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文檔簡(jiǎn)介

1、書山有路勤為徑,學(xué)海無涯苦作舟。植物組織培養(yǎng)課心得演講稿 關(guān)于植物組織培養(yǎng)技術(shù)的感想 植物組織培養(yǎng)俗稱植物克隆,是當(dāng)今國(guó)際農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的一項(xiàng)高新植物育苗技術(shù),是在無菌條件下,將植物器官、組織、花藥、體細(xì)胞甚至原生質(zhì)體等外植體接種到人工配制的培養(yǎng)基上培育成植株的技術(shù)。研究人員可以通過研究外植體其在不受植物體其他部分干擾的條件下的生長(zhǎng)和分化規(guī)律,另一方面,研究植物體的器官、組織和細(xì)胞在改變培養(yǎng)條件,包括培養(yǎng)基的配方、光照和培養(yǎng)溫度等的生長(zhǎng)、分化和發(fā)育規(guī)律,從而解決植物形態(tài)建成中的實(shí)際問題,為農(nóng)林、醫(yī)學(xué)等生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)及實(shí)踐指導(dǎo)。 一、植物組織培養(yǎng)的原理 植物細(xì)胞的全能性是指植物體的任何一個(gè)細(xì)胞都具有

2、生長(zhǎng)分化成為一個(gè)完整植株的能力,整個(gè)過程包括細(xì)胞的脫分化和再分化過程。植物組織培養(yǎng)是利用植物細(xì)胞全能性,將其從植物體中分離出來,這一過程稱細(xì)胞脫分化,然后在一定的培養(yǎng)條件下經(jīng)再分化,最后形成完整的植株的過程。 二、植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)條件 植物組織培養(yǎng)的技術(shù)條件主要包括培養(yǎng)基的配制、無菌條件和培養(yǎng)條件等。 (一)培養(yǎng)基的配制 植物組織培養(yǎng)中一個(gè)關(guān)鍵的步驟。對(duì)組織培養(yǎng)的外植體生長(zhǎng)而言,培養(yǎng)基的組分是一個(gè)決定性的因素,不同的植物材料要求不同的培養(yǎng)基,適于誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基不一定適于器官分化,適于固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基不一定適于液體培養(yǎng),因此要想獲得成功,必須精心選擇適宜的培養(yǎng)基。根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài),可

3、將植物組織培養(yǎng)分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)。不同的外植體、不同的培養(yǎng)方法、不同的培養(yǎng)目的等,都要求采用不同的培養(yǎng)基。 一般來說植物體對(duì)土壤的ph值有一定的要求,所以外植體培養(yǎng)基也不例外。目前,在植物組織培養(yǎng)上常用的培養(yǎng)基有十幾種,其主要成分是大致如下:首先,培養(yǎng)基中含有大量的水分,可以滿足外植體生長(zhǎng)對(duì)水分的需要。 其次,培養(yǎng)基中的礦質(zhì)元素包括植物必需的大量礦質(zhì)元素n、p、k、ca、mg、s和微量元素fe、mn、b、cu、zn、mo、cl以及非必需的na等。糖除了給外植體提供碳源外,還可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透勢(shì)。碳源一般采用蔗糖,少量采用葡萄糖,濃度各有不同。 植物生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素要根據(jù)培養(yǎng)的目的適當(dāng)選用

4、??刹捎胕aa、iba和naa、kt、6-ba、zt等。在誘導(dǎo)根和芽的等不同分化時(shí)段,還需根據(jù)要求調(diào)整培養(yǎng)基養(yǎng)分的比值。維生素b(硫胺素)是必需的,而煙酸、b16雖屬于不必需,但對(duì)生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,所以一般也添加到培養(yǎng)基中。有些培養(yǎng)基中還包括氨基酸、水解酪蛋白、酵母汁、椰子乳等有機(jī)附加物,以促進(jìn)細(xì)胞的分化。 (二)無菌條件 根據(jù)前面的配制可知,由于營(yíng)養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)十分豐富,微生物極易滋生而造成污染,因此,在植物組織培養(yǎng)的整個(gè)過程中都必須保持嚴(yán)格的無菌條件。所以消毒顯得重要。外植體的消毒通常采用氯化汞、過氧化氫、次氯酸鈣、次氯酸鈉或70%的酒精等,消毒后需用無菌水充分沖洗。用具必須進(jìn)行高溫高壓滅菌。培

5、養(yǎng)室要盡量保持無菌狀態(tài),定期用紫外燈照射和用殺菌劑熏蒸殺菌。 (三)培養(yǎng)條件 自然界中的植物體所需的光、溫、水、氣,植物組織培養(yǎng)時(shí)也同樣所需要。水分和氧氣條件一般容易得到滿足,而植物組織培養(yǎng)條件可通過人為控制光照和溫度,溫度一般控制在2528之間,有的還要求有晝夜溫差,主要通過控制光強(qiáng)和光周期進(jìn)行調(diào)節(jié)。人工光照一般采用日光燈,也可以透光的玻璃培養(yǎng)室利用自然光照。 三、植物組織培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn) (一)植物組織培養(yǎng)技術(shù)優(yōu)點(diǎn) 植物可以不受生長(zhǎng)季節(jié)限制地繁殖;不攜帶病毒,防止植物病毒的危害,極大的提高了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)效率;培養(yǎng)周期短,短時(shí)間內(nèi)大批量的培育出所需要的植物新個(gè)體;可用組培中的愈傷組織制取特殊的生化制

6、品;可短時(shí)間大量繁殖,用于拯救瀕危植物;可誘導(dǎo)之分化成需要的器官,如根和芽;解決有些植物產(chǎn)種子少或無的難題,如將香蕉進(jìn)行組培得到人工種以方便移種。 (二)植物組織培養(yǎng)的缺點(diǎn) 為了滿足人們生活需要,吃飯問題已經(jīng)與組培快繁密不可分了。由于培養(yǎng)基幾乎完全屬于人為調(diào)配獲得的,這就導(dǎo)致一個(gè)問題,調(diào)控的人是否理解植物的特性、是否熟悉培養(yǎng)基的理論和植物生理、是否有足夠的經(jīng)驗(yàn)來駕馭組織培養(yǎng)技術(shù),這幾點(diǎn)都決定了組培育苗的品質(zhì)。如果嚴(yán)格把關(guān)組培過程的話,那么組織培養(yǎng)或快速繁殖所獲得的苗,跟葉插、砍頭苗完全一樣,能最大程度的保留了植物的完整基因組。這是組培快繁的最大優(yōu)勢(shì),這也就決定了目前重要的作物、名貴花卉的繁殖和

7、保存也都是組培快繁的途徑實(shí)現(xiàn)的。 轉(zhuǎn)基因植物食品對(duì)我們來說已經(jīng)是一個(gè)公開的話題,也是借助組培快繁平臺(tái)來完成,我們生活中至少接觸30種轉(zhuǎn)基因植物的衍生產(chǎn)品。資料顯示這些衍生產(chǎn)品的缺點(diǎn)也比較明顯:1)表現(xiàn)為“硬化”不足,即從實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入溫室后進(jìn)行馴化栽培時(shí)間不夠,行內(nèi)稱作“硬化”。2)激素殘留明顯,或者對(duì)激素的敏感性變化,少部分苗會(huì)在后期發(fā)根后呈現(xiàn)出一些殘留激素效應(yīng),這種效應(yīng)不會(huì)超過一年,表現(xiàn)為容易出側(cè)芽、大量畸形根、生長(zhǎng)周期紊亂、開花增多等。但是這種情況并不是組培快繁苗所特有,用激素誘導(dǎo)的葉插和砍頭苗也會(huì)出現(xiàn)這種癥狀,甚至更夸張。因此這一點(diǎn)并不是鑒別組培苗的根本。3)對(duì)有性繁殖的影響,由于組培快繁

8、獲得的苗都是小苗,需要經(jīng)過硬化和長(zhǎng)期的溫室栽培才可能開花,所以一般存在對(duì)有性繁殖無影響。4)根原基異常,由于激素環(huán)境下會(huì)對(duì)導(dǎo)致根原基維管束的排列紊亂,這就導(dǎo)致了出根可能會(huì)受到抑制,正常的根無法順利萌發(fā)。 四、植物組織培養(yǎng)在生產(chǎn)實(shí)踐上的應(yīng)用 (一)植物體的無性快速繁殖及脫毒 用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行植物的無性快速繁殖,已廣泛應(yīng)用于一些花卉、果樹等園藝作物、農(nóng)作物以及林木的育苗。如廣東、廣西和海南島香蕉的種植已大多采用試管苗,甘蔗和蘭花試管苗也已大量應(yīng)用于生產(chǎn),柑橘、菠蘿、草莓、桉樹以及其他許多花卉等也利用試管苗進(jìn)行栽培。 受病毒感染的馬鈴薯植株,除了莖尖生長(zhǎng)錐外,其他部位往往都帶有病毒。因此,繼續(xù)用塊

9、莖作繁殖材料,必將導(dǎo)致后代植株染病。若利用莖尖生長(zhǎng)錐作外植體進(jìn)行無性快速繁殖,所生產(chǎn)出的幼苗將不帶病毒,從而達(dá)到脫毒的目的,可解決馬鈴薯品種的退化問題。利用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行無性快速繁殖具有許多優(yōu)缺點(diǎn),在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)該注意揚(yáng)長(zhǎng)避短,本著良心去做事,最好是建立相應(yīng)的法規(guī)并嚴(yán)格執(zhí)行。 (二)花粉培養(yǎng)和單倍體育種 利用花粉進(jìn)行組織培養(yǎng)可以獲得單倍體植株。進(jìn)行單倍體育種,可以加速育種的進(jìn)程并可獲得純系。我國(guó)已培育出10多種花粉植株,如水稻、小麥、大黑麥、小黑麥、玉米、甜菜、茄子、煙草、辣椒、楊樹和橡膠樹等,其中小麥“花培一號(hào)”、煙草“單育一號(hào)”等優(yōu)良品種已廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)。 (三)人工種子 將植物組織培養(yǎng)

10、中產(chǎn)生的體細(xì)胞胚包裹在含有養(yǎng)分的膠囊內(nèi),可像種子一樣直接播種到大田用于生產(chǎn),即所謂的人工種子。天然種子中的胚是合子胚,而人工種子中的胚是體胚,胚乳和種皮也是人工的。目前,已有胡蘿卜、芹菜、苜蓿、棉花、玉米、水稻、橡膠樹等幾十種植物的人工種子試種成功,但成本相對(duì)較高,美國(guó)己大規(guī)模生產(chǎn)樹木的人工種子。 (四)原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交 采用酶法去除細(xì)胞壁的原生質(zhì)體培養(yǎng),不僅是研究細(xì)胞生命活動(dòng)機(jī)理的良好體系之一,還可以通過原生質(zhì)體培養(yǎng)開展原生質(zhì)體融合與體細(xì)胞雜交,獲得新品系、新品種。從理論上講,細(xì)胞雜交比有性雜交可得到更多的不同類型。 五、總結(jié) 目前,植物組培方式以固體培養(yǎng)基培養(yǎng)為主,液體培養(yǎng)基培養(yǎng)由于具有物質(zhì)交換快,生長(zhǎng)速度快,產(chǎn)生的代謝物質(zhì)不會(huì)在組織周圍積累等優(yōu)點(diǎn),值得大力研究與推廣。同時(shí)要有計(jì)劃、有步驟地引進(jìn)先進(jìn)的植物組培苗生產(chǎn)配套設(shè)施,建立健全培養(yǎng)室組培快繁與溫室栽培相配套的組培苗生產(chǎn)體系,確保培育出高質(zhì)量的商品化組培苗。 總之,植物組織培養(yǎng)技術(shù)仍處于發(fā)展階

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