生物化學(xué)第三章氨基酸

1、一一. .氨基酸氨基酸蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子二二. .氨基酸的分類氨基酸的分類三三. .氨基酸的酸堿化學(xué)氨基酸的酸堿化學(xué)四四. .氨基酸的化學(xué)反應(yīng)氨基酸的化學(xué)反應(yīng)五五. .氨基酸的光學(xué)活性和光譜性質(zhì)氨基酸的光學(xué)活性和光譜性質(zhì)六六. .氨基酸的分析分離氨基酸的分析分離蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解作用提供了關(guān)于蛋白質(zhì)的水解作用提供了關(guān)于蛋白質(zhì)組成和結(jié)構(gòu)的極有價值的資料蛋白質(zhì)組成和結(jié)構(gòu)的極有價值的資料, ,根據(jù)水解程度根據(jù)水解程度, ,可分為完全水解和部分水解可分為完全水解和部分水解酸水解酸水解常用常用h h2 2soso4 4或或hclhcl進(jìn)行水解，一般用進(jìn)行水解，一般用6mo

2、l/lhcl6mol/lhcl或或4mol/l h4mol/l h2 2soso4 4；回流煮沸；回流煮沸2020小時可使蛋白質(zhì)完全水小時可使蛋白質(zhì)完全水解。解。trptrp被破壞，被破壞，asnglnasngln酰氨基脫落，羥基酰氨基脫落，羥基aaaa小部分小部分被破壞。被破壞。堿水解堿水解一般與一般與5mol/lnaoh5mol/lnaoh共煮共煮10-2010-20小時可使蛋白小時可使蛋白質(zhì)完全水解。多數(shù)氨基酸被破壞并消旋，堿性條件下質(zhì)完全水解。多數(shù)氨基酸被破壞并消旋，堿性條件下trptrp是穩(wěn)定的是穩(wěn)定的酶水解酶水解不破壞氨基酸，也不消旋，缺點：一種酶往不破壞氨基酸，也不消旋，缺點：一

3、種酶往往水解不徹底，需要幾種酶協(xié)同作用才能使蛋白質(zhì)完往水解不徹底，需要幾種酶協(xié)同作用才能使蛋白質(zhì)完全水解，且作用時間長，一般用于蛋白質(zhì)的部分水解。全水解，且作用時間長，一般用于蛋白質(zhì)的部分水解。l2020種氨基酸除脯氨酸外，其他均具如下結(jié)構(gòu)通式。種氨基酸除脯氨酸外，其他均具如下結(jié)構(gòu)通式。氨基酸在中性氨基酸在中性phph時，羧基以時，羧基以-coo-coo- -， 氨基以氨基以-nh-nh3 3+ +形式存在。氨基酸既含有一個負(fù)電荷又含有一個形式存在。氨基酸既含有一個負(fù)電荷又含有一個正電荷，稱為兼性離子（偶極離子）。正電荷，稱為兼性離子（偶極離子）。2020種氨基種氨基酸除酸除r r基為基為h

4、h外，其外，其- -碳原子是一個手性碳，都碳原子是一個手性碳，都具有旋光性。具有旋光性。coohchh2nr -氨基酸氨基酸可變部分可變部分不變部分不變部分l地球上天然形成的氨基酸有地球上天然形成的氨基酸有180180種以上種以上, ,但是但是 構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸只有構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸只有2020種種, ,且都是且都是-氨基氨基酸（可能還存在更多的）酸（可能還存在更多的）。l什么是什么是-氨基酸呢？氨基酸呢？l答案：答案：l-c-c-c-c-cooh-c-c-c-c-coohl l-c-c-c-c-c-c-c c(nh(nh2 2)-cooh -)-cooh -氨基酸氨基酸 l-c-c-c-c

5、-c c (nh (nh2 2)- c - cooh -)- c - cooh -氨基酸氨基酸 l-c-c-c c (nh (nh2 2)- c - c - cooh -)- c - c - cooh -氨基酸氨基酸 生物體中發(fā)現(xiàn)的氨基酸已有生物體中發(fā)現(xiàn)的氨基酸已有180180多種，但參與蛋白多種，但參與蛋白質(zhì)組成的常見氨基酸只有質(zhì)組成的常見氨基酸只有2020種，不參與蛋白質(zhì)組成種，不參與蛋白質(zhì)組成的稱為非蛋白質(zhì)氨基酸，參與蛋白質(zhì)組成的稱為蛋的稱為非蛋白質(zhì)氨基酸，參與蛋白質(zhì)組成的稱為蛋白質(zhì)氨基酸。白質(zhì)氨基酸。 各種氨基酸的區(qū)別在于側(cè)鏈各種氨基酸的區(qū)別在于側(cè)鏈r r基的不同?；牟煌?。2020種

6、基本種基本氨基酸：氨基酸：按按r r的極性的極性可分為非極性可分為非極性r r基氨基酸、不帶電荷的極性基氨基酸、不帶電荷的極性r r基氨基酸、帶負(fù)電荷的基氨基酸、帶負(fù)電荷的r r基（酸性）氨基酸和帶正基（酸性）氨基酸和帶正電荷的電荷的r r基（堿性）氨基酸四類?；▔A性）氨基酸四類。按按r r的化學(xué)結(jié)構(gòu)的化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸可分為脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸和雜環(huán)族氨基酸三類。脂肪族氨基酸最多。和雜環(huán)族氨基酸三類。脂肪族氨基酸最多。 甘氨酸甘氨酸 glycine 脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸h2nch choho 脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸h2nch cch3oho甘氨酸甘氨酸 g

7、lycine 丙氨酸丙氨酸 alanine 甘氨酸甘氨酸 glycine 丙氨酸丙氨酸 alanine纈氨酸纈氨酸 valine 脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸h2nch cchohoch3ch3 甘氨酸甘氨酸 glycine 丙氨酸丙氨酸 alanine纈氨酸纈氨酸 valine亮氨酸亮氨酸 leucine 脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸h2nch cch2ohoch ch3ch3甘氨酸甘氨酸 glycine 丙氨酸丙氨酸 alanine纈氨酸纈氨酸 valine亮氨酸亮氨酸 leucine異亮氨酸異亮氨酸 ileucine 脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸h2nch cchohoch3ch2ch3 甘氨酸甘氨

8、酸 glycine 丙氨酸丙氨酸 alanine纈氨酸纈氨酸 valine亮氨酸亮氨酸 leucine異亮氨酸異亮氨酸 ileucine脯氨酸脯氨酸 proline 亞亞氨基酸氨基酸hncoho 甘氨酸甘氨酸 glycine 丙氨酸丙氨酸 alanine纈氨酸纈氨酸 valine亮氨酸亮氨酸 leucine異亮氨酸異亮氨酸 ileucine脯氨酸脯氨酸 proline甲硫氨酸甲硫氨酸 methionine 含硫氨基酸含硫氨基酸h2nchcch2ohoch2sch3 甘氨酸甘氨酸 glycine 丙氨酸丙氨酸 alanine纈氨酸纈氨酸 valine亮氨酸亮氨酸 leucine異亮氨酸異亮氨酸

9、ileucine脯氨酸脯氨酸 proline甲硫氨酸甲硫氨酸 methionine半胱氨酸半胱氨酸 cysteine 含硫氨基酸含硫氨基酸h2nch cch2ohosh 芳香族氨基酸芳香族氨基酸苯丙氨酸苯丙氨酸phenylalanineh2nchcch2oho 芳香族氨基酸芳香族氨基酸苯丙氨酸苯丙氨酸phenylalanine酪氨酸酪氨酸t(yī)yrosineh2nchcch2ohooh 芳香族氨基酸芳香族氨基酸苯丙氨酸苯丙氨酸phenylalanine酪氨酸酪氨酸t(yī)yrosine色氨酸色氨酸 tryptophanh2nchcch2ohohn 堿性堿性氨基酸氨基酸精氨酸精氨酸 arginineh2n

10、chcch2ohoch2ch2nhcnh2nh 堿性堿性氨基酸氨基酸精氨酸精氨酸 arginine賴氨酸賴氨酸 lysineh2nch cch2ohoch2ch2ch2nh2 堿性堿性氨基酸氨基酸精氨酸精氨酸 arginine賴氨酸賴氨酸 lysine組氨酸組氨酸 histidineh2nch cch2ohonnh 天冬氨酸天冬氨酸 aspartic acid 酸性氨基酸酸性氨基酸h2nch cch2ohocoho 天冬氨酸天冬氨酸 aspartic acid 谷氨酸谷氨酸 glutamic acid 酸性氨基酸酸性氨基酸h2nch cch2ohoch2coho 絲氨酸絲氨酸 serine 含

11、羥基含羥基氨基酸氨基酸h2nch cch2ohooh 絲氨酸絲氨酸 serine 蘇氨酸蘇氨酸 threonine 含羥基含羥基氨基酸氨基酸h2nch cchohoohch3 天冬酰胺天冬酰胺 asparagine 含酰胺氨基酸含酰胺氨基酸h2nch cch2ohocnh2o 天冬酰胺天冬酰胺 asparagine谷酰胺谷酰胺 glutamine 含酰胺氨基酸含酰胺氨基酸h2nchcch2ohoch2cnh2olg glycine gly 甘氨酸甘氨酸 p proline pro 脯氨酸脯氨酸la alanine ala 丙氨酸丙氨酸 v valine val 纈氨酸纈氨酸 ll leucin

12、e leu 亮氨酸亮氨酸 i isoleucine ile 異亮氨酸異亮氨酸lm methionine met 蛋氨酸蛋氨酸 c cysteine cys 半胱氨酸半胱氨酸ly tyrosine tyr 酪氨酸酪氨酸 w tryptophan trp 色氨酸色氨酸 lh histidine his 組氨酸組氨酸 t threonine thr 蘇氨酸蘇氨酸lk lysine lys 賴氨酸賴氨酸 r arginine arg 精氨酸精氨酸ls serine ser 絲氨酸絲氨酸lf phenylalanine phe 苯丙氨酸苯丙氨酸 ln asparagine asn 天冬酰胺天冬酰胺lq

13、glutamine gln 谷氨酰胺谷氨酰胺ld aspartic acid asp 天冬氨酸天冬氨酸le glutamic acid glu 谷氨酸谷氨酸l在少數(shù)蛋白質(zhì)中分離出一些不常見的氨基酸，通常稱在少數(shù)蛋白質(zhì)中分離出一些不常見的氨基酸，通常稱為不常見蛋白質(zhì)氨基酸。為不常見蛋白質(zhì)氨基酸。l這些氨基酸都是由相應(yīng)的基本氨基酸衍生而來的。這些氨基酸都是由相應(yīng)的基本氨基酸衍生而來的。l其中重要的有其中重要的有4-4-羥基脯氨酸、羥基脯氨酸、5-5-羥基賴氨酸、羥基賴氨酸、n-n-甲基甲基賴氨酸、和賴氨酸、和3,5-3,5-二碘酪氨酸等。這些不常見蛋白質(zhì)氨二碘酪氨酸等。這些不常見蛋白質(zhì)氨基酸的結(jié)構(gòu)

14、如下?；岬慕Y(jié)構(gòu)如下。nhhocooh4-羥基脯氨酸h2nch2chch2ch2chcoohohnh25-羥基賴氨酸nh2ch3nhch2chch2ch2chcooh6-n-甲基賴氨酸hoiich2chcoohnh23,5-二碘酪氨酸 l除了參與蛋白質(zhì)組成的除了參與蛋白質(zhì)組成的2030種氨基酸外，種氨基酸外，還在各種組織和細(xì)胞中找到還在各種組織和細(xì)胞中找到150多種其他多種其他氨基酸。這些氨基酸大多數(shù)是蛋白質(zhì)中氨基酸。這些氨基酸大多數(shù)是蛋白質(zhì)中存在的存在的l型氨基酸的衍生物。型氨基酸的衍生物。l如：如： - -丙氨酸丙氨酸 - -氨基丁酸氨基丁酸 高半胱氨高半胱氨酸酸 高絲氨酸高絲氨酸 鳥氨酸

15、鳥氨酸 瓜氨酸等。瓜氨酸等。氨基酸的離解性質(zhì)氨基酸的離解性質(zhì)l氨基酸在結(jié)晶形態(tài)或在水溶液中，并不是以游離的羧氨基酸在結(jié)晶形態(tài)或在水溶液中，并不是以游離的羧基或氨基形式存在，而是離解成兩性離子。在兩性離基或氨基形式存在，而是離解成兩性離子。在兩性離子中，氨基是以質(zhì)子化子中，氨基是以質(zhì)子化(-nh(-nh3 3+ +) )形式存在，羧基是以離形式存在，羧基是以離解狀態(tài)解狀態(tài)(-coo(-coo- -) )存在。存在。l在不同的在不同的phph條件下，兩性離子的狀態(tài)也隨之發(fā)生變化。條件下，兩性離子的狀態(tài)也隨之發(fā)生變化。coo-chh3n+r-pk1+h+h+coohchh3n+rh+h+pk2-co

16、o-chh2nrph 1 7 10凈電荷凈電荷 +1 0 -1 正離子正離子 兩性離子兩性離子 負(fù)離子負(fù)離子 等電點等電點pi1-氨基參與的反應(yīng)氨基參與的反應(yīng)用途用途：范斯來克法定量測定氨基酸的基本反應(yīng)范斯來克法定量測定氨基酸的基本反應(yīng)。nh2r-ch-cooh + hno2 ohr-ch-cooh + n2 + h2o1-氨基參與的反應(yīng)氨基參與的反應(yīng)用途用途：用于保護(hù)氨基以及肽鏈的氨基端測定等用于保護(hù)氨基以及肽鏈的氨基端測定等。r1cxo+ h2nchcoo-r2x=-cl, oh,-ocoroh-chcoo-r2r1chnoaa的氨基的一個氫原子可被烴基（環(huán)烴及其衍生物）取代 。在弱堿性溶

17、液中，發(fā)生親核芳環(huán)取代反應(yīng)，而生成二硝基苯基aa（dnpaa） （最早sanger用來鑒定多肽或蛋白質(zhì)的氨基端的aa ）1-氨基參與的反應(yīng)氨基參與的反應(yīng)用途用途：用于肽鏈的氨基端測定等用于肽鏈的氨基端測定等。l生成的ptcaa和pthaa均無色，可用層析法分離ledman用于鑒定多肽或蛋白質(zhì)的n末端aal 在多肽和蛋白質(zhì)的aa順序分析方面占有重要地位 用途用途：用于肽鏈的氨基端測定等用于肽鏈的氨基端測定等。1-氨基參與的反應(yīng)氨基參與的反應(yīng)1-氨基參與的反應(yīng)氨基參與的反應(yīng)用途用途：是多種酶促反應(yīng)的中間過程。hoch2chnh2cooh+ch2opo3-cch2oho+h+2ch2opo3-cch

18、2ohn+hhoch2chcooh+ h2o1-氨基參與的反應(yīng)氨基參與的反應(yīng)用途用途：酶催化的反應(yīng)。酶催化的反應(yīng)。rchcoo-nh3+rchcoo-o+nh4+chcoo-nh3+ch2ch2coo-+ch3c ocoo-ch3ccoo-nh3+ccoo-ch2ch2coo-o 氨基酸與堿作用生成相應(yīng)的鹽，如與naoh反應(yīng)得氨基酸鈉鹽。氨基酸的堿金屬鹽能溶于水,而重金屬鹽則不溶于水。 （1 1）成鹽反應(yīng)）成鹽反應(yīng)用途用途：催化劑可用干燥氯化氫氣體或二氯亞催化劑可用干燥氯化氫氣體或二氯亞砜砜 1-氨基參與的反應(yīng)氨基參與的反應(yīng)用途用途：是合成氨基酸?；苌锏闹匾虚g體是合成氨基酸酰基衍生物的重

19、要中間體。r2oh+rchcoo-nh3+ h2orchcoor2nh2.hcl1 1用途用途：這是使氨基酸羧基活化的一個重要反應(yīng)這是使氨基酸羧基活化的一個重要反應(yīng)。pcl3, pcl5 or so cl2r chco o-nh pgrchcoclnhpg用途用途：常作為多肽合成活性中間體（羧基活常作為多肽合成活性中間體（羧基活化）?；chcooch3nhpgrchcoonhnh2nhpgch3ohnh2nh2rchcon3nhpghno3h2o,n2用途用途：酶催化的反應(yīng)（脫羧基反應(yīng)）酶催化的反應(yīng)（脫羧基反應(yīng)）。co2+h+rch2nh2rchcoo-nh3+1 1用途用途：常用于氨基

20、酸的定性或定量分析。常用于氨基酸的定性或定量分析。cccooo茚三酮茚三酮cccooohohh2oh2o水合茚三酮水合茚三酮co2nh2rcho+cccoohohh2nchcoohrcccooohoh+2nh3cccoocccoo-nh4+nh2o2+cccooocccoohho1 1用途用途：是多肽和蛋白質(zhì)生物合成的基本反應(yīng)。是多肽和蛋白質(zhì)生物合成的基本反應(yīng)。h2ncr1hcohoh nhccoohr2h+h2onhccoohr2hh2ncr1hco-肽鍵(1) (1) 巰基（巰基（-sh-sh）的性質(zhì)）的性質(zhì)作用：作用：這些反應(yīng)可用于巰基的保護(hù)這些反應(yīng)可用于巰基的保護(hù)。-oocchch2s

21、hnh3+ch2occlo-oocchch2snh3+occh2och2clch2-oocchch2snh3+ich2cnh2och2cnh2o-oocchch2snh3+(1) (1) 巰基（巰基（-sh-sh）的性質(zhì)）的性質(zhì)作用：作用：與金屬離子的螯合性質(zhì)可用于體內(nèi)解毒與金屬離子的螯合性質(zhì)可用于體內(nèi)解毒。-oocchch2shnh3+coo-ho-hg+-oocchch2snh3+hg+coo-(1) (1) 巰基（巰基（-sh-sh）的性質(zhì)）的性質(zhì)作用：作用：氧化還原反應(yīng)可使蛋白質(zhì)分子中二硫鍵形成或氧化還原反應(yīng)可使蛋白質(zhì)分子中二硫鍵形成或 斷裂斷裂。（過甲酸hcoooh，巰基化合物如r-

22、sh、dtt等）-oocchch2shnh3+-oocchch2shnh3+-oocchnh3+ch2ssch2nh3+ch-ooc胱氨酸胱氨酸(1) (1) 巰基（巰基（-sh-sh）的性質(zhì)）的性質(zhì)作用：作用：可用于可用于比色法定量測定半胱氨酸的含量。（1分子半胱氨酸生成1分子硫硝基苯甲酸）h3nchch2s-coo-+ssno2no2co2hco2h+coo-h3nchch2sco2hno2-s-no2coo-hs-+硝基苯甲酸二硫化合物硝基苯甲酸二硫化合物(dtnb(dtnb)（2）羥基的性質(zhì)羥基的性質(zhì)作用：可用于修飾蛋白質(zhì)。作用：可用于修飾蛋白質(zhì)。-oocchch2ohnh3+fpoc

23、h(ch3)2ooch(ch3)2+-oocchch2onh3+poch(ch3)2ooch(ch3)2二異丙基氟磷酸酯二異丙基氟磷酸酯 dfp （3）咪唑基、苯酚基的性質(zhì)咪唑基、苯酚基的性質(zhì)組氨酸含有咪唑基，它的組氨酸含有咪唑基，它的p pk k2 2值為值為6.06.0，在生理條件下具有緩沖作用。在生理條件下具有緩沖作用。l酪氨酸中的苯酚基可以與重氮化合物酪氨酸中的苯酚基可以與重氮化合物（例如：對氨基苯磺酸的重氮鹽）結(jié)合（例如：對氨基苯磺酸的重氮鹽）結(jié)合生成橘黃色的化合物。生成橘黃色的化合物。l組氨酸的咪唑基組氨酸的咪唑基與重氮苯磺酸與重氮苯磺酸也能形成也能形成相似的化合物，但顏色稍有差異

24、，呈棕相似的化合物，但顏色稍有差異，呈棕紅色。紅色。作用：在序列測定和蛋白質(zhì)化學(xué)修飾中使用作用：在序列測定和蛋白質(zhì)化學(xué)修飾中使用。氨基酸的旋光性氨基酸的旋光性l除甘氨酸外，氨基酸均含有一個手性除甘氨酸外，氨基酸均含有一個手性 - -碳碳原子，因此都具有旋光性原子，因此都具有旋光性。l比旋光度是氨基酸的重要物理常數(shù)之一，比旋光度是氨基酸的重要物理常數(shù)之一，是鑒別各種氨基酸的重要依據(jù)是鑒別各種氨基酸的重要依據(jù) l構(gòu)成蛋白質(zhì)的20種氨基酸在可見光區(qū)都沒有光吸收，但在遠(yuǎn)紫外區(qū)(220nm)均有光吸收。l在近紫外區(qū)(220-300nm)只有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸收光的能力。l酪氨酸的酪氨酸的 ma

25、xmax275nm275nm， 275275=1.4x10=1.4x103 3; ;l苯丙氨酸的苯丙氨酸的 maxmax257nm257nm， 257257=2.0 x10=2.0 x102 2; ;l色氨酸的色氨酸的 maxmax280nm280nm， 280280=5.6x10=5.6x103 3; ;(含苯環(huán)氨基酸大鍵吸收紫外光，故蛋白質(zhì)也具有紫外吸光性，實驗室利用紫外分光光度儀在280nm處測定蛋白質(zhì)含量)l分配柱層析分配柱層析：層析柱中的填充物層析柱中的填充物是一些具有親水性的不溶性物質(zhì)，如纖維素、淀粉、硅膠等。l濾紙層析濾紙層析：濾紙纖維素l薄層層析薄層層析：支持劑涂布在玻璃板上l

26、離子交換層析離子交換層析：陰離子交換樹脂-n(ch3)3oh，陽離子交換樹脂-so3hl電泳電泳：在電場中帶負(fù)電荷蛋白質(zhì)向正極移在電場中帶負(fù)電荷蛋白質(zhì)向正極移動；帶正電荷蛋白質(zhì)向負(fù)極移動。這種現(xiàn)動；帶正電荷蛋白質(zhì)向負(fù)極移動。這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)電泳象稱為蛋白質(zhì)電泳( (electrophoresiselectrophoresis) )。l層析法層析法色層分析法（吸附層析法）色層分析法（吸附層析法）系統(tǒng)的組成固定相（靜相）系統(tǒng)的組成固定相（靜相）流動相（動相）流動相（動相）分配系數(shù)分配系數(shù)描述混合物的在這兩相中的分配情況描述混合物的在這兩相中的分配情況分配定律分配定律當(dāng)一種溶質(zhì)在兩種一定的互不相溶

27、的溶劑中當(dāng)一種溶質(zhì)在兩種一定的互不相溶的溶劑中分配時，在一定的溫度下達(dá)到平衡后，溶質(zhì)在兩相中的濃度分配時，在一定的溫度下達(dá)到平衡后，溶質(zhì)在兩相中的濃度比值為一常數(shù)。即分配系數(shù)（比值為一常數(shù)。即分配系數(shù)（kd）。）。 l ca 在在a相（動相）中的濃度相（動相）中的濃度kdcb在在b相（靜相）中的濃度相（靜相）中的濃度l物質(zhì)分配液液物質(zhì)分配液液固液固液氣液氣液有效分配系數(shù)有效分配系數(shù)某一物質(zhì)在某一物質(zhì)在a相中的總量相中的總量keff=某一物質(zhì)在某一物質(zhì)在b相中的總量相中的總量對液液層析系統(tǒng)：對液液層析系統(tǒng)：cavakeff=-=rd rvcbvbvaa相的體積相的體積vbb相的體積相的體積rva

28、、b兩相的體積比兩相的體積比所以，所以，keff是是rv的函數(shù)，溶質(zhì)的有效分配系數(shù)可以調(diào)節(jié)兩相的函數(shù)，溶質(zhì)的有效分配系數(shù)可以調(diào)節(jié)兩相的體積比而加以改變。的體積比而加以改變。 分離的先決條件：各種分離的先決條件：各種aa成分的分配系數(shù)有差異，差異越成分的分配系數(shù)有差異，差異越大，越容易分開。大，越容易分開。 原理：逆流分配原理：逆流分配 l分配系數(shù)大的物質(zhì)分配系數(shù)大的物質(zhì)(kd=3)沿一毓分溶管沿一毓分溶管的的“移動移動”速度，要比分配系數(shù)小的物質(zhì)速度，要比分配系數(shù)小的物質(zhì)y(kd=1)快，每一種物質(zhì)在一毓分溶管中是相快，每一種物質(zhì)在一毓分溶管中是相當(dāng)集中的，分溶曲線呈峰形，只要用足夠數(shù)當(dāng)集中的

29、，分溶曲線呈峰形，只要用足夠數(shù)目的分溶管，就可使兩個峰彼此分開。目的分溶管，就可使兩個峰彼此分開。 填充劑（支持劑）：具有親水性的不溶物質(zhì)填充劑（支持劑）：具有親水性的不溶物質(zhì) e.g.纖纖維素、淀粉、硅膠維素、淀粉、硅膠 固定相：支持劑附著一層不會流動的結(jié)合水固定相：支持劑附著一層不會流動的結(jié)合水 流動相：沿固定相流過的與它不互溶的溶劑流動相：沿固定相流過的與它不互溶的溶劑 e.g.酚、正丁醇酚、正丁醇原理：原理： 填充劑（分溶管）填充劑（分溶管） 洗脫劑（流動相）洗脫劑（流動相）aa混合樣品在兩相之間分配混合樣品在兩相之間分配分配系數(shù)不同，各成分移動速度不同分配系數(shù)不同，各成分移動速度不同

30、 分步收集分步收集 茚三酮顯色定量茚三酮顯色定量 分配層析分配層析固定相：纖維素上吸附的水固定相：纖維素上吸附的水流動相：展層溶劑流動相：展層溶劑層析時，混合層析時，混合aa在兩相中不斷在兩相中不斷分配，使它們分布在濾紙的不同分配，使它們分布在濾紙的不同位置上。位置上。雙向濾紙層析：雙向濾紙層析：p151 優(yōu)點：分辨率高，所需樣品量微，層析優(yōu)點：分辨率高，所需樣品量微，層析速度快，可使用的支持劑種類多（纖維速度快，可使用的支持劑種類多（纖維素、淀粉、硅膠、素、淀粉、硅膠、m2o3），應(yīng)用廣泛。），應(yīng)用廣泛。步驟：把支持劑涂布在玻璃板上使成一步驟：把支持劑涂布在玻璃板上使成一個均勻的薄層，把藥分

31、析的樣品滴加在個均勻的薄層，把藥分析的樣品滴加在薄層的一端，然后用合適的溶劑在密閉薄層的一端，然后用合適的溶劑在密閉的容器中進(jìn)行展層，使樣品中各個成分的容器中進(jìn)行展層，使樣品中各個成分分離開來，最后進(jìn)行鑒定和定量測定。分離開來，最后進(jìn)行鑒定和定量測定。p152 l注意：注意： aa與樹脂結(jié)合牢固程度與樹脂結(jié)合牢固程度 （aa與樹脂間的親和力）與樹脂間的親和力） l1 、靜電吸引、靜電吸引2 、aa側(cè)鏈與苯乙烯間的疏水相互作用側(cè)鏈與苯乙烯間的疏水相互作用 lph=3 時，時，aa與陽離子交換樹脂之間靜與陽離子交換樹脂之間靜電引力的大?。弘娨Φ拇笮。簤A性堿性aa（r2+）中性）中性aa（r+）酸

32、性酸性aa l洗脫順序：酸性洗脫順序：酸性aa，中性，中性aa，堿性，堿性aa l1 1，醫(yī)藥工業(yè)，醫(yī)藥工業(yè)l 氨基酸輸液氨基酸輸液l 必需氨基酸：蘇氨酸、纈氨酸、亮必需氨基酸：蘇氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、色氨酸、苯氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸丙氨酸、蛋氨酸l 半必需氨基酸：精氨酸、組氨酸是半必需氨基酸：精氨酸、組氨酸是幼兒所必需的。幼兒所必需的。l1 1，精氨酸：對治療高氨血癥、肝機能障礙等，精氨酸：對治療高氨血癥、肝機能障礙等疾病頗有效果；疾病頗有效果；l2 2，天冬氨酸：鉀鎂鹽可用于恢復(fù)疲勞；治療，天冬氨酸：鉀鎂鹽可用于恢復(fù)疲勞；治療低鉀癥心臟病、肝病、糖尿病等。低鉀癥心臟病、肝病、糖尿病等。l3 3，半胱氨酸：能促進(jìn)毛發(fā)的生長，可用于治，半胱氨酸：能促進(jìn)毛發(fā)的生長，可用于治療禿發(fā)癥；甲酯鹽酸鹽可用于治療支氣管炎等；療禿發(fā)癥；甲酯鹽酸鹽可用于治療支氣管炎等；l組氨酸：可擴(kuò)張血管，