食品分析維生素的測(cè)定學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1食品食品(shpn)分析維生素的測(cè)定分析維生素的測(cè)定第一頁，共36頁。1）維生素對(duì)人體的作用：維生素是維持人體正常生命活動(dòng)所必需的一類天然有機(jī)化合物。其種類很多，目前已確認(rèn)的有30余種，其中被認(rèn)為(rnwi)對(duì)維持人體健康和促進(jìn)發(fā)育至關(guān)重要的有20余種。這些維生素結(jié)構(gòu)復(fù)雜，理化性質(zhì)及生理功能各異，有的屬于醇類，有的屬于胺類，有的屬于酯類，還有的屬于酚或醌類化臺(tái)物。作為代謝的輔酶。第2頁/共36頁第二頁，共36頁。維生素的共性維生素的共性(gngxng)(gngxng)： 第3頁/共36頁第三頁，共36頁。3 3）維生素分析方法：）維生素分析方法：水溶性維生素：B、C脂溶性維生素：A、D

2、、E、K 2 2）維生素的分類）維生素的分類(fn (fn li)li)： 儀器(yq)方法：微生物法： 生物鑒定法：第4頁/共36頁第四頁，共36頁。脂溶性維生素的測(cè)定脂溶性維生素的測(cè)定(cdng)脂溶性維生素具有以下脂溶性維生素具有以下(yxi)理化性理化性質(zhì)：質(zhì)：VA、VD、VE、與類脂物一起存于食物中，攝食時(shí)可吸收，可在體內(nèi)積貯。第5頁/共36頁第五頁，共36頁。 耐熱性 氧化性VA 好，能經(jīng)受煮沸 易被氧化 （光、熱 促進(jìn)其氧化）V D 好，能經(jīng)受煮沸 不易(b y)被氧化V E 好，能經(jīng)受煮沸 在空氣中能慢慢被氧化 （光、熱、堿促進(jìn)其 氧化）耐熱性、耐氧化(ynghu)性：第6頁/

3、共36頁第六頁，共36頁。根據(jù)上述性質(zhì)(xngzh)測(cè)定脂溶性維生素時(shí)，通常：第7頁/共36頁第七頁，共36頁。維生素A的結(jié)構(gòu)(jigu)：CH3CH3CH3CH2OHCH3CH3CH3CH3CH3CH2OHCH3CH3脫氫(tu qn)視黃醇視黃醇高效液相色譜法測(cè)定食物高效液相色譜法測(cè)定食物(shw)(shw)中中VAVA、VEVE（GB/T 5009.822003GB/T 5009.822003中第一法）中第一法） 高效液相色譜法測(cè)定維生素高效液相色譜法測(cè)定維生素A A是近幾年發(fā)展起來的方法，此法是近幾年發(fā)展起來的方法，此法能快速分離和測(cè)定視黃醇和它的同分異構(gòu)體、酯及其衍生物。此能快速分離

4、和測(cè)定視黃醇和它的同分異構(gòu)體、酯及其衍生物。此法是同時(shí)測(cè)定維生素法是同時(shí)測(cè)定維生素A A和維生素和維生素E E的方法。的方法。第8頁/共36頁第八頁，共36頁?；驹恚夯驹恚?在氯仿溶液在氯仿溶液(rngy)(rngy)中中VAVA能與三氯化銻生成藍(lán)色可溶性絡(luò)合物，在能與三氯化銻生成藍(lán)色可溶性絡(luò)合物，在620nm620nm有最有最大光吸收，其光吸收強(qiáng)度與大光吸收，其光吸收強(qiáng)度與VAVA濃度成正比。濃度成正比。適用范圍與特點(diǎn)：適用范圍與特點(diǎn)： 適用于高適用于高VAVA含量的食品；對(duì)低含量的食品；對(duì)低VAVA含量的食品因其它脂溶性成分的存在而受干擾含量的食品因其它脂溶性成分的存在而受干擾；本

5、法生成的藍(lán)色絡(luò)合物不穩(wěn)定，比色必須在；本法生成的藍(lán)色絡(luò)合物不穩(wěn)定，比色必須在6 6秒內(nèi)完成。秒內(nèi)完成。試劑：試劑： 無水乙醚：不含過氧化氫，檢測(cè)方法：無水乙醚：不含過氧化氫，檢測(cè)方法：5ml5ml乙醚加乙醚加1ml10%1ml10%碘化鉀振碘化鉀振1 1分鐘，或再分鐘，或再加加4 4滴滴0.5%0.5%淀粉，水呈藍(lán)色；去除方法：重蒸餾時(shí)，瓶?jī)?nèi)加入少許鐵絲。淀粉，水呈藍(lán)色；去除方法：重蒸餾時(shí)，瓶?jī)?nèi)加入少許鐵絲。第9頁/共36頁第九頁，共36頁。測(cè)定方法：測(cè)定方法： 樣品處理：脫脂，用皂化法；皂化樣品處理：脫脂，用皂化法；皂化-提取提取-洗滌洗滌-濃縮；濃縮； 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制： 樣品測(cè)

6、定：反應(yīng)在比色皿中進(jìn)行樣品測(cè)定：反應(yīng)在比色皿中進(jìn)行(jnxng)(jnxng)。注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)： 乙醇為溶劑的萃取體系，易發(fā)生乳化現(xiàn)象；乙醇為溶劑的萃取體系，易發(fā)生乳化現(xiàn)象； 所用氯仿中不應(yīng)有水分，因三氯化銻遇水會(huì)出現(xiàn)沉淀，干所用氯仿中不應(yīng)有水分，因三氯化銻遇水會(huì)出現(xiàn)沉淀，干 擾測(cè)定；故在每擾測(cè)定；故在每mlml氯仿中滴加氯仿中滴加1 1滴乙酸酐，以保證脫水；滴乙酸酐，以保證脫水； VA VA見光易分解，故整個(gè)操作要在暗處進(jìn)行見光易分解，故整個(gè)操作要在暗處進(jìn)行(jnxng)(jnxng)； 每國(guó)際單每國(guó)際單VAVA相當(dāng)于相當(dāng)于0.3ugVA0.3ugVA。第10頁/共36頁第十頁，共36頁

7、。注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)： 樣品中的樣品中的-胡蘿卜素會(huì)干擾測(cè)定胡蘿卜素會(huì)干擾測(cè)定(cdng)(cdng)，可將，可將干樣品用正已烷溶解，以氧化鋁為吸附劑，丙酮干樣品用正已烷溶解，以氧化鋁為吸附劑，丙酮- -已烷已烷混合液為洗脫劑進(jìn)行層析分離；混合液為洗脫劑進(jìn)行層析分離； 三氯化銻腐蝕性極強(qiáng)；三氯化銻腐蝕性極強(qiáng)； VA VA含量高的樣品可直接加無水硫酸鈉研磨后，加乙含量高的樣品可直接加無水硫酸鈉研磨后，加乙醚提取，加三氯甲烷溶解后即為待測(cè)的處理樣品；醚提取，加三氯甲烷溶解后即為待測(cè)的處理樣品； 顯色劑除用三氯化銻外，還可用三氟乙酸、三氯乙顯色劑除用三氯化銻外，還可用三氟乙酸、三氯乙酸。酸。第11頁

8、/共36頁第十一頁，共36頁?；驹恚夯驹恚?VA VA的異丙醇溶液的異丙醇溶液(rngy)(rngy)在在325nm325nm有最大吸收峰，其吸光度與有最大吸收峰，其吸光度與VAVA含量成正比；含量成正比；適用范圍與特點(diǎn)：適用范圍與特點(diǎn)： 靈敏度高，檢測(cè)下限為靈敏度高，檢測(cè)下限為5ppm5ppm，但，但325nm325nm吸收干擾物質(zhì)多；吸收干擾物質(zhì)多；因此只適合于透明魚油、因此只適合于透明魚油、VAVA濃縮物等純度較高的樣品；濃縮物等純度較高的樣品； 測(cè)定方法：測(cè)定方法： 樣品樣品-皂化皂化-洗脫洗脫-脫水脫水-蒸發(fā)蒸發(fā)-異丙醇溶解異丙醇溶解-325nm-325nm測(cè)定光吸收；測(cè)定光

9、吸收；第12頁/共36頁第十二頁，共36頁。 VA的前體物質(zhì)：類胡蘿卜素； 、胡蘿卜素，其中以-胡蘿卜素的效價(jià)最高，每毫克-胡蘿卜素相當(dāng)于560國(guó)際單位VA。 胡蘿卜素只存在于植物性食物(shw)中；胡蘿卜素對(duì)熱、酸、堿比較穩(wěn)定，但對(duì)紫外線和氧卻不穩(wěn)定，可將其破壞。 胡蘿卜素在450nm有最大吸收；但由于其常與葉綠素、葉黃素等色素共存，故要測(cè)定必須要分離出胡蘿卜素?；驹恚?以丙醇、石油醚提取出胡蘿卜素，以石油醚為展開劑進(jìn)行紙層析，由于胡蘿卜素的極性最小，移動(dòng)速度最快，從而與其它色素分開，取下此區(qū)帶，洗脫后于450nm比色測(cè)定。 通常用層析(cn x)法分離測(cè)定胡蘿卜素：第13頁/共36頁第

10、十三頁，共36頁。胡蘿卜素的結(jié)構(gòu)(jigu)如下：胡蘿卜素原只存在于植物性食品中，但以含有(hn yu)胡蘿卜為食物的家禽、獸類、水產(chǎn)動(dòng)物及其加工產(chǎn)品，以及為著色而添加胡蘿卜素的食品，當(dāng)然也含有(hn yu)胡蘿卜素。第14頁/共36頁第十四頁，共36頁。樣品的提取與洗滌：注意植物油和高脂肪樣品先要皂化；樣品的濃縮與定容：在有氮?dú)猸h(huán)境中濃縮，但不要濃縮得太干；紙層析： 點(diǎn)樣：在基線（距低端4CM處）上取四點(diǎn)，分別在二點(diǎn)間 帶狀點(diǎn)樣； 展開：以飽和過的石油醚為展開劑，進(jìn)行上行展開； 洗脫：剪下胡蘿卜素(h lu bo s)色帶，置于5ml具塞試管中，用力振搖， 使色素完全溶解；比色測(cè)定：以石油醚

11、為空白，于450nm處比色測(cè)定；標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：測(cè)定方法：第15頁/共36頁第十五頁，共36頁。 此法為國(guó)標(biāo)方法(fngf)，方法(fngf)簡(jiǎn)單、最小檢出限為0.11ug； 濃縮時(shí)要防止蒸干，同時(shí)要在充氮條件下進(jìn)行； 層析分離也可用柱層析，效果好，但費(fèi)時(shí)； 一般用專用的中速濾紙； （GB/T 5009.832003 ）第一方法(fngf)是HPLC；第二方法(fngf)為紙層析法。說明(shumng)與討論：第16頁/共36頁第十六頁，共36頁。概述：概述： 成人缺乏成人缺乏VDVD會(huì)患軟骨病，兒童缺乏會(huì)患軟骨病，兒童缺乏VDVD會(huì)患佝僂??；會(huì)患佝僂病；VDVD有多有多種，其中最重要的是種，

12、其中最重要的是VD2VD2和和VD3VD3及其維生素及其維生素D D原，原，VD3VD3只存在于某只存在于某些動(dòng)物性食物些動(dòng)物性食物(shw)(shw)中。維生素中。維生素D2D2無天然存在，維生素?zé)o天然存在，維生素D2D2只只存在于某些動(dòng)物性食物存在于某些動(dòng)物性食物(shw)(shw)中。但它們都可由維生素中。但它們都可由維生素D D原原( (麥角固醇和麥角固醇和7 7一脫氫膽固醇一脫氫膽固醇) )經(jīng)紫外線照射形成。經(jīng)紫外線照射形成。 1IU=0.025ugVD3 1IU=0.025ugVD3 VD VD測(cè)定方法有：比色法、紫外分光光度法、氣相色譜法、測(cè)定方法有：比色法、紫外分光光度法、氣相

13、色譜法、高效液相色譜法、薄層層析；比色法和高效液相色譜法、薄層層析；比色法和HPLCHPLC法為法為AOACAOAC推薦的推薦的VDVD測(cè)定方法。測(cè)定方法。第17頁/共36頁第十七頁，共36頁?；驹恚夯驹恚?在三氯甲烷溶液中，在三氯甲烷溶液中，VDVD與三氯化銻結(jié)合生成一種橙黃色化合物，在與三氯化銻結(jié)合生成一種橙黃色化合物，在500nm500nm處的呈色強(qiáng)度與處的呈色強(qiáng)度與VDVD的含量成正比；的含量成正比； 樣品測(cè)定：樣品測(cè)定：樣品處理：當(dāng)有樣品處理：當(dāng)有VAVA與與VDVD共存時(shí)，要進(jìn)行分離，分離方法為：共存時(shí)，要進(jìn)行分離，分離方法為：制備分離柱：分四層，依次為無水制備分離柱：分四

14、層，依次為無水Na2SO4Na2SO4、聚乙二醇層、中性氧化鋁層、聚乙二醇層、中性氧化鋁層和無水和無水Na2SO4Na2SO4；純化：以石油醚為淋洗劑，棄去初濾液，收集一定量；然后用水三次純化：以石油醚為淋洗劑，棄去初濾液，收集一定量；然后用水三次(sn c)(sn c)洗以除去殘余的聚乙二醇，避免與三氯化銻反應(yīng)生成混濁物影洗以除去殘余的聚乙二醇，避免與三氯化銻反應(yīng)生成混濁物影響比色；然后再用無水硫酸鈉脫水，之后用三氯甲烷溶解；響比色；然后再用無水硫酸鈉脫水，之后用三氯甲烷溶解；測(cè)定：繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：樣品測(cè)定：測(cè)定：繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：樣品測(cè)定：第18頁/共36頁第十八頁，共36頁。 VD常與VA、V

15、E、膽固醇等在一起，且量要大大超過VD，嚴(yán)重干擾其測(cè)定，因此要經(jīng)柱層析去除這些干擾成分； 操作時(shí)加入(jir)乙酰氯可消除溫度的影響； 此法不能區(qū)分VD2和VD3，測(cè)定的是二者的總和；說明(shumng)與討論：第19頁/共36頁第十九頁，共36頁。概述： VE有八種，又稱生育酚，屬于酚類化合物；其中以-生育酚的生理活性最高，分布也最廣；動(dòng)植物中均有分布，其中又以植物油料中為最多。 主要測(cè)定方法有：比色法、熒光法、氣相色譜法、高效液相色譜法；比色法操作簡(jiǎn)單，靈敏(ln mn)度較高，但由于VE無特異性反應(yīng)，要采取一些方法消除干擾；熒光法特異性強(qiáng)、干擾少、靈敏(ln mn)、快速、簡(jiǎn)單；目前測(cè)定

16、VE最好的方法為HPLC法。第20頁/共36頁第二十頁，共36頁?；驹恚夯驹恚?VE VE能將能將Fe3+Fe3+還原成還原成Fe2+Fe2+，而，而Fe2+Fe2+能與聯(lián)氮苯發(fā)生顏色能與聯(lián)氮苯發(fā)生顏色(yns)(yns)反應(yīng)，可反應(yīng)，可于于520nm520nm比色測(cè)定；比色測(cè)定；測(cè)定操作：測(cè)定操作： 樣品處理：皂化：于樣品處理：皂化：于KOHKOH的甲醇溶液中皂化，并在充氮?dú)饬髦械募状既芤褐性砘?，并在充氮?dú)饬髦?2-7472-74皂化，然后加水乙醚萃取，再將萃取液經(jīng)無水硫酸鈉脫水；在二氧化碳?xì)饬髟砘缓蠹铀颐演腿?，再將萃取液?jīng)無水硫酸鈉脫水；在二氧化碳?xì)饬髦袦p壓蒸干；中減壓蒸干；

17、 純化：用苯作洗脫液進(jìn)行柱層析，洗至洗出液約純化：用苯作洗脫液進(jìn)行柱層析，洗至洗出液約25ml25ml；若柱上出現(xiàn)微；若柱上出現(xiàn)微藍(lán)色帶則為類胡蘿卜素；出現(xiàn)暗藍(lán)色帶則為藍(lán)色帶則為類胡蘿卜素；出現(xiàn)暗藍(lán)色帶則為VAVA； 樣品測(cè)定：樣品測(cè)定：FeCl3FeCl3乙醇溶液、聯(lián)氮苯乙醇溶液；放置乙醇溶液、聯(lián)氮苯乙醇溶液；放置1010分鐘；分鐘；520nm520nm； 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：第21頁/共36頁第二十一頁，共36頁。 VE在堿性條件下易被氧化，因此需在N2氣流中皂化，并可加入 焦性沒食子酸(mi sh z sun)作為抗氧化劑； 處理前應(yīng)將其它可使三價(jià)鐵還原為二價(jià)鐵的還原性物質(zhì)去除；

18、 發(fā)色劑除用聯(lián)氮苯外，也可用4，7-二苯基-1，10-菲繞啉； VE的各種異構(gòu)體與試劑的反應(yīng)速度、呈色強(qiáng)度各不相同； VE見光易氧化，因此操作要避光。說明說明(shumng)與討論：與討論：第22頁/共36頁第二十二頁，共36頁。 水溶性維生素B1、B2和C，廣泛存在于動(dòng)植物組織中，飲食來源充足。但是由于它們本身的水溶性質(zhì)，除滿足人體生理、生化作用外，任何多余量都會(huì)從小便中排出。為避免耗盡，需要(xyo)經(jīng)常地由飲食來提供。 水溶性維生素都易溶于水，而不溶于苯、乙醚、氯仿等大多數(shù)有機(jī)溶劑。在酸性介質(zhì)中很穩(wěn)定，既使加熱也不破壞；但在堿性介質(zhì)中不穩(wěn)定，易于分解，特別在堿性條件下加熱，可破壞大部分或

19、全部。它們易受空氣、光、熱、酶、金屬離子等的影響； 維生素B2對(duì)光，特別是紫外線敏感，易被光線破壞； 維生素C對(duì)氧、銅離子敏感，易被氧化。水水 溶溶 性性 維維 生生 素素 的的 測(cè)測(cè) 定定第23頁/共36頁第二十三頁，共36頁。根據(jù)上述性質(zhì)，測(cè)定水溶性維生素時(shí)，一般都在酸性溶液中進(jìn)行前處理。 維生素B1、B2 鹽酸水解 酶解 提取 純化 維生素C通常采用草酸、草酸醋酸、偏磷酸醋酸溶液直接提取。在一定濃度(nngd)的酸性介質(zhì)中，可以消除某些還原性雜質(zhì)對(duì)維生素C的破壞作用。草酸價(jià)廉，使用方便，對(duì)維生素C有很好的保護(hù)作用。 淀粉酶淀粉酶木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶活性人造浮石活性人造浮石硅鎂吸附劑硅鎂吸

20、附劑第24頁/共36頁第二十四頁，共36頁。概述(i sh)： VB1又名硫胺素，可與鹽酸生成鹽酸鹽；通常以游離態(tài)，自然界常與焦磷酸結(jié)合成焦磷酸硫胺素（TPP）。在酵母、米糠、麥胚、花生、黃豆以及綠色蔬菜和牛乳、蛋黃中含量較為豐富。VB1在機(jī)體代謝中具有重要作用，缺乏會(huì)引起腳氣病、神經(jīng)炎等。人體維生素B1的需要量為每天12mg。主要測(cè)定方法有：分光光度法、熒光法、高效液相色譜法；GB/T 5009.842003中唯一的方法是熒光計(jì)法。第25頁/共36頁第二十五頁，共36頁?；驹恚夯驹恚?VB1 VB1在堿性高鐵氰化鉀溶液中，能被氧化在堿性高鐵氰化鉀溶液中，能被氧化(ynghu)(yng

21、hu)成一種藍(lán)成一種藍(lán)色的熒光化合物色的熒光化合物硫色素，在沒有其它熒光物質(zhì)存在時(shí)，溶液硫色素，在沒有其它熒光物質(zhì)存在時(shí)，溶液的熒光強(qiáng)度與硫色素的濃度成正比。所含雜質(zhì)需要用柱色譜法處的熒光強(qiáng)度與硫色素的濃度成正比。所含雜質(zhì)需要用柱色譜法處理，測(cè)定提純?nèi)芤褐欣?，測(cè)定提純?nèi)芤褐蠽B1VB1的含量。的含量。操作步驟：操作步驟：（1 1）樣品處理：）樣品處理：（2 2）提純：）提純：（3 3）氧化）氧化(ynghu)(ynghu)：（4 4）標(biāo)準(zhǔn)與標(biāo)準(zhǔn)空白制備：）標(biāo)準(zhǔn)與標(biāo)準(zhǔn)空白制備：（5 5）測(cè)定：）測(cè)定：第26頁/共36頁第二十六頁，共36頁。（1）凡士林有熒光，因此活塞上不能涂，可用甘油-淀粉代替

22、；（2）一般樣品中VB1有游離也有結(jié)合型，故需要用酸和酶水解；（3）谷物類不需要酶分解，樣品經(jīng)粉碎后用酸性氯化鉀直接提 取，氧化測(cè)定；（4）一般每克人造沸石能吸附(xf)30ugVB1，硫胺素量過大，回收 率下降；（5）鐵氰化鉀的用量要適當(dāng)，過多會(huì)破壞硫胺素，過少則硫胺 素氧化不完全；（6）樣液和標(biāo)準(zhǔn)液通過交換管的流速要一致，流速過快會(huì)因交 換不徹底或吸附(xf)不完全而影響測(cè)定結(jié)果。 說說 明：明：第27頁/共36頁第二十七頁，共36頁。維生素維生素B2B2即核黃素。在食品中以游離形式或磷酸酯等結(jié)合形式即核黃素。在食品中以游離形式或磷酸酯等結(jié)合形式存在。膳食中的主要來源是各種存在。膳食中的主

23、要來源是各種( zhn)( zhn)動(dòng)物性食品，其中動(dòng)物性食品，其中以肝、腎、心、蛋、奶含量最多，其次是植物性食品的豆類和以肝、腎、心、蛋、奶含量最多，其次是植物性食品的豆類和新鮮綠葉蔬菜。新鮮綠葉蔬菜。分析方法：分析方法： GB/T 5009.852003 GB/T 5009.852003中第一法為熒光法，中第一法為熒光法， 第二法為微生物法。第二法為微生物法。維維 生生 素素 B2 的的 測(cè)測(cè) 定定第28頁/共36頁第二十八頁，共36頁。概述：概述： VC VC又名抗壞血酸，廣泛分布于新鮮果蔬及綠色植物中，新鮮的水果、蔬菜，又名抗壞血酸，廣泛分布于新鮮果蔬及綠色植物中，新鮮的水果、蔬菜，特

24、別是棗、辣椒、苦瓜、柿子特別是棗、辣椒、苦瓜、柿子(sh zi)(sh zi)葉、獼猴桃、柑桔等食品中含量尤豐富。葉、獼猴桃、柑桔等食品中含量尤豐富。VCVC在生物機(jī)體中起重要功能。在生物機(jī)體中起重要功能。 固體固體VCVC比較穩(wěn)定，但其水溶液極易氧化，氧化速度隨溫度升高比較穩(wěn)定，但其水溶液極易氧化，氧化速度隨溫度升高pHpH增加而加增加而加快維生素快維生素C C具有較強(qiáng)的還原性，對(duì)光敏感，氧化后的產(chǎn)物稱為脫氫抗壞血酸，具有較強(qiáng)的還原性，對(duì)光敏感，氧化后的產(chǎn)物稱為脫氫抗壞血酸，仍然具有生理活性。進(jìn)一步水解則生成仍然具有生理活性。進(jìn)一步水解則生成2 2，3 -3 -二酮古樂糖酸，失去生理作用。二

25、酮古樂糖酸，失去生理作用。VCVC在食品工業(yè)中常作抗氧化劑。在食品工業(yè)中常作抗氧化劑。 VC VC測(cè)定方法主要有測(cè)定方法主要有2,6-2,6-二氯靛酚滴定法、二氯靛酚滴定法、2,4-2,4-二硝基苯肼比色法、熒光法、二硝基苯肼比色法、熒光法、極譜法、極譜法、HPLCHPLC法等。法等。第29頁/共36頁第二十九頁，共36頁。原理：原理： 中性和弱酸性條件下，中性和弱酸性條件下，VcVc能將能將2,6-2,6-二氯酚靛酚還原成二氯酚靛酚還原成無色的還原型無色的還原型2,6-2,6-二氯酚靛酚，同時(shí)二氯酚靛酚，同時(shí)VcVc被氧化成脫氫被氧化成脫氫VcVc，因此可用因此可用2,6-2,6-二氯酚靛酚測(cè)樣品中的二氯酚靛酚測(cè)樣品中的V cV c含量。含量。VcVc全部被氧全部被氧化后，稍多加一點(diǎn)染料，使溶液呈淡粉紅色，即為終點(diǎn)化后，稍多加一點(diǎn)染料，使溶液呈淡粉紅色，即為終點(diǎn)(zhngdin)(zhngdin)。如無其它干擾，則消耗的染料與樣品中。如無其它干擾，則消耗的染料與樣品中VcVc含含量成正比。量成正比。 第30頁/共36頁第三十頁，共36頁。Vc的提?。?g樣品（加5