選修1知識(shí)清單(填空版)

1、生物選修1生物技術(shù)實(shí)踐復(fù)習(xí)知識(shí)點(diǎn)1、 果酒和果醋的制作發(fā)酵：利用微生物或其他生物的細(xì)胞在有氧或無(wú)氧條件下繁殖或積累其代謝產(chǎn)物的過(guò)程。類型：（1）根據(jù)是否需要氧氣分為： 和 。（2）根據(jù)產(chǎn)生的產(chǎn)物可分為： 、 、 等1酵母菌的細(xì)胞呼吸（寫反應(yīng)式）酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖： 酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳： 2酵母菌發(fā)酵的最佳環(huán)境:酵母菌在 的條件下都能生活在有氧時(shí)，酵母菌大量繁殖，但是起不到發(fā)酵效果；在無(wú)氧時(shí)，繁殖速度減慢，但是此時(shí)可以進(jìn)行發(fā)酵。在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的 在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再 進(jìn)行發(fā)酵。20左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵的最佳溫度是在 ，pH最好是

2、 。3醋酸菌是 細(xì)菌，當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將 氧化成 。表達(dá)式為： ；當(dāng) 時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在 裝置各部位的作用充氣口： 。排氣口： 。出料口： 。與瓶身相連的長(zhǎng)而彎曲的膠管： 。該裝置的使用方法：使用該裝置制酒時(shí)，應(yīng)該 ；制醋時(shí)，應(yīng)將充氣口連接氣泵，輸入 ，酵母菌有氧呼吸時(shí)，產(chǎn)生能量多，可大量繁殖；無(wú)氧呼吸時(shí)，產(chǎn)生能量少，僅能滿足自身代謝，基本不繁殖；所以利用酵母菌進(jìn)行工業(yè)生產(chǎn)時(shí) 。挑選新鮮的水果(如葡萄)沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒果醋流程果汁發(fā)酵后酒精的檢驗(yàn)對(duì)照組2mL白酒實(shí)驗(yàn)組2mL發(fā)酵液試管甲2mL發(fā)酵前液試管乙2mL發(fā)酵后液3 mol

3、L的H2SO43滴振蕩混勻重鉻酸鉀溶液3滴觀察3 molL的H2SO43滴振蕩混勻重鉻酸鉀溶液3滴觀察 (1)兩種對(duì)照方式都必須遵循 原則。(2)前者是 對(duì)照，后者是 對(duì)照。還可以設(shè)置一組 對(duì)照（2ml蒸餾水）幾種常用發(fā)酵菌種的比較菌種項(xiàng)目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學(xué)分類真核生物原核生物真核生物原核生物代謝類型異養(yǎng)兼性厭氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)厭氧繁殖方式適宜條件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖生產(chǎn)應(yīng)用釀酒釀醋制作腐乳制作泡菜發(fā)酵條件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧深化拓展：1、由于醋酸菌和乳酸菌屬于原核生物，因此在利用這兩類微生物時(shí)，其環(huán)境中一定不要加入 等抗生素。2、在葡萄酒

4、自然發(fā)酵的過(guò)程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的 .在發(fā)酵過(guò)程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。3、控制發(fā)酵條件的作用醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡。醋酸菌最適生長(zhǎng)溫度為3035，控制好發(fā)酵溫度，使發(fā)酵時(shí)間縮短，又減少雜菌污染的機(jī)會(huì)。有兩條途徑生成醋酸：直接氧化和以酒精為底物的氧化。2、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1、培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的

5、物質(zhì)基礎(chǔ)。2、培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為 、 和 。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑 （是從紅藻中提取的一種多糖，在配制培養(yǎng)基中用作常用的凝固劑，但不止這一種凝固劑）后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見(jiàn)的 。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。 應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)。 應(yīng)用于微生物的分離和鑒定。 則常用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)及菌種保藏等。3、按照成分培養(yǎng)基可分為 和 。按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為 和 。4、培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括 等。6、 ：能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無(wú)機(jī)碳源；糖類、石油、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。 ：能

6、為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N2、NH3、NO3-、NH4+（無(wú)機(jī)氮源）蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有機(jī)氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。7、無(wú)菌技術(shù)：獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵，要注意以下幾個(gè)方面：對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行 。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行 。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？ 。10、消毒與滅菌的區(qū)別消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)

7、人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子菌落.芽孢，一種休眠體；孢子，一種生殖細(xì)胞。）。消毒方法常用 ， （對(duì)于一些不耐高溫的液體）還有 、 。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括 。滅菌方法有 、 、 。滅菌方法選擇：接種環(huán)、接種針、試管口等使用 ；玻璃器皿、金屬用具等使用 ，所用器械是 ； 培養(yǎng)基、無(wú)菌水等使用 ，所用器械是 。表面滅菌和空氣滅菌等使用 ，所用器械是 。制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（1）方法步驟： 。（2）倒平板操作的步驟：將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上， 拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶， 拔出棉塞。右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過(guò)火焰。用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿 ，右

8、手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約1020mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。等待平板 ，大約需510min。然后，將平板 放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。純化大腸桿菌（1）微生物接種的方法最常用的是 和 。（2）平板劃線法：接種環(huán)第一次灼燒，目的是 ；每次劃線前灼燒，目的是 ；劃線結(jié)束灼燒，目的是 。灼燒后冷卻目的是 。（3）稀釋涂布平板法：是將菌液進(jìn)行 ，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。一般分為 和 兩步。微生物計(jì)數(shù)方法 1、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，利用 在顯微鏡下計(jì)數(shù)，但不能區(qū)分活菌與死菌。2、活菌計(jì)數(shù)法，在稀釋度足夠高的菌液中聚集在一起的微生物被分散成單個(gè)細(xì)胞，

9、形成單個(gè)菌落，選擇菌落數(shù)在 之間的平板計(jì)數(shù)。菌落數(shù)比活菌實(shí)際數(shù) ，因?yàn)?。統(tǒng)計(jì)結(jié)果用 來(lái)表示。3、濾膜法，飲用水過(guò)濾后，濾膜放在 上培養(yǎng)，計(jì)數(shù) 大腸桿菌菌落。菌種的保存（1）對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用 的方法。（2）對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用 的方法。確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法：將 在恒溫箱中保溫12天，無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。3、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)篩選菌株：利用 篩選菌株。測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法：統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋涂布平板微生物的培養(yǎng)與觀察挑選菌落尿素分解菌的分離：尿素分解菌能合成 將尿素分解成氨。

10、氨使培養(yǎng)基的PH升高。以 的培養(yǎng)基中加入 指示劑，培養(yǎng)尿素分解菌，指示劑變 。篩選菌株（1）實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。（2）選擇性培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。（3）配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)：根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如，培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng) ；培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選擇培養(yǎng) ；加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng) 等。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括實(shí)驗(yàn)方案，所需儀器、材料、用具和藥品，具體

11、的實(shí)施步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。（1）土壤取樣：同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物，數(shù)量最大，種類最多。在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層，有更多的微生物生長(zhǎng)。從 的土壤中取樣。鏟去 ，在距地表約 的土壤層取樣。（2）樣品的稀釋：樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目。在實(shí)際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30300之間、適于計(jì)數(shù)的平板。測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用 ，測(cè)定放線菌的數(shù)量，一般選用 ， 測(cè)定真菌的數(shù)量，一般選用 。（3）微生物的培養(yǎng)與觀察：不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取 的記錄作為結(jié)果，

12、這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致一樓菌落的數(shù)目。一般來(lái)說(shuō)，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、唯獨(dú)及培養(yǎng)時(shí)間），同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)？統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的 每克樣品中的菌落數(shù)= 其中，C代表 ，V代表 ，M代表 。4、 菊花的組織培養(yǎng)一、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程1、原理： 。 細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)： 。2、全能性表達(dá)的條件： 。3、基本過(guò)程：離體的植物組織或細(xì)胞愈傷組織叢芽、生根（試管苗）完整植株。細(xì)胞分化：在生物個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞在 上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過(guò)程。細(xì)胞分化是一種持久性的變化，它有什么生

13、理意義？ 。脫分化（去分化）：由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程。 再分化：愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官的過(guò)程。4、愈傷組織：排列疏松而無(wú)規(guī)則，高度液泡化的呈無(wú)定型狀態(tài)的 。二、菊花的組織培養(yǎng) 1、材料選?。?。2、營(yíng)養(yǎng)：MS培養(yǎng)基，一般添加 (濃度、使用順序、用量比例都會(huì)影響實(shí)驗(yàn))。 3、過(guò)程：制備MS培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培4、影響植物組織培養(yǎng)的條件：（1）材料：不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大。一般來(lái)說(shuō)，容易進(jìn)行 的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。選取生長(zhǎng)旺盛嫩枝進(jìn)行組培的是嫩枝生理狀態(tài)好，容易誘導(dǎo) 。（2）營(yíng)養(yǎng)：離體的植物組織和細(xì)胞，對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條

14、件的要求相對(duì)特殊，需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的培養(yǎng)基是 ，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。（3）激素：植物激素中 和 是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。其使用的先后順序、用量的比例等都影響結(jié)果。若生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比值偏高，則 。（4）環(huán)境條件： 等環(huán)境條件。（5）無(wú)菌技術(shù)。植物組織培養(yǎng)技術(shù)與微生物培養(yǎng)技術(shù)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)微生物培養(yǎng)含義在無(wú)菌條件下，將離體的植物體器官或組織接種在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，最終發(fā)育成完整植物體在無(wú)菌條件下，在適宜的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件下對(duì)

15、微生物的培養(yǎng)培養(yǎng)基成分水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、有機(jī)添加物和植物激素等水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源等特殊操作要求嚴(yán)格控制無(wú)菌操作，在培養(yǎng)過(guò)程中要更換培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例嚴(yán)格控制無(wú)菌操作，整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程無(wú)需更換培養(yǎng)基 注：在這兩種技術(shù)中均需要一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，但營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的劃分標(biāo)準(zhǔn)不同。5、操作流程（1）配制MS固體培養(yǎng)基：需提前配制各種 。·在菊花組織培養(yǎng)中，可以不添加 ·微生物培養(yǎng)基以 為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量 。（2）外植體的消毒：菊花莖段用 沖洗后可加少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右。用 吸干外植體表面的水分，放入 中搖

16、動(dòng)23次，持續(xù)67s，立即將外植體取出，在 中清洗。取出后仍用 吸干外植體表面水分，放入 中12min。取出后，在 中至少清洗3次，漂洗消毒液。注意：對(duì)外植體進(jìn)行表面消毒時(shí)，既要考慮 ，又要考慮 。（3）接種：接種過(guò)程中插入外植體時(shí) 朝上，每個(gè)錐形瓶接種78個(gè)外植體。外植體接種與細(xì)菌接種相似，操作步驟相同，而且都要求 。（4）培養(yǎng)：應(yīng)該放在 中進(jìn)行，并 ，保持適宜的溫度（1822）和光照（12h）。（5）移栽：移栽之前要先進(jìn)行 。外植體在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)被污染，可能的原因有 ； ； ； 等。5果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用（一）基礎(chǔ)知識(shí) 1植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分有 。并且兩者不溶于水，在

17、果汁加工中，既影響出汁率，又使果汁渾濁。 2果膠酶的作用是能夠?qū)?，瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，并且使果汁變得澄清。3果膠酶是 總稱，包括 等。4果膠酶的來(lái)源： 。5影響酶活性的因素包括： 等。6酶的活性是指 。其高低用一定條件下酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的速度來(lái)表示。酶的反應(yīng)速度是指 來(lái)表示。7果膠酶的用量：生產(chǎn)果汁時(shí)，為了使果膠酶得到充分的利用，需要控制好酶的用量，用量的多少常要通過(guò)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來(lái)探究。（二）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)一探究溫度對(duì)酶活性的影響1進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前要解決的幾個(gè)問(wèn)題： 此實(shí)驗(yàn)的自變量是 ；根據(jù) ，你應(yīng)該要確保各實(shí)驗(yàn)組其他 完全相同。你要觀測(cè)的因變量是 。2設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)（1）實(shí)驗(yàn)原理：在一恒定PH下

18、，通過(guò)改變溫度來(lái)確定最適宜的溫度（2）實(shí)驗(yàn)步驟： 攪拌器攪拌制蘋果泥。 將分別裝有蘋果泥和果膠酶的試管在恒溫水浴中保溫。 加入果膠酶反應(yīng)一段時(shí)間。 過(guò)濾果汁。并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。改變不同的溫度后重復(fù)上面的實(shí)驗(yàn)。（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)果、結(jié)論：設(shè)計(jì)二探究PH對(duì)酶活性的影響1 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前要解決的幾個(gè)問(wèn)題：你準(zhǔn)備如何設(shè)置pH梯度，又將如何控制實(shí)驗(yàn)要求的pH？此實(shí)驗(yàn)應(yīng)選一個(gè)適宜的溫度進(jìn)行水浴加熱，并且要控制好其他的因素。 2設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：可參考溫度對(duì)酶活性的影響實(shí)驗(yàn)，作相應(yīng)的變動(dòng)。設(shè)計(jì)三探究果膠酶的用量1進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前要解決的幾個(gè)問(wèn)題： 此探究實(shí)驗(yàn)是建立在溫度和PH對(duì)果膠酶活性影響的基礎(chǔ)之上的。此時(shí)，研究的變量是 ，其他因

19、素保持不變。 實(shí)驗(yàn)時(shí)可以配制 的果膠酶溶液，也可以只配制 的果膠酶溶液，然后使用 即可，但必需保證 必須相同，否則影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 2設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：可參考前兩個(gè)探究實(shí)驗(yàn)，作相應(yīng)的變動(dòng)。6 血紅蛋白的提取和分離一、實(shí)驗(yàn)原理蛋白質(zhì)的 （形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等）千差萬(wàn)別，由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。1凝膠色譜法（分配色譜法）：（1）原理：分子量 的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙，路程 ，流動(dòng) ；分子量 的分子穿過(guò)多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程 ，流動(dòng) 。（2）凝膠材料：多孔性，多糖類化合物，如葡聚糖、瓊脂糖。（3）分離過(guò)程： 混合物上柱洗脫大分子流動(dòng)快、小分子流動(dòng)慢收集大分子收集

20、小分子 洗脫：從色譜柱上端不斷注入緩沖液，促使蛋白質(zhì)分子的差速流動(dòng)。2緩沖溶液（1）原理：由弱酸和相應(yīng)的強(qiáng)堿弱酸鹽組成（如H2CO3NaHCO3， NaH2PO4/Na2HPO4等），調(diào)節(jié)酸和鹽的用量，可配制不同pH的緩沖液。（2）緩沖液作用： 。3凝膠電泳法：（1）原理：不同蛋白質(zhì)的 不同，在電場(chǎng)中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)方向和運(yùn)動(dòng)速度不同。（2）分離方法： 、 等。SDS的作用是使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于 二、實(shí)驗(yàn)步驟1樣品處理 紅細(xì)胞的洗滌洗滌紅細(xì)胞的目的是 ，采集的血樣要加入抗凝血?jiǎng)?，及時(shí)采用 離心分離紅細(xì)胞，然后用膠頭吸管吸出上層透明的 ，將下層

21、暗紅色的 倒入燒杯，再加入 ，緩慢攪拌10min， 離心，如此重復(fù)洗滌三次，直至 ，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。血紅蛋白的釋放：在 和 作用下，紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。注：加入蒸餾水后紅細(xì)胞液體積與原血液體積要相同。加入甲苯的目的是溶解細(xì)胞膜，有利于血紅蛋白的釋放和分離。2粗分離分離血紅蛋白溶液 將攪拌好的混合溶液離心后，試管中的溶液分為4層。第一層為無(wú)色透明的 ，第2層為白色薄層固體，是 ，第3層是紅色透明液體，這是 ，第4層是 的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用 過(guò)濾，除去 ，于 中靜置片刻后，分出下層的紅色透明液體。透析 取1mL的血紅蛋白溶液裝入 中，將透析袋放入盛有300mL的物質(zhì)的量的濃

22、度為20mmol/L的 ，透析12h。透析可以去除 。3純化思考：加樣的過(guò)程中應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？4.純度鑒定-SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（選做）三、注意事項(xiàng)1.電泳技術(shù)：電泳技術(shù)就是在電場(chǎng)的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達(dá)到對(duì)樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。2.紅細(xì)胞的洗滌：如果分層不明顯，可能是 的原因。此外， ，會(huì)使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，也得不到純凈的紅細(xì)胞，影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。3如何檢測(cè)凝膠色譜柱的裝填是否成功由于凝膠是一種半透明的介質(zhì)，因此可以在凝膠柱旁放一支與凝膠柱垂直的 ，檢查凝膠是否裝填得均勻。此外，還可以加入 ，觀察色帶移動(dòng)的情況。如果 ，說(shuō)明凝膠色譜柱的性能良好。如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡，輕輕敲打柱體以消除氣泡，消除不了時(shí)要重新裝柱。4為什么凝膠的裝填要緊密、均勻？如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻，就會(huì)在色譜柱內(nèi)形成無(wú)效的空隙，使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過(guò)，攪亂 ，影響分離的效果。5裝填完后，立即用洗脫