織學(xué)改善明顯。結(jié)論 益胃消增膠囊能夠消除胃粘膜炎癥，并能改善、甚至部分逆轉(zhuǎn)CAG已經(jīng)形成的萎縮、腸化及不典型增生等，這提示本方能有效治療CAG，并能防止其癌變。關(guān)鍵詞 慢性萎縮性胃炎 病理組織學(xué) 益胃消增膠囊【Abstract】 Objective To observe the effect of YiWeiXiaoZeng Capsule（YWC）on gastric mucosa

4、pathological histology in rats model of chronic atrophic gastritis.Methods Seventy eight male Wistar rats were randomly divided into six groups:normal control group，model group，natural recovery group，WeiMeiSu control group，low-dose YWC group and high-dose YWC group.CAG model was established by synth

5、etical method:salicylas and high-salt hot water and sodium deoxycholate were given，et al.All the factors were given for sixty days.When the model was established successfully，model group rats were sacrificed，gastric mucosa were collected，and other rats were treated with different medicines.After a m

6、onth，all the rats were sacrificed and gastric mucosa were collected to observe the histologic mucosa changes by microscopy.Results Compared to model group，significant statistics difference（P<0.01）in pathologic changes of gastric mucosa was found between YWC treated group and model group.Conclusio

7、n YiWeiXiaoZeng Capsule can scavenge，even can turnover partly the pathologic changes of gastric mucosa.It suggests YiWeiXiaoZeng Capsule can treat CAG effectively and can prevent its progress.Key words chronic atrophic gastritis（CAG） pathological histology YiWeiXiaoZeng Capsule 慢性萎縮性胃炎（CAG）是一種常見(jiàn)消化系統(tǒng)

8、疾病。1978年WHO將其列為胃癌的癌前狀態(tài)，而在此基礎(chǔ)上伴發(fā)有不完全腸腺化生（IM）和（或）中、重度不典型增生（Dys）則被視為癌前病變。本研究是以觀察益胃消增膠囊對(duì)CAG模型大鼠胃粘膜病理組織學(xué)的影響，為其療效提供科學(xué)的理論依據(jù)，并進(jìn)一步挖掘其臨床應(yīng)用價(jià)值。1 實(shí)驗(yàn)材料    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 78只健康、性成熟雄性Wistar大鼠，（150±10）g，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。    1.2 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑 益胃消增膠囊（黃芪、丹參、三七粉、白芍、元胡、甘草等），由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院制劑室提供，分別

9、配成生藥濃度為1g/ml和2g/ml的混懸液;脫氧膽酸鈉（北京市海淀區(qū)微生物培養(yǎng)基制品廠，批號(hào):011108）配成20mmol/L的脫氧膽酸鈉溶液;氯化鈉光復(fù)精細(xì)化工研究所，批號(hào):020811）配成150g/L的氯化鈉溶液，臨用時(shí)加熱至55;另配0.9%的氯化鈉溶液;水楊酸（天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心，批號(hào):030109）配成濃度為2%的水楊酸溶液;維酶素片（北海陽(yáng)光藥業(yè)有限公司，批號(hào):030716）研末，配成0.1g/ml的混懸液。2 實(shí)驗(yàn)方法    2.1 動(dòng)物分組 將78只大鼠隨機(jī)分為6組:正常對(duì)照組（組）、模型組（組）、自然恢復(fù)組（組）、維酶素對(duì)照組（組

10、）、益胃消增膠囊低劑量組（組）及益胃消增膠囊高劑量組（組），每組13只，除組外，其余大鼠給予造模處理，造模過(guò)程中組各死亡1只，多因衰竭而死，組大鼠沒(méi)有死亡。    2.2 動(dòng)物模型的建立及處理措施 模型建立:參閱大量文獻(xiàn)資料 112  ，結(jié)合中西醫(yī)理論，具體的造模方法為:150g/L、55熱鹽水，10mlkg -1  d -1  ，灌胃;2%水楊酸溶液10mlKg -1  d -1  ，灌胃;均為1次/d;20mmol/L脫氧膽酸鈉溶液，自由飲用;配以饑飽失常處理，即2d飽食，1d禁食。按上述方法造模60天。處理措

11、施:60天后，隨機(jī)殺取2只模型組大鼠，取胃體、胃竇部標(biāo)本，經(jīng)光鏡證實(shí)造模成功后，殺取模型組另10只大鼠，留取胃體、胃竇部標(biāo)本待測(cè)各項(xiàng)觀察指標(biāo)。第組大鼠仍然充足供食及清潔自來(lái)水，組大鼠則停止造模，第組大鼠開(kāi)始給予自配生理鹽水10mlkg -1  d -1  ，灌胃;第組大鼠給予0.1g/ml維酶素混懸液10mlkg -1  d -1  ，灌胃;第組給予1g/ml的益胃消增膠囊混懸液以10mlkg -1  d -1  ，灌胃;第組給予2g/ml的益胃消增膠囊混懸液以10mlkg -1  d -1  ，灌胃;均1次/d，

12、連續(xù)用藥30天。    2.3 取材與指標(biāo)檢測(cè) 處死大鼠后立即剖腹取胃，沿胃大彎剪開(kāi)，于裝有生理鹽水的燒杯中漂洗干凈、攤平。2.4 鏡下觀察    2.4.1 光學(xué)顯微鏡觀察 在胃體及胃竇部小彎側(cè)切取1.5 cm×1.0cm組織塊，立即投入10%甲醛溶液中固定，經(jīng)梯度酒精脫水，二甲苯透明，石蠟包埋切片，常規(guī)HE染色，置Olympus BX60型光鏡下觀察，并進(jìn)行顯微攝影。    2.4.2 電子顯微鏡觀察 在胃體及胃竇部小彎側(cè)切取胃粘膜1mm×1mm大小各2塊，迅速固定于2.5%戊二醛

13、內(nèi)，置4冰箱。充分固定后抽取益胃消增膠囊高劑量組2只，其余各組各1只，用磷酸緩沖液充分沖洗，再用鋨酸后固定，丙酮逐級(jí)脫水，Epon821環(huán)氧樹(shù)脂包埋，切片，光鏡下    選取病變明顯部位，作超薄切片，經(jīng)醋酸鈾和檸檬酸鉛雙重 染色后，Philips Tecnai G 2 型透射電鏡下觀察。    2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（積分）采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析，以P<0.05差異有顯著性，以P<0.01差異有非常顯著性。3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果  

14、60; 3.1 光學(xué)顯微鏡所見(jiàn) 正常組胃粘膜上皮完整，腺體排列規(guī)則，粘膜固有層未見(jiàn)炎細(xì)胞或僅見(jiàn)少數(shù)淋巴細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞散在，無(wú)充血、水腫及糜爛，粘膜肌層較薄;模型組粘膜不完整，粘膜變薄或糜爛，表面可見(jiàn)脫落的變性、壞死的上皮細(xì)胞，粘膜腺體有不同程度的萎縮或消失，多數(shù)腺體結(jié)構(gòu)排列紊亂，見(jiàn)核分裂像，核大深染，核漿比例失調(diào)而呈現(xiàn)有不同程度的異型性，部分腺體呈囊狀擴(kuò)張。擴(kuò)張的腺體在胃體及胃竇部均可見(jiàn)，其上皮呈柱狀。粘膜固有層內(nèi)見(jiàn)較多淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、少數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞及嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。重者淋巴細(xì)胞呈灶性浸潤(rùn)，形成淋巴濾泡。粘膜肌層增厚，厚薄不均，并向固有膜伸延，在腺體之間見(jiàn)較多平滑肌纖維。并伴見(jiàn)IM及

15、Dys。自然恢復(fù)組病變類似模型組，而益胃消增膠囊高劑量組則表現(xiàn)為輕度CSG表現(xiàn)或接近正常組，低劑量組病變則重于高劑量組，但明顯好于維酶素對(duì)照組，而維酶素對(duì)照組則優(yōu)于自然恢復(fù)組。各組的具體情況見(jiàn)表1、表2。（注:各表均是按病變程度無(wú)、輕、中、重進(jìn)行積分，它們的積分分別為0、1、2、3分，其分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)參見(jiàn)2000年5月井岡山慢性胃炎的病理診斷標(biāo)準(zhǔn)。）表1 各組大鼠胃粘膜慢性炎癥、萎縮的情況（略） 表2 各組大鼠胃粘膜腸化、不典型增生的情況（略）3.2 電子顯微鏡所見(jiàn) 正常組胃粘膜上皮細(xì)胞微絨毛排列整齊密集，細(xì)胞器豐富，線粒體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等均未見(jiàn)異常，分泌顆粒未見(jiàn)減少。模型組上皮細(xì)胞普遍發(fā)生退變，細(xì)胞游離緣微絨毛呈明顯刷狀緣或稀疏、短小、脫落，細(xì)胞間隙增寬，細(xì)胞間質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)多個(gè)大小不等的杯狀細(xì)胞。許多壁細(xì)胞、主細(xì)胞的線粒體大小不一，嵴稀疏、斷裂或消失，有 的出現(xiàn)了空化或腫脹，有的線粒體膜已溶解，線粒體破碎，部分粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)出現(xiàn)斷裂，有的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張呈囊泡狀，脫顆粒明顯，微管泡系統(tǒng)也見(jiàn)擴(kuò)張，高爾基復(fù)合體萎縮變小，基質(zhì)蒼白、疏松，次級(jí)溶酶體增多，分泌顆粒減少。粘液分泌細(xì)胞有的已退變腫脹。見(jiàn)到少數(shù)內(nèi)分泌細(xì)胞，多已有損傷改變，內(nèi)分泌顆粒依然存在，線粒體腫脹，細(xì)胞表面微絨毛消失或非常稀少。間質(zhì)