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1、會(huì)計(jì)學(xué)1 浙液相色譜講義四梯方法的開發(fā)及梯分浙液相色譜講義四梯方法的開發(fā)及梯分 離時(shí)的注意事項(xiàng)離時(shí)的注意事項(xiàng) 第1頁/共20頁 溶劑 A 溶劑 B 泵 A 泵 B 混合器 A 高壓梯度 溶劑 A 泵 溶劑 B 比例閥(溶劑混合點(diǎn)) 混合器 B 低壓梯度 (溶劑混合點(diǎn)) 第2頁/共20頁 12 435 6 789 10 11 第3頁/共20頁 第4頁/共20頁 梯 度 曲 線 壓 力 曲 線 第5頁/共20頁 第6頁/共20頁 第7頁/共20頁 10分鐘的梯度,6分鐘的平衡時(shí)間色譜圖不重復(fù) 第8頁/共20頁 平衡時(shí)間6分鐘 平衡時(shí)間7分鐘 平衡時(shí)間8分鐘 平衡時(shí)間9分鐘 平衡時(shí)間從6到7分鐘,第
2、一個(gè)峰的保留時(shí)間有明顯的變化,說明6到7分鐘的平衡時(shí)間不足,而8到9分鐘變化不大因而大于這個(gè)時(shí)間時(shí),平衡充足。 第9頁/共20頁 50ml超純水的有機(jī)物污染狀態(tài) 第10頁/共20頁 “三蒸水”有大量的有機(jī)污染物不適合梯度分析 第11頁/共20頁 典型的“實(shí)驗(yàn)室水”有大量的有機(jī)污染物不適合高靈敏度梯度分析 第12頁/共20頁 開發(fā)一個(gè)有9個(gè)烷基苯酮化合物的梯度方法,用C18柱,在最初的條件下(0-100% 水-乙腈),分離不理想。整個(gè)色譜峰組保留時(shí)間太長,分離度也不好。 第13頁/共20頁 為使色譜峰前移,提高起始時(shí)乙腈的比例(50- 100%,水-乙腈),分離得到改善。但是9個(gè)化合物出 了10
3、個(gè)色譜峰,說明有雜質(zhì)存在,很可能是流動(dòng)相水中 的。 第14頁/共20頁 從空白梯度圖顯示,在同樣 的色譜條件,同樣的檢測靈敏度 下,共有兩個(gè)雜質(zhì)峰。說明流動(dòng) 相水中的雜質(zhì)在此條件下可能會(huì) 對檢測有影響。 第15頁/共20頁 空白梯度圖同樣品的色譜圖進(jìn)行對照后,我們看到雜質(zhì)(共兩個(gè)峰)中的第一個(gè)小 峰對第8個(gè)色譜峰有干擾,會(huì)使其定量分析結(jié)果不準(zhǔn)確。 第16頁/共20頁 根據(jù)“梯度曲線下的面積越大,洗脫能力越強(qiáng)”的規(guī)律,試用#5 曲線使3-9號(hào)峰提前(曲線5,50-100%B),但是小峰仍沒有分出來。 第17頁/共20頁 根據(jù)“梯度曲線下的面積越大,洗脫能力越強(qiáng)”的規(guī)律,試用#5 曲線使3-9號(hào)峰提前,改用50-95%B見到好
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