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文檔簡介

1、昆明理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(供臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)使用 )實(shí)驗(yàn)一 坐骨神經(jīng) -腓腸肌標(biāo)本制備1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)習(xí)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)基本的組織分離技術(shù);2. 學(xué)習(xí)和掌握制備蛙類坐骨神經(jīng) -腓腸肌標(biāo)本的方法;3. 了解刺激的種類。2 實(shí)驗(yàn)原理蛙類的一些基本生命活動和生理功能與恒溫動物相似,若將蛙的神經(jīng)-肌肉標(biāo)本放在任氏液中,其興奮性在幾個小時內(nèi)可保持不變。若給神經(jīng)或肌肉一次適宜刺激,可在神經(jīng)和肌肉上產(chǎn)生一個動作電位,肉眼可看到肌肉收縮和舒張一次,表明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性,刺激與反應(yīng)的規(guī)律和肌肉收縮的特征等,制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本

2、是機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本操作技 術(shù)。3 實(shí)驗(yàn)對象蛙4 實(shí)驗(yàn)藥品任氏液5 儀器與器械普通剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷 (或尖頭無齒鑷)、金屬探針(解剖針卜玻璃分針、蛙板(或玻 璃板)、蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、電子刺激器。6實(shí)驗(yàn)方法與步驟 破壞腦、脊髓取蛙一只,用自來水沖洗干凈 (勿用手搓)。左手握住蛙,使其背部向上,用大拇指或食 指使頭前俯(以頭顱后緣稍稍拱起為宜)。右手持探針由頭顱后緣的枕骨大孔處垂直刺入椎管 (圖3-1-1)。然后將探針改向前刺入顱腔內(nèi),左右攪動探針23次,搗毀腦組織。如果探針在顱腔內(nèi),應(yīng)有碰及顱底骨的感覺。再將探針退回至枕骨大孔,使針尖轉(zhuǎn)向尾端,捻動探針使其刺入椎管,搗毀脊髓。此時

3、應(yīng)注意將脊柱保持平直。針進(jìn)入椎管的感覺是,進(jìn)針時有一定的阻力,而且隨著進(jìn)針蛙出現(xiàn) 下肢僵直或尿失禁現(xiàn)象。若腦和脊髓破壞完全,蛙下頜呼吸運(yùn)動消失,四肢完全松軟,失去一切反射活動。此時可將探針反向捻動,退出椎管。如蛙仍有反射活動,表示腦和脊髓破壞不徹底,應(yīng)重新破壞。圖2-1-1搗毀蟾蜍脊髓 剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟用左手捏住蛙的脊柱,右手持粗剪刀在前肢腋窩處連同皮膚、腹肌、脊柱一并剪斷(圖(注意避開坐骨神經(jīng)),并3-1-2),然后左手握住蛙的后肢,緊靠脊柱兩側(cè)將腹壁及內(nèi)臟剪去剪去肛門周圍的皮膚,留下脊柱和后肢(圖2-1-3)。圖2-1-3剪除軀干上部及內(nèi)臟圖2-1-2橫斷脊柱 剝皮一只手捏住脊柱的

4、斷端(注意不要捏住脊柱兩側(cè)的神經(jīng)),另一只手捏住其皮膚的邊緣, 向下剝?nèi)ト亢笾钠つw (圖2-1-4)。將標(biāo)本放在干凈的任氏液中。將手及使用過的探針、 剪刀全部沖洗干凈。圖2-1-4剝?nèi)テつw 分離兩腿用鑷子取出標(biāo)本,左手捏住脊柱斷端,使標(biāo)本背面朝上,右手用粗剪刀剪去突出的骶骨(也可不進(jìn)行此步)。然后將脊柱腹側(cè)向上,左手的兩個手指捏住脊柱斷端的橫突,另一手指將兩后肢擔(dān)起,形成一個平面。此時用粗剪刀沿正中線將脊柱盆骨分為兩半(注意勿傷坐骨神經(jīng))。將其中一半后肢標(biāo)本置于盛有任氏液中備用,另一半放在蛙板上進(jìn)行下列操作。 辯認(rèn)蛙后肢的主要肌肉蛙類的坐骨神經(jīng)是由第7、8 9對脊神經(jīng)從相對應(yīng)的椎間孔穿出匯

5、合而成,行走于脊柱的兩側(cè),到尾端(肛門處)繞過坐骨聯(lián)合,到達(dá)后肢背側(cè),行走于梨狀肌下的股二頭肌和半膜 肌之間的坐骨神經(jīng)溝內(nèi),到達(dá)膝關(guān)節(jié)腘窩處有分支進(jìn)入腓腸肌。 游離坐骨神經(jīng)和腓腸肌用蛙釘或左手的兩個手指將標(biāo)本繃直、固定。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng),然后在標(biāo)本的背側(cè)于股二頭肌與半膜肌的肌肉縫內(nèi)將坐骨神經(jīng)與周邊的結(jié)締組織分離直到腘窩,但不要傷及神經(jīng),其分支待以后用手術(shù)剪剪斷。同樣用玻璃分針將腓腸肌與其下的結(jié)締組織分離并在其跟腱處穿線、結(jié)扎。 剪去其它不用的組織,操作應(yīng)從脊柱向小腿方向進(jìn)行。(a)剪去多余的脊柱和肌肉將后肢標(biāo)本腹面向上,將坐骨神經(jīng)連同23節(jié)脊椎用粗剪刀從脊柱上剪下來。再將

6、標(biāo)本背面向上,用鑷子輕輕提起脊椎,自上而下剪去支配腓腸肌以外的神經(jīng)分支,直至腘窩(圖3-1-5A),并搭放在腓腸肌上。沿膝關(guān)節(jié)剪去股骨周圍的肌肉,并將股骨刮凈,用粗剪刀剪 去股骨上端的1/3(保留2/3),制成坐骨神經(jīng)-小腿的標(biāo)本。(b)完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本將脊椎和坐骨神經(jīng)從腓腸肌上取下,提起腓腸肌的結(jié)扎線剪斷跟腱。用粗剪剪去膝關(guān)節(jié)以下部位,便制成了坐骨神經(jīng) -腓腸肌標(biāo)本(圖3-1-5B)。 檢驗(yàn)標(biāo)本用鑷子夾持坐骨神經(jīng)中樞端,如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮,說明標(biāo)本的興奮性良好。標(biāo)本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中備用。圖2-1-5分離坐骨神經(jīng)(A)和坐骨神經(jīng)腓腸標(biāo)本(B)7注意事項(xiàng)再開始實(shí)驗(yàn)效果會較

7、好。 在操作過程中, 應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液, 防止表面干燥, 以免影響標(biāo)本的興奮性。 標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘, 使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定,8 實(shí)驗(yàn)圖像10結(jié)果及分析 搗毀腦脊髓后的蛙應(yīng)有何表現(xiàn)? 制備好的神經(jīng)肌肉標(biāo)本為何要放在任氏液中? 如何判斷制備的神經(jīng)肌肉標(biāo)本的興奮性?11 思考題 用各種刺激檢驗(yàn)標(biāo)本興奮性時,為什么要從中樞端開始? 刺激有幾種形式 ?實(shí)驗(yàn)二 心臟灌流1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)習(xí)蛙離體心臟灌流方法。2觀察Na+、K+、Ca2+、H+、腎上腺素、乙酰膽堿等因素對心臟活動的影響。2實(shí)驗(yàn)原理心臟的正常節(jié)律性活動需要一個適宜的內(nèi)環(huán)境(如Na+、K+、Ca2+等的濃度及比例、pH值和

8、溫度 ),而內(nèi)環(huán)境的變化則直接影響到心臟的正常節(jié)律性活動。在體心臟還受交感神經(jīng) 和迷走神經(jīng)的雙重支配, 交感神經(jīng)末梢釋放去甲腎上腺素, 使心肌收縮力加強(qiáng), 傳導(dǎo)速度加 快,心率加快;迷走神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿,使心肌收縮力減弱,心肌傳導(dǎo)速度減慢,心率 減慢。將失去神經(jīng)支配的離體心臟保持于適宜的理化環(huán)境中(如任氏液 ),在一定時間內(nèi)仍能產(chǎn)生自動節(jié)律性興奮和收縮。而改變?nèi)问弦旱慕M成成分,離體心臟的活動就會受到影響。3實(shí)驗(yàn)對象蛙4實(shí)驗(yàn)藥品任氏液、 0.65NaCl、 2CaCl2、 1KCl、 1: 10000 腎上腺素、 1: 10000 乙酰膽堿 5儀器與器械計(jì)算機(jī)生物信號采集與處理系統(tǒng) (或二道

9、生理記錄儀 )、張力換能器、蛙類常用手術(shù) 器械一套、玻璃分針、蛙板、蛙釘、蛙心插管、蛙心夾、試管夾、滴管(7 支 )、試劑瓶 (7 個 ) 、燒杯、雙凹夾、萬能支架、細(xì)線。6實(shí)驗(yàn)方法與步驟1.標(biāo)本的制備(1)離體蛙心標(biāo)本制備 (斯氏蛙心插管法 ) 取蟾蜍一只,打開胸腔,暴露心臟。在主動脈干 下方穿雙線, 一條在左主動脈上端結(jié)扎作插管時牽引用; 另一根在動脈球上方打一活結(jié)備用 (用以結(jié)扎和固定插管 )。 玻璃分針將心臟向前翻轉(zhuǎn) ,在心臟背側(cè)找到靜脈竇 ,在靜脈竇以外的 地方做一結(jié)扎 (切忽扎住靜脈竇 ),以阻止血液繼續(xù)回流心臟 (也可不進(jìn)行此操作 )。圖3-4-1插管進(jìn)入心室示意圖左手提起左主動

10、脈上方的結(jié)扎線,右手持眼科剪在左主動脈根部(動脈球前端)沿向心方向剪一斜口,將盛有少許任氏液、 大小適宜的蛙心插管由此開口處輕輕插入動脈球。當(dāng)插管尖端到達(dá)動脈球基部時,應(yīng)將插管稍向后退(因主動脈內(nèi)有螺旋瓣會阻礙插管前進(jìn)),并將插管尾端稍向右主動脈方向及腹側(cè)面傾斜,使插管尖端向動脈球的背部后方及心尖方向推進(jìn),在心室收縮時經(jīng)主動脈瓣進(jìn)入心室 (見圖3-4-1)。注意插管不可插得過深,插管的斜面應(yīng)朝向心 室腔,以免插管下口被心室壁堵住。若插管中任氏液面隨心室的收縮而上下波動,則表明插管進(jìn)入心室,可將動脈球上已準(zhǔn)備好的松結(jié)扎緊,并固定于插管側(cè)面的鉤上,以免蛙心插管滑出心室。剪斷結(jié)扎線上方的血管,輕輕提

11、起插管和心臟,在左右肺靜脈和前后腔靜脈下引一細(xì)線并結(jié)扎(參考圖3-4-1),于結(jié)扎線外側(cè)剪去所有相連的組織則得到離體蛙心。此步操作中應(yīng)注意靜脈竇不受損傷并與心臟連結(jié)良好。最后,用任氏液反復(fù)換洗插管內(nèi)的任氏液,直到插管中無殘留血液為止。此 時,離體蛙心標(biāo)本制備成功,可供實(shí)驗(yàn)。左手拉住腹主動脈上結(jié)扎線頭,于動脈球上剪一小口,將裝有魚用生理鹽水的的蛙心套管插入動脈球,并順勢推入心室,此時可以看到套管內(nèi)的液面隨心臟搏動而上下移動。用滴管不斷更換套管中的灌流液,沖洗心室直至沒有血液為止,束緊備用線連同套管尖端一起結(jié)扎,并將線頭系在套管壁上的小突起上,達(dá)到固定作用。最后剪斷腹主動脈,提起心臟用線盡量遠(yuǎn)離靜

12、脈竇將其他血管結(jié)扎。在結(jié)扎外方剪斷各組織。此時心臟完全離體,借灌流液而正常搏動。2實(shí)驗(yàn)裝置連接按圖3-4-2將蛙心插管固定于支架上,在心室舒張時將連有一細(xì)線的蛙心夾在心臟舒張 時夾住心尖,并將細(xì)線以適宜的緊張度與張力換能器相連。張力傳感器的輸出線與計(jì)算機(jī)生 物信號采集處理系統(tǒng)或二道生理記錄儀的輸入通道相連。圖3-4-2蛙心灌流的記錄儀描記裝置3實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(1) 記錄心臟在只有任氏液時的收縮曲線,觀察心率及收縮幅度, 并將其作為正常對照。(2) Na+的作用:用吸管吸出插管中的任氏液后,換以等量的0.65%氯化鈉溶液,記錄并觀察心跳的變化。有變化出現(xiàn)時,應(yīng)立即將插管內(nèi)液體吸出,并以等量任氏液換洗

13、23次,至心跳恢復(fù)正常。(3) Ca2+的作用:將12滴2 %的氯化鈣溶液加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有 變化出現(xiàn)時,應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。(4) K+的作用:將12滴2 %的氯化鉀溶液加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變 化出現(xiàn)時,應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。(5) 腎上腺素的作用:將 12滴1: 10000腎上腺素加入灌流液中,記錄并觀察心跳變 化。有變化出現(xiàn)時,應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。(6) 乙酰膽堿的作用:將 12滴1: 10000乙酰膽堿加入灌流液中,記錄并觀察心跳變 化。有變化出現(xiàn)時,應(yīng)立即以等量任氏液換

14、洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。7 注意事項(xiàng)1. 制備離體心臟標(biāo)本時,勿傷及靜脈竇。2. 蛙心夾應(yīng)在心室舒張期一次性夾住心尖,避免因夾傷心臟而導(dǎo)致漏液。3. 每一觀察項(xiàng)目都應(yīng)先描記一段正常曲線,然后再加藥并記錄其效應(yīng)。加藥時應(yīng)在心跳 曲線上予以標(biāo)記,以便觀察分析。4. 各種滴管應(yīng)分開,不可混用。5. 在實(shí)驗(yàn)過程中,插管內(nèi)灌流液面高度應(yīng)保持恒定;儀器的各種參數(shù)一經(jīng)調(diào)好,應(yīng)不再變動。6. 給藥后若效果不明顯,可再適量滴加,并密切注意藥物劑量添加后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。給藥 量必須適度,加藥出現(xiàn)變化后, 就應(yīng)立即更換任氏液,否則會造成不可挽回的后果,尤其是 K+ , H+稍有過量,即可導(dǎo)致難以恢復(fù)的心臟停跳。7標(biāo)

15、本制備好后,若心臟功能狀態(tài)不好(不搏動),可向插管內(nèi)滴加 12滴2%CaCI2或1:1 0000腎上腺素, 以促進(jìn)(起動)心臟搏動。 在實(shí)驗(yàn)程序安排上也可考慮促進(jìn)和抑制心臟搏 動的藥物交換使用。8謹(jǐn)防灌流液沿絲線流入張力傳感器內(nèi)而損壞其電子元件。8 問題與解釋 1插管插入后,管中的液面不能隨心臟搏動而波動,或波動幅度不大,影響結(jié)果的觀察。(1) 插管插到了主動脈的螺旋瓣中,未進(jìn)入心室。(2) 插管插到了主動脈壁肌肉和結(jié)締組織的夾層中。(3) 插管尖端抵觸到心室壁。(4) 插管尖端被血凝塊堵塞。2插管后,心臟不跳動。(1) 心室或靜脈竇受損。(2) 插管尖端深入心室太多; 或尖端太粗, 心臟太小

16、 (魚類容易出現(xiàn) )影響到心室臟的收縮。(3) 心臟機(jī)能狀態(tài)不好。9 實(shí)驗(yàn)圖像 氯化鈉氯化鈣氯化鉀腎上腺素乙酰膽堿10 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 剪貼記錄曲線,并對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析討論。實(shí)驗(yàn)三 影響尿液生成的因素1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)用膀胱套管或輸尿管套管引流的方法,觀察不同生理因素對動物尿量的影響。加深 對尿生成調(diào)節(jié)的理解。2 實(shí)驗(yàn)原理 尿是血液流過腎單位時經(jīng)過腎小球?yàn)V過,腎小管重吸收和分泌而形成的,凡對這些過 程有影響的因素都可影響尿的生成。 腎小球的濾過作用取決于腎小球的有效濾過壓, 其大小 取決于腎小球毛細(xì)血管血壓, 血漿的膠體滲透壓和腎小囊內(nèi)壓。 影響腎小管重吸收作用主要 是管內(nèi)滲透壓和腎小管上皮細(xì)胞的

17、重吸收能力,后者又為多種激素所調(diào)節(jié)。3 實(shí)驗(yàn)對象 兔4 實(shí)驗(yàn)藥品 醫(yī)用酒精、生理鹽水、溫?zé)岬纳睇}水,利尿激素。5 儀器與設(shè)備 計(jì)算機(jī)生物信號采集處理系統(tǒng)(或二道生理記錄儀、電子刺激器)、壓力換能器、保護(hù)電極、記滴器、恒溫浴槽、哺乳動物手術(shù)器械一套、兔手術(shù)臺、氣管插管、膀胱導(dǎo)管(或輸尿管導(dǎo)管)、動脈插管、注射器(1 ml、20 ml)及針頭、燒杯、試管架及試管、酒精燈等。6 方法與步驟 1. 標(biāo)本的制備(1) 實(shí)驗(yàn)兔在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)給予足夠的菜和飲水。(2) 稱重動物,耳緣靜脈注射20%的氨基甲酸乙酯溶液(5 ml kg-1體重)進(jìn)行麻醉,待動物 麻醉后仰臥固定于手術(shù)臺上。(3) 在頸部手術(shù) 暴露氣

18、管, 施氣管插管; 分離左側(cè)頸總動脈, 按常規(guī)將充滿肝素生 理鹽水的動脈插管插入其內(nèi), 通過血壓換能器連至記錄裝置, 描記血壓。 分離右側(cè)的迷走 神經(jīng),穿線備用,用溫生理鹽水紗布覆蓋創(chuàng)面。(4) 尿液的收集可選用膀胱導(dǎo)管法或輸尿管插管法。.膀胱導(dǎo)尿法 自恥骨聯(lián)合上緣向上沿正中線作 4 cm 長皮膚切口,再沿腹白線剪開腹 壁及腹膜 (勿傷腹腔臟器 ) ,找到膀胱, 將膀胱向尾側(cè)翻至體外 (勿使腸管外露, 以免血壓下降 )。再于膀胱底部找出兩側(cè)輸尿管,認(rèn)清兩側(cè)輸尿管在膀胱開口的部位。小心地從兩側(cè)輸尿管下方穿一絲線,將膀胱上翻,結(jié)扎膀胱頸部。然后,在膀胱頂部血管較少處作一荷包縫合,再 在其中央剪一小

19、口, 插入膀胱導(dǎo)管,收緊縫線、結(jié)扎固定。膀胱導(dǎo)管的喇叭口應(yīng)對著輸尿管開口處并緊貼膀胱壁。 膀胱導(dǎo)管的另一端通過橡皮導(dǎo)管和直管連接至記滴器,并在它們中間充滿生理鹽水。輸尿管插管法 沿膀胱找到并分離兩側(cè)輸尿管,在靠近膀胱處穿線將它結(jié)扎;再在此結(jié)扎前約2厘米的近腎端穿一根線, 在管壁剪一斜向腎側(cè)的小切口,插入充滿生理鹽水的細(xì)塑料導(dǎo)尿管并用線扎住固定,此時可看到有尿滴滴出。再插入另一側(cè)輸尿?qū)Ч?。將兩插管?在一起連至記滴器。手術(shù)完畢后,用溫生理鹽水紗布覆蓋腹部切口。圖3-7-1兔輸尿管及膀胱導(dǎo)尿法1、輸尿管2、插膀胱導(dǎo)管部位 3、膀胱導(dǎo)管2實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(1) 記錄正常情況下每分鐘尿分泌的滴數(shù)。耳緣靜脈注射

20、 38C的0.9%NaCI溶液20ml,觀察尿量的變化。(3) 耳緣靜脈注射去利尿激素1ml,觀察尿量的變化。(4) 上腹部手術(shù):上腹部剪毛,切開胸骨劍突部位的皮膚,沿腹白線切開長約 2 cm的切口,小心分離、暴露劍突軟骨及骨柄,用金冠剪剪斷劍骨柄,將縛有長線的金屬鉤鉤于劍突中間部位,線的另一端連張力換能器,記錄呼吸。(5) 迷走神經(jīng)的作用:切斷一側(cè)迷走神經(jīng),呼吸運(yùn)動有何變化?7注意事項(xiàng)1選擇家兔體重在2.5-3.0kg左右,實(shí)驗(yàn)前給兔多喂菜葉,或用橡皮導(dǎo)尿管向兔胃內(nèi)灌入4050 ml清水,以增加基礎(chǔ)尿量。2手術(shù)動作要輕揉,腹部切口不宜過大,以免造成損傷性閉尿。剪開腹壁避免傷及內(nèi)臟。3因?qū)嶒?yàn)中

21、要多次進(jìn)行耳緣靜脈注射,因此要注意保護(hù)好兔的耳緣靜脈。應(yīng)從耳緣靜脈 的遠(yuǎn)端開始注射,逐漸向耳根部推進(jìn)。4. 輸尿管插管時, 注意避免插入管壁和周圍的結(jié)締組織中; 插管要妥善固定, 不能扭曲, 否則會阻礙尿的排出。5. 實(shí)驗(yàn)順序的安排是:在尿量增加的基礎(chǔ)上進(jìn)行減少尿生成的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,在尿量少的基 礎(chǔ)上進(jìn)行促進(jìn)尿生成的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。 一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)需在上一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)作用消失, 血壓、 尿量基本恢復(fù) 正常水平時再開始。6. 刺激迷走神經(jīng)強(qiáng)度不宜過強(qiáng),時間不宜過長,以免血壓過低,心跳停止。8 問題分析 1.開始實(shí)驗(yàn)尚未給藥時,尿量就很少或無尿(1) 兔體缺水(2) 兔本身機(jī)能狀況低下,(3) 輸尿管插管未插入輸尿管內(nèi)

22、,或輸尿管堵塞,或輸尿管扭曲。(4) 腹部切口過大,引起抗利尿激素分泌,血壓下降,尿量減少。(5) 氣溫太低,動物未保溫,血管收縮,尿量減少。9 實(shí)驗(yàn)圖像 正常一側(cè)神經(jīng)被剪兩側(cè)神經(jīng)被剪增大無效腔10 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 剪貼實(shí)驗(yàn)結(jié)果,記錄各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)所見的血壓(包括收縮壓、舒張壓、平均壓 )和尿量變化。分析這些變化產(chǎn)生的原因。11 思考題 1.靜脈快速注射生理鹽水對尿量有何影響,為什么?2. 靜脈注射利尿激素對尿量有何影響,為什么?3. 迷走神經(jīng)在節(jié)律性呼吸運(yùn)動中起何作用?實(shí)驗(yàn)四 心血管活動的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)記錄哺乳動物動脈血壓的直接測定方法,并觀察神經(jīng)- 體液因素對心血管活動的調(diào)節(jié)。2 實(shí)驗(yàn)

23、原理 在正常生理情況下,心血管活動受神經(jīng)、體液和自身機(jī)制的調(diào)節(jié)。 心臟受交感神經(jīng)和 副交感神經(jīng)的支配。 心交感神經(jīng)興奮時, 使心率加快、 心肌收縮力加強(qiáng), 心內(nèi)興奮傳導(dǎo)加快, 心輸出量增加、動脈血壓升高。心迷走神經(jīng)興奮時,使心率減慢、心房肌收縮力減弱、房室 傳導(dǎo)減慢,從而使心輸出量減少、動脈血壓下降。在神經(jīng)調(diào)節(jié)中以頸動脈竇 - 主動脈弓的減 壓反射尤為重要, 當(dāng)動脈血壓升高時, 壓力感受器發(fā)放沖動增加, 通過中樞反射性引起心率 減慢、心肌收縮力減弱、心輸出量下降、血管舒張和外周阻力降低,使血壓降低。反之,當(dāng) 動脈壓下降時, 壓力感受器發(fā)放沖動減少, 神經(jīng)調(diào)節(jié)過程又使血壓回升。 支配血管的交感縮

24、 血管神經(jīng)興奮時,使血管收縮、外周阻力增加、動脈血壓升高。家兔的壓力感受器的傳入神經(jīng)在頸部從迷走神經(jīng)分出, 自成一支, 稱為減壓神經(jīng), 其傳 入沖動隨血壓變化而變化。心血管活動還受腎上腺素和去甲腎上腺素等體液因素的調(diào)節(jié)。 它們對心血管的作用既有 共性,又有特殊性。關(guān)鍵取決于心、血管壁上哪一種受體占優(yōu)勢。腎上腺素對a與B受體均有激活作用,去甲腎上腺素主要激活a受體而對B受體作用很小,因而使外周阻力增加,動脈血壓升高,但對心臟的作用要比腎上腺素弱。3 實(shí)驗(yàn)對象 家兔。4 實(shí)驗(yàn)藥品 生理鹽水,20%氨基甲酸乙脂(或 3%戊巴比妥鈉),肝素(500 U ml-1 ),1: 10000腎上 腺素, 1:

25、 10000去甲腎上腺素, 1: 10000乙酰膽堿。5 儀器與器械 計(jì)算機(jī)生物信號采集處理系統(tǒng)(或二道生理記錄儀、刺激器),兔手術(shù)臺,手術(shù)器械一套,氣管插管, 動脈夾, 動脈套管、 血壓換能器, 保護(hù)電極, 棉線, 紗布, 棉球、 注射器 ( 50、 10、 2 ml ),支架,雙凹夾。6實(shí)驗(yàn)方法與步驟1實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:(1) 麻醉和固定:家兔稱重后,耳緣靜脈緩慢注射20%氨基甲酸乙酯(5 ml kg-1 )或 3%戊巴比妥鈉(1 ml kg-1 )進(jìn)行麻醉。當(dāng)動物四肢松軟,呼吸變深變慢,角膜反射遲鈍時,表明動物已被麻醉,即可停止注射。將麻醉的家兔仰臥位固定于兔手術(shù)臺上。(2) 分離頸部神經(jīng)、血管

26、和插氣管插管:頸部剪毛,沿頸部正中線切開皮膚57 cm ,用止血鉗鈍性分離皮下組織及淺層肌肉,暴露和分離氣管;分離左、右兩側(cè)頸總動脈(左頸總動脈盡量分離長些,以做動脈插管用。當(dāng)向頭端追索到甲狀軟骨上緣,可見到左頸動脈分支為頸外和頸內(nèi)動脈,在頸內(nèi)動脈基部有一膨大處,為頸動脈竇。分離右側(cè)的迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)和減壓神經(jīng)。在分離的氣管、頸總動脈及神經(jīng)下方各穿一不同顏色的線備用(見5-1)。圖3-5-1頸部分離進(jìn)行氣管插管(圖 3-5-2)圖3-5-2氣管插管示意圖(4) 進(jìn)行動脈插管做插管手術(shù)前經(jīng)耳緣靜脈注射肝素(500 U kg-1 ),在左側(cè)頸總動脈插入動脈插管(圖3-5-3)。2 連接實(shí)驗(yàn)裝置:

27、計(jì)算機(jī)生物信號采集處理系統(tǒng)將動脈插管通過三通與血壓換能器連接,血壓換能器與計(jì)算機(jī)生物信號采集處理系統(tǒng)的壓力通道連接;刺激電極與系統(tǒng)的刺激輸出連接;減壓神經(jīng)的記錄電極導(dǎo)線與系統(tǒng)的一個通道連結(jié)。啟動計(jì)算機(jī)生物信號采集處理分析系統(tǒng),按系統(tǒng)程序提示進(jìn)行血壓信號定標(biāo),調(diào)整放大增益。3實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(1)記錄正常情況下減壓神經(jīng)放電波形和動脈血壓波形,觀察二者變化關(guān)系,注意觀察減壓神經(jīng)的群集性放電與血壓的波動是否同步?每一群集性放電持續(xù)時間 ?血壓正常值是多少?同時辨認(rèn)血壓波的一級波和二級波,三級波(圖7.10-2):減壓神經(jīng)放電二級波血壓B的放大展開丫一級波三級渡圖3-5-4兔頸總動脈的血壓曲線(示波器記錄)一

28、級波(心搏波):由心室舒縮活動所引起的血壓波動,心縮時上升,心舒時下降,其頻率與心率一致。二級波(呼吸波):由呼吸運(yùn)動所引起的血壓波動,吸氣時血壓先下降,繼而上升,呼氣時血壓先上升,繼而下降,其頻率與呼吸頻率一致。三級波:不常出現(xiàn),可能由心血管中樞的緊張性活動的周期變化所致。(2) 夾閉頸總動脈 用動脈夾夾閉右側(cè)頸總動脈1015 s,觀察血壓與減壓神經(jīng)放電的 變化。在出現(xiàn)一段明顯變化后,突然放開動脈夾,血壓又有何變化。(3) 牽拉頸總動脈 手持左側(cè)頸總動脈上的遠(yuǎn)心端結(jié)扎線,向心臟方快速牽拉3 s。觀 察血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。若持續(xù)牽拉,血壓與減壓神經(jīng)放電會有何變化?(4) 靜脈注射乙酰膽堿待血壓基本穩(wěn)定后,由耳緣靜脈注入1:10000乙酰膽堿0.20.3 ml,觀測血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。注意動脈血壓降低到何種程度時,群集型放電才 減少?或完全停止及其恢復(fù)過程。(5) 靜脈注射去

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