植物組織培養(yǎng)試題庫(kù)

1、植物組織培養(yǎng)試題庫(kù)一、名詞外植體： 在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，由植物體上切取的根、莖、葉、花、果、種子 等器官以及各種組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體等統(tǒng)稱為外植體。熱處理脫毒： 利用病毒和植物細(xì)胞對(duì)高溫忍耐性不同， 選擇適當(dāng)?shù)母邷靥幚砣静?植株，使植株體內(nèi)的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。平板培養(yǎng)法： 是把單細(xì)胞懸浮液與融化的瓊脂培養(yǎng)基均勻混合， 平鋪一薄層在培 養(yǎng)基底上的培養(yǎng)方法。消毒：指殺死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再發(fā)生危害作用。玻璃化現(xiàn)象 ：在長(zhǎng)期的離體培養(yǎng)繁殖時(shí)， 有些試管苗的嫩莖、 葉片呈現(xiàn)半透明水 漬狀，這種現(xiàn)象稱為玻璃化。脫毒苗 ：是指不含該種植物的主要危害病毒， 即經(jīng)檢測(cè)主

2、要病毒在植物內(nèi)的存在 表現(xiàn)陰性反應(yīng)的苗木。滅菌 ：是指用物理或化學(xué)的方法， 殺死物體表面和孔隙內(nèi)的一切微生物或生物體， 即把所有生命的物質(zhì)全部殺死。褐變 ：是指外植體在培養(yǎng)中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活， 使細(xì)胞里的酚類物質(zhì)氧化 成棕褐色的醌類物質(zhì)， 有時(shí)使整個(gè)培養(yǎng)基變褐， 從而抑制其他酶的活性， 影響 材料的培養(yǎng)。微尖嫁接： 指在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)實(shí)生砧木， 嫁接無(wú)病毒莖尖以培養(yǎng)脫毒苗的技 術(shù)。主要程序：無(wú)菌砧木培養(yǎng)莖尖準(zhǔn)備嫁接嫁接苗培養(yǎng)移栽。 植物細(xì)胞全能性 ：一個(gè)生活的植物細(xì)胞， 只要有完整的膜系統(tǒng)和細(xì)胞核， 它就會(huì) 有一整套發(fā)育成一個(gè)完整植株的遺傳基礎(chǔ)， 在適當(dāng)?shù)臈l件下可以通過(guò)分裂、 分化 再

3、生成一個(gè)完整的植株。人工種子 ：將組織培養(yǎng)產(chǎn)生的體細(xì)胞胚或不定牙包裹在能提供養(yǎng)分的膠囊里， 再 在膠囊的外面包上一層具有保護(hù)功能和防止機(jī)械損傷的外膜， 形成一種類似自然 種子的結(jié)構(gòu)。試管苗馴化 ：植物組織培養(yǎng)中獲得的小植株， 長(zhǎng)期生長(zhǎng)在試管或三角瓶?jī)?nèi)， 體表 幾乎沒(méi)有保護(hù)組織，生長(zhǎng)勢(shì)弱，適應(yīng)性差，要露地移栽成活，完成由“異養(yǎng)”到 “自養(yǎng)”的轉(zhuǎn)變，需要一個(gè)逐漸適應(yīng)的馴化過(guò)程。器官培養(yǎng) ：植物的根、莖、葉、花器（包括花藥、子房）和幼小果實(shí)的無(wú)菌培 養(yǎng)。微體嫁接 ：指將 0.1-0.2mm 的莖尖作為接穗，嫁接到由試管中培養(yǎng)出來(lái)的無(wú)菌 實(shí)生砧木上，繼續(xù)進(jìn)行試管培養(yǎng)，愈合成為完整的的植株。快速繁殖 （

4、微繁殖） : 用組織培養(yǎng)的方法 ,使植物的部分器官 ,組織迅速擴(kuò)大培養(yǎng) , 并移植到溫室或農(nóng)田繁殖出大量幼苗的繁殖方法 .脫分化 : 將已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體的抑制性影響下解脫出來(lái),恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性 . 一個(gè)成熟的細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)的過(guò)程叫脫分化 . 原生質(zhì)體融合 （體細(xì)胞雜交 ）: 就是使分離下來(lái)的不同親本的原生質(zhì)體 , 在離體條 件下通過(guò)誘導(dǎo)發(fā)生的質(zhì)膜融合進(jìn)而細(xì)胞核融合 , 像性細(xì)胞受精作用那樣互相融合 成一體的現(xiàn)象 .愈傷組織培養(yǎng) : 是指將母體植株上的外植體 ,接種到無(wú)菌的培養(yǎng)基上 , 進(jìn)行愈傷組 織誘導(dǎo) , 生長(zhǎng)和發(fā)育的一門技術(shù)馴化：試管苗移植前可將培養(yǎng)瓶移到自然光照

5、下鍛煉310d，讓試管苗接受自然光的照射，感受自然溫度的晝夜溫差現(xiàn)象，使其壯實(shí)，然后再開(kāi)瓶移植，經(jīng)過(guò) 較低溫、濕度的處理，以適應(yīng)自然溫、濕度條件。褐變：是指外植體在培養(yǎng)中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活，使細(xì)胞里的酚類物質(zhì)氧化成棕褐色的醌類物質(zhì)，有時(shí)使整個(gè)培養(yǎng)基變褐，從而抑制其他酶的活性，影響材 料的培養(yǎng)。二、填空題1、植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞全能性。2、 組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室必要的設(shè)備有超凈工作臺(tái)、高壓滅菌器、 空調(diào)機(jī) 、天平、顯微鏡、蒸餾水發(fā)生器等。3、 糖在植物組織培養(yǎng)中是不可缺少的，它不但作為離體組織賴以生長(zhǎng)的 碳源，而且還能維持培養(yǎng)基滲透壓4、培養(yǎng)基滅菌一般在 108 kPa的壓力下，鍋內(nèi)溫

6、度達(dá) 121 C，維持20-30 mi n。5、 在離體葉培養(yǎng)中，6-BA和KT利于芽 的形成;2,4-D利于愈傷組織的形 成&在離體葉組織脫分化和再分化培養(yǎng)中，莖和芽的分化主要有4個(gè)途徑：直接產(chǎn)生不定芽、由愈傷組織產(chǎn)生不定芽、胚狀體形成、形成球狀體或小鱗莖等途徑。7、 目前培育無(wú)病毒苗最廣泛和最重要的一個(gè)途徑是莖尖培養(yǎng)脫毒。8、花藥培養(yǎng)前的預(yù)處理：低溫冷藏 是最常用的方法。1、 植物組織培養(yǎng)的發(fā)展分為三個(gè)階段：萌芽階段、奠基階段和快速發(fā)展和 應(yīng)用階段。2、 培養(yǎng)基最常用的碳源是蔗糖，使用濃度在1%-5%常用3%。3、 培養(yǎng)基的種類按其態(tài)相不同分為 固體培養(yǎng)基與液體培養(yǎng)基，其滅菌方法

7、一般采用濕熱消毒滅菌方法。4、pH的大小會(huì)影響瓊脂的凝固能力，一般當(dāng) pH大于6.0時(shí)，培養(yǎng)基將會(huì)硬，低于5.0時(shí)，瓊脂。5、 一般情況下，生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比值高，有利于根的形成和愈傷組織 的 形成；比值低，有利于 芽的形成。6、選擇外植體時(shí)應(yīng)選擇 選擇優(yōu)良的種質(zhì)、選健壯的植株 、選最適的時(shí) 期和選取適宜的大小 。7、花藥和發(fā)粉培養(yǎng)的共同特點(diǎn)是利用花粉 （小孢子）染色體數(shù)目的單倍性，培育 出單倍體植株。8、原生質(zhì)體的分離方法有機(jī)械分離法和酶法分離法。1、 組織培養(yǎng)植株再生的途徑：體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑 和器官發(fā)生途徑。2、 培養(yǎng)基的主要成分包括 無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分（大量元素、微量元素和鐵鹽） 、有機(jī)

8、營(yíng)養(yǎng)成分（包括維牛素、氨基酸等）、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)、碳水化合物 、 其它物質(zhì) 。3、 在固體培養(yǎng)時(shí)瓊脂是使用最方便、最好的凝固劑和支持物 ，一般用量為6-10g /L 之間。4、 一般情況下，生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比值高，有利于根的形成和愈傷組織 的 形成；比值低，有利于 芽 的形成。5、 試管苗的生態(tài)環(huán)境：高溫且恒溫、高濕、弱光、無(wú)菌 。&愈傷組織的形態(tài)發(fā)生方式主要有 方式。7、無(wú)病毒苗的保存分：隔離保存和長(zhǎng)期保存兩種方法。8、壓片染色法是檢測(cè)劃分發(fā)育時(shí)期的簡(jiǎn)便有效方法，常用染色劑為醋酸洋紅。不定芽方式和胚狀體三、單項(xiàng)選擇題1、中A、2、A、3、A、4、A、1974年我國(guó)朱至清等設(shè)計(jì)了

9、（B ）培養(yǎng)基主甘，目前廣泛應(yīng)用在花藥培養(yǎng)馬鈴薯-2號(hào) B 、N6C 、W14D組培室應(yīng)建立在安靜、清潔，并且在該地長(zhǎng)年主風(fēng)向的（ 上風(fēng)B 、下風(fēng)C制作每升固體培養(yǎng)基常用瓊脂的用量為（46B 、610C下列培養(yǎng)類型不屬于液體培養(yǎng)的是（D旋轉(zhuǎn)培養(yǎng) B 、紙橋培養(yǎng) C 、振蕩培養(yǎng) D 、看護(hù)培養(yǎng)5、進(jìn)行莖尖培養(yǎng)脫毒時(shí)，通常以帶1-3個(gè)幼葉原基的莖尖作外植體較合適。 則莖尖的長(zhǎng)度約為（B °B 、0.3-0.5mm C下列現(xiàn)象中不屬于離體培養(yǎng)容易出現(xiàn)的三大問(wèn)題的是（ 污染B 、褐變超低溫種質(zhì)保存的溫度為（A 015C；B、在植物組織培養(yǎng)表面滅菌時(shí)， 70%-75%-般來(lái)說(shuō)，在愈傷組織培養(yǎng)時(shí)

10、，幼年細(xì)胞和組織比成年細(xì)胞和組織 A、困難B 、容易 C 、一樣 D 、10、利用花粉或花藥培養(yǎng)，進(jìn)行單倍體育種選育一個(gè)新品種只需 （ 1-3B細(xì)胞工程、（ 蛋白質(zhì)工程 配制（B2,4-D B煉苗的環(huán)境開(kāi)始時(shí)和（A 培養(yǎng)室條件B 、無(wú)菌界室條件C、緩沖間條件離體培養(yǎng)常用的誘導(dǎo)生根的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)主要是（A、脫落酸D°進(jìn)行熏蒸。、高錳酸鉀和酒精、N6、W14、左風(fēng) DB )克°、1015D)、c17A °方向。、右風(fēng)、1520A、0.1-0.3mm6、A、7、o、0.3-0.5mm、0.4-0.6mm8、A9、CC -80 C； 常用的酒精濃度為（、黃化°

11、°C -196 C；B 、80%-85% C 、90%-95%D 、0.6-0.8mmC °°、玻璃化A、1、A、2、A、3、A、4、A、5、A、液6、A、7、A、2-4、3-5-280 C° °、100%（B °° 不一定C ° 年°4-6）、酶工程、發(fā)酵工程是生物技術(shù)的主要范疇。 基因工程溶液時(shí)應(yīng)先用、BAC 、微生物工程 D 、生化工程 10%勺HCI溶解，再加蒸餾水定容。C 、GA3 D 、IAA°相似，后期類似于田間栽培條件。B 、無(wú)菌界室條件生長(zhǎng)素 B、細(xì)胞分裂素植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室需

12、要定期用（ 高錳酸鉀和甲醛 B、酒精和洗液D 、準(zhǔn)備室條件 ）°、乙烯D、高錳酸鉀和洗進(jìn)行無(wú)菌操作前，工作人員可以不必 洗臉 B、換拖鞋C電子天平的感量一般在（C °0.1g 或 0.01g B 、0.01g 或 0.001g C、0.001g 或 0.0001g D 0.1g 或（A °、穿工作服D范圍。、洗手O.OOOIg8、進(jìn)行干熱滅菌時(shí)，應(yīng)在150C時(shí)保持（B °分鐘。A 30B 、 60C9、適合雙子葉植物花藥培養(yǎng)的培A、MS培養(yǎng)基 B 、B 5培養(yǎng)基培養(yǎng)基10、下列不屬于原生質(zhì)體培養(yǎng)的是（A、平板培養(yǎng)B、液體淺層培養(yǎng)、90AD° &

13、#176;N 6培養(yǎng)基、120D 、 White）、懸滴培養(yǎng) D 在（ A、1.0-1.5cm D、糖培養(yǎng)之間。、1.5-2.0cmB )°1、為了減少污染，一般選擇培養(yǎng)材料的大小，A、0.1-0.5cmB、0.5-1.0cmC2、世界上首次提出植物細(xì)胞具有全能性的理論概念的科學(xué)家是（C 、Schleide n D3、在植物組織培養(yǎng)表面滅菌時(shí)，常用的氯化汞濃度為（A、0.1-1% B 、0.2-2%4、在細(xì)胞懸浮液成批培養(yǎng)過(guò)程中，速增加，增長(zhǎng)速率保持不變的是（ A、減慢期B、延遲期C5、下列不屬于原生質(zhì)體培養(yǎng)的是（A、平板培養(yǎng)B&在愈傷組織培養(yǎng)時(shí)，A、困難B 、容易 C 、一

14、樣7、在進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)時(shí)，最適宜的花粉發(fā)育時(shí)期是 A、成熟花粉粒B、單核花粉期C、二核花粉期D 植物組織培養(yǎng)中大多數(shù)植物都適用的培養(yǎng)基是（MSB 、N6C 、White下列現(xiàn)象中不屬于離體培養(yǎng)容易出現(xiàn)的三大問(wèn)題的是 污染B 、褐變 C 、黃化1升容量瓶?jī)?nèi)，當(dāng)制作4升培養(yǎng)、0.5-1.0cmA Morel B 、Haberlandt、WhiteAD)°、0.4-4%C 、0.3-3%細(xì)胞數(shù)目會(huì)不斷發(fā)生變化，其中細(xì)胞數(shù)目迅 C °、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期D、靜止期D °、液體淺層培養(yǎng) C 、懸滴培養(yǎng) D 一般雙子葉植物比單子葉植物誘導(dǎo)愈傷組織 、容易8、A9、A、糖培養(yǎng)（B

15、）°D 、不一定（B ）°、三核花粉期AD培養(yǎng)基°、B5C、玻璃化10、配制微量元素母液時(shí)，濃縮了 200倍保存在 基時(shí)，應(yīng)取用鐵鹽母液（DA 50B 、 40)ml。 C30、20四、單或多項(xiàng)選擇題1.下列不屬于細(xì)胞分裂素類的植物激素是A BA ； B NAA ； C ZT ； D2.植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)是A :繁殖率高；C管理方便；D產(chǎn)量大 誘導(dǎo)試管苗生根，培的調(diào)整應(yīng)加大生長(zhǎng)素的濃度B 加大分裂素的濃度 C加活性炭D 降低鹽AC°KTA培養(yǎng)條件可人為控制；B生長(zhǎng)周期3、A的濃度4.下列不屬于大量元素的鹽是_B.養(yǎng)基BDA NH 4NQ; B KNC3;

16、 C ZnSQ.7H2O; D MgSO4.7H2。5.培養(yǎng)休眠的植物材料時(shí)必需加入的激素是：A GA ; B IAA ; C NAA; D ZT五、判斷題1、PH增高不利于原生質(zhì)體的再生。（ X ）2、 剝離法是植物離體培養(yǎng)中花粉分離的一種方法。( X )3、 莖尖培養(yǎng)一般采用半固體培養(yǎng)基，也可使用液體培養(yǎng)基。(V )4、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分越復(fù)雜、營(yíng)養(yǎng)成分越豐富，植板細(xì)胞的臨界密度越低。(V)5、 晴天下午取材在一定程度上可以減輕污染。( V )6、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基中氧濃度低于臨界水平時(shí)， 利于根的形成。 ( X )7、 植物組織培養(yǎng)有利于快速繁殖稀有植物并挽救瀕臨滅絕得植物。( V )8

17、、 培養(yǎng)室的試管苗瓶?jī)?nèi)濕度在 80%左右。(X )9、愈傷組織繼代培養(yǎng)中銨態(tài)氮的含量一般不能高于 8mmol/L。( V )10、 “脫毒苗”是指不含該種植物的主要危害病毒。(V )1、 葉柄和葉脈的切口處不能形成愈傷組織和分化成苗(X )。2、在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，所用外植體是指植物體上的根、莖、葉、花、果、 種子。( X )3、 植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基使用前須經(jīng)過(guò)高壓滅菌。( V )4、離體葉培養(yǎng)中，消毒后的葉片應(yīng)整理切割成 5X5mm大小。( V )5、一般來(lái)說(shuō)單葉子植物的愈傷組織培養(yǎng)比雙子葉植物容易。 ( X )6、連續(xù)培養(yǎng)是植物脫毒的常用方法。 ( X )7、試管苗與常規(guī)苗相比，莖、葉

18、綠色，光合作用更強(qiáng)。 ( X )8、莖尖培養(yǎng)主要用于消除病毒，也可消除植物體中其他病原菌，包括類病毒、 類菌質(zhì)體、細(xì)菌和真菌。 ( V )9、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基中氧濃度低于臨界水平時(shí)，利于形成胚狀體。(V)10、 漂浮釋放法是植物離體培養(yǎng)中花粉分離的一種方法。( V )1、植物組織培養(yǎng)屬于有性繁殖范疇。 ( X )2、莖尖分生組織主要是指對(duì)莖尖長(zhǎng)度不超過(guò) 0.1mm的莖尖進(jìn)行培養(yǎng)。(V )3、 外植體是指用于組培接種用的離體植物材料。( V )4、懸浮培養(yǎng)屬固體培養(yǎng)的一種。 ( X )5、植物離體培養(yǎng)中細(xì)菌污染的特點(diǎn)是污染部分長(zhǎng)有不同顏色的霉菌。(X)6、 試管苗的莖葉呈綠色，光合作用弱。(

19、 V )7、大多數(shù)植物組織培養(yǎng)要求的 PH范圍是4.0-7.0 0 ( X )8、植株進(jìn)行一次病毒鑒定未發(fā)現(xiàn)病毒，9、大多數(shù)外植體組織培養(yǎng)的溫度要求在10、IAA/KT 高，利于芽分化0 ( X1. X般將微量元素母液均配制成就可確定該植株不帶病毒0( X )25土2C。( V )100 倍，在配制培養(yǎng)基時(shí)，使用量為10ml/L02X 細(xì)胞分裂素 /生長(zhǎng)素的比值較高時(shí)，有利于愈傷組織芽的誘導(dǎo)03X 對(duì)于金邊虎尾蘭等遺傳學(xué)上的嵌合體植物， 要是組織培養(yǎng)繁殖的植株 保持原有的園藝價(jià)值，只能通過(guò)莖尖和側(cè)芽培養(yǎng)。4. X植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí)，材料也容易褐變，細(xì)胞分裂有刺激多 酚氧化酶活性提高的作

20、用。5. X利用莖尖分生組織進(jìn)行脫毒培養(yǎng)時(shí)，莖尖外植體大小與脫毒效果成反 比。6. V某些植物通過(guò)愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無(wú)病毒苗。7. V無(wú)病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在清除病毒之后，體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)和生 理狀況發(fā)生改變， 因而對(duì)其他病毒和病原體的侵染更為敏感， 因此在種植脫毒苗 的一定要隔離種植。8. X微繁不定芽的產(chǎn)生有兩個(gè)途徑，一是不定芽不通過(guò)愈傷組織由外植體 直接產(chǎn)生， 二是外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織， 由愈傷組織上產(chǎn)生不定芽。 前一途徑 相對(duì)較為優(yōu)越，因?yàn)橥ㄟ^(guò)愈傷組織會(huì)出現(xiàn)一些突變。9. V細(xì)胞的全能性，可以通過(guò)成熟細(xì)胞的脫分化和再分化過(guò)程得以體現(xiàn)。10. V培養(yǎng)基中的鐵鹽，常用不易分解的乙二

21、胺四乙酸鐵螯合物，以防在 pH 較高時(shí)鐵被氧化為不溶的氫氧化鐵。簡(jiǎn)答1. 無(wú)病毒苗培育的意義？答：從根本上消除只靠種苗傳播的病毒病的危害。 無(wú)病毒栽培可改善果樹(shù)品質(zhì)，提高豐產(chǎn)性，抗逆性及利用砧木的優(yōu)良性狀 減少農(nóng)藥的使用，降低生產(chǎn)成本，減少或避免對(duì)環(huán)境的污染。2. 組培苗基質(zhì)選配的原則？答：需具有良好的物理特性，通氣性好。 需具有良好的化學(xué)特性， 不含有對(duì)植物和人類有毒的成分， 不與營(yíng)養(yǎng)液中的鹽 類發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而影響苗正常生長(zhǎng)。 需對(duì)鹽類要有良好的緩沖能力，維持穩(wěn)定，適且植物生長(zhǎng)的PH值。 選用基質(zhì)還需物美價(jià)廉，便于就地取材。3. 褐化現(xiàn)象的產(chǎn)生原因和預(yù)防措施各是什么？答：褐變的主要原因：植物

22、品種；生理狀態(tài)；培養(yǎng)基成分；培養(yǎng)條件不當(dāng)。 預(yù)防措施：選擇合適的外植體；合適的培養(yǎng)條件；使用抗氧化劑；連續(xù)轉(zhuǎn)移。4. 在植物組織培養(yǎng)中，造成組培材料污染的因素都有哪些？如何采取相應(yīng)的措 施防止或降低污染？ 答：造成污染的原因：培養(yǎng)基滅菌不徹底；外植物體表面消毒滅菌不徹底；操作 不當(dāng)。防止污染的措施是：培養(yǎng)基正確滅菌，外植體沖洗充分，消毒滅菌徹底， 嚴(yán)格無(wú)菌操作。5. 花藥和花粉培養(yǎng)在育種學(xué)方面的作用是什么 ? 答：花藥培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)使單個(gè)花粉粒發(fā)育成完整的單倍體植株， 經(jīng)過(guò)染色體的 加倍處理成為正常結(jié)實(shí)的二倍體植株， 其后代屬于真正的純系。 可以大大縮短育 種年限。MS固體培養(yǎng)基的制作步驟如下

23、：母液取出。適量蒸餾水放入加熱容器，接通電源加熱。加入稱量好的瓊脂至完全溶化， 稱取相應(yīng)量的蔗糖至溶解， 將母液混合液加入 混勻，最后用蒸餾水定容至所需體積。測(cè)試培養(yǎng)基溶液的PH值(5.8-6.0)，調(diào)整。2. 簡(jiǎn)述通過(guò)小葉嫁接法鑒定草莓病毒的操作步驟。 從被鑒定的草莓采集長(zhǎng)成不久的新葉，除去兩邊的小葉，中央的小葉帶11.5cm的葉柄，把它削成楔形作接穗。 將指示植物除去中間的小葉，在葉柄的中央用刀切入11.5cm,再插入接穗，用線把接合部位包扎好。為了防止干燥，在接合部位涂上少量的凡士林。 觀察。約經(jīng)2周時(shí)間，撤去塑料袋。若帶有病毒，嫁接后12個(gè)月，在新展開(kāi)的葉、匍匐莖或老葉上會(huì)出現(xiàn)病癥。3

24、、制作配方為MS+6-BA0.5mg/L的培養(yǎng)基2L (大量元素母液為10X，微量元素母液、鐵鹽母液、有機(jī)物母液均為 100X，激素母液濃度為1mg/ml)(1) 按配方移取各母液：大量元素母液為 200ml，微量元素母液、鐵鹽母液、有機(jī)物母液均為20ml，6-BA激素母液為1ml。(2) 定容：用蒸餾水定容至 2L。 稱量蔗糖和瓊脂：蔗糖50-60g，瓊脂1416g。(4) 培養(yǎng)基熬制：加入蔗糖和瓊脂后進(jìn)行培養(yǎng)液熬制，直至瓊脂全部融化。(5) 調(diào)PH值：先用PH計(jì)或PH試紙測(cè)量后再用0.1MNaOH或HCl調(diào)PH值為5.8 6.0 。(6) 二次定容：當(dāng)培養(yǎng)基熬制后總體積少于 2L 時(shí)要定容

25、至 2L。分裝并扎瓶口 ：趁熱分裝，100ml的三角瓶約裝入30 40ml, 35瓶/L。（8）高壓滅菌：及時(shí)滅菌，121-123 C條件下保持20- 30分鐘。（9）冷卻：待接種。1 、在植物組織培養(yǎng)中，通過(guò)哪些途徑可以得到完整的植株？答：（1）外植體愈傷組織根、芽試管苗（2分）（2）外植體胚狀體試管苗（2分）（ 3）外植體根、芽試管苗（ 2 分）2、母液配制意義是什么？答： （1）在植物組織培養(yǎng)中，配制培養(yǎng)基是日常必備的工作。 （3分）（ 2）為簡(jiǎn)便起見(jiàn)，通常先配制一系列母液。（ 3 分）3、莖段培養(yǎng)與莖尖培養(yǎng)有什么主要區(qū)別 ?答： 莖尖培養(yǎng)是指帶有頂芽的器官培養(yǎng)，可用于脫毒和快繁；（2分

26、）莖段培養(yǎng)指不帶芽和帶 1 個(gè)以上定芽或不定芽的，包括塊莖、球莖在內(nèi) 的幼莖切段的無(wú)菌培養(yǎng)。 （2分）莖段培養(yǎng)的主要目的是快速繁殖 ,莖尖培養(yǎng)的主要目的是脫毒。（ 2 分）4、簡(jiǎn)述莖段培養(yǎng)基本過(guò)程？答：選健壯的枝梢 ,去葉片用自來(lái)水沖洗 （1 分） 75酒精浸 1min（1 分） 0.1%Hgcl2 浸泡 5- 10min（ 1 分）用無(wú)菌水沖洗 4-5 次接種（ 1 分）培養(yǎng) （ 1 分）5、培育無(wú)病毒苗常用的方法及其優(yōu)缺點(diǎn)？答： （1）莖尖培養(yǎng)脫毒：脫毒率高，但成本較高。 （1.5分）（2）愈傷組織培養(yǎng)脫毒：脫毒率較高，但成本高。（1.5分）（ 3）微尖嫁接脫毒：適合于難生根樹(shù)種，但方法繁

27、瑣，技術(shù)要求高。（ 1.5 分）（ 4）高溫處理脫毒：方法簡(jiǎn)單、易操作，適合于生產(chǎn)，但易傷害植物。（ 1.5 分）五、計(jì)算題（每題 5 分，共 5 分）1、培養(yǎng)基的配方是 MSBA2NAA0.530g/L 糖，要配制 400mL， MS 母 液的濃度分別是：大量元素 20 倍，微量元素 200 倍，鐵鹽 100 倍，有機(jī)物 50倍。要吸取各種母液各多少 mL ?糖稱取多少克？答：大量元素：20mL （2分） 微量元素：2mL （2分） 鐵鹽 :4mL （2分） 有機(jī)物 ：8mL （2分） 糖 ：12g （2 分）六、論述題（共15分）1、某地區(qū)的一種馬鈴薯經(jīng)多年的種植后，植株變的矮小，產(chǎn)量和品

28、質(zhì)都下降， 懷疑是由病毒所至。請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)脫毒的技術(shù)方案。（每題10分，共10分）答：無(wú)病毒苗培養(yǎng)：（1）取材：從田間切取6-8cm頂芽，放入培養(yǎng)箱中生長(zhǎng)2-3周，除去頂芽促 進(jìn)腋芽生長(zhǎng)，剪取腋芽1-2cm。（ 2分）（2） 消毒：在自來(lái)水下沖洗干凈，無(wú)菌條件下先用70%的酒精消毒30秒，再 用0.1%氯化汞消毒數(shù)7-8分鐘，最后用無(wú)菌水沖洗材料 4-5次。（2分）（3）剝?nèi)デo尖與接種：在電子顯微鏡下剝?nèi)デo尖，接種在 MS+0.1mg/L（NAA）+0.2mg/L（2 分）（GA3）+0.5mg/L （6-BA）+2% 蔗糖 +PH5.8 液體培養(yǎng)基上。（4）培養(yǎng)溫度：21-25C光照度：2000-3000IX光照時(shí)間：12小時(shí)/天 （ 1分）（5）生根培養(yǎng)生根培養(yǎng)基：MS+0.3mg/L（NAA）+0.1%活性炭（2分）（6）煉苗移栽（1分）2、試論述組培實(shí)驗(yàn)室的基本構(gòu)造及其主要設(shè)備？（每題 5分，共5分）答：（1）準(zhǔn)備室（0.5分）主要設(shè)備：高壓滅菌鍋（0.3分）；器皿干燥箱（0.3分）；冰箱（0.3 分）； 小推車（0.3分）;（2）緩沖室（0.5分）主要設(shè)備：衣服架（