中藥化學實驗指導(dǎo)—實驗八甾體皂苷元的提取分離與檢識

1、實驗八 甾體皂苷元的提取分離與檢識（一）目的要求學習從藥材中提取、精制和檢識甾體皂苷元，通過實驗要求：1掌握用酸水解，有機溶劑提取和精制皂苷元的方法。2熟悉皂苷及皂苷元的性質(zhì)和檢識方法。（二）主要化學成分的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)甾體皂苷主要存在于百合科、薯蕷科、龍舌蘭科等植物中。某些甾體皂苷元如薯蕷皂苷元、替告皂苷元及?？稍碥赵仁侵扑幑I(yè)中合成甾體激素類藥物及甾體避孕藥的重要原料。穿山龍為薯蕷科植物穿龍薯蕷Dioscorea nipponica Mak.的干燥根莖。具有舒筋活血、消食利水、祛痰截瘧的功效。主治風寒濕痹、慢性氣管炎、消化不良、勞損扭傷、瘧疾、癰腫。常被作為提取薯蕷皂苷元的原料，穿山龍總皂苷

2、水解可得1.52.6薯蕷皂苷元。1薯蕷皂苷(dioscin) 分子式C45H72O16，分子量869.08，針狀結(jié)晶，mp.275277（分解），可溶于甲醇、乙醇、醋酸，微溶于丙酮、戊醇，難溶于石油醚、苯，不溶于水。 薯蕷皂苷 2薯蕷皂苷元(diosgenin) 又稱薯蕷皂素,分子式C27H42O3，分子量414.61。為白色結(jié)晶性粉末（乙醇），mp.206208，可溶于常用的有機溶劑及醋酸中，不溶于水。（三）實驗原理本實驗是根據(jù)藥材中的薯蕷皂苷，經(jīng)酸加熱水解可產(chǎn)生薯蕷皂苷元和糖。因甾體皂苷元不溶于水，可溶于有機溶劑的性質(zhì)，用石油醚連續(xù)回流提取總皂苷元，再用活性炭吸附脫色精制，得到精制薯蕷皂苷

3、元。（四）實驗內(nèi)容1薯蕷皂苷元的提取、精制略2薯蕷皂苷與皂苷元的檢識（1）泡沫試驗：取穿山龍的水浸液2ml，置于小試管中，用力振搖1分鐘，應(yīng)產(chǎn)生多量泡沫，放置10分鐘，泡沫量應(yīng)無顯著變化。（2）溶血試驗：取清潔試管二支，一支加入穿山龍的水浸液0.5ml，另一支加入蒸餾水0.5ml作對照，然后各加入0.8氯化鈉水溶液0.5ml，搖勻，再向每支試管中加入紅細胞懸浮液1ml，充分搖勻，靜置，觀察溶血現(xiàn)象。如試管中溶液為透明的鮮紅色，管底無紅色沉淀物為全部溶血；如試管中溶液透明但無色，管底沉著大量紅細胞，振搖立即發(fā)生混濁為不溶血。（3）醋酐-濃硫酸反應(yīng)：取薯蕷皂苷元結(jié)晶少許，置白瓷板上，加醋酐數(shù)滴溶解

4、后，加濃硫酸1滴，觀察顏色變化。（4）三氯醋酸反應(yīng)：取薯蕷皂苷元結(jié)晶少許，置于干燥試管中，加等量固體三氯醋酸，于6070恒溫水浴中加熱數(shù)分鐘后，觀察顏色變化。（5）磷鉬酸試驗：取薯蕷皂苷元結(jié)晶少許，溶于乙醇中，用毛細管點于濾紙片或硅膠薄層板上，滴加磷鉬酸試劑于斑點上，110加熱，觀察顏色變化，并與空白試劑作對照。（6）薄層色譜檢識薄層板：硅膠G-CMC-Na板試 樣：薯蕷皂苷元精制品乙醇溶液對照品：薯蕷皂苷元對照品乙醇溶液展開劑：氯仿-丙酮（937）顯 色：噴5磷鉬酸乙醇溶液，110加熱10分鐘顯色。（五）實驗說明及注意事項1穿山龍經(jīng)酸水解后應(yīng)充分洗滌呈中性，以免烘干時被碳化。2在干燥水解后的原料時，應(yīng)注意經(jīng)常翻動，以縮短干燥時間。3石油醚極易揮發(fā)和燃燒，必須用水浴加熱且水浴溫度不宜過高，以能使石油醚微沸即可，并應(yīng)加大冷凝水流速，以便冷凝完全。4本實驗也可用石蒜科龍舌蘭屬植物劍麻Agaue sisalana Perrine為原料提取甾體皂苷元，此植物南方各省有種植，將劍麻葉片刮去纖維，殘渣壓榨取汁，將汁液自然發(fā)酵2周（酶水解得其次生苷），布袋濾過收集沉淀，曬干，以干渣為原料，用硫酸水解，再用石油醚提