流式演示文稿(2010研究生)

1、流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞儀 2010年3月流式細(xì)胞儀簡(jiǎn)介流式細(xì)胞儀（Flow Cytometry, FCM）是檢測(cè)細(xì)胞各種成分的重要細(xì)胞生物學(xué)工具。定量檢測(cè)細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中的各種細(xì)胞成分；研究細(xì)胞的各種功能狀態(tài)(細(xì)胞增殖，細(xì)胞凋亡、細(xì)胞分化、酶活性、細(xì)胞膜通透性、氧化還原狀態(tài)、吞噬性等)；測(cè)量細(xì)胞或亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的新型分析技術(shù)和分選技術(shù)。主要包括了樣品的液流技術(shù)、計(jì)數(shù)技術(shù)和細(xì)胞的分選，以及數(shù)據(jù)的采集和分析技術(shù)等。 BD FACSCalibur流式細(xì)胞分析儀流式細(xì)胞分析儀COULTER MAXM血細(xì)胞流式分析儀 美國(guó) 流式細(xì)胞分析儀流式細(xì)胞分析儀 德國(guó)德國(guó)流式細(xì)胞儀的特點(diǎn)：測(cè)量速度快。最快可在1秒

2、種內(nèi)計(jì)測(cè)數(shù)萬(wàn)個(gè)細(xì)胞；可進(jìn)行多參數(shù)測(cè)量?？梢詫?duì)同一個(gè)細(xì)胞做有關(guān)物理、化學(xué)特性的多參數(shù)測(cè)量，并具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；是一門綜合性的高科技技術(shù)。它綜合了激光技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、圖像技術(shù)等多領(lǐng)域的知識(shí)和成果；既是細(xì)胞分析技術(shù)，又是精確的分選技術(shù)。 流式細(xì)胞儀的構(gòu)造流式細(xì)胞儀主要由五部分組成1.流動(dòng)室和液流系統(tǒng)；2.激光源和光學(xué)系統(tǒng)；3.光電管和檢測(cè)系統(tǒng)；4.計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)；5.細(xì)胞分選系統(tǒng) 1.流動(dòng)室的基本結(jié)構(gòu)流動(dòng)室是儀器的核心部件，被測(cè)樣品在此與激光相交，得到準(zhǔn)確的細(xì)胞熒光信息。將待測(cè)細(xì)胞染色后制成單細(xì)胞懸液。用一定壓力將待測(cè)樣品壓入流動(dòng)室，不含細(xì)胞的磷酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴

3、出，鞘液管入口方向與待測(cè)樣品流成一定角度，鞘液包裹著樣品高速流動(dòng)，組成一個(gè)圓形的流束，待測(cè)細(xì)胞在鞘液的包裹下單行排列，依次通過檢測(cè)區(qū)域。液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)進(jìn)樣速率： 改變樣本的進(jìn)樣速率開關(guān)，可提高采樣分析的速度，但是，這并不是提高樣本的速度，而是改變了細(xì)胞的距離（整個(gè)系統(tǒng)運(yùn)行中流速是不變的）。從圖可以看出，樣本流變寬，細(xì)胞間距離縮短，這樣單位時(shí)間內(nèi)流經(jīng)激光區(qū)的細(xì)胞就增加。Lo:12L/min、 Med:35L/min、Hi:60L/min2.激光源和光學(xué)系統(tǒng)通常以激光作為發(fā)光源（氬離子氣體激光器和小功率半導(dǎo)體激光器）。經(jīng)過聚焦整形后的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下，產(chǎn)生散

4、射光和激發(fā)熒光。光散射信號(hào)在前向小角度進(jìn)行檢測(cè)，這種信號(hào)基本上反映了細(xì)胞體積的大??；熒光信號(hào)的接受方向與激光束垂直，經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個(gè)不同波長(zhǎng)的熒光信號(hào)。這兩種信號(hào)同時(shí)被前向光電二極管和90方向的側(cè)向光電倍增管接收。 FACSCalibur流式細(xì)胞儀的光平臺(tái)系統(tǒng)流式細(xì)胞儀的光平臺(tái)系統(tǒng) 3.光電管和檢測(cè)系統(tǒng)：經(jīng)熒光染色的細(xì)胞受合適的光激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光是通過光電轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變成電信號(hào)而進(jìn)行測(cè)量的。二種探測(cè)器和二類放大器二種探測(cè)器:光電二極管和光電倍增管。光電二極管對(duì)光的敏感度低于光電倍增管,用于探測(cè)FSC,因FSC是強(qiáng)信號(hào)。光電倍增管（PMTs）用于探測(cè)SSC,FL1

5、,FL2,FL3,因?yàn)樗鼈兪侨跣盘?hào)。PMT的響應(yīng)時(shí)間短，僅為ns數(shù)量級(jí)；光譜響應(yīng)特性好，在200900nm的光譜區(qū)，光量子產(chǎn)額都比較高。光電倍增管的增益從103到108可連續(xù)調(diào)節(jié)，因此對(duì)弱光測(cè)量十分有利。兩類放大器:一類是輸出信號(hào)輻度與輸入信號(hào)成線性關(guān)系，稱為線性放大器。另一類是對(duì)數(shù)放大器，輸出信號(hào)和輸入信號(hào)之間成常用對(duì)數(shù)關(guān)系。放大器的作用:可對(duì)信號(hào)進(jìn)行微調(diào)。通過對(duì)FSC,SSC,FL1,FL2,FL3設(shè)置放大模式和微調(diào)放大增益獲得最佳細(xì)胞信號(hào)。這是因?yàn)閺腜MT輸出的電信號(hào)仍然較弱，需要經(jīng)過放大后才能輸入分析儀器。4.計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)經(jīng)放大后的電信號(hào)被送往計(jì)算機(jī)分析器。 熒光信號(hào)的強(qiáng)度代表了所

6、測(cè)細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度，經(jīng)光電倍增管接收后轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，再通過模數(shù)轉(zhuǎn)換器，將連續(xù)的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識(shí)別的數(shù)字信號(hào)。計(jì)算機(jī)把所測(cè)量到的各種信號(hào)進(jìn)行計(jì)算機(jī)處理，將分析結(jié)果顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上，也可以打印出來(lái)，還可以數(shù)據(jù)文件的形式存儲(chǔ)在硬盤上以備日后的查詢或進(jìn)一步分析。流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞儀系統(tǒng)流程： 標(biāo)本激光系統(tǒng)流動(dòng)系統(tǒng)信號(hào)處理系統(tǒng)放大系統(tǒng)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)結(jié)果打印5.細(xì)胞分選系統(tǒng)細(xì)胞的分選是通過分離含有單細(xì)胞的液滴而實(shí)現(xiàn)的。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)超高頻電晶體，充電后振動(dòng)，使噴出的液流斷裂為均勻的液滴，待測(cè)定細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負(fù)不同的電荷，當(dāng)液滴流經(jīng)帶有幾千伏

7、特的偏轉(zhuǎn)板時(shí)，在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉(zhuǎn)，落入各自的收集容器中，不予充電的液滴落入中間的廢液容器，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。 流式細(xì)胞儀有關(guān)的測(cè)量參數(shù)及數(shù)據(jù)處理測(cè)量參數(shù)：檢測(cè)數(shù)據(jù)的顯示視測(cè)量參數(shù)的不同有多種形式可供選擇。FSC(Forward Scatter),SSC(Side Scatter),第一激光（488nm）激發(fā)出的FL1,FL2,FL3,第二激光（635nm）激發(fā)出的FL4。數(shù)據(jù)處理：主要包括數(shù)據(jù)的顯示和分析。流式數(shù)據(jù)可以用一維直方圖、二維散點(diǎn)圖、等高線圖、密度圖等來(lái)表示。 激發(fā)光光源波長(zhǎng)激發(fā)光光源波長(zhǎng)488nm的示意圖的示意圖u測(cè)量參數(shù)：1.散射光信號(hào)：前向角散射和側(cè)向角散射（細(xì)胞的物理固

8、有參數(shù)）(1)前向角散射，即FSC與細(xì)胞的大?。ㄖ睆降钠椒剑┫嚓P(guān)，我們平時(shí)上機(jī)的時(shí)候，有時(shí)用FSC做閾值，排除樣品中的各種碎片及鞘液中的小顆粒，以避免對(duì)被測(cè)細(xì)胞的干擾。（一般流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞儀能夠測(cè)量到0.2m0.5m）。 (2)側(cè)向角散射，即SSC是指與激光束正交90度方向的散射信號(hào)，它對(duì)細(xì)胞膜、胞質(zhì)、核膜的折射率更為敏感，可以提供有關(guān)細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)及顆粒性質(zhì)的信息。（這兩種信號(hào)來(lái)自于激光原光束，波長(zhǎng)與激光相同）利用這兩個(gè)參數(shù)可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分群，通過設(shè)門就可以將具有一定SSC和FSC的細(xì)胞群從大量細(xì)胞中區(qū)分出來(lái)。細(xì)胞的光散射特性根據(jù)FSC/SSC，可區(qū)分裂解紅細(xì)胞處理后外周血白細(xì)胞中的淋巴

9、細(xì)胞、單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞三個(gè)細(xì)胞群體，或在未進(jìn)行裂解紅細(xì)胞處理的全血樣本中找出血小板和紅細(xì)胞等細(xì)胞群體。R1FSC、SSC二維散點(diǎn)圖2.熒光信號(hào)：當(dāng)激光光束與細(xì)胞正交時(shí)，一般會(huì)產(chǎn)生兩種熒光信號(hào)。一種是細(xì)胞自身在激光照射下發(fā)出微弱的熒光信號(hào)，稱為細(xì)胞自發(fā)熒光；另一種是經(jīng)過特異熒光素標(biāo)記細(xì)胞后，受激發(fā)照射得到的特異熒光信號(hào)，通過對(duì)這類熒光信號(hào)的檢測(cè)和定量分析就能了解所研究細(xì)胞參數(shù)的存在與定量。測(cè)量熒光信號(hào)的主要參數(shù)：（1）熒光信號(hào)的線性測(cè)量和對(duì)數(shù)測(cè)量模式（2）細(xì)胞高度、面積和寬度的熒光信號(hào)測(cè)量（3）光譜重疊的校正(調(diào)節(jié)熒光補(bǔ)償電壓)， 因FL1、FL2、FL3是來(lái)自于同一點(diǎn)光源，它們之間的補(bǔ)償是

10、不可避免的。（1）熒光信號(hào)線性測(cè)量和對(duì)數(shù)測(cè)量模式線性測(cè)量：輸出信號(hào)與輸入信號(hào)成線性關(guān)系。適用于在較小范圍內(nèi)變化的信號(hào)以及代表生物學(xué)線性過程的信號(hào)，例DNA、RNA、總蛋白含量的測(cè)量。對(duì)數(shù)測(cè)量：輸出信號(hào)和輸入信號(hào)之間成常用對(duì)數(shù)關(guān)系。在免疫學(xué)測(cè)量中常使用對(duì)數(shù)測(cè)量。細(xì)胞膜表面抗原的分布有時(shí)要相差幾十倍甚至幾萬(wàn)倍。如用線性放大器，將無(wú)法在一張圖上清晰地將細(xì)胞陽(yáng)性群、陰性群同時(shí)顯示出來(lái)。 （2）熒光信號(hào)的高度、面積和寬度熒光信號(hào)的高度熒光信號(hào)的高度（ 如FL2-H）是對(duì)細(xì)胞高度的熒光信號(hào)的測(cè)量。一般都采用此參數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，因?yàn)榧?xì)胞高度的熒光信號(hào)雖有差異，但不影響陰性群和陽(yáng)性群細(xì)胞在各區(qū)域的分布，從而通過統(tǒng)

11、計(jì)學(xué)（正態(tài)分布）得到它們各自分布在不同區(qū)域的百分含量。熒光信號(hào)的面積所謂熒光信號(hào)的面積是采用對(duì)熒光光通量進(jìn)行積分測(cè)量，一般對(duì)DNA倍體測(cè)量時(shí)采用面積（如FL2-A），這是因?yàn)闊晒饷}沖的面積比熒光脈沖的高度更能準(zhǔn)確反應(yīng)DNA的含量，當(dāng)形狀差異較大，而DNA含量相等的二個(gè)細(xì)胞，得到的熒光脈沖高度是不等的，而經(jīng)過對(duì)熒光信號(hào)面積積分后，所得到的信號(hào)值就相等。熒光信號(hào)的寬度寬度（如FL2-W）常用來(lái)區(qū)分雙聯(lián)體細(xì)胞，由于DNA樣本極容易聚集，當(dāng)兩個(gè)G1期細(xì)胞粘連在一起時(shí)，其測(cè)量到的DNA熒光信號(hào)（FL2-A）與G2期細(xì)胞相等，這樣得到的測(cè)量數(shù)據(jù)G2期細(xì)胞比例會(huì)增高，影響測(cè)量準(zhǔn)確性，通過設(shè)“門”排除雙聯(lián)體細(xì)

12、胞，其原理是雙聯(lián)體細(xì)胞所得到的熒光信號(hào)（FL2-W）比單個(gè)G2期細(xì)胞大，設(shè)“門”后得到真正的DNA含量分布曲線和細(xì)胞周期。小牛胸腺細(xì)胞的DNA分布曲線（3）光譜重疊的校正當(dāng)細(xì)胞攜帶兩種熒光素（PE和FITC）受激光激發(fā)而發(fā)射出兩種不同波長(zhǎng)的熒光時(shí)，理論上，可選擇濾片使每種熒光僅被相應(yīng)的檢測(cè)器檢測(cè)到，而不會(huì)檢測(cè)到另一種熒光。由于目前使用的各種染料都是寬發(fā)射譜性質(zhì)，雖然它們之間各自發(fā)射峰值各不相同，但發(fā)射譜范圍有一定的重疊，克服這種誤差的最有效方法是使用熒光補(bǔ)償電路。FITC探測(cè)器會(huì)探測(cè)到少量的 PE光譜，而PE探測(cè)器則探測(cè)到較多的FITC光譜。補(bǔ)償前后模型圖數(shù)據(jù)處理：u 直方圖：顯示一個(gè)參數(shù)與細(xì)

13、胞之間的關(guān)系。 每一個(gè)細(xì)胞單參數(shù)的測(cè)量數(shù)據(jù)可以整理成統(tǒng)計(jì)分布，以直方圖的方式來(lái)顯示。在圖中，橫坐標(biāo)表示熒光信號(hào)或散射光信號(hào)相對(duì)強(qiáng)度的值，其單位是道數(shù)，可以是線性（line）或者對(duì)數(shù)（log）?？v坐標(biāo)是細(xì)胞數(shù)。2N代表G0/G1期細(xì)胞，4N代表G2/M期細(xì)胞，兩者中間代表S期細(xì)胞。這是以2倍體和4倍體細(xì)胞為主的流式DNA圖。 DNA周期檢測(cè)中的死亡和凋亡圖中100101（M1）為陰性細(xì)胞，101以上的（M2）為陽(yáng)性細(xì)胞。 u散點(diǎn)圖散點(diǎn)圖：散點(diǎn)圖常被用來(lái)分析多參數(shù)數(shù)據(jù)，如CD4、CD8、CD34、CD45等分子的表達(dá)，以及凋亡周期特異性，早期凋亡的檢測(cè)等 細(xì)胞凋亡的檢測(cè)結(jié)果：橫坐標(biāo)是Annexin

14、-V FITC, 縱坐標(biāo)是PI，右上象限代表死亡的細(xì)胞，左下象限是存活的細(xì)胞，右下象限是凋亡的細(xì)胞。 雙染色區(qū)分凋亡和死亡的細(xì)胞Annexin V-FITC/PI染色右上角表示：壞死晚期凋亡在實(shí)際應(yīng)用中，可根據(jù)需要選擇匹配，以便了解和獲得盡可能多的有用信息。流式細(xì)胞儀的常用技術(shù)參數(shù)為了表征儀器性能，往往根據(jù)使用目的和要求而提出幾個(gè)技術(shù)參數(shù)或指標(biāo)來(lái)定量說明。1.熒光分辨率2.熒光靈敏度3.適用樣品濃度4.分選純度5.分析測(cè)量參數(shù) （1）熒光分辨率：強(qiáng)度一定的熒光在測(cè)量時(shí)是在一定道值上的一個(gè)正態(tài)分布的峰，熒光分辨率是指兩相鄰的峰可分辨的最小間隔。通常用變異系數(shù)（C.V值）來(lái)表示。（2）熒光靈敏度：

15、反映儀器所能探測(cè)的最小熒光光強(qiáng)的大小。一般用熒光微球上所標(biāo)可測(cè)出的FITC的最少分子數(shù)來(lái)表示。目前儀器均可達(dá)到1000左右。（3）分析速度/分選速度：儀器每秒種可分析/分選的數(shù)目。一般分析速度為500010000；分選速度掌握在1000以下（300/s）。（4）樣品濃度：主要給出儀器工作時(shí)樣品濃度的適用范圍。一般在105107細(xì)胞/ml的數(shù)量級(jí)。 （5）分析測(cè)量參數(shù) : FSC,SSC,FL1,FL2,FL3,FL4、 FL2- A, FL2- W及線性和對(duì)數(shù)測(cè)量模式。常用流式軟件常用流式軟件1.cellquestcellquest是BD公司推出的針對(duì)流式的試驗(yàn)數(shù)據(jù)獲取和分析軟件。界面友好，操

16、作簡(jiǎn)單，是目前流式相關(guān)軟件中應(yīng)用最多的軟件之一。獲取：建立檢測(cè)模板（選測(cè)樣通道、設(shè)“門”、作象限圖、直方圖），調(diào)節(jié)探測(cè)器和確定放大器測(cè)量模式可使所需信號(hào)出現(xiàn)在二維點(diǎn)圖的適當(dāng)位置。（顆粒通過激光束時(shí)產(chǎn)生光信號(hào)，然后轉(zhuǎn)換成電信號(hào)，并在點(diǎn)圖上相對(duì)應(yīng)于一個(gè)道值）。分析：建立分析模板（設(shè)“門”、作象限圖、直方圖），經(jīng)數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)后得到分析結(jié)果。設(shè)門的概念所說的設(shè)門，是指在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，所設(shè)的選擇區(qū)域，可以用“門”選擇感興趣的細(xì)胞群。（設(shè)門技術(shù)比較復(fù)雜，染色和上機(jī)都需要操作人員有一定的經(jīng)驗(yàn)）。數(shù)據(jù)分析Cellquest的儀器控制：有二種探測(cè)器：光電二極管和光電倍增管(PMTs)光電二極管用于探測(cè)FSC ，因?yàn)镕

17、SC是強(qiáng)信號(hào)?？赏ㄟ^調(diào)電壓選擇對(duì)FSC信號(hào)的不同放大。光電倍增管(PMTs)用于探測(cè)SSC、FL1、FL2、FL3 、FL4，因?yàn)樗鼈兪侨跣盘?hào)。 PMTs的電壓調(diào)節(jié)從150-999。當(dāng)電壓上升時(shí)，信號(hào)增加，數(shù)據(jù)出現(xiàn)在道值較高處。放大器：可對(duì)信號(hào)進(jìn)行微調(diào)。對(duì)FSC、 SSC、FL1、FL2、FL3可設(shè)置放大模式和放大增益。放大模式選擇Lin（線性），放大器的增益在1-9.99之間調(diào)節(jié)。放大模式選擇Log（對(duì)數(shù)），放大器的增益不可調(diào)節(jié)。對(duì)數(shù)常用于分開陰性信號(hào)和弱陽(yáng)性信號(hào)。（E00、E01、E02、E03、E-1表示將信號(hào)放大100、101、102、103、10-1倍）閾值：可用來(lái)設(shè)置低于該道值的數(shù)

18、據(jù)信號(hào)不被處理，只有高于或等于閾值道數(shù)的信號(hào)才傳送到計(jì)算機(jī)進(jìn)行處理。在免疫表型中，在FSC上設(shè)閾值。在DNA分析中，在FL2上設(shè)閾值。補(bǔ)償：當(dāng)樣本用2色或3色熒光染色時(shí)需調(diào)節(jié)補(bǔ)償以消除光譜重疊。補(bǔ)償調(diào)節(jié)量依賴于探測(cè)器的電壓。當(dāng)補(bǔ)償過后的群體與陰性群體一致時(shí)，補(bǔ)償調(diào)節(jié)正確。鼠中人造血干細(xì)胞表型分析 (雙染色）File: 2006/9/19 45/34.002Acquisition Date: 19-Sep-06QuadEvents% Gated % Total X Geo MeanUL10.010.0113.10UR190.210.1927.88LL903299.6690.322.11LR110

19、.120.1116.82File: 2006/9/19 45/34.003Acquisition Date: 19-Sep-06QuadEvents% Gated % Total X Geo MeanUL70.080.077.07UR5506.165.50138.26LL574564.3757.451.89LR262329.3926.23100.75File: 2006/9/19 45/34.003Acquisition Date: 19-Sep-06QuadEvents% Gated % Total X Geo MeanUL00.000.00*UR63818.706.38150.29LL70

20、.210.0713.97LR276781.1027.6799.08File: 2006/10/24 Yang.001Acquisition Date: 24-Oct-06QuadEvents % Gated % Total X Geo MeanUL130.140.1313.44UR560.600.5646.56LL921698.7792.164.14LR460.490.4628.67File: 2006/10/24 Yang.002Acquisition Date: 24-Oct-06QuadEvents % Gated % Total X Geo MeanUL128313.6212.833.

21、66UR500.530.5042.45LL806885.6480.683.61LR200.210.2028.21R1Control人造血干細(xì)胞表型分析 (單染色）畢赤酵母發(fā)酵液中細(xì)胞活性的檢測(cè)（PI染色) R2R1亞洲玉米螟昆蟲細(xì)胞周期的獲取流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)畢赤酵母發(fā)酵過程中胞內(nèi)活性氧水平左下區(qū)域?yàn)殡p陰性區(qū)(DCF-PI-)，對(duì)應(yīng)于無(wú)(或低)ROS積累活細(xì)胞；右下區(qū)為DCF陰性PI陽(yáng)性區(qū)(DCF-PI+)，為無(wú)(或低)ROS積累的死亡細(xì)胞；左上為DCF陽(yáng)性PI陰性區(qū)(DCF+PI-)高ROS積累活細(xì)胞；右上為雙陽(yáng)性區(qū)(DCF+PI+)，為高ROS積累死亡細(xì)胞。File: 2007/12/28 G

22、FP Liu.001Acquisition Date: 28-Dec-07QuadEvents % Gated % TotalUL00.000.00UR160.170.16LL946699.1694.66LR640.670.64File: 2007/12/28 GFP Liu.009Acquisition Date: 28-Dec-07QuadEvents % Gated % TotalUL00.000.00UR680.790.68LL3734.333.73LR817494.8881.74R1檢測(cè)動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的GFP含量2.Modfit分析軟件分析軟件ModFit 是專門用于流式細(xì)胞術(shù)中進(jìn)行

23、細(xì)胞周期分析的軟件。它通過對(duì)DNA含量直方圖進(jìn)行曲線擬合，能快速計(jì)算出各種倍體細(xì)胞的含量、細(xì)胞周期各時(shí)相及亞二倍體細(xì)胞所占的比例、DNA指數(shù)、G0/G1期峰的變異系數(shù)等。 Channels (FL2-A)0306090120150ModFitLT V3.0(PMac)File analyzed: Data.440Date analyzed: 4-Apr-2006Model: 1nn0n_DSFAnalysis type: Manual analysisDiploid: 100.00 % Dip G1: 48.40 % at 52.85 Dip G2: 27.31 % at 104.57 Dip

24、 S: 24.29 % G2/G1: 1.98 %CV: 3.55Total S-Phase: 24.29 %Total B.A.D.: 0.00 % no debris no aggsDebris: %Aggregates: 0.00 %Modeled events: 17541All cycle events: 17541Cycle events per channel: 333RCS: 1.199Dip G1Dip G2Dip SFSC-H0306090120R1FL2-W0306090120R2亞洲玉米螟昆蟲細(xì)胞周期分析篤絲越桔對(duì)神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷起保護(hù)作用過程中的篤絲越桔對(duì)神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷起保護(hù)作用過程中的DNA 的檢測(cè)的檢測(cè) DNA檢測(cè)的常用術(shù)語(yǔ)：分辨率(變異系數(shù)CV) ： % CV= (SD標(biāo)準(zhǔn)微球/mean平均熒光強(qiáng)度)1003%。影響CV的因素：儀器（液流、光路、機(jī)器調(diào)試等）；人為影響（樣本制備、染