《黃酮類化合物》ppt課件

1、第六章第六章 黃酮類化合物黃酮類化合物 概概 述述1黃酮的含義： 1經(jīng)典含義是指以2-苯基色原酮衍生的一類化合物的總稱，由于該類化合物大多呈淡黃色或黃色，且分子中多具酮基，因此稱為黃酮。 2現(xiàn)代含義是泛指二個苯環(huán)A環(huán)和B環(huán)經(jīng)過三個碳原子相互銜接而成的一系列化合物的總稱，即具有C6-C3-C6構(gòu)造的一類化合物的總稱。2 黃酮的生物活性 第一節(jié)第一節(jié) 構(gòu)造和分類構(gòu)造和分類 分類根據(jù)：分類根據(jù)： 1、3-位羥基取代與否位羥基取代與否 2、三碳鏈能否構(gòu)成環(huán)、三碳鏈能否構(gòu)成環(huán) 3、三碳鏈的氧化程度、三碳鏈的氧化程度 4、B-環(huán)銜接位置環(huán)銜接位置(2、3-位位) 氧化型 復(fù)原型 第一節(jié) 構(gòu)造和分類黃酮黃酮

2、醇異黃酮查耳酮黃烷3-醇類花樣素類橙酮類二氫黃酮二氫黃酮醇二氫異黃酮二氫查耳酮黃烷3、4-二醇類汕酮高異黃酮類OOABC1234567823465 芹菜素5，7，4-三OH黃酮 木犀草素5，7，3，4-四OH黃酮 黃芩素(5，6，7-三OH黃酮)23OO橙皮苷5，7，3 - 三OH，4-OCH3二氫黃酮 甘草苷甘草素甘草苷甘草素-7-O-glu苷苷 甘草素甘草素7，4 二二OH二氫黃酮二氫黃酮 構(gòu)造和分類構(gòu)造和分類黃酮黃酮二氫黃二氫黃酮酮 n黃酮醇黃酮醇23OOOH 山柰酚5，7，4-三OH黃酮醇 槲皮素5，7，3，4-四OH黃酮醇 楊梅素5，7，3，4，5-五OH黃酮醇 構(gòu)造和分類構(gòu)造和分類

3、23OOOH 二氫黃酮醇二氫黃酮醇二氫槲皮素5，7，3，4-四OH二氫黃酮醇 二氫桑色素5，7，2，4-四OH二氫黃酮醇23OO 大豆素7，4-二OH異黃酮 大豆苷大豆素-7-O-glc苷 葛根素7，4-二OH，8- glc異黃酮苷23OO紫檀素紫檀素魚藤酮魚藤酮 構(gòu)造和分類構(gòu)造和分類二氫異黃二氫異黃酮酮異黃酮異黃酮2345623465OOHOOHOHOHOHOglc紅花苷紅花苷查耳酮查耳酮 構(gòu)造和分類OOHOOHOHOHOglc梨根苷梨根苷二氫查耳酮二氫查耳酮OOH3OOHOHOHOHHHOH +兒茶素兒茶素OOHOH34OOHOHOHOHOHOHOH 無色飛燕草素?zé)o色飛燕草素 構(gòu)造和分類黃

4、烷黃烷-3，4-二醇二醇黃烷黃烷3-醇醇34OOCH256723456OOHOHOHOHOHOH+34OOH+ 飛燕草苷元 構(gòu)造和分類橙酮橙酮花樣素花樣素硫磺菊素6，3，4-三OH橙酮OOOHOHOHOHglcOO異芒果素 構(gòu)造和分類OO 高異黃高異黃酮酮雙苯吡酮雙苯吡酮OOHOOOHHHCH2OHHOCHOHOHOH3 木脂素黃酮木脂素黃酮水飛薊素水飛薊素 構(gòu)造和分類 第二節(jié)第二節(jié) 黃酮類化合物的理化性質(zhì)黃酮類化合物的理化性質(zhì)一性狀一性狀 形狀：多為結(jié)晶性固體，少數(shù)為無定形粉末。形狀：多為結(jié)晶性固體，少數(shù)為無定形粉末。 顏色：多為黃色顏色：多為黃色交叉共軛體系電子交叉共軛體系電子轉(zhuǎn)移、重排，

5、共軛加轉(zhuǎn)移、重排，共軛加強(qiáng)，產(chǎn)生顏色的根底強(qiáng)，產(chǎn)生顏色的根底 助色團(tuán)給系統(tǒng)提供助色團(tuán)給系統(tǒng)提供電子，使顏色加深，電子，使顏色加深，尤其尤其7，4-位，輔助位，輔助作用作用 黃酮灰黃黃色 二氫黃酮黃酮醇灰黃黃色 二氫黃酮醇查耳酮黃橙黃色 二氫查耳酮 二氫異黃酮 黃烷醇類 異黃酮無或微黃色花樣素類顏色隨花樣素類顏色隨pH而改動而改動 紅色紅色pH 8.5OOOOOO47+交叉共軛體系交叉共軛體系 旋光性 取決于 不對稱碳原子的有無 有 無 一切黃酮苷糖 游離黃酮 游離黃酮 黃酮 二氫黃酮 黃酮醇 二氫黃酮醇 異黃酮 二氫異黃酮 查耳酮二氫 黃烷醇類 橙酮 花樣素類等 *OHOOOO2*OO二旋光性

6、：二旋光性：三溶解性三溶解性: 符合苷的溶解性規(guī)律。但水符合苷的溶解性規(guī)律。但水溶性與構(gòu)造的平面性、取代基團(tuán)溶性與構(gòu)造的平面性、取代基團(tuán)的種類和數(shù)目等有一定關(guān)系。的種類和數(shù)目等有一定關(guān)系。 黃酮類化合物的理化性質(zhì)黃酮類化合物的理化性質(zhì)1分子的立體構(gòu)造 平面型分子 非平面型分子 黃酮 二氫類C-環(huán)半椅式構(gòu)造 黃酮醇 異黃酮羰基與B-環(huán)立體妨礙 查耳酮 交叉共軛 分子間陳列不嚴(yán)密，水分子易于進(jìn)入 水溶度小 水溶度大 黃酮類化合物的理化性質(zhì)黃酮類化合物的理化性質(zhì)2OOHRH R=OH 二氫黃酮醇R=H 二氫黃酮2取代基團(tuán)的性質(zhì)、數(shù)目、銜接位置 引入羥基，數(shù)目多，7、4-位，水溶度較大。 羥基甲基化-

7、OCH3, 水溶度降低。 黃酮類化合物的理化性質(zhì)1三糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元23 - O - 糖苷 7 - O - 糖苷平面性分子3花樣素(平面性分子,離子型) 非平面性分子 平面性分子2 .黃酮苷黃酮苷(親水性親水性) 四酸堿性四酸堿性1酸性 1來源：酚羥基 數(shù)目、位置 2酸性規(guī)律 a、7，4-OH酸性強(qiáng)于其他位置羥基的酸性處于羰基對位，羰基的共軛誘導(dǎo)。 b、5-OH酸性最弱處于羰基鄰位，構(gòu)成分子內(nèi)氫鍵。 c、酚羥基數(shù)目越多，酸性越強(qiáng)。 7，4-OH 7或4-OH 其他位-OH 5-OH NaHCO3 + - - - Na2CO3 + + - - NaOH + + + + 運(yùn)用：運(yùn)用：pH

8、梯度法分別梯度法分別OOH+Cl2.堿性：堿性： -吡喃酮環(huán)1-氧原子 微弱堿性孤對電子，接受質(zhì)子 僅溶于強(qiáng)的、濃酸僅溶于強(qiáng)的、濃酸+水水 濃硫酸濃硫酸 烊 鹽呈色 運(yùn)用 初步鑒別黃酮母核類型：黃酮、黃酮醇 黃橙色，并有熒光 二氫黃酮 橙紅冷、紫紅熱 查耳酮 橙紅洋紅 異黃酮二氫 黃色 橙酮 紅洋紅五顯色反響五顯色反響 1復(fù)原顯色反復(fù)原顯色反響響反響類型反響類型 鑒別特征鑒別特征 鑒別意義鑒別意義 備注備注 鹽酸-鎂粉 黃酮、二氫黃酮、 紅紫紅 黃酮類特征性 假陽性 反響 黃酮醇、二氫黃酮醇 紅紫紅 鑒別反響 花樣素 最常用 查耳酮、橙酮、 - 兒茶素類、異黃酮 - 四氫硼鈉 二氫黃酮、二氫黃

9、酮醇 紅紫紅 二氫黃酮類特有 復(fù)原反響 其它黃酮類 - 鈉汞齊反響 黃酮、二氫黃酮 紅 異黃酮、二氫異黃酮 紅 黃酮醇類 黃淡紅色 二氫黃酮醇類 棕黃色2.與金屬鹽類試劑絡(luò)合反響與金屬鹽類試劑絡(luò)合反響反響類型反響類型 鑒別特征及鑒別意義鑒別特征及鑒別意義 備備 注注 鋯鹽鋯鹽 枸櫞酸枸櫞酸 鋯鹽鋯鹽-枸櫞酸枸櫞酸 3-OH或或3，5 -二二OH 黃色黃色 黃色不褪黃色不褪 PPC(ZrOCl2) 5-OH 黃色褪去 示 氨性氯化鍶(SrCl2) 鄰二酚羥基 綠、棕乃至黑色沉淀 三氯化鐵(FeCl3) 酚羥基 紫、藍(lán)、綠三氯化鋁 3-OH，4-C=O 黃色 AlCl3 5-OH，4-C=O 鮮黃

10、色熒光 PPCTLC 鄰二酚羥基 4或7，4黃酮醇，天藍(lán)色熒光3. 硼酸顯色反響硼酸顯色反響 硼酸 5 - 羥基，4 - 羰基黃酮 黃色，綠色熒光草酸液 H3BO3 6-羥基，4 - 羰基查耳酮 黃色，無熒光枸櫞酸4. 堿性試劑反響堿性試劑反響反響類型反響類型 鑒別特征及鑒別意義鑒別特征及鑒別意義 備備 注注氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液 黃酮黃酮 黃黃 橙色橙色 查耳酮、橙酮查耳酮、橙酮 紅紅 紫紅紫紅 二氫黃酮二氫黃酮 黃黃橙色冷橙色冷 深紅深紅 紫紅紫紅 較長時間或加熱較長時間或加熱 母核類型鑒別 稀氫氧化鈉 鄰三酚羥基黃酮類 暗綠藍(lán)綠色纖維狀 鄰三酚羥基氨蒸氣或碳酸鈉溶液氨蒸氣或碳酸鈉溶液

11、顏色變化顏色變化 TLC、PPC五氯化銻五氯化銻 (SdCl5)： 查耳酮特征性顯色反響查耳酮特征性顯色反響 (紅或紫紅色沉淀紅或紫紅色沉淀) 黃酮、二氫黃酮、黃酮醇類呈橙色。黃酮、二氫黃酮、黃酮醇類呈橙色。Gibb，s反響：酚羥基對位活潑質(zhì)子的特征藍(lán)反響：酚羥基對位活潑質(zhì)子的特征藍(lán) 或藍(lán)綠色或藍(lán)綠色 5與五氯化銻反響與五氯化銻反響6其他顯色反響其他顯色反響 一提取方法 溶劑法第三節(jié)第三節(jié) 黃酮類化合物的提取、分別黃酮類化合物的提取、分別溶劑法關(guān)鍵: 溶劑的選擇 溶劑選擇根據(jù): 黃酮類成分的存在形狀 游離、苷及溶解性 提取方法選擇根據(jù): 溶劑的溶解性能 煎煮法、滲漉法、回流法等 溶劑 提取原理

12、 游離黃酮 黃酮苷 備 注 乙醇 溶解范圍廣 + + 甲醇 苷、苷元均可溶 9095% ( 60% 甲醇毒性大沸水 多糖苷易于水 + 本錢低、平安,水溶性雜質(zhì)多 堿性水或 稀氫氧化鈉溶出才干強(qiáng) 堿性乙醇 酚羥基的酸性 + + 石灰水除雜質(zhì)效果好黃酮類化合物的提取黃酮類化合物的提取二二.分別方法分別方法一溶劑萃取法一溶劑萃取法 黃酮與雜質(zhì)黃酮與雜質(zhì) 分別根據(jù)：成分之間分別根據(jù)：成分之間 苷與苷元苷與苷元 之間的極性分配系數(shù)之間的極性分配系數(shù)K差別差別 苷元與苷元苷元與苷元 分別工藝：分別工藝： 原料的提取濃縮液水溶液原料的提取濃縮液水溶液 依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取 石油醚液

13、 乙醚液 乙酸乙酯 水飽和正丁醇 母液脂溶性雜質(zhì) 回收 回收 減壓回收 水溶性雜質(zhì)) 苷元 單糖苷 多糖苷 二二pH梯度萃取法梯度萃取法 分別根據(jù)：游離黃酮類化合物的酸性差別分別根據(jù)：游離黃酮類化合物的酸性差別 分別工藝：總游離黃酮的乙醚液分別工藝：總游離黃酮的乙醚液 依次以5%NaHCO3 、5%Na2CO3、0.2 % NaOH、 4% NaOH萃取 5%NaHCO3液 5%Na2CO3液 0.2 % NaOH液 4% NaOH液 母液 酸化 脂溶性雜質(zhì)7，4-OH黃酮黃酮 7或或4-OH黃酮黃酮 普通普通-OH黃酮黃酮 5-OH黃酮黃酮三柱色譜法三柱色譜法 吸附原理 異黃酮、二氫黃酮醇、

14、 氯仿-甲醇不同比例105，活化 高度甲基化或乙酰化黃酮醇 混合溶劑洗脫 極性小分配原理 多羥基黃酮醇或黃酮苷類 氯仿-甲醇-水 加水失活或不活化 極性大 80 ：20 ：1等比例1硅膠柱色譜硅膠柱色譜2氧化鋁柱色譜少氧化鋁柱色譜少 具有具有3-OH或或5-OH 、4-羰基及鄰二酚羥基黃酮類化羰基及鄰二酚羥基黃酮類化合物與鋁離子絡(luò)和而被結(jié)實(shí)吸附，難于洗脫。合物與鋁離子絡(luò)和而被結(jié)實(shí)吸附，難于洗脫。2聚酰胺色譜聚酰胺色譜吸附規(guī)律：與黃酮類化合物酚羥基的數(shù)目、位置及介質(zhì)有關(guān)。吸附規(guī)律：與黃酮類化合物酚羥基的數(shù)目、位置及介質(zhì)有關(guān)。1酚羥基數(shù)目越多，吸附才干越強(qiáng)。酚羥基數(shù)目越多，吸附才干越強(qiáng)。2酚羥基數(shù)

15、目一樣的情況下，酚羥基所處的位置有利于構(gòu)成分子內(nèi)氫酚羥基數(shù)目一樣的情況下，酚羥基所處的位置有利于構(gòu)成分子內(nèi)氫鍵，吸附才干減弱。鍵，吸附才干減弱。 3-OH或或5-OH黃酮的吸附力小于其他位置黃酮的吸附力小于其他位置-OH黃酮；黃酮； 鄰二酚羥基黃酮的吸附力弱于間位或?qū)ξ环恿u基黃酮鄰二酚羥基黃酮的吸附力弱于間位或?qū)ξ环恿u基黃酮3分子內(nèi)芳香化程度越高，吸附力越強(qiáng)。分子內(nèi)芳香化程度越高，吸附力越強(qiáng)。 查耳酮查耳酮 二氫黃酮二氫黃酮 黃酮醇黃酮醇 黃酮黃酮 二氫黃酮醇二氫黃酮醇 異黃酮異黃酮4與介質(zhì)的關(guān)系：吸附力與介質(zhì)的關(guān)系：吸附力 水中水中 甲醇、乙醇濃度甲醇、乙醇濃度 由低到高由低到高 堿性溶劑堿

16、性溶劑氫鍵吸附氫鍵吸附洗脫規(guī)律：與吸附規(guī)律正好相反，即吸附才干越強(qiáng)，越難洗脫洗脫規(guī)律：與吸附規(guī)律正好相反，即吸附才干越強(qiáng)，越難洗脫 聚酰胺聚酰胺“雙重色譜原理雙重色譜原理 正相色譜正相色譜 反相色譜反相色譜聚酰胺：極性固定相極性酰胺基團(tuán) 非極性固定相非極性脂肪鏈洗脫劑：有機(jī)溶劑氯仿-甲醇，極性小 含水溶劑甲醇-水，極性大 先洗脫：游離黃酮苷元，極性小 苷極性大柱色譜分別 Rf值： 苷元 苷 苷元 雙糖苷雙糖苷 單糖苷單糖苷 苷元苷元 1-OH 2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黃酮黃酮 4 . 葡聚糖凝膠柱色譜葡聚糖凝膠柱色譜“雙重色譜原理雙重色譜原理常用洗脫劑：常用洗脫劑： 堿水堿水0

17、.1mol / L NH3.H2O 鹽水鹽水0.5mol / L NaCl 醇或醇水不同比例。醇或醇水不同比例。 運(yùn)用：適用于各種黃酮類化合物的分別運(yùn)用：適用于各種黃酮類化合物的分別 原理：反相柱色譜黃酮類化合物極性大原理：反相柱色譜黃酮類化合物極性大 固定相：固定相：ODS 流動相：水流動相：水-乙晴，水與甲醇不同比例乙晴，水與甲醇不同比例6高效液相色譜法高效液相色譜法HPLC 第四節(jié)黃酮類化合物的檢識一理化檢識一理化檢識 1.顏色：多呈黃色顏色：多呈黃色 2.母核檢識：鹽酸母核檢識：鹽酸-鎂粉反響鎂粉反響-黃酮、黃酮醇、二氫黃酮黃酮、黃酮醇、二氫黃酮 二氫黃酮醇二氫黃酮醇+ 四氫硼鈉反響四

18、氫硼鈉反響-二氫黃酮醇類二氫黃酮醇類+ 五氯化銻五氯化銻-查耳酮類查耳酮類+ 3.取代基團(tuán)檢識：鋯鹽取代基團(tuán)檢識：鋯鹽-枸櫞酸反響枸櫞酸反響-3-OH+ 5-OH- 黃酮鑒別黃酮鑒別 氨性氯化鍶反響氨性氯化鍶反響-鄰二酚羥基鄰二酚羥基+二二.色譜檢識色譜檢識 一紙色譜一紙色譜PPC 原理：分配原理原理：分配原理 適用范圍：游離黃酮苷元及黃酮苷的分別鑒別適用范圍：游離黃酮苷元及黃酮苷的分別鑒別 雙相色譜雙相色譜 第I向 醇性展開劑 第II向 水性展開劑BAW、TBA、水飽和正丁醇 28%HAc、3%NaCl、1%HCl 正相色譜 反相色譜固定相水極性 流動相 *有以為是吸附原理？Rf規(guī)律：極性小

19、的化合物Rf大 極性大的化合物Rf大 苷元0.7以上 單糖苷 雙糖苷0.7以下 苷元中，平面型分子 非平面型分子 Rf規(guī)律與左邊相反 母核一樣，2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黃酮 苷元的分別鑒別 黃酮苷及花樣素類 PPC色譜1硅膠薄層色譜 極性較小的黃酮類化合物黃酮苷元2聚酰胺薄層色譜 可用于黃酮苷及游離黃酮的分別 鑒別，其色譜行為可參考聚酰胺柱色譜。3纖維素薄層色譜分配原理，其色譜行為可參考紙色譜。 二薄層色譜二薄層色譜TLC 各種色譜的檢識：各種色譜的檢識： 日光下察看日光下察看多數(shù)黃酮有黃色斑點(diǎn)多數(shù)黃酮有黃色斑點(diǎn) 紫外光下察看紫外光下察看多數(shù)黃酮呈黃綠色熒光斑點(diǎn)多數(shù)黃酮呈黃綠色

20、熒光斑點(diǎn) 氨蒸氣熏氨蒸氣熏多數(shù)黃酮有顏色變化多數(shù)黃酮有顏色變化 噴顯色劑噴顯色劑2%AlCl3甲醇液甲醇液多數(shù)黃酮黃色變深，熒光加強(qiáng)多數(shù)黃酮黃色變深，熒光加強(qiáng)第五節(jié)第五節(jié) 黃酮類化合物的構(gòu)造研討黃酮類化合物的構(gòu)造研討一一. 紫外可見光譜在黃酮類化合物構(gòu)造測定中的運(yùn)用紫外可見光譜在黃酮類化合物構(gòu)造測定中的運(yùn)用 普通鑒定程序：普通鑒定程序： 1、先測定在甲醇中的光譜。、先測定在甲醇中的光譜。 2、再測定在參與各種診斷試劑后的紫外光譜。、再測定在參與各種診斷試劑后的紫外光譜。 3、如為苷類，那么可水解或甲基化后再水解，并測定、如為苷類，那么可水解或甲基化后再水解，并測定苷元或其衍生物的紫外光譜。苷元

21、或其衍生物的紫外光譜。 4、將以上各種光譜數(shù)據(jù)或光譜圖進(jìn)展對比分析，、將以上各種光譜數(shù)據(jù)或光譜圖進(jìn)展對比分析，即可獲得有關(guān)構(gòu)造信息。即可獲得有關(guān)構(gòu)造信息。 黃酮醇： 帶 II、帶I均強(qiáng)母核光譜特征 二氫黃酮類、異黃酮類：帶 II強(qiáng)、 帶I弱 母核的推斷 甲醇 查耳酮、橙酮：帶 II弱、帶I強(qiáng) 取代基：OH等，為助色團(tuán) 依紅移規(guī)律推斷取代基團(tuán) 甲醇鈉：強(qiáng)堿，一切酚羥基解離 醋酸鈉：堿性弱，酸性強(qiáng)的酚羥基解離 參與診斷試劑 醋酸鈉/硼酸：鄰二酚羥基絡(luò)和 相應(yīng)吸收峰紅移 三氯化鋁：3-OH，4-羰基 5-OH，4-羰基 絡(luò)和 鄰二酚羥基OOROOROOR+黃酮類化合物在甲醇中紫外光譜特征黃酮類化合物

22、在甲醇中紫外光譜特征 苯甲酰系統(tǒng)苯甲酰系統(tǒng) 桂皮酰系統(tǒng)桂皮酰系統(tǒng)帶帶II 220280nm 帶帶1 300400nm 黃酮類化合物構(gòu)造中的交叉共軛體系黃酮類化合物構(gòu)造中的交叉共軛體系OOBOORAB 二氫黃酮醇 異黃酮二氫 由B環(huán)產(chǎn)生的桂皮酰系統(tǒng)不存在，帶I弱，帶II強(qiáng) 黃酮類化合物在甲醇中紫外光譜特征黃酮類化合物在甲醇中紫外光譜特征黃酮類化合物母核黃酮類化合物母核UV吸收特征吸收特征 母核類型 帶II nm 帶I nm 備注黃酮 250280強(qiáng) 304350強(qiáng) 典型的交叉共軛系統(tǒng)黃酮醇3-OH取代 328357強(qiáng) 3-OH供電減弱，使黃酮黃酮醇3-OH游離 358385強(qiáng) 3-OH供電共軛，

23、帶1紅移 異黃酮 245278強(qiáng) ( sh ) 桂皮酰系統(tǒng)破壞 二氫黃酮醇 270295強(qiáng) ( sh )查耳酮 220270弱 340390強(qiáng)橙酮 230270弱 370430強(qiáng) 花青素苷 270280 465560可見區(qū)2取代基團(tuán)對共軛吸收的影響n黃酮類核中引入-OH酚羥基等供電基團(tuán)，使共軛程度加強(qiáng)，相應(yīng)的吸收峰紅移。n 普通，A環(huán)引入 OH，帶II紅移，B環(huán)引入 OH帶I紅移。n羥基甲基化或苷化后，原酚羥基的供電才干下降，引起相應(yīng)的吸收峰紫移。n 3-OH甲基化或苷化，帶I紫移， n 5-OH與羰基構(gòu)成分子內(nèi)氫鍵甲基化，帶I、帶II均紫移515nm，n 4-OH甲基化，帶I紫移310nm。

24、n羥基乙?；螅阴；奈娮饔?，使原來酚羥基對共軛系統(tǒng)的供電才干消逝，對光譜的影響亦將完全消逝。 黃酮黃酮 、黃酮醇參與診斷試劑后吸收峰帶、黃酮醇參與診斷試劑后吸收峰帶I、帶、帶II的位移規(guī)律的位移規(guī)律診斷試劑診斷試劑 位移規(guī)律位移規(guī)律 歸歸 屬屬 NaOMe 帶I紅移4060nm，強(qiáng)度不降 示有4-OH 帶I紅移5060 nm，強(qiáng)度下降 示有3-OH、但無4-OHNaOAc 帶II紅移520nm 示有7-OH2.參與診斷試劑后引起的位移及其在構(gòu)造測定中的意義參與診斷試劑后引起的位移及其在構(gòu)造測定中的意義 NaOAc / H3BO3 帶I紅移1230nm 示B環(huán)有鄰二酚羥基 帶II紅移510

25、nm 示A環(huán)有鄰二酚羥基 不包括5，6-鄰二酚羥基 診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬AlCl3 及AlCl3/HCl AlCl3/HCl譜圖 = AlCl3譜圖 示無鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜圖 AlCl3譜圖 示有鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜較AlCl3譜 帶I紫移3040 nm 示B環(huán)有鄰二酚羥基 假設(shè)紫移20 nm 示B環(huán)有鄰三酚羥基 帶I紫移5065 nm 示A、B環(huán)均能夠有鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜圖 = MeOH譜圖 示無3-及/或5-OH無鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜圖 MeOH譜圖 示能夠有3-及/或5-OH 帶I紅移3555 nm 示只需5-OH 無3-OH 僅

26、紅移1720 nm 示除5-OH外，尚有6-含氧取代 紅移5060nm 示能夠有3-OH及5-OH 異黃酮、二氫黃酮醇的吸收峰帶異黃酮、二氫黃酮醇的吸收峰帶II位移規(guī)律位移規(guī)律NaOAc 異黃酮 帶II紅移620nm 示有7-OH 二氫黃酮醇 帶II紅移3437nm 示有5，7-二OH 帶II紅移5158nm 示有7-二OHAlCl3/HCl AlCl3/HCl譜圖與甲醇中的譜圖比較 異黃酮 帶II紅移1014nm 示有5-OH 二氫黃酮醇 帶II紅移2026nm 示有5-OH 診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬查耳酮、橙酮的吸收峰查耳酮、橙酮的吸收峰 帶帶I 位移規(guī)律位移規(guī)律 NaOMe 查耳酮 帶

27、I紅移60100nm，強(qiáng)度添加 示有4-OH 帶I紅移60100nm，強(qiáng)度不添加 示有2-或4-OH 橙酮 帶I紅移7095nm， 示有或6-OH AlCl3 及及AlCl3/HCl 查耳酮、橙酮查耳酮、橙酮 AlCl3較較 AlCl3/HCl譜圖譜圖 帶帶I 紅移紅移4070nm 示有示有B-環(huán)鄰二酚羥基環(huán)鄰二酚羥基 查耳酮查耳酮 AlCl3/HCl譜圖較譜圖較MeOH譜圖譜圖 帶帶I 紅移紅移4060nm 示有示有2- OH診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬 二1H-NMR譜在黃酮構(gòu)造研討中的運(yùn)用n測定溶劑 ：n CCl4 - 樣品需制備成三甲基硅醚化衍生物，不能顯示羥基質(zhì)子特征，目前已根本不被采

28、用。n DMSO-d6 - 樣品苷、苷元不需制備成衍生物，可以顯示各酚羥基質(zhì)子特征。 A 環(huán)質(zhì)子 B環(huán)質(zhì)子 C環(huán)質(zhì)子 糖上質(zhì)子 取代基團(tuán)質(zhì)子 芳環(huán)質(zhì)子 芳環(huán)質(zhì)子 與類型有關(guān) 端基質(zhì)子 -OH、-CH3、 其它質(zhì)子 -OCH3、-OCOCH3 黃酮類化合物各質(zhì)子的信號特征黃酮類化合物各質(zhì)子的信號特征、峰外形、峰外形、J、峰面積、峰面積6 8ppm6 8ppm，B-HB-H位于較低場位于較低場5-H5-H最大最大8.0ppm8.0ppm羰基去屏蔽羰基去屏蔽A-H 5.77.9 5-OH 12.40 (12.99) A-H 5.77.9 5-OH 12.40 (12.99) B-H 6.5 7.9

29、B-H 6.5 7.9 7-OH 10.93 1H-NMR譜在黃酮構(gòu)造研討中的運(yùn)用J鄰鄰 6 9Hz 3-OH 9.70J間間 2 3 Hz 4-OH (10.01)J對對 0 1 Hz不計不計 3-OH (9.42)峰外形及峰外形及J與取代有關(guān)與取代有關(guān) -OCH33.5 4.10(3H s) 6-CH32.042.27(3H s) 8-CH32.142.45(3H s)A-環(huán) B-環(huán) -OCOCH3 (羥基乙?；?5，7-二OH 4- 氧取代 糖上1.652.10(3H s)7-OH取代 3，4- 氧取代 苷元2.302.50(3H s) 3，4，5- 氧取代 glu H-1 位于低場位于

30、低場 較大較大4.85.70ppm 依依、峰形、峰形d、dd、J 苷元苷元-3-O-glu 5.80左右左右1H.d. J與構(gòu)型有關(guān)與構(gòu)型有關(guān)Jaa=69Hz， Jae=23A、B-環(huán)取代方式推斷環(huán)取代方式推斷 苷元苷元-5、7、4-O-glu 5.0左右左右 rha C-CH3 0.8 1.20 ( d/m )黃酮黃酮 H-3 6.301H，s黃酮醇黃酮醇 C-環(huán)無質(zhì)子環(huán)無質(zhì)子異黃酮異黃酮 H-2 7.6 7.801H，s受受1-氧原子和氧原子和4-羰基吸電影羰基吸電影 響響,較大較大二氫黃酮二氫黃酮 H-2 中心中心5.2(1H,dd.Jaa =11.0Hz, Jae = 5.0Hz) 兩

31、個兩個H-3 中心中心2.8 (1H,dd.J偕偕 =17.0Hz, Jaa =11.0Hz) (1H,dd.J偕偕 = 17.0Hz, Jae = 5.0Hz) 二氫黃酮醇二氫黃酮醇 H-2 4.85.01H，d. Jaa= 11.0Hz H-3 4.1 4.31H，d. Jaa=11.0Hz 查耳酮查耳酮 H-a 6.7 7.40 (1H,d.J反反=17.0Hz) H- 7.0 7.70 (1H,d.J反反=17.0Hz) 橙酮橙酮 =CH 6.5 6.701H，s 黃黃 酮酮 黃黃 酮酮 醇醇 異異 黃黃 酮酮 橙橙 酮酮OOHCOOOHCOOHC3223OOCH324564567CC

32、2332C23OOHHHOOHOHHOHH45626a二二 氫氫 黃黃 酮酮 二二 氫氫 黃黃 酮酮 醇醇 查查 耳耳 酮酮 1H-NMR譜在黃酮構(gòu)造研討中的運(yùn)用OOOHOROOOHOHOHHABCOH5AOHOHA67857OR23564OROR23564OROROR235641BBBCH2OH B-H 6. 57. 9ppm, 位于較低場位于較低場 26-H 大大(2H,d. 8.0Hz) 35-H小小(2H,d. 8.0Hz) 2-H7.20(1H,d.2.0Hz) 1 2 5-H6.7 7.1(d.8.0Hz)1A-H 6. 3 7. 1 ppm一一-OH供電供電 6-H7.9(dd.

33、2.0;8.0Hz) 5-H 8. 0 (1H,d. J=8.0Hz) * 3、4-OR取代不同，取代不同， 6-H (1H,dd, J=8. 0;2. 0Hz) -2、6能夠顛倒能夠顛倒 8-H (1H,d, J=2. 0Hz) 2 A-H 5. 7 6. 9 ppm (二二-OH供電供電) 26-H 6.57.5 (2H,s) 6-H 較小較小 (1H,d. J=2. 5Hz) 或分別以雙峰或分別以雙峰J=2.0Hz 8-H 較大較大 (1H,d. J=2. 5Hz) 出現(xiàn)出現(xiàn)取代基團(tuán)取代基團(tuán)三三13C-NMR譜在黃酮類化合物構(gòu)造研討中的運(yùn)用譜在黃酮類化合物構(gòu)造研討中的運(yùn)用 推斷黃酮類化合

34、物的骨架類型 一黃酮類化合物骨架類型的判別一黃酮類化合物骨架類型的判別 利用利用13C-NMR譜中黃酮類化合物的中央三個碳核譜中黃酮類化合物的中央三個碳核信號的位置以及它們在偏共振去偶譜中的裂分情信號的位置以及它們在偏共振去偶譜中的裂分情況況 13C-NMR譜中黃酮類化合物構(gòu)造中的中央三碳核的信號特征譜中黃酮類化合物構(gòu)造中的中央三碳核的信號特征 C=O C-2或C- C-3或C-a 歸屬 174.5184.0 (s) 160.5163.2 (s) 104.7111.8 (d) 黃酮類 149.8155.4 (d) 122.3125.9 (s) 異黃酮類 147.9 (s) .0 (s ) 黃酮

35、醇類 182.5182.7(s) 146.1147.7(s) 111.6111.9 (d) 橙酮類 ( =CH- )188.0197.0 (s) .9145.4 (d) 116.6128.1(d) 查耳酮類 75.080.3 (d) 42.844.6 (t) 二氫黃酮類 82.7(d) 71.2 (d) 二氫黃酮醇類178.4163.2153.6133.7129.0126.3OO131.8131.6125.2125.7124.0118.1107.6129.0126.3二黃酮類化合物取代圖式確實(shí)定二黃酮類化合物取代圖式確實(shí)定 利用黃酮類化合物中芳香碳原子利用黃酮類化合物中芳香碳原子 A-環(huán)碳原子

36、、環(huán)碳原子、B-環(huán)碳原子的信號特征環(huán)碳原子的信號特征 確定取代基的取代圖式黃酮母核黃酮母核13C-NMR信號歸屬信號歸屬推斷取代基推斷取代基X的銜接位置的銜接位置 依取代基的位移效應(yīng)規(guī)律依取代基的位移效應(yīng)規(guī)律 ( B-環(huán)環(huán)) X Zi Zo Zm Zp -OH +26.0 -12.8 +1.6 -7.1 -OCH3 +31.4 -14.4 +1.0 -7.8確定確定5，7-二二OH取代黃酮圖式取代黃酮圖式 依依5，7-二二OH黃酮中的黃酮中的C6和和C8信號特征信號特征 90100ppm范圍內(nèi)范圍內(nèi) C6 C8 確定糖與苷元的銜接位置 依苷化位移規(guī)律 苷元酚羥基：苷元酚羥基： a-C移向高場，

37、移向高場，降低降低 鄰、對位鄰、對位-C移向低場，移向低場，增大增大 糖酚苷：糖酚苷： 端基碳原子端基碳原子+4.0 6.0ppm四四MS在黃酮類化合物構(gòu)造研討中的運(yùn)用在黃酮類化合物構(gòu)造研討中的運(yùn)用M + . M + . 黃酮類化合物黃酮類化合物MS特征特征 測定分子量測定分子量M+ 取代基團(tuán)推斷碎片離子峰苷元極性小 苷極性大、難氣化、與熱不穩(wěn)定 EI-MS以前：苷看不到以前：苷看不到,須制備成衍生物須制備成衍生物PM等方能測得很弱的等方能測得很弱的 方能測得很弱的苷元峰為基峰。方能測得很弱的苷元峰為基峰。 FD-MS、FAB-MS、ESI-MS目前：可測得分子離子峰目前：可測得分子離子峰 或準(zhǔn)分子離子峰或準(zhǔn)分子離子峰M+1、M+23等。等。EI-MS裂解規(guī)律裂解規(guī)律1分子離子峰為基峰分子離子峰為基峰 用于測定分子量。用于測定分子量。2主要碎片離子峰為裂解途徑主