《離子交換色譜》ppt課件

1、離子交換劑亦稱離子交換介質(zhì)，通常是一種不溶性高分子化合物如樹脂，纖維素，葡聚糖，醇脂糖等； 含可交換離子 洗脫的能夠性取決于交換反響平衡常數(shù) 吸附的蛋白質(zhì)可以經(jīng)過改動pH值，使蛋白 質(zhì)分子電性發(fā)生改動，而洗脫下來。 不同蛋白質(zhì)構(gòu)成離子鍵數(shù)目有差別的，及親和力不同。n離子交換劑的分類n陽離子交換劑：強(qiáng)酸型和弱酸型n 可電離的基團(tuán) 磺酸基-SO3Hn 磷酸基-PO3H2n 羧酸基-COOHn 酚羥基-OHn陰離子交換劑：強(qiáng)堿型和弱堿型n 可電離的基團(tuán) 伯胺基-NH2n 仲胺基-NHCH3 n 叔胺基-N(CH3)2n 季胺基-N+(CH3) 3 n強(qiáng)離子交換劑的電離率根本不受pH值影響，離子交換作

2、用的pH范圍寬n弱離子交換劑的電離率受pH影響很大，離子交換作用的pH范圍小n弱酸性陽離子交換劑在pH值降低時(shí)，其電離率逐漸降低，離子交換才干逐漸減弱n弱堿性陰離子交換劑在pH值升高時(shí)，其電離率逐漸降低，離子交換才干逐漸減弱常用的離子交換劑n離子交換樹脂：離子交換樹脂：n離子交換纖維素：離子交換纖維素：n離子交換纖維素是攜帶功能基團(tuán)纖維素衍生物，離子交換纖維素是攜帶功能基團(tuán)纖維素衍生物，具有松散的親水性網(wǎng)狀構(gòu)造以及較大的外表積，具有松散的親水性網(wǎng)狀構(gòu)造以及較大的外表積，大分子可以自在經(jīng)過，因此對生物大分子如蛋大分子可以自在經(jīng)過，因此對生物大分子如蛋白質(zhì)的交換容量比離子交換樹脂大。白質(zhì)的交換容量

3、比離子交換樹脂大。n陽離子型離子交換纖維素包括羥甲基纖維素陽離子型離子交換纖維素包括羥甲基纖維素CM纖維素等纖維素等n陰離子型離子交換纖維素包括二乙基氨基乙基纖陰離子型離子交換纖維素包括二乙基氨基乙基纖維素維素DEAE纖維素纖維素離子交換纖維素 離子交換纖維素 離子交換纖維素離子交換纖維素 在pH7時(shí)可耐120的高熱 2105的蛋白質(zhì) 適用于 對pH及溫度的變化均較穩(wěn)定，可在pH310和070范圍內(nèi)運(yùn)用，改動離子強(qiáng)度或pH時(shí)，床體積變化不大。 被分別物質(zhì)所帶的電荷性質(zhì) 離子交換劑的分類離子交換劑的分類強(qiáng)離子交換劑的電離率根本不受pH值影響，離子交換作用的pH范圍寬弱離子交換劑的電離率受弱離子交

4、換劑的電離率受pHpH影響很大，離子交換作用的影響很大，離子交換作用的pHpH范圍范圍小小弱酸性陽離子交換劑在弱酸性陽離子交換劑在pHpH值降低時(shí)，其電離率值降低時(shí)，其電離率逐漸降低，離子交換才干逐漸減弱逐漸降低，離子交換才干逐漸減弱弱堿性陰離子交換劑在弱堿性陰離子交換劑在pHpH值升高時(shí)，其電離率逐漸降低值升高時(shí)，其電離率逐漸降低，離子交換才干逐漸減弱，離子交換才干逐漸減弱酸堿處置的次序決議了離子交換劑攜帶反離子的類型。酸堿處置的次序決議了離子交換劑攜帶反離子的類型。 補(bǔ)充層析柱平衡補(bǔ)充補(bǔ)充補(bǔ)充樣品洗脫CC2C2C11VA2/A1A1 C1 V為流出體積對總體積之比 A2 C2 當(dāng)當(dāng)A1A2時(shí)為線性梯度，當(dāng)時(shí)為線性梯度，當(dāng)A1A2時(shí)為凹形梯度，時(shí)為凹形梯度，A1A2時(shí)為凸形梯度。時(shí)為凸形梯度。 n假設(shè)有脂溶性物質(zhì)那么可用非離子型去污劑洗柱后再生，也可用乙醇洗滌，其順序?yàn)椋?.5mol/L NaOH-水-乙醇-水-20NaOH-水。n保管離子