食品中抗生素殘留危害及檢測方法

1、食品中抗生素殘留危害及檢測方法隨著人們生活質(zhì)量的提高，食品安全問題越來越為廣大消費(fèi)者所關(guān)注，特別是農(nóng)藥和抗生素等藥物殘留問題更是廣大消費(fèi)者所關(guān)注的焦點(diǎn)問題。在食品安全這個(gè)全球關(guān)注的熱點(diǎn)問題上，如何快速、準(zhǔn)確地檢測食品安全的問題已成為重中之重。要檢測抗生素在食品中的殘留，必須選擇特異性強(qiáng)、靈敏度高、高效快速的檢測方法。因此，研究各種抗生素類殘留檢測的方法，提高其靈敏度與選擇性具有十分重要的意義。 抗生素具有哪些危害 人們吃了有抗生素殘留的肉、蛋、奶等食物后，會(huì)造成抗生素在人體內(nèi)蓄積，使人產(chǎn)生對(duì)抗生素的抗性，引起各種組織器官病變，甚至癌變。 對(duì)人類健康的危害 

2、;對(duì)人體腸道菌群的影響人體腸道菌群是一個(gè)平衡的生態(tài)系統(tǒng)，對(duì)保持人體健康起著非常重要的作用。如果人們長期攝入含有抗生素的食品后，會(huì)使敏感菌群被殺滅或抑制，而耐藥菌群卻大量繁殖，從而打破原來的平衡狀態(tài)造成菌群失調(diào)，這就可能會(huì)導(dǎo)致長期腹瀉或營養(yǎng)不良，嚴(yán)重時(shí)還可造成耐藥菌感染，給臨床治療帶來困難。 引起過敏和變態(tài)反應(yīng)青霉素、四環(huán)素、磺胺類及某些氨基糖苷類抗生素能使部分人群發(fā)生過敏反應(yīng)和變態(tài)反應(yīng)，氯霉素可破壞機(jī)體造血功能，誘發(fā)再生障礙性貧血。經(jīng)常食用含抗生素的動(dòng)物性食品，輕者出現(xiàn)皮膚瘙癢、蕁麻疹、關(guān)節(jié)腫痛，重者導(dǎo)致血管性水腫、休克、甚至死亡。 導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性增加目前，由于抗生素的廣泛

3、使用，使得細(xì)菌的耐藥性不斷增加，食用含抗生素殘留的動(dòng)物性食品后，人體內(nèi)細(xì)菌的耐藥性增加。同時(shí)，動(dòng)物體內(nèi)的耐藥性菌株的耐藥性也可能轉(zhuǎn)移到人體細(xì)菌中，從而對(duì)人類產(chǎn)生極大的危害。 其他毒害作用動(dòng)物性食品中殘留的鏈霉素進(jìn)入人體后可引起腎損害和聽神經(jīng)受損。長期攝入氨基糖苷類抗生素殘留嚴(yán)重超標(biāo)的動(dòng)物性食品，可損害第8 對(duì)腦神經(jīng)，出現(xiàn)頭暈、頭痛、耳鳴、耳聾、惡心、嘔吐等癥狀。四環(huán)素會(huì)引起肝損傷，與骨骼或牙齒中的鈣質(zhì)結(jié)合后，使骨骼及牙齒黃染，還可影響兒童的生長發(fā)育。鄰氯青霉素、頭孢菌素等可引起人類免疫性疾?。宦让顾貢?huì)損害人的造血功能，抑制蛋白質(zhì)摘要：文章綜述了抗生素殘留的來源與途徑,

4、60;介紹了抗生素殘留對(duì)人類健康、乳制品生產(chǎn)、環(huán)境及其他方面造成的危害，分析了檢測抗生素殘留的方法，包括微生物檢測法、儀器檢驗(yàn)法、免疫學(xué)分析法等，并指出了這些檢測方法的研究現(xiàn)狀與發(fā)展前景。 對(duì)乳制品生產(chǎn)工藝的危害 由于含有抗生素的奶無法制成酸奶、奶酪等一些高質(zhì)量牛奶產(chǎn)品，容易造成大量原料奶的浪費(fèi)，給乳品企業(yè)造成經(jīng)濟(jì)損失。另一方面，一些不法奶戶在高溫季節(jié)為防止鮮乳的酸敗，往往向牛乳中摻雜各種抗生素，從而造成乳中抗生素殘留，對(duì)人體也造成了很大的危害。 對(duì)環(huán)境的危害 一些性質(zhì)穩(wěn)定的藥物被排泄到環(huán)境中仍能穩(wěn)定存在很長時(shí)間，從而造成環(huán)境中的藥物殘留。鏈霉素、土霉素

5、在環(huán)境中不易降解；螺旋霉素低濃度降解很快，但濃度高時(shí)需6 個(gè)月才能降解完；桿菌肽鋅在有氧的條件下完全降解需34個(gè)月，在無氧環(huán)境中降解所需要的時(shí)間更長。據(jù)報(bào)道，動(dòng)物養(yǎng)殖場污水處理池中紅霉素、復(fù)紅霉素、磺胺甲唑質(zhì)量濃度可達(dá)69g/L，這些藥物的排放污染了環(huán)境，破壞了生態(tài)平衡。 抗生素殘留量的檢測方法 隨著社會(huì)的進(jìn)步和人們對(duì)抗生素殘留的日益重視，在客觀上就要求改進(jìn)傳統(tǒng)的檢測方法。引進(jìn)先進(jìn)的檢測儀器，尋求一種快速、精確的檢測方法，使得檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確、可靠。微生物檢測方法微生物檢測方法的主要原理是根據(jù)抗微生物藥對(duì)特異微生物的抑制作用，來定性或定量檢測受檢樣品中殘留的抗微生

6、物藥。微生物檢測法應(yīng)用較為廣泛，是抗生素殘留檢測的傳統(tǒng)方法，但測定時(shí)間長，結(jié)果誤差較大，操作復(fù)雜。其優(yōu)點(diǎn)是費(fèi)用低，一般實(shí)驗(yàn)室都能操作。 氯化三苯四氮唑法（TTC）這是目前我國食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中用來檢查牛乳中抗生素殘留的檢測方法。如果牛乳中有抗生素存在，當(dāng)乳中加入菌種（嗜熱鏈球菌）經(jīng)培養(yǎng)后，菌種不增殖。此時(shí)，加入的TTC 指示劑不發(fā)生還原反應(yīng)，所以仍呈無色狀態(tài)。如果沒有抗生素存在，則加入菌種就可增殖，TTC 還原變成紅色，使樣品染成紅色。 棉拭法或紙片法這是檢測胴體內(nèi)可疑抗生素殘留的現(xiàn)場試驗(yàn)方法，簡便而又有一定準(zhǔn)確性，被世界普遍采用，具有廣域的靈敏性。它是用棉

7、拭插入待檢部位浸潤20min取出，放入有枯草桿菌的培養(yǎng)基中培養(yǎng)18h24 h，或用圓濾紙從腎臟或乳取樣，與含有枯草桿菌等細(xì)菌的營養(yǎng)瓊脂貼合培養(yǎng)，通過觀察棉拭周圍有無抑菌圈或根據(jù)其大小判定有無抗菌物質(zhì)存在。該法的特點(diǎn)是能夠確定抗生素的種類，提高檢出率和準(zhǔn)確率。如，氯霉素最低檢出限量為0.01mg/kg、土霉素為0.05mg/kg等。 杯蝶法樣品經(jīng)處理后，注入牛津杯中，與含菌液的檢定平板貼合。培養(yǎng)后，根據(jù)抑菌圈的有無及大小判定結(jié)果。采用不同的試驗(yàn)菌種，可檢測不同的抗生素。如檢測肉中四環(huán)素類抗生素用蠟樣芽孢桿菌；檢測青霉素用金黃色葡萄球菌；檢測鏈霉素或雙氫鏈霉素用枯草桿菌。 電泳

8、生物檢測法該法靈敏度較高。Fusac（1989）應(yīng)用電泳和微生物自顯影技術(shù)測定動(dòng)物組織中殘留的氨基糖苷類抗生素（如，雙氫鏈霉素、卡那霉素等），取得了滿意的結(jié)果。 瓊脂擴(kuò)散法Korkela 以豬腎為樣品采用瓊脂擴(kuò)散法對(duì)幾種抗生素殘留檢測進(jìn)行了比較。能檢測出土霉素和鏈霉素的殘留。Untermann（1986）報(bào)道，采用枯草桿菌進(jìn)行瓊脂擴(kuò)散法檢測出了牛、豬及山羊的肌肉中和腎臟內(nèi)抗生素的殘留。 儀器檢驗(yàn)方法 儀器檢驗(yàn)方法是利用抗生素分子中的基團(tuán)所具有的特殊反應(yīng)或性質(zhì)來測定其含量，進(jìn)行定性定量和藥劑鑒定。其敏感性較高，但有的檢測程序較復(fù)雜或檢測費(fèi)用較高。液相色譜法

9、（LC）德國Russel 報(bào)道了液相色譜法檢測氯霉素殘留，檢測限為10g/kg，回收率為63%79%。Jefery等（1994）報(bào)道了用LC法測定沙拉沙星在海峽鲇魚肌肉中的殘留，沙拉沙星的檢測限為1.4ng/g，回收率為85.4104。 氣相色譜法（GC）該法有許多高靈敏、通用性或?qū)Ｒ恍詮?qiáng)的檢測器供選用。Plomp和Maes報(bào)道了在血液和羊水中甲砜霉素的快速氣相色譜檢測方法，檢測限為0.1g/mL，甲砜霉素血清的回收率為91.3，羊水的回收率為90.3。 薄層色譜法（TLC）該法經(jīng)常作為樣品篩選方法。其優(yōu)點(diǎn)是速度快，有利于現(xiàn)場應(yīng)用，且已在飼料、組織和體液等的分析中

10、得到了廣泛的應(yīng)用。Bossuyt 等（1976）報(bào)道用TLC 法測定牛奶中新霉素的殘留。但新霉素的檢測限為15g/g，遠(yuǎn)高于牛奶中的新霉素殘留限量。 高效薄層色譜法（HPTLC）該法現(xiàn)已成為僅次于HPLC的殘留分析法。HPTLC在獸藥殘留的快速篩選檢測方面應(yīng)用廣泛。測定組織樣品時(shí)需在樣品展開后噴以硫酸- 高氯酸試液，靈敏度可提高10倍，檢測限達(dá)10g/kg。 高效液相色譜法（HPLC）這是目前廣泛應(yīng)用的一種理化檢測方法。該法對(duì)抗生素殘留的檢測具有較高的靈敏性。Anadan等（1995）報(bào)道了用HPLC法測定雞脂肪、肝臟、腎臟、肺臟及皮膚中恩諾沙

11、星及代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星濃度，檢測限為0.003 g/g，在各種組織中提取回收率均大于70。Rolinski 等（1997）用HPLC 法檢測了肉雞組織和雞蛋中諾氟沙星殘留，檢測限為0.0025g/g。 超臨界流體色譜法（SFC）該法可彌補(bǔ)GC和HPLC法的不足，但不可能取代二者。SFC 最大優(yōu)點(diǎn)是可以方便地連接各種靈敏的檢測器。Pensabene 等將雞蛋樣品進(jìn)行超臨界流體萃取后進(jìn)行磺胺類藥物的殘留分析，檢測限為25 g/kg，回收率為81101%。 毛細(xì)管電泳法（CE）Ackermans 等將豬肉樣品加乙腈提取，離心后上清液

12、過濾膜后直接進(jìn)行毛細(xì)管區(qū)帶電泳分析。測出肉樣中15 種磺胺類藥物的檢測限在2 mg/kg9mg/kg 的范圍內(nèi)。 聯(lián)用技術(shù)聯(lián)用技術(shù)可揚(yáng)長避短，一般兼分離、定量和定性（分子結(jié)構(gòu)信息）于一體，因而特別適用于確證性分析。常見的聯(lián)用技術(shù)有薄層色譜- 質(zhì)譜（TLC-MS）、氣相色譜- 質(zhì)譜（GC-MS）、液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）等。色譜和質(zhì)譜聯(lián)用由于實(shí)現(xiàn)了高效層析分離和檢測聯(lián)機(jī)，可用微電腦控制層析條件、程序和數(shù)據(jù)處理，其特異性、靈敏度和重復(fù)性均好，并可一次同時(shí)完成同一樣本中多種藥物及其代謝物的檢測。 免疫分析法免疫分析法主要有放射免疫分析（RIA）、酶免疫分析（EIA）、熒光免疫分析（FIA） 和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。與常規(guī)的理化分析技術(shù)相比，免疫分析技術(shù)最突出的優(yōu)點(diǎn)是操作簡單、容量大、速度快、儀器化程度低且分析成本低，分析效率則為HPLC 或GC 的幾十倍以上。免疫分析法能與其他技術(shù)聯(lián)用。 放射免疫分析（RIA）Mahon 等曾將卡那霉素與人血清白蛋白直接連接制備結(jié)合抗原，并建立了血清樣品的放射免疫測定法，檢測限為10 ng/mL。1984 年Arnold 等即建立了氯霉素的放射免疫測定法，其檢測限為0.21g/kg。酶聯(lián)免疫吸附法