微生物農(nóng)藥復(fù)習(xí)資料

1、精品 一、名詞解釋(大概念、大類概念、構(gòu)成、特殊結(jié)構(gòu)、作用方式等) 1.微生物農(nóng)藥 2. 農(nóng)用抗生素 3. VIP蛋白 4. 包涵體 5. 重寄生作用 二、單項(xiàng)選擇題 （最、第一等字眼；防治對(duì)象、專性、來源、毒素、機(jī)理、不同分類、可開發(fā)為。，已應(yīng)用等字眼；有效活性成分，測(cè)定方法、指標(biāo)，特殊結(jié)構(gòu)、致病過程、實(shí)際生產(chǎn)方法、等） 1. 以下哪一種微生物為專性寄生昆蟲病原菌（ ）。 A. 綠僵菌 B. 金龜子芽孢桿菌 C. 枯草芽孢桿菌 D. 蘇云金芽孢桿菌 2. （ ）具有抗植物根結(jié)線蟲作用，是一種很有應(yīng)用前景的生防因子。 A. 穿刺巴斯德氏柄菌 B. 肉毒梭菌 C. 嗜酸乳桿菌 D. 熒光假單胞菌

2、 3. 綠僵菌的主要防治對(duì)象為（ ）。 A. 蚜蟲 B. 蠟蚧 C. 鱗翅目幼蟲 D. 線蟲 4. 魯保一號(hào)是用于防治（ ）的微生物源藥劑。 A. 害蟲 B. 病原菌 感謝下載載精品 C. 雜草 D. 鼠害 5. （ ）是諾爾斯鏈霉菌西昌變種產(chǎn)生的抗生素，對(duì)多種植物病毒病具有特效。 A. 井岡霉素 B. 農(nóng)抗120 C. 中生霉素 D. 寧南霉素 6. （ ）可以產(chǎn)生劇烈的細(xì)菌外毒素，此毒素是目前草原農(nóng)田廣泛應(yīng)用的生物殺鼠劑。 A. 肉毒梭菌 B. 穿刺巴氏柄菌 C. 惡臭假單胞菌 D. 熒光假單胞菌 7. 以下農(nóng)用抗生素可用于殺螨劑的是（ ）。 A. 莫西菌素 B. 華光霉素 C. 武夷霉素

3、 D. 波拉霉素 8. 除了（ ）以外，以下均為DNA殺蟲病毒。 A. 核型多角體病毒 B. 顆粒體病毒 C. 昆蟲痘病毒 D. 質(zhì)型多角體病毒 9. 可以開發(fā)為殺蟲劑的病毒主要集中在（ ）。 A. 桿狀病毒科 B. 長(zhǎng)尾噬菌體科 C. 絲狀病毒科 D. 壬酸 10. 雙丙氨膦屬于滅生性除草劑，其有效殺草成分為（ ）。 A. L-草銨膦 B. 蘆竹堿 C. 纖精酮 D. 拮抗關(guān)系 11. 病毒制劑毒力生物測(cè)定方法有活體生物測(cè)定、離體生物測(cè)定和空斑測(cè)定法，其中活體生物測(cè)定法檢測(cè)病毒毒力常用指標(biāo)為（ ）。 A. LD50 B. TCID50 感謝下載載精品 C. LC50 D. EC50 12.

4、蘇云金素對(duì)昆蟲的毒性是由于其對(duì)害蟲（ ）具有抑制作用。 A. RNA合成 B. 蛋白質(zhì)合成 C. DNA合成 D. 幾丁質(zhì)合成 13. 第一個(gè)登記注冊(cè)的病毒殺蟲劑是（ ）。 A. 棉鈴蟲NPV殺蟲劑 B. 茶小卷葉蛾NPV殺蟲劑 C. 小菜蛾GV殺蟲劑 D.甘藍(lán)夜蛾NPV殺蟲劑 14.（ ）為具有囊膜的昆蟲病毒。 A. 顆粒體病毒 B. 細(xì)小病毒 C. 虹彩病毒 D. 質(zhì)型多角體病毒 15. （ ）對(duì)蚊蟲具有毒殺作用，是一種很有應(yīng)用開發(fā)前景的蚊蟲病原菌。 A. 球形芽孢桿菌 B. 梭狀芽孢桿菌 C. 惡臭假單胞菌 D. 多黏芽孢桿菌 16. 在菌物中已用于開發(fā)殺蟲劑的除卵菌門的（ ）以外，其余

5、都是無性型真菌。 A. 大鏈壺菌 B. 暗孢耳霉 C. 粉棒束孢 D. 寡雄腐霉 17. 在昆蟲病原真菌侵染寄主過程中各種水解酶起到重要作用，其中以（ ）最為重要，其活性高低是決定真菌致病力的及其重要因素。 A. 蛋白酶 B. 幾丁質(zhì)酶 C. 脂酶 D. 糖苷酶 18. （ ）在寄主體內(nèi)繁殖過程中一般不分泌毒素，直到菌絲占領(lǐng)整個(gè)蟲體后才引起昆蟲死亡。 感謝下載載精品 A. 布氏白僵菌 B. 球孢白僵菌 C. 綠僵菌 D. 蟲霉菌 19. 以分生孢子為產(chǎn)品的真菌殺蟲劑，在實(shí)際生產(chǎn)中多采用（ ）。 A. 液體發(fā)酵 B. 固體發(fā)酵 C. 雙相發(fā)酵 D. 高密度發(fā)酵 20.（ ）會(huì)造成染病昆蟲表現(xiàn)出行

6、動(dòng)遲緩、體軀腫脹和皮膚易破、組織液化等病理特征。 A. 小菜粉蝶GV B. 梭狀芽孢桿菌 C. 球孢白僵菌 D. 球形芽孢桿菌 三、多項(xiàng)選擇題 1. 由于阿維菌素毒性偏高，通過化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾與改造獲得的系列新型殺蟲抗生素有（ ）。 A. 伊維菌素 B. 多拉菌素 C. ?，斁?D. 中生菌素 2. 農(nóng)用抗生素具有（ ）等特點(diǎn)。 A. 選擇性強(qiáng) B. 高效、低毒、易降解 C. 大多具有內(nèi)吸活性 D. 可通過發(fā)酵工程生產(chǎn) 3. 按照用途微生態(tài)制劑可分為（ ）。 A. 微生態(tài)促生長(zhǎng)劑 B. 微生態(tài)治療劑 C. 微生態(tài)多功能劑 D. 微生態(tài)單菌劑 4. 真菌植物病害生防劑的作用方式包括（ ）。 A.

7、重寄生 B. 抗生 C. 占領(lǐng) D. 誘導(dǎo)植物抗性 感謝下載載精品 5. 以下哪些昆蟲病毒可形成包涵體形式（ ）。 A. 甜菜尺蠖姬蜂病毒 B. 棉鈴蟲核型多角體病毒 C. 菜粉蝶球形病毒 D. 印度棕櫚獨(dú)角仙病毒 四、判斷題（每小題1分，共10分） （來源、對(duì)象、機(jī)制、致病過程、藥劑性質(zhì)（水溶。堿溶） 得分： 分 1. 位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)是熒光假單胞菌在植物根圍定殖和大量繁殖的重要機(jī)制。（ ） 2. 春雷霉素能選擇性的抑制某些真菌和一些細(xì)菌的生長(zhǎng)，尤其對(duì)稻瘟病菌特別敏感，其作用機(jī)制是干擾菌體蛋白的合成。（ ） 3. 緩死芽孢桿菌是對(duì)金龜子幼蟲蠐螬具有高度致病力的專性致病菌。（ ） 4. 地衣芽孢桿菌可

8、通過產(chǎn)生抗菌物質(zhì)、位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)及誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性而起到抑菌作用。（ ） 5. 昆蟲痘病毒寄生在寄主的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，病毒粒子包埋于紡錘形包涵體內(nèi)。（ ） 6. 滅瘟素是一種從灰色鏈霉菌的代謝產(chǎn)物中分離出來的芐氨基苯磺酸鹽類抗生素。（ ） 7. 綠色木霉可通過競(jìng)爭(zhēng)、占領(lǐng)和重寄生等多重方式作用于植物病原菌。（ ） 8. 塊狀耳霉菌劑型種類多樣，殺蟲譜廣，可寄生于鱗翅目、同翅目和雙翅目等昆蟲。（ ） 9. Cry蛋白具有廣泛的溶細(xì)胞活性，被稱為溶細(xì)胞蛋白。（ ） 10. 武夷菌素為水溶性抗生素，是具有我國自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的內(nèi)吸性核苷類抗生素殺菌劑。（ ） 五、簡(jiǎn)答題 （對(duì)比作用方式。機(jī)制，區(qū)別概念，簡(jiǎn)單） 1.

9、簡(jiǎn)述井岡霉素的作用機(jī)制和特點(diǎn)。 2.什么是昆蟲病原病毒，與蟲媒病毒有何不同？ 感謝下載載精品 3.簡(jiǎn)述食線蟲真菌的作用方式，如何科學(xué)使用真菌殺線蟲劑？ 4.昆蟲病原真菌的作用方式與其他昆蟲病原微生物有何不同？ 5.簡(jiǎn)述核型多角體病毒在宿主細(xì)胞中的復(fù)制周期？ 6.簡(jiǎn)述枯草芽孢桿菌抗病機(jī)理？ 六、論述題（比較機(jī)理） 比較阿維菌素與蘇云金芽孢桿菌殺蟲機(jī)理有何異同。 一、名詞解釋 1. 昆蟲病原病毒 2. -外毒素 3. 拮抗作用 4. 伴孢晶體 5. 食線蟲真菌 二、填空題 1. 真菌殺線蟲劑是使用食線蟲真菌經(jīng)發(fā)酵加工制成，其作用方式有和。 2. 井岡霉素是由產(chǎn)生的多組分的類抗生素，其主要成分井岡霉

10、素A分子中包含了結(jié)構(gòu)和一個(gè)。 3. 雙丙氨膦是經(jīng)一種發(fā)酵而產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，其有效殺草成分為。 4. 微生態(tài)制劑按作用和用途可分為、和微生態(tài)多功能劑。 三、判斷題 感謝下載載精品 1. 金龜子芽孢桿菌是對(duì)鞘翅目害蟲金龜子幼蟲具有高度致病力的專性致病菌。（ ） 2. 核型多角體病毒和顆粒體病毒都是專性寄生鱗翅目昆蟲的病原病毒。（ ） 3. 梭狀芽孢桿菌會(huì)造成染病昆蟲表現(xiàn)出行動(dòng)遲緩、體軀腫脹和組織液化等病理特征。（ ） 4. 木霉菌主要通過競(jìng)爭(zhēng)、拮抗和誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性達(dá)到對(duì)植物的保護(hù)作用。（ ） 5. 井岡霉素對(duì)多種植物病原真菌以及革蘭氏陽性細(xì)菌、革蘭氏陰性細(xì)菌均具有明顯抑菌作用。（ ） 四、 選擇題

11、1. 已被開發(fā)用于防治根結(jié)線蟲的真菌殺線蟲劑是（ ）。 A. 淡紫擬青霉 B. 盤長(zhǎng)刺盤孢 C. 湯普生被毛孢 D. 尖孢鐮刀菌 2. 肉毒毒素是肉毒梭菌產(chǎn)生的一種（ ）殺鼠劑，它具有很多化學(xué)殺鼠劑所不及的優(yōu)點(diǎn)，具有良好的推廣前景。 A. 神經(jīng)毒劑 B. 呼吸抑制劑 C. 抗凝血?jiǎng)?D. 以上都對(duì) 3.（ ）被應(yīng)用于防治森林的馬尾松毛蟲，已經(jīng)開發(fā)了多種生防制劑。 A. 綠僵菌 B. 菜氏野村菌 C. 玫煙色棒束孢 D. 大鏈壺菌 4. 以下哪一種抗生素作用機(jī)理不屬于抑制菌體蛋白質(zhì)的生物合成（ ）。 A. 春雷霉素 B. 鏈霉素 C. 滅瘟素 D. 灰黃霉素 5熒光假單胞菌能通過與植物根際病原菌

12、競(jìng)爭(zhēng)（ ）而達(dá)到抑制病原物的效果。 感謝下載載精品 A.鐵元素 B. 游離氮 C. 氧份 D. 碳元素 6球形芽孢桿菌對(duì)不同蚊幼蟲的毒殺作用主要是通過其產(chǎn)生的（ ）。 A.毒素蛋白 B. 蛋白酶 C. 芽孢 D. 細(xì)菌素 7（ ）通過幼蟲攝食而侵入，感病幼蟲呈現(xiàn)食欲不振、停止進(jìn)食、下痢、吐液、體積縮小等癥狀。 A. 核型多角體病毒 B. 質(zhì)型多角體病毒 C. 顆粒體病毒 D. 泡囊病毒 8. 以下哪種昆蟲病毒具有球形體和紡錘體兩種類型包涵體（ ）。 A. 昆蟲痘病毒 B. 顆粒體病毒 C. 細(xì)小病毒 D. 虹彩病毒 9. 蘇云金芽孢桿菌用于害蟲防治主要是其毒素發(fā)揮作用，其中營養(yǎng)生長(zhǎng)其分泌的殺蟲

13、蛋白是（ ）。 A. VIP蛋白 B. Cry蛋白 C. Cyt蛋白 D. 腸毒素 10（ ）是通過內(nèi)吸篩選模型獲得的一種內(nèi)吸性強(qiáng)、廣譜、高效、低毒的核苷類抗生素。 A. 武夷菌素 B. 中生菌素 C. 寧南霉素 D. 多抗霉素 五、簡(jiǎn)答題 1. 簡(jiǎn)述阿維菌素神經(jīng)毒作用機(jī)制。 感謝下載載精品 2. 依據(jù)抗生素農(nóng)藥的作用目標(biāo)和作用機(jī)理，抗生素農(nóng)藥可分為哪些種類？ 3. 簡(jiǎn)述蘇云金芽孢桿菌的毒素殺蟲機(jī)制。 4. 簡(jiǎn)述核型多角體病毒致病機(jī)理。 5. 細(xì)菌農(nóng)藥與化學(xué)農(nóng)藥相比有什么特點(diǎn)？ 6. 微生態(tài)制劑在微生物農(nóng)藥方面有什么應(yīng)用潛力？ 六、論述題 什么是真菌殺蟲劑？使用真菌殺蟲劑有哪些優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)？怎樣

14、才能用好真菌殺蟲劑？ 微生物農(nóng)藥復(fù)習(xí)資料 考點(diǎn)：大類概念、具體品種、機(jī)理機(jī)制、特點(diǎn)、使用、生產(chǎn)、研發(fā)過程、重要意義（里程碑、首個(gè)）、分類及依據(jù) 第一章緒論 1.3R問題：殘留、抗藥性、再猖獗 2.微生物農(nóng)藥來源分類： （1）活體微生物農(nóng)藥： 細(xì)菌農(nóng)藥：蘇云金桿菌、日本金龜子桿菌、球狀芽孢桿菌 真菌農(nóng)藥：白僵菌、綠僵菌 病毒農(nóng)藥：核型多角體病毒、質(zhì)型多角體病毒、顆粒體病毒 農(nóng)用抗生素：井岡霉素、春雷霉素、農(nóng)抗120、多抗霉素、阿維菌素 寄生線蟲：小桿線蟲、斯氏線蟲 微孢子原蟲類 感謝下載載精品 3.微生物農(nóng)藥概念：以活體微生物或微生物代謝產(chǎn)物來作為農(nóng)藥，包括殺蟲、殺菌、除草和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)活性等。

15、 4.活體農(nóng)藥主要商品化產(chǎn)品有：蘇云金桿菌、枯草芽孢桿菌、蠟質(zhì)芽孢桿菌、棉鈴蟲核型多角體病毒、粘蟲核型多角體病毒、甘藍(lán)夜蛾核型多角體病毒、短穩(wěn)桿菌、木霉菌 抗生素產(chǎn)品:寧南霉素、伊維菌素、阿維菌素、井岡霉素、多抗霉素、春雷霉素、中生霉素 5.微生物農(nóng)藥特點(diǎn)： 答:優(yōu)點(diǎn)：（1）環(huán)境相容性好 對(duì)非靶標(biāo)生物毒性低，影響小，在大氣、土壤、水體、作物中易于分解，無殘留影響 對(duì)病蟲害特異性強(qiáng)，不殺傷植物病原體、害蟲、雜草的天敵和有害生物，能保護(hù)生態(tài)平衡 （2）不易產(chǎn)生抗藥性 作用成分和作用機(jī)理復(fù)雜，害蟲和病菌抗藥性發(fā)展緩慢，特別是活體微生物農(nóng)藥 （3）資源豐富，開發(fā)成本低 資源豐富，可篩選分離；并可用現(xiàn)代

16、生物技術(shù)手段對(duì)產(chǎn)生菌及其發(fā)酵工藝進(jìn)行改造，不斷改進(jìn)性能和提高品質(zhì) 生產(chǎn)原料和有效成分屬于天然產(chǎn)物，能保證可持續(xù)性發(fā)展 缺點(diǎn)：大多數(shù)微生物農(nóng)藥發(fā)揮作用緩慢 穩(wěn)定性相對(duì)較差，特別是以活體微生物為有效成分的產(chǎn)品 一些微生物農(nóng)藥如活體生物的應(yīng)用等技術(shù)要求高，對(duì)氣候條件要求較嚴(yán)格，不利于農(nóng)民掌握 生產(chǎn)工藝比較復(fù)雜，工業(yè)化生產(chǎn)難度大等，使成本相對(duì)高 存在一定程度的隱患 天敵的安全性問題主要是對(duì)生物多樣性的影響 感謝下載載精品 轉(zhuǎn)基因作物則存在“基因污染”和“基因漂移”等隱患，對(duì)人類有無致病性、致畸性，尚不明確 抗生素令靶標(biāo)生物產(chǎn)生抗性，對(duì)非靶標(biāo)生物也具有一定的毒性 6.微生物農(nóng)藥的發(fā)展方向 答：（1）利用

17、生物工程技術(shù)改造微生物農(nóng)藥 殺蟲工程菌、殺蟲工程植物、工程病毒 (2)科學(xué)使用微生物農(nóng)藥，揚(yáng)長(zhǎng)避短 活體生物農(nóng)藥，應(yīng)靈活運(yùn)用各種使用方法 (3)以化學(xué)和生物相結(jié)合的方法開發(fā)與創(chuàng)制新農(nóng)藥 以天然物質(zhì)為先導(dǎo)化合物i，通過化學(xué)修飾改造，例如甲氨基阿維菌素，活性較阿維菌素提高了10倍 第二章微生物農(nóng)藥研發(fā)的一般原理和方法 1.生產(chǎn)菌種的來源 從自然環(huán)境(土壤、水、動(dòng)植物、礦物、極端環(huán)境)篩選并培育改良 從微生物或培養(yǎng)物保存單位收集菌株并篩選 購置專利菌種 2.細(xì)菌 細(xì)菌種類：芽孢桿菌屬，假單胞菌屬 產(chǎn)生的抗生素：桿菌肽、短桿菌肽、泰樂菌素、多粘菌素、多肽類 提取的優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn) 培養(yǎng)時(shí)間短，對(duì)生產(chǎn)有利

18、缺點(diǎn)：易受到噬菌體的侵襲；易產(chǎn)生粘性強(qiáng)的多糖類 3.真菌 感謝下載載 精品 種類：木霉屬，黏帚霉屬 產(chǎn)生的抗生素類：木霉素、膚霉素、抗菌肽、綠黏帚霉素 放線菌，代謝產(chǎn)物為抗生素，如鏈霉素、阿維菌素、井岡霉素、寧南霉素、武夷霉素、春雷 霉素和滅瘟素其中發(fā)酵工藝和后提取工藝這三個(gè)因素。4.工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)水平的高低主要取決于生產(chǎn)菌種、 擁有良好菌種是前提。菌種主要來源于土壤。依據(jù)相生相克這種微生物農(nóng)藥研究開發(fā)的一般原理即為：5.利用自然界現(xiàn)有的微生物資源， 普遍現(xiàn)象來防治有害生物。微生物農(nóng)藥包括微生物體農(nóng)藥和微生物生物化學(xué)農(nóng)藥（即農(nóng)用抗生素）。微生物體農(nóng)藥的6. 開發(fā)核心在于發(fā)現(xiàn)和馴化，而微生物化學(xué)類

19、生物農(nóng)藥的開發(fā)較為復(fù)雜。 生產(chǎn)菌種的要求7. 1.在較短時(shí)間的發(fā)酵過程中高產(chǎn)有市場(chǎng)價(jià)值的生物農(nóng)藥答： 發(fā)酵培養(yǎng)基價(jià)格低廉、來源充足、轉(zhuǎn)化為產(chǎn)品的效率高 對(duì)人、動(dòng)物、植物和環(huán)境安全 發(fā)酵后副產(chǎn)品少，產(chǎn)品相對(duì)容易分離遺傳特性穩(wěn)定，易進(jìn)行基因操作 8.生產(chǎn)菌種的分離和篩選步驟 答：定方案：查閱資料，了解菌種的生長(zhǎng)培養(yǎng)特性 采樣：有針對(duì)性的采樣 增殖：人為控制養(yǎng)分或培養(yǎng)條件，使所需菌種增殖培養(yǎng)后，在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì) 分離：利用分離技術(shù)得到純種 感謝下載載精品 發(fā)酵性能測(cè)定：進(jìn)行生產(chǎn)性能測(cè)定。包括形態(tài)、培養(yǎng)特征、營養(yǎng)要求、生理生化特性、發(fā)酵周期、產(chǎn)品品種和產(chǎn)量、耐受最高溫度、生長(zhǎng)和發(fā)酵最適溫度、最適PH值、

20、提取工藝等 9.菌種分離：要從混雜的各類微生物中依照生產(chǎn)的要求，采用各種篩選方法，快速、準(zhǔn)確地把所要生物菌種挑選出來 目的：高效地獲取一株高產(chǎn)目的產(chǎn)物的微生物 問題：如何使樣品中所含微生物的可能性最大；如何在后續(xù)的操作中使這種可能性實(shí)現(xiàn) 10.有效成分活性追蹤 以生物測(cè)定（離體和活體）為依據(jù)，建立快捷簡(jiǎn)單、可重復(fù)，且較經(jīng)濟(jì)等要求的活性測(cè)試體系 生測(cè)方法： 殺蟲殺螨活性篩選體系 供試蟲種：具有一定的經(jīng)濟(jì)意義，可大批供應(yīng)，不受季節(jié)限制 如：粘蟲、苜蓿蚜、二斑葉螨、家蠅或庫蚊子、小菜蛾雜擬谷盜 生測(cè)方法：飼料混毒飼蟲法，葉片浸藥飼蟲法，點(diǎn)滴法，藥液浸蟲法 殺菌活性篩選系統(tǒng) 供試菌種：分類上具有一定的

21、代表性，最好是重要的農(nóng)業(yè)植物病害的病原菌；易培養(yǎng)，多代繁殖不易產(chǎn)生變異 如：番茄灰霉病菌、蘋果炭疽病菌、水稻稻瘟病菌、玉米大斑病菌、枯草桿菌、黃瓜霜霉病菌、小麥條銹病菌 生測(cè)方法：生長(zhǎng)速率法、孢子萌發(fā)法、抑菌圈法、組織法、盆栽試驗(yàn)法 感謝下載載精品 除草活性篩選體系 供試植物：反枝莧種子、油菜種子、狗尾草種子，小麥種子 生測(cè)方法：小麥去胚乳法，水瓊脂培養(yǎng)法 11.微生物源生物化學(xué)農(nóng)藥研究開發(fā)的程序與方法（圖示） 12.有效成分的分離與精制方法（圖示） 13.有效成分分離和精制的方法 化合物溶解度不同重結(jié)晶法、沉淀法、酸堿分離法 化合物在兩相溶劑中分兩相溶劑萃取法、逆流連續(xù)萃取法、液滴配比不同逆

22、流層析、高速逆流層析、分配柱層析 化合物吸附能力不同吸附柱層析、薄層層析、聚酰胺吸附層析 化合物離解度不同離子交換樹脂 透析法、凝膠過濾法、超濾法化合物分子量不同 14.活性成分結(jié)構(gòu)研究的一般程序與方法 常用檢測(cè)方法：質(zhì)譜、紅外（IR）、紫外(uv)、圓二色譜（CD）、原子力顯微技術(shù)（AFM）、X-單晶衍射、一維核磁共振譜、二維核磁共振譜 15.試管培養(yǎng)、試管搖床培養(yǎng) 目的：原種斜面培養(yǎng)后，為了提高初篩效率 感謝下載載 精品 搖床上培養(yǎng)250ml-500ml錐形瓶，再200rpm搖瓶培養(yǎng)， 目的：培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的初篩 5L-50L。是搖床向發(fā)酵罐過渡的階段容量玻璃自控發(fā)酵罐 目的：工藝參數(shù)、

23、工藝條件的選擇和考察 試驗(yàn)罐培養(yǎng)、中間工業(yè)試驗(yàn)階段 目的：放大和驗(yàn)證搖床試驗(yàn)結(jié)果，積累發(fā)酵工藝規(guī)律和發(fā)酵參數(shù) 菌株選育、分子改造目的：16. 防止菌種退化、解決生產(chǎn)實(shí)際問題、提高生產(chǎn)能力、提高產(chǎn)品品質(zhì)、開發(fā)新產(chǎn)品 方法： 基因突變：自然選育、誘變育種 基因重組：雜交、原生質(zhì)體融合、基因工程技術(shù)DNA shuffling 基因的直接進(jìn)化：點(diǎn)突變、易錯(cuò)、PCR 微生物活體農(nóng)藥開發(fā)的一定程序17. ）病毒活體農(nóng)藥開發(fā)的一般程序（1 病毒活獲得昆室內(nèi)飼大量飼收集死感染特體生物蟲病毒養(yǎng)活體養(yǎng)技術(shù)亡蟲體定病毒農(nóng)藥制原藥昆蟲改進(jìn)劑 感謝下載載 精品 （2）細(xì)菌真菌活體農(nóng)藥開發(fā)的一般程序與方法 制劑加工產(chǎn)生大

24、采收菌液體、?粉劑固體發(fā)微生物量的菌?干菌絲體、孢固體發(fā)?微膠囊絲和芽酵菌株子酵?漂浮劑生孢子 （3）病原線蟲活體農(nóng)藥開發(fā)的一般程序 大規(guī)模線蟲培制劑活體養(yǎng)應(yīng)用加工線蟲深度大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)線蟲 病毒農(nóng)藥第三章 1.病毒：非細(xì)胞形式的最小有機(jī)體，是一種最原始的生命形態(tài) 病毒由兩部分組成：內(nèi)部是核酸，外部是衣殼，成分是蛋白質(zhì) 只含有一種核酸，DNA或RNA，沒有細(xì)胞器和細(xì)胞構(gòu)造，不能獨(dú)立生活，只能在活的寄主細(xì)胞內(nèi)才能復(fù)制增殖 2.病毒和其他生物的主要區(qū)別 答：病毒只含有一種核酸，DNA或RNA，其他生物一般含有DNA和RNA兩種核酸 病毒依靠自身的核酸通過復(fù)雜的生物合成過程進(jìn)行復(fù)制，在特定的生活的宿

25、主細(xì)胞中進(jìn)行，而不是通過二分裂或類似二分裂方式在特定的宿主活細(xì)胞中進(jìn)行繁殖 病毒缺乏完整的酶系統(tǒng)，不含核糖體，必須利用宿主細(xì)胞的核糖體合成自身蛋白質(zhì)，脫離宿主不能進(jìn)行任何形式的代謝活動(dòng) 在離體條件下能以無生命的生物大分子狀態(tài)存在，并可長(zhǎng)期保持其侵染活力 病毒對(duì)抗菌素或其他對(duì)微生物代謝途徑作用的因子不敏感 感謝下載載精品 病毒對(duì)宿主DNA復(fù)制有一定指導(dǎo)性。例如病毒的核酸整合到宿主的基因組中，并誘發(fā)潛伏性感染 3.病毒的復(fù)制 病毒在活細(xì)胞內(nèi)，以其基因?yàn)槟０?，在酶的作用下，分別合成病毒基因及蛋白質(zhì)，再組裝成完整的病毒顆粒，這種方式稱為復(fù)制。 從病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞開始，經(jīng)過基因組復(fù)制和病毒蛋白合成至釋放

26、出子代病毒的全過程，稱為一個(gè)復(fù)制周期 病毒復(fù)制周期：包括吸附、侵入、脫殼、大分子合成、裝配與釋放五個(gè)連續(xù)步驟 4. 昆蟲病毒分類與性狀 4.1病毒粒子特性 （1）病毒的形態(tài)特征（囊膜、粒子的大小、性狀及亞顯微結(jié)構(gòu)） （2）生理生化和物理性質(zhì)（如分子量、沉降系數(shù)） （3）病毒基因組（核酸的類型、單雙鏈、線狀或環(huán)狀） （4）病毒蛋白（結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白的數(shù)量、大小、功能、活性） （5）病毒脂類和碳水化合物的含量和特性 （6）病毒基因組組成和復(fù)制特性 4.2病毒抗原性質(zhì)（病毒粒子及有關(guān)血清學(xué)性質(zhì)）、 4.3病毒生物學(xué)特性（天然寄主范圍、傳播特性、分布、致病機(jī)理、引發(fā)的病理和組織病理學(xué)特點(diǎn)） 5.

27、根據(jù)病毒核酸類型分為 （1）雙鏈DNA病毒（有囊膜） 感謝下載載精品 囊膜（envelope）是指病毒外殼包被的由蛋白質(zhì)、多糖和脂類構(gòu)成的類脂雙層膜，也稱為包膜。囊膜主要來源于宿主細(xì)胞膜（磷脂層和膜蛋白），但也包含有一些病毒自身的糖蛋白。病毒囊膜的主要功能是幫助病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞。 桿狀病毒科多分DNA病毒科痘病毒科泡囊病毒 （2）雙鏈DNA病毒（無囊膜） 虹彩病毒科細(xì)尾病毒科 （3）單鏈DNA病毒（無囊膜） 細(xì)小病毒科 （4）雙鏈RNA病毒 呼腸孤病毒科二分RNA病毒科 （5）單鏈RNA病毒 微RNA病毒科 野田村病毒科 T4病毒科 （6）DNA和RNA反轉(zhuǎn)錄病毒，包括： 前病毒科變位病毒科

28、6. 根據(jù)包涵體在寄主細(xì)胞中的部位分類 核型多角體病毒（NPV） 棉鈴蟲、粘蟲和桑毛蟲的核型多角體病毒 家蠶、馬尾松松毛蟲、茶毛蟲、棉鈴蟲、小） CPV質(zhì)型多角體病毒（地老虎 顆粒體病毒（GV） 菜青蟲、小菜蛾、茶小卷葉螟、稻縱卷葉螟 美麗姬蜂非包涵體病毒1無包涵體病毒 型、橄欖實(shí)蠅非包 感謝下載載 精品涵體病昆蟲痘病 7. 昆蟲病毒包括兩類就可以認(rèn)為是昆蟲病昆蟲病毒：泛指以昆蟲為宿主的病毒，即只要在昆蟲體內(nèi)增殖的病毒， 毒 蟲媒病毒:能在昆蟲體內(nèi)增殖，不表現(xiàn)病原性，它們以昆蟲為中間介體傳給其他動(dòng)物或植物 在生物防治中用于防治害蟲昆蟲病原病毒：可以在昆蟲體內(nèi)增殖，對(duì)寄主昆蟲表現(xiàn)致病性， 也為桿

29、狀病毒 我國絕大部分為桿狀病毒，國際60%8.NPV ，美國首個(gè)商品化制劑是棉鈴蟲1971 9. 病毒殺蟲劑優(yōu)缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn)：選擇性好：不損傷天敵，不易引起生態(tài)平衡的破壞 傳播性強(qiáng)：很快擴(kuò)散蔓延，造成流行病 持久性長(zhǎng)：包涵體可抵抗不良環(huán)境，具有非常好的穩(wěn)定性 經(jīng)濟(jì)效益高：劑量低，使用方便 安全無害：無殘留 缺點(diǎn)： 10防治效果慢：天，潛伏期較長(zhǎng)，往往降低其商業(yè)價(jià)值和實(shí)際效果 防治譜窄：不能成功得用來防治種植地區(qū)生長(zhǎng)季節(jié)內(nèi)繁衍的多種害蟲 受到溫度、陽光等環(huán)境條件影響大 不易生產(chǎn) 感謝下載載 精品 存在的安全隱患： 昆蟲病毒、其它的無脊椎動(dòng)物、脊椎動(dòng)物和植物病毒之間并無明確的界限又能寄生植朋揚(yáng)病毒科、

30、彈狀病毒科的全體成員既能使昆蟲致死，呼腸孤病毒環(huán)狀病毒屬、 物；野田村病毒既能使昆蟲發(fā)病，又能使哺乳動(dòng)物發(fā)病致死 病毒10. DNA ）昆蟲痘病毒（EPV1）NPV (2)GV (3)（病毒科、虹彩病毒科、泡囊病毒科、多分DNA）其它DNA病毒 5(4) DNV細(xì)小病毒（ 細(xì)尾病毒科、棕櫚獨(dú)角仙病毒 桿狀病毒（樹頂病，宿主專一性）11. 病毒DNA發(fā)現(xiàn)最早、數(shù)量最大、研究最多最實(shí)用的節(jié)肢動(dòng)物特異性的 種左右桿狀病毒殺蟲劑試用或應(yīng)用研發(fā)現(xiàn)狀：20 舞毒蛾春尺蠖NPV,NPV,亞組核型多角體病毒，如家蠶NPV，棉鈴蟲NPV,松毛蟲ANPV NPV,中國刺蛾NPV,斜紋夜蛾NPV,粘蟲GV 茶小卷葉

31、蛾，菜粉蝶GV,GVB亞組顆粒體病毒，如黃地老虎 C亞組非包涵體核型桿狀病毒，如印度棕櫚獨(dú)角仙病毒 基因組核型桿狀病毒，如甜菜尺蠖姬蜂病毒D亞組非包涵體多分體DNA 桿狀病毒致病癥狀：初期，行動(dòng)遲緩，缺乏食欲，體軀腫脹，變黃或乳白色，皮膚變脆，組 織液化，一觸即破 感謝下載載 精品 后期：趨向最高處。如植株頂端，頭朝下倒掛，“樹頂病” 桿狀病毒殺蟲劑特點(diǎn) 感染病毒的幼蟲形成大量包涵體，擴(kuò)散，傳播? 宿主專一性，宿主僅限于節(jié)肢動(dòng)物，對(duì)脊椎動(dòng)物、植物完全不感染應(yīng) 桿狀病毒有? 用安全研究最多，且實(shí)用意義最主要見于昆蟲體內(nèi)，是已知昆蟲病毒中類群最大、? 發(fā)現(xiàn)最早、 大的 主要應(yīng)用：作為載體，表達(dá)外源

32、基因 作為殺蟲劑，有效地控制農(nóng)業(yè)害蟲的發(fā)生，并且對(duì)環(huán)境不造成污染 殺蟲活性：主要為鱗翅目，其次是膜翅目、雙翅目、鞘翅目、直翅目多種害蟲有效，克服防治譜窄，但活性10舉例：光譜的桿狀病毒，苜蓿銀紋夜蛾病毒，對(duì) 1-2個(gè)數(shù)量級(jí)低 包涵體：在感染病毒的昆蟲細(xì)胞內(nèi)形成特殊的蛋白質(zhì)晶體顆粒微10：是指隨著某種昆蟲病毒的感染，核內(nèi)或細(xì)胞質(zhì)中形成直徑0.5polyhedra 多角體它的功能中間包藏著數(shù)目不定的病毒粒子。米的多面體，由晶狀排列的堿溶性蛋白質(zhì)組成，而在堿中易溶是保護(hù)病毒顆粒免受外界各種不良環(huán)境的破壞，它對(duì)各種蛋白分解酶有抗性， 解，釋出病毒粒子。NPV 1（）核多角體病毒病毒，主要寄生鱗翅目，在

33、雙翅目、膜翅目、鞘翅目等也有，DNA專一性侵染節(jié)肢動(dòng)物的 感謝下載載精品 僅脊椎動(dòng)物中發(fā)現(xiàn) 形態(tài)特征 病毒粒子呈桿狀、具囊膜，雙鏈環(huán)狀DNA分子，DNA分子以超螺旋形式壓縮包裝在桿狀衣殼內(nèi)，90-180kb 病毒束：在NPV中，每個(gè)囊膜可以包封一個(gè)至多個(gè)核衣殼，一個(gè)囊膜內(nèi)有多個(gè)排列成束的核衣殼的，常稱為病毒束 判斷：同一品系或分離株病毒的多角體的形狀是趨于穩(wěn)定的 相同寄主而不同品系或分離株病毒的多角體形狀和平均大小可能差別很大 舉例：盜毒蛾幼蟲體分離的NPV的兩菌株，一個(gè)多角體是多角形狀的，另一個(gè)是立方體的。 多角體的表面有膜，若多角體被溶解，則會(huì)留下囊狀空炮，再延長(zhǎng)時(shí)間，也會(huì)被溶解，與核膜相

34、似。 在NPV中，每個(gè)囊膜可以包封一個(gè)至多個(gè)核衣殼，一個(gè)囊膜內(nèi)有多個(gè)排列成束的核衣殼的，常稱為病毒束 獲得囊膜的病毒粒子被隨機(jī)的包埋在蛋白質(zhì)構(gòu)成的結(jié)晶狀多角體之內(nèi)，一個(gè)多角體可以包埋一個(gè)至多個(gè)病毒粒子。而未被包埋的病毒粒子則只有核衣殼。 核型多角體病毒根據(jù)病毒粒子囊膜內(nèi)包含核衣殼的數(shù)目分為兩類 MNPV :即多核衣殼核型多角體病毒，指一個(gè)囊膜包含多個(gè)核衣殼 SNPV單核衣殼 包涵體大小為0.5-15微米 判斷：兩種不同包埋型的病毒，與不同的病毒品系或分離株有關(guān)，是由遺傳性決定的； 棉鈴蟲、斜紋夜蛾、盜毒蛾都是MNPV 同一種昆蟲的兩種不同包埋型的NPV，它們對(duì)寄主的感染力、專一性、對(duì)環(huán)境的抵抗

35、力以 感謝下載載 精品 及多角體蛋白的化學(xué)特性、血清學(xué)特征等方面都可能有較大差異 NPV理化性質(zhì) ? 對(duì)不同化學(xué)藥劑具有高度抵抗力 ? 不溶于水和各種有機(jī)溶劑 ? 不被細(xì)胞或細(xì)胞蛋白酶分解 時(shí)，可被胰蛋白酶破壞值2-2.9 ?在PH ?溶于強(qiáng)酸和強(qiáng)堿 比重大于水，稍耐低溫，不耐高溫? 不溶于昆蟲血淋巴，所以將其接種于昆蟲的血腔，幼蟲不會(huì)感染 ? 必須通過幼蟲食入，經(jīng)消化液消化后，才能釋放出有感染能力的病毒粒子? 年后，在碳 ?經(jīng)干燥后，可以保存多年性質(zhì)不變，如家蠶多角體在無水氯化鈣中保存37 酸鈉中的溶解性不變 多角體一般不受破壞可以抵抗細(xì)菌的腐敗作用，在提純或死蟲尸體為細(xì)菌污染的時(shí)候，? 在

36、昆蟲幼蟲消化液中的溶解性不受寄主范圍的限制，對(duì)非敏感昆蟲也如此?但經(jīng)酸堿處理后可為一些染料所成熟的多角體不易被一般染料著色，? 有較強(qiáng)的折光性， 強(qiáng)染 NPV復(fù)制過程 重要特點(diǎn)：具有兩種不同表現(xiàn)性，產(chǎn)生兩種不同形態(tài)、不同功能的病毒粒子 BV）出芽型病毒粒子（包涵體來源型病毒粒子(ODV) 感謝下載載 精品 兩種表現(xiàn)型的病毒粒子形成雙相復(fù)制周期并感染宿主中腸上皮細(xì)胞，病毒在中第一階段：包涵體在宿主中腸內(nèi)被堿裂解釋放出ODV, 該過程也稱為初級(jí)感染。腸細(xì)胞內(nèi)復(fù)制與增殖產(chǎn)生子代BV, BV 再感染其他組織與細(xì)胞，引起宿主系統(tǒng)感染，即次級(jí)感染第二階段，增殖后的由多角體保護(hù)著，最后宿主幼蟲的ODV晚期產(chǎn)

37、生了大量的ODV，BV,此階段感染早期產(chǎn)生 細(xì)胞核充滿了多角體并液化 致病機(jī)理NPV并出現(xiàn)最初的復(fù)侵入上皮細(xì)胞，通過幼蟲口服侵入，多角體在易感蟲體中腸內(nèi)迅速溶解， 制最終由于病毒蛋白酶的產(chǎn)引起昆蟲腫脹，厭食，在侵染昆蟲細(xì)胞核內(nèi)充滿大量的多角體， 生，細(xì)胞核和細(xì)胞裂解，導(dǎo)致昆蟲死亡蟲體導(dǎo)致昆蟲表皮解體，昆蟲死亡后，病毒編碼的幾丁質(zhì)酶和組織蛋白酶的進(jìn)一步作用， 組織液化，大量多角體釋放進(jìn)入環(huán)境中 中毒癥狀：內(nèi)不表現(xiàn)癥狀，初期無明顯變化，漸而行動(dòng)遲緩，食欲減退，體色變淡或油光色，血2-5d 淋巴變?nèi)榘咨?。天?nèi)死亡，表現(xiàn)為表皮易破，體內(nèi)組織液化，內(nèi)部含有大量多角體，破后流出乳白色5-12 或褐色濃稠液

38、體。 殺蟲劑的生產(chǎn)NPV 感謝下載載精品 適齡健康幼蟲，感染病毒后，感病幼蟲擴(kuò)增病毒，收集蟲尸，低溫貯存含病毒蟲尸，高速勻漿過濾，得到粗制多角體，差速離心，提純多角體。加乳液添加劑得到乳劑，加固體添加劑并干燥得到粉劑。生測(cè)之后產(chǎn)品包裝。 NPV生產(chǎn)中應(yīng)該注意的問題： 1. 生產(chǎn)環(huán)境的消毒和條件控制 車間、使用器具必須嚴(yán)格消毒；溫度20-26、濕度50%、光照 2. 人工飼養(yǎng)宿主昆蟲 人工合成飼料 3. 病毒感染液的制備和感染 通常用感病幼蟲蟲尸提取病毒多角體作為接種源，也可以用組織培養(yǎng)的細(xì)胞增殖的病毒作為毒源 4.病毒收獲和制劑的加工 將病蟲和蟲尸低溫儲(chǔ)藏，進(jìn)行抽提：勻漿、過濾、離心濃縮、制成

39、懸浮劑或粉劑 4. 病毒制劑毒力生物測(cè)定 產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化的核心是生物活性測(cè)定 病毒活體生物測(cè)定，用敏感昆蟲測(cè)試，指標(biāo)是LD50，根據(jù)幼蟲死亡率計(jì)算 病毒離體生物測(cè)定，以昆蟲細(xì)胞為對(duì)象直接測(cè)定病毒對(duì)昆蟲細(xì)胞的感染效價(jià)。 空斑測(cè)定法 在用苜蓿銀紋夜蛾NPV感染夜蛾細(xì)胞的時(shí)候，在培養(yǎng)的單層細(xì)胞上覆蓋一層瓊脂糖，限制了新生病毒粒子的運(yùn)動(dòng)，這樣一個(gè)病毒粒子感染可使集團(tuán)病變的細(xì)胞形成一個(gè)空斑。產(chǎn)生一個(gè)空斑的病毒量為一個(gè)空斑形成單位PFU 推廣最多，最成功得是棉鈴蟲NPV (2) 顆粒體病毒GV殺蟲劑 感謝下載載 精品 (3) 最初從患病的大菜粉蝶中發(fā)現(xiàn)，主要存在于鱗翅目昆蟲幼蟲中，致病性較強(qiáng) 顆粒體病毒的理化

40、性質(zhì) 1. 比重大于水 2. 不溶于水及多種有機(jī)溶劑 強(qiáng)酸強(qiáng)堿下迅速溶解，并使粒子變性失活3. 耐低溫，高溫和紫外線易使粒子失活4. 有包涵體的顆粒體病毒，在外界環(huán)境中較穩(wěn)定，在室內(nèi)和野外土壤中可存活數(shù)年5. 6. 沒有包涵體保護(hù)的顆粒體，穩(wěn)定性差 顆粒體（蒴狀體）是包涵和保護(hù)病毒粒子的結(jié)晶狀蛋白質(zhì)，呈卵形、橢圓形、腎形 顆粒體病毒的生物學(xué)特性 屬于桿狀病毒，病毒粒子由一個(gè)桿狀的核衣殼包圍在囊膜內(nèi)而組成，粒子呈桿狀GV 顆粒體（蒴狀體）是包涵和保護(hù)病毒粒子的結(jié)晶狀蛋白質(zhì)，呈卵形、橢圓形、腎形 一個(gè)顆粒體僅包埋一個(gè)（偶爾2個(gè)）病毒粒子 顆粒體的致病機(jī)理相似，被敏感昆蟲攝入體內(nèi)后，顆粒體在消化道中

41、被堿性消化液溶解，侵染途徑：與NPV形成新的病毒粒病毒粒子通過中腸柱形細(xì)胞的微絨毛侵入細(xì)胞，通過核孔進(jìn)入細(xì)胞核增殖， 子和包埋入顆粒體 中毒癥狀 初期無明顯病癥，因顆粒體大量在脂肪體中積累，腹部出現(xiàn)蒼白或乳黃色感病幼蟲幼蟲期比正常幼蟲要長(zhǎng)一些，體積更大，隨著體色變化，幼蟲活力通常變?nèi)?，行?dòng) 感謝下載載 精品 遲鈍，身體變軟，皮膚易破 顆粒體病毒殺蟲劑的生產(chǎn)和應(yīng)用表現(xiàn)更高的宿主專一性，主要是人工飼養(yǎng)昆蟲，然后GV生產(chǎn)原理和方法與NPV相同，但 ，等病蟲瀕死時(shí)收集蟲尸，再配成殺蟲劑。感染GV具有更NPVGV殺蟲劑通常比GV也是具有包涵體的病毒，病毒粒子能抵抗外界不良環(huán)境。 高的殺蟲專一性 EPV）

42、殺蟲劑（2）痘病毒（通常呈磚形或橢圓形，病毒形具囊膜。EPVEPV屬于痘病毒科，雙鏈DNA,形態(tài)特征 態(tài)相似，大小隨寄主不同而不同。 包涵體有兩類：球形體，包埋病毒粒子 紡錘體，不含病毒粒子 類似于多角體蛋白和顆粒體病毒蛋白，是一種結(jié)晶蛋白結(jié)構(gòu)，基質(zhì)蛋白叫球形蛋白，球形體： 蛋相對(duì)分子量要打，不同宿主甚至同一宿主不同細(xì)胞中球形體包含的病毒粒子數(shù)不等 紡錘體：出現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)中的核周邊區(qū)，功能和意義尚不明確。 致病機(jī)理EPV EPV感染脂肪體細(xì)胞，也有些能感染較多組織。宿主范圍小，不同科之間無交叉感染。有些 后，表現(xiàn)為蟲體發(fā)白發(fā)軟，蛹期延長(zhǎng)，幼蟲比正常的大。鱗翅目昆蟲感染EPV 后，脂肪體和真皮中包

43、涵體的增殖使體色逐漸發(fā)白。EPV鞘翅目昆蟲感染 感謝下載載精品 EPV殺蟲劑生產(chǎn) 我國首次發(fā)現(xiàn)的蝗蟲痘病毒是西伯利亞蝗蟲痘病毒，接著發(fā)現(xiàn)亞洲小車蝗蟲痘病毒。意大利蝗蟲痘病毒等五種。 （3）DNV細(xì)小病毒科殺蟲劑 細(xì)小病毒是最小的DNA動(dòng)物病毒，為單鏈DNA，無囊膜。大多數(shù)細(xì)小病毒DNV病毒對(duì)環(huán)境抗性較強(qiáng)，能夠水解蛋白酶及核酸水解酶 感染DNV的幼蟲，病變發(fā)生在細(xì)胞核內(nèi)，核明顯膨大 殺蟲活性 國外：蠟螟濃縮核癥病毒和鹿眼蝶濃縮核癥病毒 國內(nèi)：菜粉蝶濃縮核癥病毒 可感染：鱗翅目，鞘翅目、膜翅目 （4）虹彩病毒 形態(tài)：病毒粒子為二十面體。直徑為120-200毫微米，核酸為雙鏈DNA,無膜，無包涵體。

44、 代表種為：二化螟虹彩病毒，是鱗翅目幼蟲感染虹彩病毒的首例， 昆蟲癥狀與致病機(jī)理 食入病毒感染，粒子大量復(fù)制，在組織內(nèi)形成大量結(jié)晶體，活體昆蟲出現(xiàn)虹彩顏色。 感染部位主要在脂肪細(xì)胞， 其次為皮膚上皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和肌肉細(xì)胞 殺蟲活性：雙翅目，鱗翅目，也可感染鞘翅目、半翅目和膜翅目昆蟲 感謝下載載精品 主要寄主：棉鈴象甲，葉跳蟲，深山葉蟬，黑尾葉蟬、小褐飛虱、蚊蟲 12. RNA病毒殺蟲劑 質(zhì)型多角體病毒CPV,其他RNA殺蟲病毒（雙RNA病毒科，野田村病毒科，四對(duì)稱病毒科） （1）質(zhì)型多角體病毒CPV 屬于呼腸孤病毒科。侵襲昆蟲消化管，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)寄生，細(xì)胞核中無多角體。已在鱗翅目、雙翅目、膜翅

45、目、鞘翅目、脈翅目中發(fā)現(xiàn)。 cpv致病機(jī)理 CPV是通過幼蟲攝食CPV多角體侵入，主要感染幼蟲的中腸部位，約4天后表現(xiàn)癥狀 癥狀：初期：食欲不振，體型縮小，比例失調(diào)成大頭，長(zhǎng)刺毛。幼蟲消化道出現(xiàn)不透明和淡黃色或乳白色，失去半透明和淡綠色。 后期：表皮出現(xiàn)白色斑塊。中腸細(xì)胞液化后，多角體可被嘔吐出來或由糞便排出。 影響病毒防治效果的因素： （1）病毒本身 選擇毒力高的病毒株系，適宜濃度、次數(shù)、時(shí)間 （2）防治對(duì)象 （3）環(huán)境因素 （4）溫度、光照、pH值 CPV大量生產(chǎn)與應(yīng)用 感謝下載載精品 天然飼料人工飼料飼養(yǎng)昆蟲。原理簡(jiǎn)單：活蟲體、活細(xì)胞、活組織 采集或引進(jìn)昆蟲病毒的原種：不同單株毒力不同，

46、且差異很大，所以一定要選用最好的病毒 株 必須經(jīng)濟(jì)方便：選用最易感染的昆蟲 找出一個(gè)最適宜的接種量，蟲期、環(huán)境條件。 舉例：我國CPV，馬尾松毛蟲CPV,茶毛蟲CPV/棉鈴蟲CPV和文山松毛蟲 馬尾松毛蟲不能人工飼料飼養(yǎng)。 在生產(chǎn)馬尾松松毛蟲CPV時(shí)采用直接感染宿主昆蟲增殖病毒，最簡(jiǎn)便的方法是在害蟲大發(fā)生時(shí)，將病毒噴灑于植物上，然后手收集病死蟲。 *林建圍欄增殖法是我國生產(chǎn)松毛蟲最常用的方法。 CPV大量生產(chǎn)的方法： 直接在害蟲自然種群中繁殖： 蟲口密度大，適當(dāng)蟲期噴，把死蟲收回，最簡(jiǎn)便，適于一些害蟲在室內(nèi)不易人工培養(yǎng)，如葉蜂，森林上的害蟲 野外采集，采回（小區(qū)、室內(nèi)）接種 完全在室內(nèi)條件下用

47、自然或人工合成的飼料來繁殖：斜紋夜蛾，地老虎 NPV殺蟲劑生產(chǎn)工藝 NPV的采集、分離、鑒定 重組昆蟲桿狀病毒 NPV毒株的引進(jìn) 天然飼料養(yǎng)、添食，使用人工半合成飼料 NPV感染，大量增殖 NPV大量增殖 直接從野外大量收 NPV蟲尸集感病蟲體的收集、破 感謝下載載 碎、勻漿過濾精品 昆蟲病毒的傳播與誘發(fā) 水平傳遞：經(jīng)污染的環(huán)境和食物傳給健康昆蟲 垂直傳遞：經(jīng)雌蟲所產(chǎn)的卵傳遞給后代由患病幼蟲傳播：患病毒而死亡的 1.幼蟲，從其尸體釋放出大量的病毒，這些病毒留在植物或其食物上，甚至嚴(yán)重污染周圍環(huán)境，從而感染其他健康昆蟲，或從口或糞便中排出病毒。 2.患病成蟲傳播，飛行，交尾傳播 3.鳥類或其他媒

48、介傳播 鳥類取食，糞便。寄生昆蟲。 應(yīng)用 短期防治長(zhǎng)期防治選擇防治：利用?；詮?qiáng)、蟲口密度低時(shí)殺死一部分，協(xié)調(diào)防治。 感謝下載載 精品 注意事項(xiàng) 1.防治對(duì)象 2.密度比水大 3.口服進(jìn)入消化道 4.較長(zhǎng)的潛伏期 5.使用環(huán)境 混用6. 經(jīng)驗(yàn)和秸稈 單獨(dú)使用 增效作用。迫發(fā)劑。原理：亞致死劑量的化學(xué)農(nóng)藥提高了寄主昆蟲對(duì)病毒的感受性混用 +短效8010 等 長(zhǎng)效混用生物農(nóng)藥 病毒+病毒 干擾作用：研究有益昆蟲病毒?。ㄐQ、蜂） 增效作用： 移栽法：苗浸泡再移栽，目的：把病毒引入生態(tài)學(xué) 病蟲釋放法： 土壤 思考題： 1.病毒農(nóng)藥防治害蟲的優(yōu)缺點(diǎn)？ 2.生產(chǎn)病毒殺蟲劑需要解決哪些關(guān)鍵問題？ 感謝下載載

49、 精品 怎樣才能使用好病毒農(nóng)藥？3. 昆蟲病原病毒和蟲媒病毒區(qū)別4. 桿狀病毒兩種表現(xiàn)型有什么差別5. NPV CPV6.比較的致病機(jī)理 7.改造病毒殺蟲劑的方法有哪些 8.簡(jiǎn)述NPV復(fù)制周期 9.基因工程病毒殺蟲劑的應(yīng)用前景 分類總結(jié)： 病毒DNA松毛蟲，棉鈴蟲NPV,（呈桿狀、具囊膜，雙鏈環(huán)狀）NPV DNA分子 ）家蠶NPV（1NPV, 舞毒蛾NPV,春尺蠖NPV, NPV復(fù)制過程 重要特點(diǎn)：具有兩種不同表現(xiàn)性，產(chǎn)生兩種不同形態(tài)、不同功能的病毒粒子 ）出芽型病毒粒子（BV包涵體來源型病毒粒子(ODV) 此階段感染早期產(chǎn)生BV,晚期產(chǎn)生了大量的ODV，ODV由多角體保護(hù)著，最后宿主幼蟲的細(xì)胞核充滿了多角體并液化 (2)GV 如黃地老虎GV，菜粉蝶GV,茶小卷葉蛾GV D NA雙鏈、超螺旋、共價(jià)閉合環(huán)狀 (3)昆蟲痘病毒（EPV） 感謝下載載精品 雙鏈DNA,具囊膜 包涵體有兩類：球形體，包埋病毒粒子 紡錘體，不含病毒粒子 (5) DNV細(xì)小病毒（單鏈DNA，無囊膜 (6) 其它DNA病毒 多