USP-51抗菌效力測(cè)試(翻譯)

1、877237b57b4ff6af2cfe115c842f87d2.pdf 第 1 頁(yè)，共 5 頁(yè)抗菌的效力測(cè)試抗菌防腐劑是實(shí)際被添加到有菌的劑量配方里的物質(zhì)，使他們不受微生物滋長(zhǎng)或是被無(wú)意中引進(jìn)到生產(chǎn)過(guò)程中的微生物侵害。在無(wú)菌包裝多劑量配方的容器里，抗菌防腐劑被添加用來(lái)抑制由重復(fù)添加單劑量所引進(jìn)的微生物的滋長(zhǎng)。抗菌防腐劑不應(yīng)被作為在良好生產(chǎn)操作中的替代方式使用，或僅是用來(lái)減少一個(gè)有菌產(chǎn)品的微生物群數(shù)量，或是在生產(chǎn)時(shí)控制多劑量的微生物量。在劑量表里抗菌防腐劑與添加的要求必需符合規(guī)定。所有有用的抗菌藥劑都是有毒物質(zhì)。為了最大的保護(hù)使用者，防腐劑的含量應(yīng)被有效地顯示在產(chǎn)品的最終包裝上，并應(yīng)會(huì)處在一個(gè)

2、可能對(duì)人體有毒的水平線下。添加的抗菌防腐劑含量能夠被保持在一個(gè)最小的濃度，如果配方的活性成分具有一個(gè)固定的抗菌力?？咕男ЯΓ还苁钱a(chǎn)品里固有的或者是生產(chǎn)中添加的抗菌防腐劑，都必須在所有注入包裝的多劑量容器里或其它包含抗菌防腐劑的產(chǎn)品上顯示?？咕栏瘎┍仨毐伙@示在多劑量和口頭劑量型和給其它劑量型，如眼藥，耳藥，鼻藥，沖洗的和透析液。(看 Pharmaceutical Dosage Forms(a1151).本章提供的測(cè)試用來(lái)顯示抗菌保護(hù)的效力。添加的抗菌防腐劑必須顯示在標(biāo)簽上。測(cè)試的效力和標(biāo)準(zhǔn)適用于一個(gè)產(chǎn)品在原有的、未打開過(guò)的經(jīng)由制造商銷售的容器里。產(chǎn)品分類產(chǎn)品分類 為了測(cè)試的目的，配制產(chǎn)品分

3、開為四個(gè)分類（看表 1）?？咕ЯΦ臉?biāo)準(zhǔn)對(duì)于這些產(chǎn)品是一個(gè)管理的作用。Table 1.Compendial Product Categories 表 1: 配制藥品分類Category類類 別別Product Description產(chǎn)產(chǎn) 品品 概概 述述1針劑，其它非腸胃藥劑，包括乳劑、無(wú)菌耳用劑、鼻用劑和眼用劑含水的或其它介質(zhì)的。2局部使用產(chǎn)品，含水的或其它介質(zhì)，如未滅菌耳用劑產(chǎn)品、軟膏，包括那些涂在黏膜上的。3口服產(chǎn)品，除了以水為基底或其它的介質(zhì)的解酸劑。4含水解酸劑。測(cè)試生物體使用以下微生物的培養(yǎng)基：白念珠菌（ATCC NO.10231）,黑曲霉菌（ATCC NO.16404）,大腸桿菌

4、（ATCC NO.8739）,綠膿桿菌(ATCC no.9027),和金黃色葡萄球菌( ATCC NO.6538). 在測(cè)試中使用活的微生物從原始的培養(yǎng)基移轉(zhuǎn)次數(shù)不得超過(guò)五次。為了測(cè)試的目的，移轉(zhuǎn)的定義是從一個(gè)已確定的培養(yǎng)877237b57b4ff6af2cfe115c842f87d2.pdf 第 2 頁(yè)，共 5 頁(yè)基移到一個(gè)新鮮的媒介里。所有的移轉(zhuǎn)均應(yīng)被計(jì)算在內(nèi)的。一旦有機(jī)體被以種子庫(kù)(seed-lot) 技術(shù)保存下來(lái)時(shí)，每個(gè)在新鮮媒介里冰凍的，融化的和再生的循環(huán)周期被認(rèn)為是一次轉(zhuǎn)移。種子存儲(chǔ)技術(shù)將會(huì)被使用到培養(yǎng)的長(zhǎng)期存儲(chǔ)中。從 ATCC 得到的培養(yǎng)基將會(huì)依照操作方向蘇醒。如果在液體培養(yǎng)基里

5、生長(zhǎng)，細(xì)胞會(huì)通過(guò)離心法的方式被聚集成塊。懸浮在 1/20 容量的新鮮的液體培養(yǎng)基里，并添加一個(gè)同等容量的 20%（V/V 水里）的無(wú)菌的甘油。從表面到 10%的甘油液體培養(yǎng)基里可能得到在瓊膠培養(yǎng)基上的細(xì)胞生長(zhǎng)。分配小部分的懸浮液到無(wú)菌的小瓶里。把小瓶子放在液化氮里或一個(gè)不超過(guò)-50 攝氏度的機(jī)械冷藏室里。當(dāng)要求一個(gè)新鮮的種子存儲(chǔ)瓶時(shí)，它可能被移除和使用來(lái)給一系列的有效的培養(yǎng)菌做接種。這些有效的培養(yǎng)基到時(shí)可以被定期地（每天，當(dāng)測(cè)試細(xì)菌和酵母時(shí)）使用來(lái)啟動(dòng)接種培養(yǎng)基。媒介測(cè)試中所有媒介的使用，必須做促生長(zhǎng)測(cè)試。在有機(jī)體測(cè)試下使用上面指定的測(cè)試微生物。接種體的準(zhǔn)備準(zhǔn)備測(cè)試，由最近再生的培養(yǎng)基的表面適

6、當(dāng)?shù)慕臃N特定的微生物。接種培養(yǎng)基的描述請(qǐng)參考表 2，表 2 里的適合的培養(yǎng)基是黃豆-消化酪蛋白(soybean casein digest)或沙保羅氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。（ 參看Microbial Enumeration Tests (61)和 Absence of Specified Microorganism 62）為了獲得細(xì)菌和白色念珠菌(C.albicans)培養(yǎng)基，使用干凈的鹽水溶液(Saline TS ，注: 9 克氯化鈉溶于 1000 mL.的水)，清洗表面的生成物，把它收集在一個(gè)合適的容器里，并添加足夠的鹽水溶液以獲得一個(gè)每毫升大約 1108 cfu 的微生物計(jì)數(shù)。為了獲得黑曲霉

7、菌(A. niger)細(xì)胞，使用干凈的鹽水溶液含 0.05%的聚山梨醇酯 80(polysorbate 80)，并添加足夠的鹽水溶液來(lái)獲得一個(gè)大約 1108cfu 每毫升的計(jì)數(shù)?；蛘?，一個(gè)合適的液體的培養(yǎng)液（如，黃豆-消化酪蛋白液 soybean casein digest broth 或沙氏瓊脂培養(yǎng)液 sabouraud dextrose broth）可能生長(zhǎng)出培養(yǎng)菌微生物并通過(guò)離心法得到細(xì)胞，然后以無(wú)菌的鹽水溶液清洗和重新懸浮以獲得一個(gè)大約 1108cfu 每毫升的微生物計(jì)數(shù)。（注意 預(yù)計(jì)的接種濃度可能通過(guò)濁度計(jì)測(cè)量來(lái)挑戰(zhàn)微生物。如果懸浮液沒有在兩個(gè)小時(shí)內(nèi)被使用，請(qǐng)冷凍它）測(cè)出每個(gè)懸浮液的

8、每毫升的菌落數(shù)量，使用在 TABLE2 里的媒介和微生物的恢復(fù)培養(yǎng)期的情況來(lái)確認(rèn)估計(jì)每毫升的原始 cfu。這個(gè)值可以用在測(cè)試中做接種尺寸的比對(duì)。細(xì)菌和酵母菌的懸浮液在 24 小時(shí)收獲期里應(yīng)被使用，但真菌的準(zhǔn)備可在冷凍情況下儲(chǔ)存 7 天。程序877237b57b4ff6af2cfe115c842f87d2.pdf 第 3 頁(yè)，共 5 頁(yè)測(cè)試可以在五個(gè)干凈的容器里操作，如果在每個(gè)容器里有足夠容量的產(chǎn)品且產(chǎn)品容器能被無(wú)菌地裝入（ 如，使用針和注射器穿過(guò)一個(gè)人造的橡膠瓶塞），或者在五個(gè)無(wú)菌的，加蓋的、尺寸合適的，能移轉(zhuǎn)產(chǎn)品的充足容量的細(xì)菌容器里。給每一個(gè)準(zhǔn)備好的標(biāo)準(zhǔn)的接種體的容器做接種注射，并混合。接

9、種懸浮液的使用量在產(chǎn)品量的 0.5%到 1.0%之間。被添加到產(chǎn)品的測(cè)試細(xì)菌濃度（類型 1.2.3）到最終的測(cè)試準(zhǔn)備濃度在接種之后是每毫升1105and 1106cfu 之間。對(duì)于類型 4 產(chǎn)品（解酸劑）測(cè)試準(zhǔn)備的最終濃度在接種后是每毫升產(chǎn)品 1103到 1104cfu 之間。在每次測(cè)試準(zhǔn)備的活的微生物的原始濃度是預(yù)計(jì)是基于每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)接種體的微生物濃度，通過(guò)皿測(cè)法來(lái)預(yù)計(jì)的。在 22.52.5 的溫度下將容器接種。如表 3，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間間隔里把每個(gè)容器做樣品標(biāo)示。記錄下在每個(gè)間隔時(shí)間里出現(xiàn)的任何變化（參看 Microbial Limit Tests (61)下的程序） 。以平皿計(jì)數(shù)方式(plate

10、 count)在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間間隔里計(jì)算出現(xiàn)的 cfu 數(shù)。使用特定的抗菌劑做為鈍化劑（中和劑）或是適當(dāng)?shù)南♂屃縼?lái)做平皿計(jì)數(shù)。在表 2 中規(guī)定出培養(yǎng)基與不同菌種的各種接種狀況與驗(yàn)收時(shí)間。在開始測(cè)試時(shí)使用每毫升多少CFU 來(lái)計(jì)算濃度，在適當(dāng)?shù)拈g隔測(cè)試對(duì)每個(gè)微生物計(jì)算每毫升 CFU 濃度的 log10 值的變化，并表述以 log為單位的減少變化量。Table 2.Culture Conditions for Inoculum Preparation 接種體準(zhǔn)備的培養(yǎng)基Organism微生物Suitable Medium 適合的培養(yǎng)基IncubationTemperature接種溫度Inoculum I

11、ncubation Time接種時(shí)間Microbial Recovery Incubation Time驗(yàn)收時(shí)間Escherichia coli 大腸桿菌(ATCC No.8739)SoybeanCasein Digest Broth;黃豆-消化酪蛋白液SoybeanCasein Digest Agar黃豆-消化酪蛋白基32.52.518 to 24hours18 至 24 小時(shí)3 to 5days3 至 5 天Pseudomonas aeruginosa 綠膿桿菌(ATCC No.9027)SoybeanCasein Digest Broth;黃豆-消化酪蛋白液SoybeanCasein D

12、igest Agar黃豆-消化酪蛋白基32.52.518 to 24hours18 至 24 小時(shí)3 to 5days3 至 5 天Staphylococcus aureus金黃色葡萄球菌 SoybeanCasein Digest Broth;黃豆-消化酪蛋白液32.52.518 to 24hours18 至 24 小時(shí)3 to 5days3 至 5 天877237b57b4ff6af2cfe115c842f87d2.pdf 第 4 頁(yè)，共 5 頁(yè)Organism微生物Suitable Medium 適合的培養(yǎng)基IncubationTemperature接種溫度Inoculum Incubat

13、ion Time接種時(shí)間Microbial Recovery Incubation Time驗(yàn)收時(shí)間(ATCC No.6538)SoybeanCasein Digest Agar黃豆-消化酪蛋白基Candida albicans 白念珠菌(ATCC No.10231)Sabouraud Dextrose Agar;沙氏瓊脂培養(yǎng)基Sabouraud Dextrose Broth沙氏瓊脂培養(yǎng)液22.52.544 to 52hours44 到 52 小時(shí)3 to 5days3 至 5 天Aspergillus niger 黑曲霉菌(ATCC No.16404)Sabouraud Dextrose A

14、gar;沙氏瓊脂培養(yǎng)基Sabouraud Dextrose Broth沙氏瓊脂培養(yǎng)液22.52.56 to 10days6 至 10 天3 to 7days3 至 7 天抗菌效力標(biāo)準(zhǔn)抗菌效力的要求如 Table 3 下規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)（參看 significant figures and tolerances under general notices）。增加值不高于現(xiàn)行測(cè)量值的 0.5 log10 單位的可視為沒有增加。測(cè)試微生物的標(biāo)準(zhǔn)For Category 1 Products 對(duì)第一類產(chǎn)品Bacteria: 細(xì)菌7 天里的原始計(jì)數(shù)量不少于 1.0 log 的減少量，在 14 天里原始計(jì)數(shù)量不

15、少于 3.0 log 的減少量，在 14 天-28 天里計(jì)數(shù)量不增加。Yeast and Molds:酵母和霉菌原始計(jì)數(shù)量在 7 天，14 天，28 天里沒有增加。For Category 2 Products 對(duì)第二類產(chǎn)品Bacteria:細(xì)菌Not less than 2.0log reduction from the initial count at 14days,and no increase from the 14dayscount at 28days.Yeast and Molds:酵母和霉菌No increase from the initial calculated count at 14and 28days.For Category 3 Products 對(duì)第三類產(chǎn)品Bacteria:細(xì)菌Not less than 1.0log reduction from the initial count at 14days,and no increase from the 14dayscount at 28days.Yeast and Molds:酵母和霉菌No increa