PTEN表達(dá)與宮頸癌預(yù)后相關(guān)性分析

1、PTEN表達(dá)與宮頸癌預(yù)后相關(guān)性分析作者：李洪凌朱向輝姜新曲雅勤【關(guān)鍵詞】 宮頸癌；PTENS因表達(dá)；實(shí)驗(yàn)研究磷酸酶及張力蛋白同源物(PTEN)基因是一種重要的抑癌基因, 在50%80%的實(shí)體瘤中發(fā)生突變1，并且與腫瘤的進(jìn)程和預(yù)后相 關(guān)。在最近一系列研究中，PTEN基因低表達(dá)在()37%,而突變低 于17%24。血管生成在子宮頸癌的進(jìn)展中具有重要作用，于宮頸 癌預(yù)后和PTEN基因表達(dá)的關(guān)系目前還沒有完全明確。為了探討 PTEN表達(dá)和子宮頸癌預(yù)后之間的關(guān)系，本研究觀察了 200()2()05年 宮頸癌患者PTEN表達(dá)情況與療效的相關(guān)性。1材料與方法1.1臨床資料60例患者,年齡3472歲,平均(4

2、9±14.9) 歲，按F1G()分期為IIIIV期宮頸癌，均為初治，遠(yuǎn)期生活質(zhì)量評估 量表(KPS)評分&gt；6()分，治療前肝腎功能、血常規(guī)、心電圖正常。 III期48例，IV期12例，采用同時放化治療。1.2方法全部采用體外適形放療并體內(nèi)腔內(nèi)放療，同步采用 柴杉醇 順鉗聯(lián)合(TP)化療方案。PTEN 一抗購自西美杰生物公司。 采用免疫組化（ABC法）檢測。取手術(shù)標(biāo)本腫塊實(shí)質(zhì)部分約1 .（）cmX 1.（） cm X 0.2 cm大小，置入10%中性福爾馬林液，固定24 h后脫水， 石蠟包埋。選用抗PTEN單克隆抗體（北京西美杰生物公司），用AEC 酶標(biāo)染色。石蠟切片二甲

3、苯脫蠟，梯度酒精水化；用小牛血清（1 : 100） 滴片，室溫下孵育20 min;滴加PTEN McAB（l : 50）, 4°C冰箱過夜； 滴加生物素化二抗，室溫下45 min;滴加AEC免疫復(fù)合物，室溫下 45 mino上述各步均以TBS緩沖液沖洗3次，23 min/次；二氨基聯(lián) 苯胺（DAB） H2O2顯色1（） min,水洗，蘇木精復(fù)染，鹽酸酒精脫 水，透明，中性樹膠封片。通常以細(xì)胞核呈界限清楚的棕褐色反應(yīng)作 為陽性，增殖細(xì)胞核抗原（PTEN）染色結(jié)果判定，選擇切片中最有 代表性的視野，在放大200倍顯微鏡下，計數(shù)1（）（）（）個癌細(xì)胞中PTEN 的陽性細(xì)胞核數(shù)，并計算出增殖

4、指數(shù)（Pl） （PI=PTEN陽性細(xì)胞數(shù)/I 000）o將Pl>20%視為髙表達(dá)。1.3統(tǒng)計學(xué)分析 數(shù)據(jù)以x±s表示，采用SPSS11.5軟件。2結(jié)果在PTEN高表達(dá)組1、3、5年生存率分別為83.3%、70.8%.62.5%； PTEN低表達(dá)組1、3、5年生存率分別為75%、41.4%、33.3%； 1、3年生存率兩組沒有明顯差異（P>（）.（）5）, 5年生存率有明顯差異 （PV0.05）。見圖 1、表 1。圖1病理標(biāo)本免疫組化照片（X400）（略）表1 TEN不同表達(dá)組生存率比較（略）3討論P(yáng)TEN基因是迄今為止發(fā)現(xiàn)的第一個發(fā)現(xiàn)具有磷酸酶活性的 抑癌基因，阻滯細(xì)胞周

5、期，抑制細(xì)胞的生長發(fā)育和誘導(dǎo)凋亡。其作用 機(jī)制之一是阻斷磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）信號通路，抑制磷酸化蛋 白激酶B （Akt）活性，而Akt在腫瘤生長和增殖中起著重要作用5, 6，而在宮頸癌的表達(dá)目前還沒有明確的文獻(xiàn)闡述。本實(shí)驗(yàn)利用免疫 組化技術(shù)檢測PTEN蛋白的表達(dá)水平，將患者分為髙表達(dá)和低表達(dá)兩 組，觀察不同組別宮頸癌患者長期生存率的差別。在PTEN髙表達(dá)患 者中，1年生存率83.3%；在PTEN低表達(dá)患者中，1年生存率75.0%, 兩者沒有統(tǒng)計學(xué)差異。在PTEN高表達(dá)患者,3年生存率70.8%; PTEN 低表達(dá)患者3年生存率41.4%,兩者無統(tǒng)計學(xué)差異。在PTEN高表達(dá) 患者中,5年

6、生存率62.5%；在PTEN低表達(dá)患者中,5年生存率33.3%, 兩者存在統(tǒng)計學(xué)差異。在PTEN低表達(dá)患者，可能存在較高的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn) 移和局部復(fù)發(fā)，預(yù)后不良。研究結(jié)果表明PTEN表達(dá)和患者的預(yù)后明 顯相關(guān)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 Ali IUSchriml LM , Dean M.Mutational spectra ofPTEN/MNIAC1 gene: a tumor suppressor with lipid phosphatase activity JJ Natl Cancer Inst, 1999； 91 (22) :192232.2 Holway AH) Rieger Christ KM，Mi

7、ner WR,et al.Somatic mutation of PTBN in vulvar cancer JClin Cancer Res, 2000;6:3228 35.3 Kurosc K, Zhou XP, Araki T,et al.Biallelic inactivatingmutations and an occult gcrmlinc mutation of PTEN in primary cervical carcinomasJ. Genes Chromosomes Cancer, 2000;29 (2) :16672.4 Su TH, Chang JG, Perng Ll

8、,ct al.Mutation analysis of the putative tumor suppressor gene PTE N/MMAC1 in cerncal cancerJ.Gynecol Oncol, 2000;76:1939.5 Kennedy SG, Wagner AJConzen SD,ct al.Thc PI 3kinase/ Akt signaling pathway delivers an antiapoptotic signalJGenesDev, 1997；11 (6) :70113.6 Kennedy SG, Kandcl ES ? Cross TK&t al.Akt/Prot