生理凝血試驗(yàn)報(bào)告

1、生理凝血實(shí)驗(yàn)報(bào)告篇一：凝血實(shí)驗(yàn)報(bào)告血液凝固和影響血液凝固的因素摘要【目的】通過測定某些條件下血液凝固的時(shí)間,探究不同因素物質(zhì)對(duì)于血液凝固的影響.【方法】采用頸動(dòng)脈放血取血,用不同的因數(shù)處理各試管中的血液,記錄凝血時(shí)間.【結(jié)果】肝素,2%的草酸鉀,石蠟會(huì)導(dǎo)致血液凝固變慢甚至不凝固.棉花,肺組織浸液會(huì)大大加快血液凝固.【結(jié)論】 棉花、 肺組織浸液、 生理鹽水有促進(jìn)血液凝固的作用,石蠟油、肝素、草酸鉀使血液凝固變慢甚至不凝固.并且外源性凝血時(shí)間比內(nèi)源性凝血時(shí)間短.關(guān)鍵詞：抗凝；內(nèi)源性；外源性引言血液凝固的過程是由許多凝血因子參加的酶促反應(yīng).根據(jù)血液凝固過程中凝血酶原激活途徑不同,可將血液凝固分為內(nèi)源

2、性激活途徑和外源性激活途徑.內(nèi)源性凝血是指參與血液凝固的凝血因子全部存在于血漿中； 外源性凝血是指組織因子參與下的血凝固過程.本實(shí)驗(yàn)采用動(dòng)物頸動(dòng)脈放血取血,血液幾乎未與組織因子接觸.因此,凝血過程主要是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的作用,肺組織浸液中含豐富的組織因子,參加試管觀察外源性凝血系統(tǒng)的作用.11材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)材料：1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家兔,試管,動(dòng)脈夾,動(dòng)脈插管,恒溫水浴,秒表.,石蠟油,冰塊,草酸鉀,肝素,生理鹽水,棉花,肺組織浸液.1.2實(shí)驗(yàn)方法氨基甲酸乙酯烏拉坦按5ml/kg體重劑量給家兔耳緣靜脈注射麻醉,將兔子仰臥固定在兔手術(shù)臺(tái)上.,別離頸外靜脈,采血10ml,制備血漿和血清.,頭部

3、用線結(jié)扎,向心端夾上動(dòng)脈夾.用眼科剪在近結(jié)扎線處的血管壁剪一個(gè)“V字的小口,向心方向插入動(dòng)脈插管,用線結(jié)扎固定.以備取血之用.,編號(hào)1-10.根據(jù)下列圖預(yù)先參加各個(gè)準(zhǔn)備物.,9號(hào)管有纖維蛋白,10號(hào)去除纖維蛋白.立即用秒表記時(shí)間,每隔15s將試管傾斜一次,觀察血液是否凝固,至血液成為凝膠狀記下時(shí)間.2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.實(shí)驗(yàn)討論3.15號(hào)試管作為對(duì)照組,5號(hào)凝固是由于血液與試管壁接觸,啟動(dòng)了內(nèi)源性凝血過程.3.21號(hào)試管生理鹽水血液凝固時(shí)間比5號(hào)試管長,是由于血液稀釋的血液凝固水平減弱.3.32號(hào)試管棉花血液凝固時(shí)間比5號(hào)試管短,血液接觸到粗糙的外表,引起血小板黏著,促進(jìn)凝血.3.43號(hào)試管70分鐘

4、內(nèi)不凝固,由于石蠟油外表光滑,不易引起血小板黏著,即不易使血小板發(fā)揮促進(jìn)凝血的作用.3.54號(hào)試管冰水血液不凝固,酶的活性隨著溫度的不同而不同,冰水降低了血液中凝血酶的活性,使凝血過程減慢.3.66號(hào)試管肺組織浸液血液凝固時(shí)間5號(hào)試管短,是由于肺組織浸液含組織因子,組織因子Fm啟動(dòng)了外源性凝血過程,加速了血液凝固過程.3.77號(hào)試管肝素血液不凝固,是由于肝素是抗凝劑,主要通過以下機(jī)制增長了血液凝固時(shí)間：增強(qiáng)抗凝血酶田與凝血酶的親和力,加速凝血酶的失活；抑制血小板的粘附、聚集.+3.88號(hào)試管草酸鉀血液不凝固,原因是草酸鉀是抗凝劑與血液中Ca結(jié)合生成草酸鈣2+沉淀,減少了Ca,抑制了凝血過程.3

5、.99號(hào)燒杯血液不凝固,主要是由于內(nèi)源性影響血液凝固的因素纖維蛋白取出后會(huì)使血液不再凝固；10號(hào)燒杯中血液不凝固,可能由于當(dāng)天溫度過低,實(shí)驗(yàn)兔血液中缺少凝血因子等； 實(shí)驗(yàn)時(shí)秒表記錄時(shí)間及每隔十五秒傾斜一次試管,難免帶來一定的人為誤差.5.實(shí)驗(yàn)結(jié)論棉花、肺組織浸液、生理鹽水有促進(jìn)血液凝固的作用,石蠟油、肝素、草酸鉀使血液凝固變慢甚至不凝固.并且外源性凝血時(shí)間比內(nèi)源性凝血時(shí)間短.4實(shí)驗(yàn)結(jié)論棉花、肺組織浸液、生理鹽水有促進(jìn)血液凝固的作用,石蠟油、肝素、草酸鉀使血液凝固變慢甚至不凝固.并且外源性凝血時(shí)間比內(nèi)源性凝血時(shí)間短.5參考文獻(xiàn)1陸源,林國華,楊午鳴.機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)教程M.北京：科學(xué)出版社.XX篇二：

6、【實(shí)驗(yàn)報(bào)告】血液凝固及其影響因素實(shí)驗(yàn)五：血液凝固及其影響因素實(shí)驗(yàn)人：同組人：【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?學(xué)習(xí)血液凝固的根本過程2了解加速或延緩血液凝固的一些因素【實(shí)驗(yàn)原理】血液凝固是一個(gè)酶的有限水解激活過程,在此過程中有多種凝血因子參與.根據(jù)凝血過程起動(dòng)時(shí)激活因子來源不同,可將血液凝固分為內(nèi)源性激活途徑和外源性激活途徑.內(nèi)源性激活途徑是指參與血液凝固的所有凝血因子在血漿中,外源性激活途徑是指受損的組織中的組織因子進(jìn)入血管后,與血管內(nèi)的凝血因子共同作用而啟動(dòng)的激活過程.【實(shí)驗(yàn)材料和用具】家兔清潔小試管7個(gè)、小燒杯2個(gè)、竹簽、秒表、試管架、哺乳動(dòng)物手術(shù)器械一套、兔手術(shù)臺(tái)、動(dòng)脈夾、塑料動(dòng)脈插管、線、棉花、水浴槽、

7、冰盒液狀石蠟、肝素、草酸鉀12mg、腦勻漿液0.1ml、生理鹽水【實(shí)驗(yàn)過程】1、動(dòng)物麻醉及頸部手術(shù)此部由助教老師操作取一只動(dòng)物,稱重.按1g/kg體重的劑量將烏拉坦氨基甲酸乙酯由耳緣靜脈緩慢注入,觀察動(dòng)物肌張力、呼吸與角膜反射的變化.動(dòng)物麻醉后背位固定于兔手術(shù)臺(tái)上.剪去頸部手術(shù)野的毛,沿頸正中線在喉頭上一指至鎖骨上一指的地方作一57cm的皮膚切口.別離皮下組織及肌肉.2、頸總動(dòng)脈插管此部由助教老師操作在氣管兩側(cè)區(qū)分并別離頸總動(dòng)脈,頸總動(dòng)脈下方穿兩條線備用.在左側(cè)頸總動(dòng)脈的近心端夾一動(dòng)脈夾,在動(dòng)脈夾遠(yuǎn)心端距動(dòng)脈夾約3cm處結(jié)扎.用小剪刀在結(jié)扎線的近側(cè)結(jié)扎線與動(dòng)脈夾之間沿向心方向剪一小斜口約占管徑

8、的一半,向心臟方向插入動(dòng)脈插管,由備用的線結(jié)扎固定.取血時(shí)將動(dòng)脈夾松開即可.3、血液凝固的加速和延緩觀察1.2.3.4.5.6.翻開兔頸總動(dòng)脈夾,血液從動(dòng)脈插管流出,棄去第一份1mL動(dòng)脈血后,向每個(gè)試管中注入1mL兔動(dòng)脈血,并搖勻.自血液流出動(dòng)脈插管開始計(jì)時(shí).除第1管外,其他各管每隔15秒鐘將試管傾斜一次,觀察液面是否傾斜即血液是否流動(dòng),直到試管內(nèi)血液不再流動(dòng)為止,記錄凝血時(shí)間.當(dāng)?shù)?管已經(jīng)凝固時(shí),再傾斜第1管看血液是否凝固,假設(shè)尚未凝固那么按上述方法每隔15秒鐘傾斜一次,直到血液凝固為止,記錄凝血時(shí)間,即為該兔血的凝固時(shí)間.以第2管為對(duì)照,各管觀察其他各管中血液凝固時(shí)間.向第9管中滴加2氯化

9、鈣2滴,觀察血液是否凝固.取出第5管中的玻棒,用水洗凈,觀察附著在玻棒上的纖維蛋白.考前須知：a)b)c)d)取放試管時(shí)要用拇指和食指捏住試管的上端,不要握住試管的底部,以免手的溫度影響結(jié)果.每支試管口徑及采血量要盡量一致,不可相差太大.記錄凝血時(shí)間要準(zhǔn)確.判斷凝血的標(biāo)準(zhǔn)要前后一致.一般以傾斜試管達(dá)45時(shí),試管內(nèi)血液不見流動(dòng)為準(zhǔn).【實(shí)驗(yàn)結(jié)果及相關(guān)討論】機(jī)體凝血系統(tǒng)包括凝血和抗凝兩個(gè)方面,兩者間的動(dòng)態(tài)平衡是正常機(jī)體維持體內(nèi)血液流動(dòng)狀態(tài)和預(yù)防血液丟失的關(guān)鍵.機(jī)體的正常止凝血,主要依賴于完整的血管壁結(jié)構(gòu)和功能,有效的血小板質(zhì)量和數(shù)量,正常的血漿凝血因子活性.其中,血小板和凝血因子是生理性止凝血的重要

10、成分,見圖1.抗凝系統(tǒng)不僅包括抗凝因子,還包括纖溶系統(tǒng).BT由血時(shí)間CFT束臂試驗(yàn)CRT血塊收縮試驗(yàn)BPC血小板計(jì)數(shù)CT凝血時(shí)間RT復(fù)鈣時(shí)間APTT活化局部凝血活酶時(shí)間PT凝血酶原時(shí)間PF3血小板第3因子TF組織因子Fb纖維蛋白TXA2血栓素A25-HT5羥色胺PK激肽釋放酶原HMW瘠分子量激肽原圖1正常止血機(jī)制及血栓與止血常用篩選試驗(yàn)檢測環(huán)節(jié)血小板的作用：在正常的血液循環(huán)中,血小板并不與內(nèi)皮細(xì)胞外表或其他細(xì)胞發(fā)生作用,而是沿著毛細(xì)血管內(nèi)壁排列,維持其完整性,血管局部受損傷時(shí),血小板的止血兼有機(jī)械性的堵塞傷口和生物化學(xué)性粘附聚集作用.止血時(shí),首先是受損的血管壁發(fā)生收縮,使局部血液流動(dòng)變慢或減少

11、.血液中的血小板在vWF因子存在下迅速粘附于暴露的膠原纖維,此時(shí)血小板被激活,血小板形態(tài)發(fā)生改變,由正常的圓盤狀態(tài)變?yōu)閳A球形,偽足突起,血小板發(fā)生聚集血小板膜糖蛋白IIb/IIIa由纖維蛋白原介導(dǎo)發(fā)生互相粘附、聚集,此為血小板第一相聚集,激活的血小板便發(fā)生釋放反響和花生四烯酸代謝,其中許多物質(zhì),如血小板的ADP等,可加速血小板的聚集、變性成為不可逆的“第二相聚集,形成白色血栓,構(gòu)成了初期止血的屏障.與此同時(shí),由血小釋放和激活許多促凝物質(zhì)參與血液凝固反響.血小板膜磷脂外表提供了凝血反響的場所,血小板第3因子在凝血過程多個(gè)環(huán)節(jié)中發(fā)揮重要作用,血小板合成釋放的TXA2和5-HT促使進(jìn)一步收縮,血小板

12、收縮蛋白那么最終可使纖維蛋白收縮血塊收縮,使血栓更為堅(jiān)固,止血更加徹底.凝血過程：血液凝固簡稱凝血,是血液由流動(dòng)狀態(tài)變?yōu)槟z狀態(tài)的過程,它是止血功能的重要組成局部.凝血過程是一系列凝血因子被相繼酶解激活的過程,最終生成凝血酶,形成纖維蛋白凝塊.迄今為止,參與凝血的因子共有14個(gè).其中用羅馬數(shù)字編號(hào)的有12個(gè) 從I皿,其中因子VI并不存在.習(xí)慣上,前4個(gè)凝血因子常分別稱為纖維蛋白原因子I、凝血酶因子n、組織因子因子田和鈣離子因子Wo凝血因子VI是血清中活化的凝血因子V,故不再視為一獨(dú)立的凝血因子.1.內(nèi)源性凝血途徑內(nèi)源性凝血途徑是指參加的凝血因子全部來自血液內(nèi)源性.臨床上常以活化局部凝血活酶時(shí)間

13、APTT來反映體內(nèi)內(nèi)源性凝血途徑的狀況.內(nèi)源性凝血途徑是指從因子刈激活,到因子X激活的過程.當(dāng)血管壁發(fā)生損傷,內(nèi)皮下組織暴露,帶負(fù)電荷的內(nèi)皮下膠原纖維與凝血因子接觸,因子刈即與之結(jié)合,在HK和PK的參與下被活化為刈a.在不依賴鈣離子的條件下,因子刈a將因子XI激活.在鈣離子的存在下,活化的XIa又激活了因子IX.單獨(dú)的IXa激活因子X的效力相當(dāng)?shù)?它要與皿a結(jié)合形成1:1的復(fù)合物,又稱為因子X酶復(fù)合物.這一反響還必須有Ca2+和PL共同參與.2.外源性凝血途徑外源性凝血途徑：是指參加的凝血因子并非全部存在于血液中,還有外來的凝血因子參與止血.這一過程是從組織因子暴露于血液而啟動(dòng),到因子X被激活

14、的過程.臨床上以凝血酶原時(shí)間測定來反映外源性凝血途徑的狀況.組織因子是存在于多種細(xì)胞質(zhì)膜中的一種特異性跨膜蛋白.當(dāng)組織損傷后,釋放該因子,在鈣離子的參與下,它與因子W一起形成1:1復(fù)合物.一般認(rèn)為,單獨(dú)的因子W或組織因子均無促凝活性.但因子W與組織因子結(jié)合會(huì)很快被活化的因子X激活為Wa,從而形成Wa組織因子復(fù)合物,后者比Wa單獨(dú)激活因子X增強(qiáng)16000倍.外源性凝血所需的時(shí)間短,反響迅速.外源性凝血途徑主要受組織因子途徑抑制物TFPI調(diào)節(jié).TFPI是存在于正常人血漿及血小板和血管內(nèi)皮細(xì)胞中的一種糖蛋白.它通過與因子Xa或因子Wa-組織因子-因子Xa結(jié)合形成復(fù)合物來抑制因子Xa或因子Wa-組織因

15、子的活性.另外,研究說明,內(nèi)源凝血和外源凝血途徑可以相互活化.3凝血的共同途徑從因子X被激活至纖維蛋白形成,是內(nèi)源、 外源凝血的共同凝血途徑.主要包括凝血酶生成和纖維蛋白形成兩個(gè)階段.(1)凝血酶的生成：即因子Xa、因子Va在鈣離子和磷脂膜的存在下組成凝血酶原復(fù)合物,即凝血活酶,將凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟?(2)纖維蛋白形成：纖維蛋白原被凝血酶酶解為纖維蛋白單體,并交聯(lián)形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊,這一過程可分為三個(gè)階段,纖維蛋白單體的生成,纖維蛋白單體的聚合,纖維蛋白的交聯(lián).纖維蛋白原含有三對(duì)多肽鏈,其中纖維蛋白肽A(FPA)和B(FPB)帶較多負(fù)電荷,凝血酶將帶負(fù)電荷多的纖維蛋白肽A和肽B水解后除去

16、,轉(zhuǎn)變成纖維蛋白單體.從纖維蛋白分子中釋放生的FPA和FPB可以反映凝血酶的活化程度,因此FPA和FPB的濃度測定也可用于臨床高凝狀態(tài)的預(yù)測.纖維蛋白單體生成后,即以非共價(jià)鍵結(jié)合,形成能溶于尿素或氯醋酸中的纖維蛋白多聚體,又稱為可溶性纖維蛋白.纖維蛋白生成后,可促使凝血酶對(duì)因子XIII的激活,在Xina與鈣離子的參與下,相鄰的纖維蛋白發(fā)生快速共價(jià)交聯(lián),形成不溶的穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊.纖維蛋白與凝血酶有高親和力,因此纖維蛋白生成后即能吸附凝血酶,這樣不僅有助于局部血凝塊的形成,而且可以預(yù)防凝血酶向循環(huán)中擴(kuò)散.在凝血共同途徑中有兩步重要的正反響反響,有效地放大了內(nèi)外源凝血途徑的作用.一是Xa形成后,

17、可反響激活因子V、口、皿、IX;二是凝血酶形成后,可反響激活因子V、口、皿、X、XI、以及凝血酶原.凝血酶還可促使血小板發(fā)生聚集和釋放反響,刺激血小板收縮蛋白引起血塊退縮.但大量凝血的產(chǎn)生卻反過來破壞因子皿、和因子V,這是正常凝血的負(fù)反響調(diào)節(jié),以預(yù)防不適當(dāng)?shù)倪^度凝血.抗凝劑的選擇：1草酸鉀：常用于尿素、肌酐、纖維蛋白原等測定,不能用鉀、鈣等測定,對(duì)LDH丙酮酸激酶、AKP和淀粉酶有抑制作用.2肝素：常用于電解質(zhì)、血?dú)夥治?、血氨等測定.抗凝劑比例為5061u肝素/5ml血.注意鈉鹽可使淀粉酶升高.（ 3）氟化鈉： 常用氟化鈉草酸鈉混合抗凝劑作血糖測定的抗凝劑,氟化鈉可以抑止烯醇化酶,它可預(yù)防血細(xì)

18、胞葡萄糖酵解酶的作用,延長標(biāo)本的保存時(shí)間.（ 4）二乙胺四乙酸鈉鹽EDTA-Na2：生化常用的抗凝劑,但不能用于鈣、鈉、及含氮物質(zhì)的測定,對(duì)淀粉酶、肌酸激酶、AKP、ALP、5-核苷酸酶等可抑制,對(duì)丙酮酸激酶有明顯升高的作用.5枸櫞酸鈉,測定血沉用3.8%枸櫞酸鈉抗凝,抗凝劑與血液比例為1：4,凝血試驗(yàn)需用3.2%枸櫞酸鈉抗凝,比例為1：9.6實(shí)驗(yàn)室使用抗凝劑種類較多,血細(xì)胞分析及紅細(xì)胞比積測定宜用EDTAK2抗凝,保證室溫下6小時(shí)RBC體積不變,抗凝劑比例為1.02.0mg/1ml血.【參考文獻(xiàn)】生理學(xué)姚泰人民衛(wèi)生出版社動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)魏香清華大學(xué)出版社篇三：血凝實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告影響血液凝固的因素

19、一實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^本實(shí)驗(yàn)來了解血液凝固的根本過程及了解影響血液凝固的一些因素.二實(shí)驗(yàn)對(duì)象：家兔三實(shí)驗(yàn)步驟：略四實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1、觀察纖維蛋白原在凝血過程中的作用：實(shí)驗(yàn)中可見到靜置杯內(nèi)血液發(fā)生凝固.攪拌杯內(nèi)血液不凝固,但在毛刷上見到紅色的血凝塊,經(jīng)水沖洗后毛刷上纏繞有白色絲狀物.2、觀察影響血凝的一些理化因素：如下表9-1所示.表9-3影響血凝的一些理化因素實(shí)驗(yàn)條件1.加少許棉花2.用石蠟油均勻涂試管內(nèi)壁3.放置37水浴4.放置冰水水浴5.加肝素10個(gè)單位6.加草酸鉀2mg表9-3文字說明：略3、觀察內(nèi)源性及外源性凝血過程：如下表9-2所示表9-2內(nèi)源性和外源性凝血過程的觀察試劑1、富血小板血漿2、少

20、血小板血漿3、生理鹽水4、羊肺懸液5、0.025mol/lcacl2血液凝固時(shí)間表9-2文字說明：略五討論：血液凝固是指血液由流動(dòng)的液體狀態(tài)變?yōu)椴涣鲃?dòng)的凍膠狀態(tài)血液凝固過程大致分為三個(gè)主要階段：凝血酶原激活物形成；凝血酶原激活成凝血酶,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白.在凝血酶原激活物的形成過程中分有兩種不同的途徑：內(nèi)源性凝血途徑和外源性凝血途徑.內(nèi)源性凝血途徑是由凝血因子?啟動(dòng)的,參與血凝的全部凝血因子都在血漿內(nèi).凝血因子?可被各種帶負(fù)電荷的物質(zhì)等所激活,如血管內(nèi)膜暴露的膠原纖維、玻璃、陶器等.外源性凝血途徑是由存在于血管外組織中的凝血因子iii所啟動(dòng)的,其余參與的凝血因子也在血管內(nèi).凝血因子iii

21、在腦、肺、胎盤組織含量很豐富.不管是內(nèi)源性凝血途徑或外源性凝血途徑,他們最后的是使血纖維蛋白的形成而使血液發(fā)生凝固.在觀察纖維蛋白原在凝血過程中作用的實(shí)驗(yàn)中,由于參與凝血的全部凝血因子都在血漿中,因此其凝血過程是屬于內(nèi)源性凝血.由于玻璃和毛刷外表都帶有負(fù)電荷,后者可激活凝血因子?,啟動(dòng)內(nèi)源性凝血過程.凝血到最后階段時(shí),在凝血酶的作用下,把纖維蛋白原水解成血纖維蛋白；形成的纖維蛋白不斷地交叉成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),把血液中的所有血細(xì)胞網(wǎng)凝血時(shí)間50815215645不凝不凝試管10.2ml0.2ml0.2ml215試管20.2ml0.2ml0.2ml345試管30.2ml0.2ml0.2ml45羅于其中,從

22、而使血液發(fā)生凝固.靜置杯中的血液,由于發(fā)生了上述的血液凝固過程,所形成的纖維蛋白沒有被破壞,所以杯中血液凝固.而攪拌過的杯內(nèi)血液,雖也發(fā)生血液凝固過程,但所形成的纖維蛋白卻不斷纏繞到毛刷上,當(dāng)杯內(nèi)血液的纖維蛋白原全部水解掉后,形成的纖維蛋白也全部纏繞在毛刷上,這時(shí)血纖維只能網(wǎng)羅毛刷附近的一些血細(xì)胞,在毛刷上見有血凝塊.經(jīng)水漂洗后,血細(xì)胞被沖走,毛刷上剩下的是白色細(xì)絲狀的纖維蛋白.攪拌后的杯內(nèi)血液因纖維蛋白原全部被耗盡,無法再形成纖維蛋白,那么攪拌后的杯內(nèi)血液不發(fā)生凝固.由此可見,血液凝固的過程實(shí)際上是纖維蛋白形成的過程,任何一個(gè)步驟被破壞,就不會(huì)引起血液凝固.在血液凝固的兩個(gè)過程中,它們是有所

23、不同的.兩者的主要區(qū)別如下表9-3所示：表9-3內(nèi)源性和外源性凝血的主要區(qū)別區(qū)別點(diǎn)啟動(dòng)的凝血因子X因子的激活參與凝血的凝血因子凝血過程凝血時(shí)間內(nèi)源性凝血?需要?因子復(fù)合物數(shù)量多,且全部在血管中復(fù)雜慢、約數(shù)分鐘外源性凝血而需要市因子復(fù)合物數(shù)量少,而因子在血管外,其余在血管內(nèi)簡單快、約幾十秒鐘由上可知,外源性凝血比內(nèi)源性凝血所需的時(shí)間短.在實(shí)驗(yàn)結(jié)果表9-2中,第1、2試管都是由血小板、生理鹽水和cacl2溶液組成的,參與凝血的凝血因子都在血漿中,故其凝血過程為內(nèi)源性凝血.而第3試管是由血小板、 羊肺懸液和cacl2溶液組成.在第3試管中含有羊肺懸液,其內(nèi)含有豐富的第市凝血因子.顯然第3試管發(fā)生的血

24、液凝固過程主要是外源性凝血途徑.因此第3試管凝血時(shí)間最快.在第1、2試管中雖然所含成分相同,但血小板含量不一樣,第1試管血小板含量高于第2試管.血小板對(duì)血液凝固具有促進(jìn)作用,表現(xiàn)為：血小板的質(zhì)膜上吸附有許多凝血因子,如纖維蛋白原、因子V、因子xi等.其a顆粒中也含有許多凝血因子以及血小板因子.血小板因子為血液凝固過程提供磷脂外表,其激活后能加速血凝；同時(shí)其能對(duì)一些血凝因子具有保護(hù)作用,免受抗凝血酶iii和肝素的破壞.可見,第1試管內(nèi)因含有豐富的血小板,故其凝血時(shí)間比第2試管快.血液凝固受許多因素的影響,如凝血因子的質(zhì)和量、各種理化因素等.棉花給血液凝固提供一個(gè)粗糙外表,容易使血小板發(fā)生粘著、聚

25、集,然后發(fā)生解體,釋放許多凝血因子和血小板因子； 另外,棉花含許多帶負(fù)電荷植物纖維,也能激活凝血因子?,啟動(dòng)內(nèi)源性凝血途徑.因此放有棉花的試管內(nèi)血液凝固加快.試管內(nèi)壁涂上一層石蠟油時(shí),由于石蠟油外表光滑,不易引起血小板粘著,即不易使血小板發(fā)揮促進(jìn)凝血的作用.另外石蠟油為絕緣體,其把試管外表所帶的負(fù)電荷覆蓋,不利于凝血因子?的激活,因此血液凝固變慢.血液凝固實(shí)際上是一系列蛋白酶的水解過程.參與血液凝固的凝血因子大多數(shù)是蛋白質(zhì)酶原,其水解后變成有活性的蛋白質(zhì)酶,如因子ii、因子xi、因子xii等因子vii是有活性的 .這些蛋白質(zhì)酶具有酶隨溫度升高催化活性增強(qiáng)的特性,也具有蛋白質(zhì)受熱變性的特點(diǎn).當(dāng)溫

26、度低時(shí),蛋白質(zhì)酶的活性下降,而當(dāng)溫度升高到4245c以上時(shí),由于蛋白質(zhì)發(fā)生變性,蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)被破壞,從而使蛋白質(zhì)功能受損,蛋白質(zhì)酶的活性下降或失活.因此,把血液放入37水浴時(shí)血液凝固的時(shí)間就比放入冰凍水浴時(shí)所需時(shí)間短.體內(nèi)重要的抗凝物質(zhì)是抗凝血酶而和肝素.抗凝血酶iii與凝血酶等多種凝血因子的活性中央絲氨酸殘基結(jié)合,使這些凝血因子的活性受到抑制或失活,從而到達(dá)抗凝作用.肝素那么主要通過與血漿中的一些抗凝蛋白,如抗凝血酶iii結(jié)合,增強(qiáng)后者的抗凝作用.此外,肝素還能使血管內(nèi)壁細(xì)胞釋放凝血抑制物和纖溶酶原激活物,增強(qiáng)纖溶作用.因此在試管內(nèi)放入肝素時(shí)血液不會(huì)發(fā)生凝固.血凝過程中,ca是重要的凝血

27、因子,其參與了血液凝固的許多環(huán)節(jié),當(dāng)血液中沒有ca2+時(shí)血液就不會(huì)發(fā)生凝固.在試管內(nèi)放有草酸鉀時(shí),由于草酸鉀與血液中的ca2+發(fā)生化學(xué)2+反響,生成草酸鈣沉淀,使血液中沒有ca,故血液不會(huì)發(fā)生凝固.六結(jié)論：通過本實(shí)驗(yàn)可知：血液凝固過程可分為三個(gè)互相聯(lián)系的主要階段,任何一個(gè)階段被破壞,凝血過程就終止,而血液凝固的過程實(shí)際上是纖維蛋白形成的過程.根據(jù)凝血酶原激活物形成的途徑不同,可把血液凝固分為內(nèi)源性和外源性兩條凝血途徑,內(nèi)源性凝血途徑所消耗的時(shí)間比外源性凝血途徑長.血小板在血液凝固過程中具有發(fā)揮促進(jìn)作用.血液凝固除受凝血因子的質(zhì)和量影響外,還受接觸面、 溫度等理化因素的影響.血液接觸面粗糙、適當(dāng)

28、加溫能加速血凝,而血中加肝素等抗凝劑、 以及除去血中游離鈣離子等可延緩血液凝固.2+篇二：血凝血凝抑制試驗(yàn)總結(jié)1、如果是馬上要做實(shí)驗(yàn),先把實(shí)驗(yàn)所需的抗原、標(biāo)準(zhǔn)陽性血清、陰性血清、待檢血清取出回溫,如果待檢血清已冷藏,可取出放入37恒溫培養(yǎng)箱中回溫,待血清析出后取出時(shí)間大約看具體情況而定.2、試驗(yàn)準(zhǔn)備階段：a準(zhǔn)備好清洗干凈的血清離心管要有刻度裝血液.b采血： 注射器內(nèi)先參加一半體積的阿氏液 預(yù)防血液凝集,當(dāng)所需紅細(xì)胞較多時(shí),加入注射器量程一半的阿氏液,當(dāng)所需紅細(xì)胞較少時(shí),加入1.5ml2ml的阿氏液.c1%紅細(xì)胞懸液的制備采集至少3只spf無特定病原體 公雞或無禽流感和新城疫等抗體的健康公雞的血

29、液與等體積的阿氏液混合,用ph7.2、0.01mol/lpbs液洗滌3次,每次去掉上層的清液后加入少量pbs用注射器反復(fù)抽吸使之混勻,再加至所要刻度,放入離心.每次均以1000r/min離心10min,洗滌后用pbs配成體積分?jǐn)?shù)為1%的紅細(xì)胞懸液,4保存?zhèn)溆脤?shí)際pbs液用1%的生理鹽水代替.d所需1%紅細(xì)胞懸液的體積4hau+1ml本例中為30ml+1ml=31ml,否那么配置的1%紅細(xì)胞懸液不夠用理論計(jì)算為30.1ml,取31ml以防萬一.e阿氏液alsevers制備葡萄糖2.05g檸檬酸鈉0.80g檸檬酸0.055g氯化鈉0.42g加蒸餾水至100ml,散熱溶解后調(diào)ph值至6.1,69kp

30、a高壓滅菌15min,4保存?zhèn)溆?3、血凝試驗(yàn)?zāi)康模?檢測試驗(yàn)所用的標(biāo)準(zhǔn)抗原的血凝滴度,如檢測結(jié)果血凝滴度為210=1024,表示標(biāo)準(zhǔn)抗原稀釋1024倍仍能與紅細(xì)胞發(fā)生凝集反響.注意：一瓶新的未使用的抗原禽流感或新城疫為粉狀,需要參加用注射器2ml的稀釋液0.9%生理鹽水,一般瓶身上有標(biāo)注參加的體積2mla反響板要同時(shí)做三排每排12孔,原因：根據(jù)三排的多數(shù)結(jié)果來確定血凝滴度.例如：10999三個(gè)結(jié)果為：2、2、2,那么本次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)抗原血凝滴度為2.b參加1%的紅細(xì)胞懸液后放到微量震蕩器上震蕩混合1min,室溫20c25c下靜置40min,放4c靜置60min.當(dāng)pbs對(duì)照孔紅細(xì)胞呈明顯紐扣狀沉

31、到孔底時(shí)判定結(jié)果.4、 4hau抗原例如：標(biāo)準(zhǔn)抗原血凝滴度為210=1024,那么4hau抗原=1：210/4=1：256,稀釋時(shí),將1ml的抗原參加到255ml的pbs中即為4hau.5、計(jì)算配置4hau所需稀釋液體積v和標(biāo)準(zhǔn)抗原體積x假設(shè)：待檢血清100份每排12個(gè)孔實(shí)際只需要11孔,但多計(jì)算一些,以防不夠每孔參加25ul4hau抗原體積=25ulX12X100=30000ul=30ml設(shè)標(biāo)準(zhǔn)抗原體積為x那么有：1：256=x：30000標(biāo)準(zhǔn)抗原體積x=3000/256=117.1875ul=0.117ml稀釋液體積v=30-0.117=29.883ml但實(shí)際量取時(shí)稀釋液體積直接用30ml計(jì)算,由于0.117ml數(shù)量很小,可以忽略不計(jì).6、血凝抑制試驗(yàn)a紅細(xì)胞在使用過程中應(yīng)經(jīng)常搖勻.b參加1%的紅細(xì)胞懸液后放到微量震蕩器上震蕩混合1min,室溫20c25c下靜置40min,假設(shè)環(huán)境溫度過高,放4c靜置60min.當(dāng)pbs對(duì)照孔紅細(xì)胞呈明顯紐扣狀沉到孔底時(shí)判定結(jié)果.7、結(jié)果判定血凝試驗(yàn)：將反響板傾斜,看是否呈淚滴狀,不呈淚滴狀的說明發(fā)生血凝血凝抑制：將反響板傾斜,看是否呈淚滴狀,呈淚滴狀的說明未發(fā)生血凝或血凝不完全即血凝抑制8、 篇三： 血凝試驗(yàn)檢查的影響因素分析血凝試驗(yàn)檢查的影響因素分析【關(guān)鍵詞】血凝試驗(yàn)血凝試驗(yàn)是臨床工作中常用的檢測工程,血凝試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性是