液相色譜常見問題及其對策

1、SHIMADZU Solutions for Science Since 18751液相色譜常見問題及其對策液相色譜常見問題類型液相色譜常見問題類型l A. A. 壓力異常（偏高、波動）壓力異常（偏高、波動）l B. B. 漏液漏液 l C. C. 保留時間漂移保留時間漂移l D. D. 基線問題（漂移、噪聲）基線問題（漂移、噪聲） l E. E. 峰形異常峰形異常SHIMADZU Solutions for Science Since 18752現(xiàn)象：無壓力，流動相不流動可能原因 1、保險絲斷或電源問題 2、柱塞桿折斷 3、泵頭內(nèi)有空氣或流動相不足 4、單向閥損壞 5、漏液 6、壓力傳感器損

2、壞(流動相流動正常，但無壓力)液相色譜常見問題及其對策壓力異常壓力異常SHIMADZU Solutions for Science Since 18753現(xiàn)象：壓力持續(xù)偏高或不斷上升 1、流速設(shè)定過高 2、保護(hù)柱或柱子篩板堵塞 3、流動相使用不當(dāng)或有緩沖鹽析出 4、色譜柱選擇不當(dāng) 5、進(jìn)樣閥損壞 6、線路過濾器堵塞液相色譜常見問題及其對策壓力異常壓力異常SHIMADZU Solutions for Science Since 18754現(xiàn)象：壓力持續(xù)偏低 1、流速設(shè)定過低 2、色譜柱選擇不當(dāng) 3、柱溫過高 4、系統(tǒng)漏液液相色譜常見問題及其對策壓力異常壓力異常SHIMADZU Solutions

3、 for Science Since 18755現(xiàn)象：壓力波動可能原因 1、泵頭中有氣泡 2、單向閥損壞 3、柱塞密封圈損壞 4、脫氣不充分 5、系統(tǒng)漏液 6、使用了梯度洗脫液相色譜常見問題及其對策壓力異常壓力異常SHIMADZU Solutions for Science Since 18756接頭處漏液 1、接頭處松動 2、接頭磨損 3、接頭被污染 4、部件不匹配 液相色譜常見問題及其對策漏液漏液SHIMADZU Solutions for Science Since 18757泵漏液 1、單向閥松動 2、泵密封損壞 3、放空閥損壞 4、接頭松動（不要擰的太緊）液相色譜常見問題及其對策漏液

4、漏液SHIMADZU Solutions for Science Since 18758進(jìn)樣閥漏液 可能原因 1、轉(zhuǎn)子密封損壞 2、定量環(huán)堵塞 3、進(jìn)樣口密封松動 4、進(jìn)樣針尺寸不合適 5、廢液管產(chǎn)生虹吸 6、廢液管堵塞液相色譜常見問題及其對策漏液漏液SHIMADZU Solutions for Science Since 18759檢測器漏液 可能原因 1、流通池墊片損壞 2、流通池透鏡破碎 3、手緊接頭處漏液 4、廢液管堵塞 5、流通池堵塞液相色譜常見問題及其對策漏液漏液SHIMADZU Solutions for Science Since 187510保留時間漂移保留時間漂移 可能原因

5、 1、柱溫變化 2、流動相組分變化 3、色譜柱沒有平衡 4、流速變化 5、泵中有氣泡 6、流動相選擇不當(dāng) 7、鍵合相流失 8、緩沖容量不夠液相色譜常見問題及其對策保留時間漂移保留時間漂移SHIMADZU Solutions for Science Since 187511基線漂移基線漂移 可能原因 1、溫度波動 2、流動相不均勻(脫氣，使用純度更高的溶劑) 3、流通池被污染或有氣泡 4、流通池窗口破裂 5、流動相配比不當(dāng)或流速變化 6、柱子平衡（約3060min）液相色譜常見問題及其對策基線問題基線問題SHIMADZU Solutions for Science Since 187512基線漂

6、移基線漂移 可能原因 7、流動相污染，變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成 8、樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)以饅頭樣峰被洗出 9、檢測器沒有設(shè)定在最大吸收波長處液相色譜常見問題及其對策基線問題基線問題SHIMADZU Solutions for Science Since 187513基線噪聲（規(guī)則的）基線噪聲（規(guī)則的） 可能原因 1、流動相、泵、檢測器中有氣泡 2、有地方漏液 3、流動相混和不均勻 4、溫度影響（檢測器和柱溫差別太大） 5、其他電子設(shè)備的影響 液相色譜常見問題及其對策基線問題基線問題SHIMADZU Solutions for Science Since 187514基線噪聲（不規(guī)則的）基線噪聲（

7、不規(guī)則的） 可能原因 1、流動相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成 2、有地方漏液 3、流動相各溶劑不相溶或混和不均勻 4、流通池污染 5、檢測池能量不足 6、系統(tǒng)內(nèi)有氣泡液相色譜常見問題及其對策基線問題基線問題SHIMADZU Solutions for Science Since 187515前沿峰、拖尾峰前沿峰、拖尾峰 可能原因 1、柱塞板堵塞 2、色譜柱塌陷 3、柱外效應(yīng) 4、干擾峰 5、緩沖不足或不合適 6、化學(xué)或次級保留（硅羥基效應(yīng)）液相色譜常見問題及其對策峰形異常峰形異常SHIMADZU Solutions for Science Since 187516前沿峰、拖尾峰前沿峰、拖尾峰 可

8、能原因 7、重金屬污染 8、樣品溶劑選擇不當(dāng) 9、樣品過載 10、柱溫過低液相色譜常見問題及其對策峰形異常峰形異常SHIMADZU Solutions for Science Since 187517分叉峰分叉峰 可能原因 1、保護(hù)柱或分析柱污染 2、樣品溶劑不溶于流動相液相色譜常見問題及其對策峰形異常峰形異常SHIMADZU Solutions for Science Since 187518峰展寬1. 進(jìn)樣體積過大2. 流動相粘度過高3. 檢測池體積過大4. 保留時間過長5. 柱外體積過大6. 樣品過載液相色譜常見問題及其對策峰形異常峰形異常SHIMADZU Solutions for S

9、cience Since 187519峰變形峰變形 可能原因 1、樣品過載 2、樣品溶劑選擇不當(dāng)液相色譜常見問題及其對策峰形異常峰形異常SHIMADZU Solutions for Science Since 187520鬼峰1、進(jìn)樣閥殘余峰2、樣品中未知物3、柱未平衡4、水污染5、三氟乙酸氧化液相色譜常見問題及其對策峰形異常峰形異常SHIMADZU Solutions for Science Since 187521液相色譜容易出問題的部件維護(hù)流程圖吸濾頭單向閥柱塞密封圈線路過濾器手動進(jìn)樣器檢測器SHIMADZU Solutions for Science Since 187522材料：不銹

10、鋼燒結(jié)，孔徑10um故障：堵塞表現(xiàn)：管路中不斷有氣泡生成措施：用520的稀硝酸，超聲波清洗， 再用蒸餾水清洗注意點：吸濾頭拆下時不必將塑料管剪斷吸濾頭吸濾頭液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solutions for Science Since 187523LC-10ATvp泵：串聯(lián) 式往復(fù)泵LC-10ADvp泵：并聯(lián)式 往復(fù)泵液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solutions for Science Since 187524液相色譜容易出問題的部件單向閥結(jié)構(gòu)單向閥結(jié)構(gòu)拋光面透明塑料墊片寶石球吸液沖程排液沖程出口單向閥進(jìn)口單向閥泵頭流動相單向閥原理單向閥原理吸液沖程排液沖程出

11、口單向閥進(jìn)口單向閥泵頭SHIMADZU Solutions for Science Since 187525液相色譜容易出問題的部件故障1：寶石球粘附于墊片表現(xiàn)：泵無法吸液或排液，流路不通措施：1）用針筒抽出口單向閥以產(chǎn)生負(fù)壓， 使寶石球與墊片分開 2）拆下單向閥，放入異丙醇或水中， 用超聲波清洗單向閥單向閥SHIMADZU Solutions for Science Since 187526液相色譜容易出問題的部件故障2：寶石球或塑料墊片受污導(dǎo)致密封不好表現(xiàn)：系統(tǒng)壓力波動大措施：拆下單向閥，放入異丙醇或水中，用超 聲波清洗單向閥單向閥SHIMADZU Solutions for Scienc

12、e Since 187527故障：密封圈磨損而導(dǎo)致 密封不良現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動大或 漏夜措施：更換密封圈注意點： 更換密封圈 拆卸泵頭前，柱塞桿 復(fù)位 （PSET）柱塞密封圈柱塞密封圈流動相泵頭清洗管路柱塞桿密封圈液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solutions for Science Since 187528故障：堵塞現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動大或壓 力偏高措施：5稀硝酸，超聲波清 洗判斷依據(jù)：關(guān)閉排液閥，斷開出口管路，設(shè)定流速1mL/min，如壓力3kgf/cm2，則可能堵塞。線路過濾器線路過濾器排液閥壓力傳感器線路過濾器流動相液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solution

13、s for Science Since 187529手動進(jìn)樣閥 故障：轉(zhuǎn)子密封損壞 現(xiàn)象：漏液 原因：a 擰的太緊 b 樣品太臟 c 針頭損壞或不使用液相專用針 解決措施：更換轉(zhuǎn)子密封，并在使用 時注意保養(yǎng)液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solutions for Science Since 187530液相色譜容易出問題的部件手動進(jìn)樣閥 故障：載樣困難 原因：a 定量環(huán)堵塞 b 進(jìn)樣器污染 解決措施：清洗或更換定量環(huán)、進(jìn)樣器SHIMADZU Solutions for Science Since 187531柱子 故障：系統(tǒng)高壓、峰型變差（拖尾峰、前沿峰、分叉峰），保留時間的改變

14、解決措施：清洗 正相柱，正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇 反相柱，甲醇、乙腈、氯仿、異丙醇、0.05M稀硫酸液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solutions for Science Since 187532液相色譜容易出問題的部件峰產(chǎn)生有肩或分叉的原因峰產(chǎn)生有肩或分叉的原因1. 柱子劣化柱子劣化 （進(jìn)口處產(chǎn)生不均勻的空隙）（進(jìn)口處產(chǎn)生不均勻的空隙）2. 樣品劣化樣品劣化 （生成氧化物、分解物等）（生成氧化物、分解物等）判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷標(biāo)準(zhǔn) 所有的峰都產(chǎn)生有肩峰或分叉時則為柱子劣化所有的峰都產(chǎn)生有肩峰或分叉時則為柱子劣化SHIMADZU Solutions for Science Si

15、nce 187533延長柱壽命方法：延長柱壽命方法： 倒沖柱倒沖柱 換過濾片換過濾片 修補(bǔ)柱頭修補(bǔ)柱頭 液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solutions for Science Since 187534液相色譜容易出問題的部件柱的補(bǔ)修柱的補(bǔ)修SHIMADZU Solutions for Science Since 187535填料的取出填料的取出液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solutions for Science Since 187536恢復(fù)例恢復(fù)例液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solutions for Science Since 187537分 析

16、柱 的 維 護(hù)1、在使用新柱之前，最好用強(qiáng)溶劑在低流量下 (0.2-0.3 ml/min)沖洗 30 mins，長時間未用的分析柱也要同樣 處理2、定期使用強(qiáng)溶劑沖洗柱子3、使用緩沖鹽時，要先用水沖洗，再用有機(jī)溶劑沖洗4、凈化樣品5、分離條件6、不使用時，要蓋上蓋子，避免固定相干枯7、使用預(yù)柱8、避免流動相組成及極性的劇烈變化9、避免壓力脈沖的劇烈變化液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solutions for Science Since 187538更換氘燈更換氘燈（紫外檢測器） 判斷氘燈能量： 設(shè)定220nm波長，檢查參比池能量，如 能量低于800，需更換氘燈。 操作注意點： 不要

17、用手直接接觸氘燈表面液相色譜容易出問題的部件SHIMADZU Solutions for Science Since 187539液相色譜容易出問題的部件故障：樣品池受污表現(xiàn)：樣品池和參比池能量相差較大檢查方法：設(shè)定250nm波長，通甲醇或水，查看SMPL EN和 REF EN，如兩者相差較大，則樣品池受污。措施：用針筒注入異丙醇，清洗樣品池；如污染嚴(yán)重， 拆開樣品池，將透鏡等放入異丙醇中超聲波清洗。紫外檢測器紫外檢測器SHIMADZU Solutions for Science Since 187540其他問題溶劑的過濾溶劑的過濾 濾膜類型： 聚四氟乙烯濾膜： 適用于所有溶劑，酸和鹽。 醋酸

18、纖維濾膜： 不適用于有機(jī)溶劑，特別適用于水基溶劑。 尼龍66濾膜： 適用于絕大多數(shù)有機(jī)溶劑和水溶液，可以用于強(qiáng)酸，不適 用于二甲基甲酰胺。 再生纖維素濾膜： 蛋白吸收低，同樣適用于水溶性樣品和有機(jī)溶劑SHIMADZU Solutions for Science Since 187541脫氣： 除去流動相中溶解或因混合而產(chǎn)生的氣泡 氣泡對測定的影響： 1）泵中氣泡使液流波動，改變保留時間和峰面積 2）柱中氣泡使流動相繞流，峰變形 3）檢測器中的氣泡產(chǎn)生基線波動其他問題SHIMADZU Solutions for Science Since 187542脫氣的目的脫氣的目的 1. 防止由氣泡的產(chǎn)生

19、引起的故障 2. 防止由溶解（在液體中的）氣體量 的變動引起的檢測不穩(wěn)定程度 1）示差折射率檢測器 *使折射率變化 2）UV檢測器（200nm以下） *溶解氧氣有吸收 3）熒光檢測器 *溶解氧氣有消光作用其他問題SHIMADZU Solutions for Science Since 187543其他問題脫氣的方法1. 超聲波脫氣法超聲波脫氣法2. He清除法清除法3. 使用氟樹脂膜的減壓脫氣法使用氟樹脂膜的減壓脫氣法SHIMADZU Solutions for Science Since 187544其他問題He清除法清除法調(diào)壓閥調(diào)壓閥排氣閥排氣閥往送液泵往送液泵流動相流動相過濾器過濾器SHIMADZU Soluti