臨床微生物學檢驗

1、臨床微生物學檢驗題型單選（4選1）多選（5選多）判斷改錯（錯誤的并改正） 簡答（適當解釋說明）論述（案例分析，具體闡述）1. 細菌大小以微米（pb1）為測量單位。2. 細菌結構：%1 附屬結構：鞭毛、菌毛（光鏡下看不見，不能作為鑒定依據(jù)，沒鑒定價值） 或纖毛；%1 表層結構：糖萼（莢膜或粘液層）；%1 內部結構：細胞質、質粒、芽孑包。3. 細菌功能：%1 動力（鞭毛是細菌的運動器官），觀察細菌動力可用懸滴法或壓滴法 在顯微鏡下直接觀察其運動，也可將細菌穿刺接種半固體培養(yǎng)基觀察動力。鞭毛具有鑒定價值，采用鞭毛特殊染色（如鍍銀染色）可觀察有無鞭 毛及鞭毛數(shù)量、分布；一般染色不能看見鞭毛（如革蘭氏染

2、色）。4芽砲的功能：對熱力、干燥、輻射、化學消毒劑等具有強人抵抗力；%1 以是否殺死芽孑包作為物品消毒滅菌判斷效果的指標。%1 芽他在菌體的位置和直徑人小隨菌種不同，這種形態(tài)特點有助于 細菌鑒別。5. 細菌生長曲線（要求整個過程，結合生長曲線記憶4個時期比較容易，可能是簡 答題）細菌二分裂方式進行繁殖。以傾注平板法計數(shù)孵育后的菌落數(shù)換算菌落形成單位（cfu） o生長曲線：連續(xù)檢測細菌不同培養(yǎng)吋間的cfu,以cfu為縱坐標，培養(yǎng)時間為 橫坐標作出一條反映細菌生長數(shù)變化的規(guī)律曲線。典型的生長曲線分為遲緩期、對數(shù)生長期、穩(wěn)定期、衰亡期。%1 遲緩期。也稱為準備時期，是細菌適應環(huán)境的過程。特點：細菌的

3、核酸、 蛋白質、輔酶等物質合成增加，細胞體積增人，細菌數(shù)量恒定或極少量增加。%1 對數(shù)生長期。特點：細菌以最大的速率生長和分裂，細菌數(shù)量成對數(shù)增 加。細菌代謝活躍、穩(wěn)定，其人小、形態(tài)、染色性和?；磻湫?，對外界因索反應敏感，是檢測細菌生物7性狀和進行藥物敏感性試驗的適宜階段。不添加培養(yǎng)基 下-般細菌對數(shù)期維持48h。%1 穩(wěn)定期。特點：由于培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質消耗、有害代謝產(chǎn)物積累和ph等 環(huán)境變化，細菌生長速率降低，細菌死亡數(shù)增加使生長繁殖菌數(shù)和死廣菌數(shù)處丁動 態(tài)平衡，細菌數(shù)量達到最大，即處于穩(wěn)定期。此時期細菌合成代謝產(chǎn)物較多，通常 維持10h。向培養(yǎng)基系統(tǒng)中補充營養(yǎng)物質，取走代謝產(chǎn)物，改善培

4、養(yǎng)條件，可延長 穩(wěn)定期。由于代謝產(chǎn)物較多，是細菌?；磻囼炶b定的最佳時期。%1 衰亡期。特點：細菌死亡速率逐步増加，活菌數(shù)減少，死亡數(shù)大于增加 數(shù)，細菌形態(tài)不典型，甚至出現(xiàn)自溶，該時期的細菌不能用于細菌的鑒定和研究丁 作o6. 細菌的生化反應：山于不同細菌所具有的酶系統(tǒng)各不相同，對營養(yǎng)物質的分解能 力也不一致，因而其代謝產(chǎn)物不同。根據(jù)此特點，利用生化試驗的方法來檢測細菌 對各種基質的代謝作用及英代謝產(chǎn)物，從而鑒別細菌的反應。7. 滅菌：破壞和去除物體上所有微生物（包括病原微生物和非病原微生物）和細 菌芽他的方法。消毒：是破壞物體上活的病原微生物的方法，但不包括細菌芽他和非病原微生 物。防腐：

5、直接使用防腐劑破壞或抑制活病原微生物的方法。無菌：防止感染病原休進入滅菌組織或物品的操作技術稱為無菌操作，無菌即不 存在活微生物。第四章1 病毒的大小以納米（nm）測量單位。2. 病毒的結構:分為基本結構和輔助結構。基本結構：包括核心（含一種類型核酸即dna或rna）和衣 殼（蛋白質結構），二者構成核衣殼。輔助結構：包膜（功能：維護病壽體結構的完幣性；與宿主 細胞膜親和及融合；決定病毒種、型抗原的特異性）和其他輔助結構（纖維刺突 或纖突）。第七章1. 細菌標本采集原則：%1 盡早采集。一旦懷疑細菌感染，應及時采集標本進行細菌學檢驗， 對細菌感染的診斷和治療具有極其重要意義。%1 選擇不同采集時

6、機和標本種類。根據(jù)臨床癥狀和流行病學資料可預 測感染性疾病的病原體，根據(jù)病程和感染部位的不同，選擇合適時機采集不同種類 標木。%1 在抗生素應用前采集。感染可帶來生命危險，臨床醫(yī)生會在細菌學 檢驗出結果之前使用抗生素治療，抗生索的使用將影響病原菌的檢出。因此應盡可 能在抗生素使用前留取標本。%1 遵導無菌操作。在采取如腦脊液、血液或穿刺液等正常狀態(tài)下的無 菌部位標本，應嚴格注意無菌操作，不得被英他部位細菌污染。在有正常菌群寄居 的部位，如口咽部、鼻咽部和泌尿生殖道等部位應采取措施避免正常菌群的和英他 菌群的污染。盛放標本的容器應無菌。%1 正確保存和運送。采集的標本均含有病原體或潛在的病原體，

7、必須 做好標木的正確保存和運送，容器應密封不易碎，標木不得污染容器的口和外壁。 采集的標木應及時運送，遠距離運送時，一般應冷藏（但對腦膜炎和淋病奈瑟菌， 需保溫3537°c） o2. 細菌的生理生化特征檢測（其中為碳水化合物的代謝試驗，為蛋白質和 氨基酸的代謝試驗，為碳源和氮源利用試驗）%1 氧化發(fā)酵試驗（of試驗）。又稱hughleifson （hl）試驗。必須在有氧 環(huán)境中才能分解葡萄糖的是專性需氧菌；無論在冇氧或無氧的環(huán)境中都能分解葡萄 糖的是兼性厭氧菌。細菌以分了氧作為電了受體分解葡萄糖的稱為氧化型；細菌以 無氧降解的方式分解葡萄糖的稱為發(fā)酵型；不能分解葡萄糖的細菌稱為產(chǎn)堿型

8、。利 用此試驗可區(qū)分細菌的代謝類型。用丁細菌種屈間的鑒別。腸桿菌科細菌為發(fā)酵型，非發(fā)酵菌通常為氧化型或產(chǎn) 堿型。微球菌屬可氧化葡萄糖，葡萄球菌屬能發(fā)酵葡萄糖。%1 甲基紅（mr）試驗。原理：細菌在代謝過程小分解葡萄糖產(chǎn)牛內酮酸，某些細菌可進一步將內酮 酸分解為乳酸、乙酸、甲酸等，使培養(yǎng)基的ph下降至4.5以下，加入?yún)n基紅指示 劑出現(xiàn)紅色邙口性）。有些細菌分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生的酸進一步轉化為其 他物質，培養(yǎng)基的酸堿度維持在ph6.2以上，加入甲基紅指示劑呈黃色（陰性）。主要用于大腸埃希菌邙h性）和產(chǎn)氣腸桿菌（陰性）的鑒別。沙門菌屬、志 賀菌屬、枸椽酸桿菌屬、變形桿菌屬等為陽性，腸桿菌屬、克

9、雷伯菌屬等為陰性。%1 vp試驗。原理：細菌在葡萄糖的代謝過程屮生成丙酮酸，有些細菌可將丙酮酸進一步 脫酸產(chǎn)生乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在堿性溶液中被空氣中的氧氧化為二乙酰 （丁二酮），進而與培養(yǎng)基屮的精氨酸所含的肌基發(fā)生反應，生成紅色化合物 （vp反應陽性）。vp試驗常與與甲基紅試驗一起使用，兩試驗的結果陽性、陰性和反。即甲 基紅試驗為陽性的細菌，在vp試驗中則為陰性（如大腸埃希菌、沙門菌屬、志賀 菌屬）;叩基紅試驗為陰性的細菌，在vp試驗屮則為陽性（沙雷菌屬、陰溝腸桿 菌）。%1 呵喙試驗。原理：細菌分解蛋白豚中的色氨酸，牛成刪味，與試劑中的對二甲氨基苯甲 酸作用，形成紅色的玫瑰ii引味。

10、主要用于腸桿菌科細菌的鑒定。%1 枸椽酸鹽利用試驗。當細菌利用錢鹽作為唯一氮源，利用枸椽酸鹽作為唯一 碳源時，可在枸椽酸鹽培養(yǎng)基上生長分解枸椽酸鈉，使培養(yǎng)基變堿（陽性）。有助 于腸桿菌科細菌的鑒定。%1 氧化酶試驗。試驗結果未產(chǎn)生顏色反應（如腸桿菌科）為陰性，產(chǎn)生顏色反 應（如弧菌科、奈瑟菌屬）為陽性。%1 卵磷脂酶試驗。產(chǎn)生卵磷脂酶的細菌，會在菌落周圍形成乳口色混濁環(huán)并擴 大邙h性）。用丁產(chǎn)氣莢膜梭菌的鑒定。%1 optochin敏感試驗。兒乎所有的肺炎鏈球菌都敏感，其他鏈球菌則耐藥。%1 桿菌肽敏感試驗。a群鏈球菌對桿菌肽幾乎100%敏感，其他群鏈球菌對桿 菌肽通常耐藥。%1 凝固酶試驗。

11、金黃色葡萄球菌產(chǎn)生凝固酶，使血漿凝固（陽性）。表皮及腐 生葡萄球菌的凝i古i酶（陰性）。imvic （i指口引味試驗，m指甲基紅試驗，v指vp試驗，c指枸橡酸鹽試驗） 試驗的兩種細菌的試驗結果：大腸埃希菌+產(chǎn)氣腸桿菌 一一 +3. 病毒人小的測定方法：電了顯微鏡育接測量；超過濾法；超速離心法。4. 分離培養(yǎng)病毒的方法主要有三種：動物接種；雞胚培養(yǎng)；組織培養(yǎng)。組織培養(yǎng)為主耍的病毒分離培養(yǎng)技術，廣泛使用的組織培養(yǎng)技術是細胞培養(yǎng)。根據(jù)細胞的來源、染色體特性和傳代次數(shù)的不同，分為：原代和次代細胞培養(yǎng) （是正常細胞）二倍體細胞培養(yǎng)（是正常細胞，廣泛用:病毒分離和疫苗制備） 傳代細胞培養(yǎng)（類似腫瘤細胞，常用于病毒的分離和鑒定，不能用于疫苗制備） 5 .病毒的理化性狀的檢測：%1 有包膜病毒對乙儲、氯仿、膽鹽等脂溶劑均皺感，無包膜病毒對脂溶劑 有抵抗。即乙瞇敏感試驗小有包膜病毒為陽性，無包膜病毒為陰性。%1 耐酸性試驗中，不同ph值下不同病毒會被很快滅活。如腸道病毒可耐 ph3,鼻病毒在ph3-5環(huán)境中很快被滅活。6試比較病毒與細菌的異同處？區(qū)分細菌的芽抱和真菌的砲子（補充）7.