免疫組化的在病理中的臨床意義

1、1、惡性腫瘤免疫組化耐藥預后標記, 全套4項：P-gP, GST兀,TOP/ , Ki-67.2、乳癌免疫組化耐藥預后標記,全套 7項：P-gp, GS丘,TOPS , Ki-67 , ER PR C-erbB-2.3、意義：標記物-作用-陽性部位-臨床意義多藥耐藥基因蛋白P-Gp-藥泵作用-胞膜/胞漿-陽性率越高,對以下藥 物耐藥性越強：阿霉素、柔紅霉素、表阿霉素、米托蕙醍、長春花堿、長春新 堿、紫彬醇、泰素帝.谷光甘肽S轉移酶GST兀-解毒作用-胞漿-陽性率越高,對以下藥物耐 藥性越強：阿霉素、順鉗、氮芥、環(huán)磷酰胺、瘤可寧.拓撲異構酶H TOPCT -靶點作用-胞核-陽性率越高,對以下藥物

2、越有效：蕙環(huán)類抗生素和鬼臼毒素類,如VP16替尼泊昔、玫瑰樹堿、新霉素、柔紅霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26陽性率高者對VP16尤其有效.雌激素受體EB -性激素作用-胞核-陽性率越高,腫瘤對內分泌治療越有 效,預后越好.孕激素受體P-性激素作用-胞核-陽性率越高,腫瘤對內分泌治療越有 效,預后越好.C-erbB-2 -癌基因產物-胞漿-陽性率越高,腫瘤惡性程度越高.ER PE陽性而C-erbB-2也陽性者,用三苯氧胺治療效果不好.Ki-67 -細胞增殖標志-胞核-陽性率越高,腫瘤增殖越快,惡性程度越高.Ki-67為細胞增值的一種標記,在細胞周期 G< S、G2 M期均有表達,G0期 缺

3、如,其和許多腫瘤分化程度、浸潤、轉移、預后密切相關.PCNA曾埴細胞 核抗原.CEA多數(shù)腺癌表達CEARb retinoblastoma 視網膜母細胞瘤基因是腫瘤抑制基因,調節(jié)細胞周期.P53在免疫組化中均為突變型,陽性率越高,預后約差.野生型半衰期很短Nm23是轉移抑制基因,其陽性表達和腫瘤轉移呈負相關.目前已被廣泛應用 于乳腺癌、非小細胞肺癌、胃癌、大腸癌、肝癌、喉癌等多種惡性腫瘤的檢測. 幾乎所有的研究都說明,nm23蛋白高表達患者淋巴結轉移率相對較低,存活 期相對較長.E-Ca, E鈣粘附蛋白,介導細胞間粘連作用的跨膜糖蛋白,其功能喪失引起細 胞之間連接的破壞,主要用于腫瘤侵襲和轉移方

4、面的研究.PS2雌激素調節(jié)蛋白,其表達和 ER表達有關,可作為內分泌治療和預后判 斷的指標之一.CK1&低分子量角蛋白,主要標記各種單層上皮包括腺上皮,而復層鱗狀上皮 常陰性,主要用于腺癌診斷.CK19分布于單層上皮和間皮,常用于腺癌診斷,肝細胞不表達,而膽管為陽 性反響Hep par 1,肝細胞抗原,正常肝細胞和高分化肝細胞癌陽性,低分化肝細胞癌 多弱陽性或陰性.CK四用于胃腸道腺癌、卵巢黏液性腫瘤、皮膚Merkel細胞癌診斷.鱗癌、乳腺癌、肺癌、子宮內膜和卵巢非黏液性腫瘤常陰性.CK7卵巢、肺和乳腺上皮常陽性,結腸、前列腺、胃腸道上皮陰性.Villin絨毛蛋白,正常組織中,vill

5、in通常只表達于有刷狀緣的細胞上,如胃腸道上皮細胞、胰腺和膽管上皮細胞以及腎實質的上皮細胞中(特別是近曲 小管).Villin在胃腸道癌、胰腺癌、膽囊癌和膽管癌組織中有很高的表達率,具有明顯腺樣結構的腫瘤上沒有villin 表達,那么這個腫瘤為胃腸道、胰腺、膽囊或膽管來源的可能性極低.乳腺癌也經常成為女性患者未知原發(fā)部位轉移癌要鑒別排除的一種疾病.由于在轉移癌組織上觀察到明顯的 villin免疫組化陽性染色,那么這個腫瘤就極不可能為乳腺來源.其他villin免疫組化染色通常為陰性表達的腫瘤還有：如卵巢漿液性癌、尿道移行細胞癌和前列腺癌.間皮瘤也經常為villin 陰性表達,因此在一些情況下Vi

6、llin 還可以作為鑒別間皮瘤和腺癌使用抗體的一種. 但是也有一些非胃腸道來源的腫瘤可表達villin ,如子宮內膜樣腺癌、卵巢粘液性癌、腎細胞癌和小局部肺癌.也有一些專家報道Villin在局部宮頸內膜腺癌病例中表達.肝癌的診斷：Villin免疫組化染色可以顯示出毛細膽管結構,因此它也可能在表達局部肝癌的管狀結構上很有用.多克隆CEA是用于此目的的第一種試劑,而且CD10(CALLA)在表達肝癌的該結構上也非常有用. 多克隆CEA villin 和CD10 (CALLA在肝癌病例上的表達,相互之間并沒有任何的沖突,因此如 果疑心肝癌的可能性,建議將這三種抗體共同使用以協(xié)助疑難病例的診斷.Vil

7、lin在神經內分泌腫瘤上的應用：Villin在神經內分泌腫瘤的研究上也很有幫助.眾所周知,類癌和胰腺的胰島細胞腫瘤具有相相似的形態(tài)學特征,僅 在形態(tài)學上區(qū)分這兩種腫瘤幾乎是不可能的.Villin 在這種情況下特別有用, 由于據(jù)文獻報道在85啷胃腸道類癌病例中有 villin 的表達,但在胰島細胞 腫瘤上未見陽性表達報道.Villin 在類癌上的表達通常為胞膜陽性.另外,有一些證據(jù)說明villin在胃和下消化道的小細胞癌上的表達率比在其他部位的小細胞癌上要高.如：肺、食道、膀胱或前列腺等.據(jù)文獻報道,大約有40知勺肺類癌病例villin 陽性,在其他一些神經內分泌腫瘤上,如甲狀腺髓樣 癌和少數(shù)的

8、美克爾細胞瘤上也有 villin 的表達.MRP侈藥耐藥相關蛋白1,影響化療敏感性,和預后相關.MDR多藥耐藥基因臣胸昔合成酶,是5-FU重要作用靶點,如果其高表達,陽性反映 +以上,提 示腫瘤細胞對5FU耐藥.Syn突觸素神經組織標志S-100神經組織標志,存在于神經組織,垂體、頸動脈體,腎上腺髓質、唾液 腺、少數(shù)間葉組織,常用于神經鞘瘤、惡黑、脂肪肉瘤、軟骨腫瘤診斷.NSE主要用于神經內分泌腫瘤診斷.Chr嗜銘素,腎上腺髓質含量很高,鑒別腎上腺髓質和皮質,用于神經內分泌 腫瘤診斷.CKH高分子角蛋白,主要標記鱗狀細胞腫瘤.CKL低分之角蛋白,主要標記單層上皮、腺上皮.EMA上皮膜抗原.糖蛋

9、白,廣泛分布各種上皮及其腫瘤.Vim波形蛋白,間葉組織標志.P504甲酰基輔酶A消旋酶檢測診斷前列腺癌的敏感性為97%,特異性為100%.AMACR勺優(yōu)點在于它是癌癥特異性,只存在于癌癥組織. Rubin稱,AMACRT 可用作其他癌癥的診斷標志物.對各種癌癥細胞進行檢查后發(fā)現(xiàn),結腸直腸癌、 卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、淋巴瘤和黑素瘤都過度表達 AMACR以結腸 直腸癌和前列腺癌表達最高.CD117胃腸間質瘤CD10作為共同急性淋巴母細胞型白血病抗原,主要表達于未成熟淋巴細胞, 在Burkitt淋巴癌,慢性髓性白血病等造血系統(tǒng)疾病的診斷中具有應用價值. 近幾年來發(fā)現(xiàn)該抗原在造血系統(tǒng)外的某些腫

10、瘤中有表達,如子宮內膜間質肉 瘤、惡性黑色素瘤等.抗體在對腎細胞癌進行診斷和鑒別時有一定的參考價值. CD15是一種細胞粘附分亍,因其對霍奇金淋巴瘤 (HD)中的R-S細胞具有良 好的標記作用,被認為是HD的重要標志物.除HD的鑒別診斷外,對胃癌、結 直腸癌、甲狀腺 癌、乳腺癌等腫瘤CD15的表 達研究發(fā)現(xiàn),CD15S達隨癌細 胞分化程度下降、淋巴結轉移和臨床分期增高而明顯增高.認為 CD15的表達 是判斷腫瘤的開展、預測淋巴結轉移和預后的良好 指標.免疫電鏡觀察顯示, CD15抗原主要分布于大腸癌細胞漿的界膜、內質網、高爾基體及近細胞核膜 處,CD15可能是通過對所結合的鋪基構型改變影響和參

11、與腫瘤的形成和轉移過程.SMA平滑肌肌動蛋白,標記平滑肌.CD56為神經細胞黏附分子.主要分布于大多數(shù)神經外胚層來源細胞,常用于 星型細胞瘤、神經母細胞瘤、神經內分泌腫瘤診斷,也是NK細胞瘤的重要標志,也標記小細胞肺癌.Des結蛋白,廣泛分布于平滑肌、心肌、骨骼肌細胞和肌上皮細胞,高分化高 表達、低分化低表達.MSA肌特異性肌動蛋白,廣泛分布于幾乎所有肌型細胞中.CD68存在于骨髓和各神經組織的巨噬細胞 用于粒細胞白血病、各種單核細胞 來源腫瘤、包括惡性纖維組織細胞瘤診斷(首選).CD34表達于早期淋巴造血干細胞、祖細胞、內皮細胞、胚胎纖維母細胞和某 些神經組織細胞,多用于標記血管內皮細胞,血

12、管源性腫瘤的診斷,GIST80-90%.CD31也標記血管內皮.CD44是一種分布廣泛的跨膜糖蛋白分子,分CD44s和CD44v兩大類.CD44s主要作為透明質酸受體,結合透明質酸后影響腫瘤的生長和轉移. 而CD44v那么 主要表達于轉移的腫瘤細胞.李道明等用免疫組化LSAE&檢測了 42例食管鱗 癌CD44v此5的表達,結果發(fā)現(xiàn),淋巴結轉移組的陽性表達率為 76. 19% (16 /21),而非轉移組的陽性率為 42. 86%(9/12),兩組間有顯著性差異.癌 巢周邊的癌細胞、肌間浸潤的癌細胞、有核分裂的癌細胞和癌栓中的癌細胞及浸潤脈管壁的癌細胞均呈強陽性表達.張成武等檢測了20例

13、正常胃粘膜上皮、43例異型增生和85例胃癌組織CD44v6的表達,結果正常胃粘膜無 表達, 而異型增生和胃癌 組織陽性率分別為30. 2%和74. 1%,其表達強度與胃癌 浸潤深度、淋巴結轉移、腫瘤生長方式、靜脈和淋巴管侵襲及遠處轉移密切相關.以上結果均說明,CD44vW高表達構成了腫瘤細胞的侵襲性與易轉移性. NESTIN神經干細胞中極為豐富.Ost成骨素,為骨化細胞分泌.AAT抗胰蛋白酶 纖維組織細胞來源腫瘤 ACT抗糜蛋白酶.GFAP膠質纖維酸性蛋白神經組織標志,多用于星形膠質瘤診斷. Tg甲狀腺球蛋白,甲狀腺癌tg陽性.CT降鈣素 甲狀腺髓樣癌陽性.PH甲狀旁腺素 甲狀旁腺腫瘤陽性.N

14、-myc表達增強的小細胞肺癌和神經母細胞瘤對化療缺乏反響并進展快速； Bcl-2 :耐藥機理為抗凋亡作用,高表達者對多數(shù)抗癌藥物 /放射治療耐受. 腫瘤相關抗原72 (TGA72)多種惡性上皮性腫瘤表達TGA72尤其是乳腺癌、 卵巢癌和結腸癌.正常上皮細胞、肉瘤、淋巴造血系統(tǒng)腫瘤通常TGA72K性.TGA72K體用于乳腺癌的研究較多,其高表達通常與腫瘤體積大、淋巴結轉移 瘤細胞分化差及高增殖活性有關.腫瘤相關抗原(GA733編碼上皮糖蛋白40,是一種上皮細胞黏附分子(EP-CAM)對上皮細胞的生長與分化起著重要作用.多種腫瘤可有GA73臻達, 尤其是乳腺癌、結腸癌及肺癌等.Kubuschok等

15、采用GA733對非小細胞肺癌手 術切除淋巴結中隱匿性微轉移灶進行檢測,發(fā)現(xiàn)隱匿灶的檢出是判斷總生存率的獨立預后因子.結腸癌GA73軟達形式與腫瘤預后有關,細胞膜及細胞漿的 表達預后較基膜側的表達為差.TTF-1甲狀腺轉錄因子-1 , TTF-1表達于甲狀腺腺上皮和肺的上皮細胞中. 在肺腫瘤研究中發(fā)現(xiàn),大多數(shù)肺的小細胞癌、原發(fā)性和轉移性肺腺癌、少局部 大細胞未分化肺癌、大多數(shù)非典型神經內分泌腫瘤免疫組化結果顯示 TTF-1陽 性,而肺鱗癌及絕大多數(shù)典型類癌 TTF-1陰性.在甲狀腺乳頭狀腺癌中TTF-1 亦陽性,而TTF在其它組織表達陰性.據(jù)此認為TTF-1可用來鑒別肺腺癌與鱗 癌,并有助于與肺

16、轉移性腺癌的鑒別.TTF-1在甲狀腺及其腫瘤中的表達.TTF-1主要表達在甲狀腺濾泡細胞中和甲狀旁腺的主細胞中,TTF-1為甲狀腺分化和甲狀腺球蛋白分泌調節(jié)的根底物質,可促進甲狀腺過氧化物酶、碘/鈉的轉運,？TTF-1與血清TSH的活性有關,活性的TSH-R可增強TTF-1的表達. TTF-1在良惡性甲狀腺組織中表達不同,正常甲狀腺和良性腺瘤表達多,甲狀 腺乳頭狀癌與濾泡癌中表達少,未分化癌中不表達,TTF-1在惡性甲狀腺病變中的表達強度隨年齡增加而增強,而且病變存瘤期長,復發(fā)機率高.TTF-1在肺癌中的表達75知勺肺非小細胞癌NSCLCs陽性表達,腺癌ACs明顯高于鱗癌SCC, 90% 以上

17、的原發(fā)性小細胞肺癌SCLC表達陽性,TTF-1在非小細胞肺癌NSCLCs 陽性表達強度與病人的預后成呈負相關,可作為一項獨立的預后指標,肺的典型性類癌TCS均為陰性,說明小細胞肺癌和非小細胞肺癌可能有一個 不同于TCS的共同起源的理論.臨床常見的免疫組化指標在乳腺癌診治中的應用近年來,由于免疫組化實驗方法在各醫(yī)院病理科的迅速普及, 許多患者的術后 標本可以進行免疫組化檢查.這對于患者的診斷、分型以及術后的綜合治療有 著重要的意義.本文就臨床上常見的一些指標及其意義進行綜訴.一、激素受體ER和孕激素受體PR人類最先發(fā)現(xiàn)乳腺癌細胞和激素的關系始于1896年.Bentson觀察到乳腺癌患者切除卵巢后

18、可使乳腺癌細胞的生長受到抑制.1967年Jensen發(fā)現(xiàn)人類乳腺癌中含有ER從此開始了真正意義上的乳腺癌內分泌治療的研究.女性正 常乳腺的細胞上存在ER和PR雌激素和孕激素通過ER和PRM細胞功能進行 調節(jié).當細胞惡變時,腫瘤細胞可以局部地或全部保存正常的受體系統(tǒng),其功能與正常細胞相似.這種腫瘤細胞的生長仍然依賴原來的激素環(huán)境調節(jié),稱為激素依賴性腫瘤,臨床上稱為 ER陽性乳腺癌.有些細胞在癌變過程中,其 受體系統(tǒng)保存很少或完全喪失,不能再作為激素的靶細胞,其生長不再受激素 的限制與調節(jié),臨床上表現(xiàn)為 ER陰性乳腺癌.Jensen發(fā)現(xiàn)ER后,很快又發(fā) 現(xiàn)PR并證實PR的合成與雌激素和ER復合物在

19、核內發(fā)生的變化過程有關, PR的形成直接受ER的限制和調節(jié),故PR陽性的乳腺癌,ER大多為陽性.臨床上可以通過對雌激素受體ER和孕激素受體PR的檢測,得出腫瘤細 胞內激素受體含量的水平,從而提示乳腺癌的預后信息和指導內分泌治療.據(jù)報道乳腺癌ER PR檢測的陽性率分別為40吟60% 30茲右.許多文獻均已 證實,ER PR變化與乳腺癌病人預后密切相關,亦與其他公認的預后因素, 如腫瘤分級、倍體性及分期有關.高分化腫瘤或臨床分期較低的腫瘤ER PR更可能陽性,受體陽性腫瘤細胞的明顯減少與細胞增殖分級增高、c-erbB-2癌基因擴增增加及EGFFgt達增加有關.免疫組化抗受體檢測可預測乳腺癌對 激素

20、治療的反響性.無 ER或PR表達的腫瘤對激素治療通常反響性差,而 ER 及PR陽性腫瘤那么對激素治療反響性高.1974年美國Bethesde國際會議,綜合世界各國400多例各種方式的內分泌治 療報道,說明事先未經激素受體測定的乳腺癌患者,應用內分泌治療有效率只有30%而經ER測定陽性者有效率達55%6%,受體陰性者有效率5% 8%. TAM治療無效的原因與ER的異常結構有關.其后多年病例不斷積累,報道的 有效率根本在這一水平.1998年美國臨床腫瘤年會ASCO國際權威協(xié)作臨 床研究報道37 000例乳腺癌患者的結果說明：乳腺癌術后輔助三苯氧胺TAM治療可以明顯降低復發(fā)率、死亡率； TAM對絕經

21、后患者有效,絕經 前患者也有一定療效；ER陽性患者用TA瞬果最好,ER不明的患者也有效； 輔助化療后加用TAM能進一步提升療效；延長服藥時間能提升療效； 服用TA相顯降低對測乳腺癌發(fā)生率；長期服用TA帳增加患子宮內膜癌的 風險.二、PS2基因PS2蛋白是Masialowski于1982年從激素依賴性乳腺癌 MCF-7細胞株中提取 出來的雌激素誘導蛋白之一,在乳腺癌中表達陽性率約為43%58 %.PS2基 因受雌激素調節(jié)和限制,在雌激素誘發(fā)和限制下才能轉錄,產生 PS2蛋白.換 言之PS2依賴于ER的存在.可以認為,PS2基因的存在與ER PB存在著密切 正相關關系.Gion研究446例原發(fā)性乳

22、腺癌,觀察PS2與ER PR關系.結果 68. 5% PS2陽性病例,其ER PB均陽性；而PS2陽性其ER PR均陰性者不 足3%.Gillesby 等報道ER( + )者中有59%, PR( + )者中有60% PS2呈 陽性.大量研究說明,PS2蛋白可以顯示功制性雌激素調節(jié)系統(tǒng),能更好的指 導臨床抗雌激素治療.目前認為 PS2對判斷預后及指導內分泌治療均有價值, 陽性者預后好,復發(fā)率及死亡率均較低,且內分泌治療有效.作為內分泌治療 效果預測的指標,PS2可以補充ER PR的缺乏,甚至有學者認為 PS2更優(yōu)于 ER PR如果將三者結合使用,可到達相當滿意的效果.當三項均陰性時,內 分泌治療

23、很少有效,預后甚差.三、c-erbB-2 癌基因c-erbB-2癌基因是乳腺組織細胞中較常見而易激活的原癌基因.在多種腺癌 細胞中此癌基因均有高水平表達,報道最多的是乳腺癌.c-erbB-2癌基因的異常表達擴增見于 25-30%的原發(fā)性乳腺癌病例,并且僅限于癌細胞,而不出現(xiàn)于正常乳腺上皮.c-erbB-2擴增與雌、孕激素受體表達呈負相關,與腫瘤 級別較高有關.c-erbB-2基因表達陽性者可使ER陽性病人對內分泌治療的反 應率降至20%;ERm性病人內分泌治療幾乎無效.c-erbB-2癌基因的擴增或過 度表達還與乳腺癌的復發(fā)、轉移及生存期明顯相關.過度表達者其術后早期復 發(fā)率和遠處轉移率增加,

24、生存期縮短,淋巴結陽性的乳腺癌c-erbB-2的過表達 是預后不良的重要因素.另有研究說明,乳腺癌c-erbB-2表達陽性病例其瘤腫往往大于2cm因此推測其蛋白產物p185過量表達可能與腫瘤的生長速度 有關.因而c-erbB-2的強陽性表達可作為識別早期乳腺癌的有效指標.近年來有人提出"四聯(lián)檢測,包括ER PR PS2以及c-erbB-2.ER、PR PS2陽性表達的乳腺癌激素治療的敏感性高,無 c-erbB-2基因過度擴增的乳腺癌 同樣治療敏感性增加.相反,前三者陰性而后者陽性的乳腺癌,通常其復發(fā)率、 死亡率均高,預后差.四、P53抑癌基因p53是一種抑癌基因,是人類研究最多的基因

25、,分野生型(Wtp53)和突變型(Mtp53).Wtp53在正常組織內含量低,半衰期短,僅 3060分鐘,而免疫組化的敏感性無法檢測如此微量的抗原成分.當p53突變后,能和進入組織內的各種病毒蛋白、Wtp53蛋白、正常等位基因蛋白和熱休克蛋白等結合形成穩(wěn) 定的復合物,在組織內的半衰期長,含量逐漸積累,為免疫組化的檢測提供了 條件.其陽性表達率約2 5 % 3 5 %. Wtp53在正常組織中能參與細胞從 G0 期進入G1期的負調節(jié).從而限制細胞的增生,同時誘導細胞的程序性死亡.當p53突變后那么喪失了啟動細胞凋亡的水平, 結果使腫瘤細胞數(shù)目增加,從而 使細胞呈現(xiàn)無休止生長而凋亡受到抑制. 在乳

26、腺癌增生過程中有 Mtp53基因表 達,并隨著非典型增生程度的增加而增加.p53表達水平與細胞的高度增生及 腫瘤細胞的分化程度有關,分化越低惡性程度越高的腫瘤,p53基因水平越高. p53基因蛋白陽性和ER陰性的乳腺癌患者預后不良,生存期短.五、nm23nm23又稱為抗轉移癌基因,是一種抑癌基因,產物是由152個氨基酸組成的蛋白質,與二磷酸核甘激酶NDPK的氨基酸序列具有高度同源性. 人類nm23 基因有2個亞型：nm23H何nm23H2兩者有88%同源性,nm23H1與乳腺癌的 預后關系更密切.nm23蛋白具有NDP附能,通過影響微管聚合而調節(jié)細胞運 動,并通過影響G蛋白的信號傳遞而發(fā)揮負向

27、調節(jié)作用,從而抑制腫瘤轉移. 但其作用并不依耐于 NDPK的活性.有實驗結果說明,與轉移潛能有關的是 nm23/NDPK勺表達水平而不是NDPK勺活性.nm23是獨立預后指標,其表達與 年齡、腫瘤大小、ER PR和C-erbB-2無關,與淋巴結轉移狀況、組織學分型、 分級及臨床分期均有顯著關系,nm23高表達者的預后明顯好于低表達者.nm23 表達降低的乳腺癌分化較低,ER表達水平低,并常常出現(xiàn)淋巴結轉移,預后 不良.在乳腺癌進展過程中,nm23的表 達水平降低.通過檢測 nm23可以把 腋淋巴結陽性病人中可能發(fā)生遠處轉移和腋淋巴結陰性病人中有潛在高轉移 傾向的病例篩選出來,進行相應的預防性治

28、療,從而提升治療效果.六、多耐藥MDR基因腫瘤細胞耐藥是化療失敗的主要原因,引起耐藥的重要原因之一是多藥耐藥性,即腫瘤細胞接觸一種抗癌藥物產生耐藥性后, 對多種結構和作用機制不同 的其它抗癌藥也產生耐藥性.多藥耐藥MDR基因的產物P糖蛋白P-gp 是一種跨膜蛋白,作為“藥泵功能引起癌細胞產生耐藥,它具有膜轉運蛋白的許多結構特征,一旦與抗癌藥物結合,在 ATP供能下,將藥物由胞內泵出胞 外,因而胞內藥物濃度不斷下降,以致無法發(fā)揮細胞毒作用,出現(xiàn)耐藥性.陽 性表達的細胞對化療劑尤其是蕙環(huán)類和長春花堿類及阿霉素等化療劑,具有固有和獲得性耐藥.P-gp表達可見于高度固有耐藥的腫瘤,在這些腫瘤,P-gp

29、的高水平表達亦見于產生這些腫瘤的正常組織.對化療敏感的腫瘤通常P-gp表達 率低,那些對系統(tǒng)化療最敏感的實體瘤精原細胞瘤和胚胎性癌很少 出現(xiàn)P-gp表達,曾接受過化療患者發(fā)生的腫瘤常有 P-gp表達增強.檢測P-gp 表達有助于確定可能對常規(guī)化療耐藥的腫瘤, 從而提供適合于這些病人合理的 替代治療方法,對腫瘤病人選擇化療方案和預后的判斷具有重要的臨床意義.七、血管內皮細胞生長因子VEGF血管形成在腫瘤生長、浸潤、轉移中起關鍵作用,它受到一系列促進和抑制因 子的調節(jié),其中最重要的促進因子之一是腫瘤細胞在生長過程中分泌的VEGF它的編碼基因位于6P21.3,由8個外顯子構成,由于 mRNAF同的剪

30、切形式, 形成5種不同的VEGF分別含有121、145、165、189、206個氨基酸,其中以 VEGF16JM重要,在各種細胞中表達占優(yōu)勢,VEGF121和VEGF189&大局部表達 VEGF勺組織和細胞中均能檢測到,VEGF14岳日VEGF20徘常少見,其中VEGF206 只在人胎肝cDNA庫中可以檢測到.VEGF通過二硫鍵結合形成二聚體后才有 活性,它的受體為酪氨酸蛋白激酶型膜受體,具有高度特異性.當VEGFW受體結合后,可以刺激血管內皮細胞增殖,促進血管形成,并增加血管通透性,這樣腫瘤細胞一方面可以獲得充分的營養(yǎng)而迅速增殖,另一方面也容易通過血 管內皮細胞進入血流從而發(fā)生遠處轉

31、移. VEG呼要由腫瘤細胞產生,小局部來白細胞間質,它是獨立預后指標,與年齡、絕經狀態(tài)無關,與ER PR呈負相關,高表達者易轉移復發(fā),預后不良,且內分泌治療和化療的效果差,建議對VEGF 高表達者聯(lián)合應用抗血管生成治療,如利用vegfi抗阻斷與受體結合,重組VEG四VEGF爭受體,將VEGFW小分子毒性物質結合,利用反義核酸技術 抑制VEGFg達等等.七、腫瘤細胞增生標志物目前被廣泛采用的兩種增殖相關標志物是 Ki-67及PCNA增埴細胞核抗原.PCNA 增殖細胞核抗原：是一種僅在增殖細胞中合成或表達的核內多肽, 其表達與細胞周期有關.主要表達于增殖細胞的S期、G1期和G2初期.Ki-67 與

32、PCN住樣,為細胞增殖的一種標記,在細胞凋亡中 S、G2、M期均有表達, G0期缺如.Ki-67增殖指數(shù)上下與許多腫瘤的分化程度、浸潤、轉移以及預后 密切相關.Ki-67與PCNA疫反響性與細胞增生的形態(tài)學特征關系密切,特 別是與有絲分裂數(shù)及腫瘤分級相關. 在乳腺腫瘤中,其表達還與其他分化及預 后指標相關,如與雌孕激素受體表達呈負相關,而與P53基因異常呈正相關.在乳腺癌、前列腺癌、結腸 癌、肺癌、肝癌、胃癌和一些淋巴瘤及肉瘤,采 用Ki-67與PCN施疫組化分析,均顯示有增殖證據(jù),提示這些腫瘤病人更容 易進展.高Ki-67及PCN福記指數(shù)的病人無病生存率及總生存率明顯下降.2、乳癌免疫組化耐

33、藥預后標記,全套 7項：P-gp, GS丘,TOP勉,Ki-67 , ER PR C-erbB-2.3、意義：標記物-作用-陽性部位-臨床意義多藥耐藥基因蛋白P-Gp-藥泵作用-胞膜/胞漿-陽性率越高,對以下藥 物耐藥性越強：阿霉素、柔紅霉素、表阿霉素、米托蕙醍、長春花堿、長春新 堿、紫彬醇、泰素帝.谷光甘肽S轉移酶GST兀-解毒作用-胞漿-陽性率越高,對以下藥物耐 藥性越強：阿霉素、順鉗、氮芥、環(huán)磷酰胺、瘤可寧.拓撲異構酶n TOPCT -靶點作用-胞核-陽性率越高,對以下藥物越有效： 蕙環(huán)類抗生素和鬼臼毒素類,如 VP16替尼泊昔、玫瑰樹堿、新霉素、柔紅 霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26陽

34、性率高者對VP16尤其有效.雌激素受體E0 -性激素作用-胞核-陽性率越高,腫瘤對內分泌治療越有 效,預后越好.孕激素受體PR-性激素作用-胞核-陽性率越高,腫瘤對內分泌治療越有 效,預后越好.C-erbB-2-癌基因產物-胞漿-陽性率越高,腫瘤惡性程度越高.ER PE陽性而C-erbB-2也陽性者,用三苯氧胺治療效果不好.Ki-67-細胞增殖標志-胞核-陽性率越高,腫瘤增殖越快,惡性程度越高.Ki-67為細胞增值的一種標記,在細胞周期 G< S、G2 M期均有表達,G0期 缺如,其和許多腫瘤分化程度、浸潤、轉移、預后密切相關.PCNA曾埴細胞核抗原.CEA多數(shù)腺癌表達CEARb ret

35、inoblastoma 視網膜母細胞瘤基因是腫瘤抑制基因,調節(jié)細胞周期.P53在免疫組化中均為突變型,陽性率越高,預后約差.野生型半衰期很短Nm23是轉移抑制基因,其陽性表達和腫瘤轉移呈負相關.目前已被廣泛應用 于乳腺癌、非小細胞肺癌、胃癌、大腸癌、肝癌、喉癌等多種惡性腫瘤的檢測. 幾乎所有的研究都說明,nm23蛋白高表達患者淋巴結轉移率相對較低,存活 期相對較長.E-Ca, E鈣粘附蛋白,介導細胞間粘連作用的跨膜糖蛋白,其功能喪失引起細 胞之間連接的破壞,主要用于腫瘤侵襲和轉移方面的研究.PS2雌激素調節(jié)蛋白,其表達和 ER表達有關,可作為內分泌治療和預后判 斷的指標之一.CK1&低分子量角蛋白,主要標記各種單層上皮包括腺上皮,而復層鱗狀上皮 常陰性,主要用于腺癌診斷.CK19分布于單層上皮和間皮,常用于腺癌診斷,肝細胞不表達,而膽管為陽 性反響Hep pa