人粒細(xì)胞無形體病專題調(diào)查方案(試行)

1、人粒細(xì)胞無形體病專題調(diào)查方案（試行）為指導(dǎo)發(fā)生疫情的地區(qū)開展人粒細(xì)胞無形體病的調(diào)查， 增進(jìn)對該病病原學(xué)、傳播機(jī)制、危險(xiǎn)因素及臨床診斷等的認(rèn) 識，為制訂相應(yīng)的防控策略和措施提供科學(xué)依據(jù)，特制訂本 方案。一、調(diào)查目的（一）了解人粒細(xì)胞無形體病疫區(qū)人群感染狀況及抗體 水平。（二）了解人粒細(xì)胞無形體病主要的潛在傳播媒介的種 類、分布及帶菌狀況。（三）了解人粒細(xì)胞無形體病常見的動(dòng)物宿主種類、分 布及帶菌狀況。二、調(diào)查內(nèi)容與方法（一）血清流行病學(xué)調(diào)查。1.調(diào)查對象（1）可能暴露者：與患者有類似暴露史的人員（暴露 于有可疑野生動(dòng)物或蜱的生境）。（2）密切接觸者：與患者密切接觸者（參與救治的醫(yī) 護(hù)人員、護(hù)理患

2、者的家屬等）。（3）般人群：與患者無密切接觸，也無可疑生境暴露者。2. 標(biāo)本米集對所有密切接觸者應(yīng)采集雙份血清，間隔3-4周，另應(yīng)米集可能暴露者及一般人群血清各30-50份。每次采集靜脈血5ml，分離血清送檢。血清標(biāo)本的包裝、 貯存及運(yùn)送見人 粒細(xì)胞無形體病實(shí)驗(yàn)室檢測方案（試行）（附件3）。3. 標(biāo)本檢測采集的標(biāo)本應(yīng)及時(shí)送有條件的省級疾病預(yù)防控制中心 進(jìn)行抗體檢測。如當(dāng)?shù)責(zé)o檢測條件，應(yīng)送中國疾病預(yù)防控制 中心進(jìn)行檢測。檢測方法及注意事項(xiàng)見人粒細(xì)胞無形體病 實(shí)驗(yàn)室檢測方案（試行）（附件3）。（二）宿主動(dòng)物調(diào)查。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查的線索，確定是否進(jìn)行宿主動(dòng)物的調(diào) 查。1. 調(diào)查地點(diǎn)和時(shí)間在病例可能感

3、染的地點(diǎn)，或根據(jù)當(dāng)?shù)氐牡乩砭坝^，選擇 宿主動(dòng)物調(diào)查的地點(diǎn)。調(diào)查時(shí)間可選擇在疫情發(fā)生后或宿主 動(dòng)物活動(dòng)高峰季節(jié)。2. 捕獲方法（1）居民區(qū)采用籠夜法。在鼠類經(jīng)常出沒的場所，于 傍晚時(shí)在每15m2的房間放置鼠籠一個(gè)，并做好標(biāo)記。誘餌 用花生米或油條、油餅等（同一地區(qū)應(yīng)選用同一種誘餌）。次日清晨取回鼠籠，將捕獲鼠的鼠籠放入布鼠袋內(nèi)，系緊袋 口，做好記錄，并編號。（2）野外采用夾（籠）夜法。在有鼠活動(dòng)的場所，于傍晚時(shí)布放鼠夾（籠），夾（籠）的行距應(yīng)在30m以上，夾（籠）間距為5m并做好標(biāo)記。誘餌應(yīng)統(tǒng)一。次日清晨取回 夾（籠），將捕獲鼠放入布鼠袋內(nèi)，系緊袋口，做好標(biāo)記， 并編號。如捕白天活動(dòng)的鼠，采用夾

4、（籠）日法。（3）鼠類以外的其它野生宿主動(dòng)物（如野兔等）可通 過有關(guān)渠道獲取。3. 標(biāo)本處理（1）采集動(dòng)物血標(biāo)本待檢。（2）解剖前，將所捕宿主動(dòng)物（如鼠等）置于密閉容 器內(nèi)，用乙醚深度麻醉。將動(dòng)物（鼠）置于白瓷盤中，先用 鑷子夾取盤中和動(dòng)物（鼠）體表的寄生物，如蜱、螨、蚤等， 寄生物按鼠只分別置入盛有 75%酒精的密閉容器中，并標(biāo)記 相應(yīng)鼠只的編號；然后，采用無菌方法解剖動(dòng)物（鼠），取 其脾、肝、腎標(biāo)本，置入相應(yīng)編號的無菌凍存管內(nèi)，于液氮罐內(nèi)保存。無液氮罐保存條件的，應(yīng)置20 C環(huán)境保存。上述標(biāo)本送回實(shí)驗(yàn)室后， 應(yīng)盡快檢測。否則，應(yīng)置-80 C 超低溫、或20 C低溫冰箱內(nèi)保存。4. 動(dòng)物的分

5、類、鑒定參考醫(yī)學(xué)動(dòng)物鑒定手冊等相關(guān)專業(yè)資料，鑒定宿主動(dòng)物的種類、學(xué)名等5. 核酸檢測及病原分離（1）采用PCR擴(kuò)增動(dòng)物血液標(biāo)本的 DNA并測定核苷酸 序列。（2）有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對陽性標(biāo)本進(jìn)行病原體分離。 陽性病原分離物送中國疾病預(yù)防控制中心作進(jìn)一步鑒定。方法見附件3人粒細(xì)胞無形體病實(shí)驗(yàn)室檢測方案（試 行）。6. 計(jì)算動(dòng)物（鼠）種的構(gòu)成、密度及其帶菌率。（三）蜱的調(diào)查。1. 調(diào)查地點(diǎn)和時(shí)間在病例可能感染的地點(diǎn)，或根據(jù)當(dāng)?shù)氐牡乩砭坝^選擇媒 介蜱的調(diào)查地點(diǎn)。調(diào)查時(shí)間可選擇在疫情發(fā)生后，或蜱活動(dòng) 高峰季節(jié)。2. 捕獲方法（1）布旗法。用約 1平方米大小的白絨布旗，在調(diào)查 地段內(nèi)定時(shí)進(jìn)行拖蜱。拖蜱時(shí)，

6、手持旗桿伸向一側(cè)，使布旗 平鋪于草叢上，以等速緩步向前行走，每步行2米觀察一次， 將附著于旗上的蜱撿入玻管內(nèi)保存。每小時(shí)檢獲蜱數(shù)即為蜱 密度，單位為只/布旗人工小時(shí)，每次捕蜱時(shí)間不少于1小時(shí)（如蜱密度單位采用只/布旗人工分鐘，每次捕蜱時(shí)間一 般不少于30分鐘）。同時(shí)，檢查拖蜱者身體上是否附著有 蜱，如有，將蜱撿入另一玻管內(nèi)保存，以區(qū)別于布旗法捕獲 的蜱。凡拖過蜱的地方，短時(shí)間內(nèi)不應(yīng)在原地重復(fù)調(diào)查。（2）帶蜱指數(shù)調(diào)查法。用鼠籠在有蜱活動(dòng)的地方捕捉 活鼠，鼠體上蜱的米集可參照宿主動(dòng)物體外寄生物米集方法 進(jìn)行。平均每只鼠體上的蜱數(shù)即為帶蜱指數(shù)，單位為只/鼠家養(yǎng)動(dòng)物或其它野生動(dòng)物用適當(dāng)方式制動(dòng)固定后，

7、可直接檢 蜱，計(jì)算帶蜱指數(shù)。3. 蜱的分類、鑒定參考有關(guān)專業(yè)資料，對捕獲的蜱進(jìn)行分類、鑒定、命名（學(xué)名）。若當(dāng)?shù)責(zé)o法鑒定，可將采集到的雌、雄蜱各若干 只置于75%乙醇溶液中保存，送中國疾病預(yù)防控制中心傳染 病所鑒定。4. 核酸檢測及病原分離（1）采用PCR擴(kuò)增蜱標(biāo)本的DNA并測定核苷酸序列。（2）有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對陽性蜱標(biāo)本進(jìn)行病原分離。 陽性病原分離物送中國疾病預(yù)防控制中心作進(jìn)一步鑒定。方法見附件3人粒細(xì)胞無形體病實(shí)驗(yàn)室檢測方案（試 行）。5. 計(jì)算蜱種的構(gòu)成、總帶菌率及各種蜱的帶菌率。三、資料的收集、管理和利用（一）一般背景資料的收集。收集當(dāng)?shù)氐囊话惚尘百Y料，如調(diào)查時(shí)當(dāng)?shù)氐臍庀筚Y料（氣溫、

8、降雨量、濕度、風(fēng)力、風(fēng)向等）、地理狀況（地理位置、地形、地貌、湖泊、河流、流域等）、人口統(tǒng)計(jì)學(xué)資 料、生產(chǎn)及生活方式（農(nóng)、牧業(yè)、狩獵等活動(dòng)）、生活及衛(wèi) 生習(xí)慣、特殊風(fēng)俗、社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況以及其他相關(guān)資料等。（二）專題調(diào)查相關(guān)資料的收集。收集專題調(diào)查的相關(guān)資料，包括各種采樣（人體血清、 宿主動(dòng)物標(biāo)本、媒介蜱）登記表、檢測登記表、檢測報(bào)告， 以及各類專題調(diào)查（血清采集、宿主動(dòng)物調(diào)查、媒介蜱調(diào)查） 統(tǒng)計(jì)表等（見附表1-8 ）。（三）資料的管理和利用?，F(xiàn)場調(diào)查結(jié)束后，應(yīng)及時(shí)撰寫專題調(diào)查報(bào)告，上報(bào)上級 疾控機(jī)構(gòu)及同級衛(wèi)生行政部門，并將專題調(diào)查的原始記錄、 匯總整理資料、分析數(shù)據(jù)及調(diào)查報(bào)告等及時(shí)整理、歸檔。實(shí)

9、 驗(yàn)室檢測工作結(jié)束后，應(yīng)及時(shí)將檢測結(jié)果反饋給當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù) 防控制機(jī)構(gòu)，由當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制機(jī)構(gòu)告知相關(guān)單位及被調(diào) 查者。附表1血清標(biāo)本采集登記表采血時(shí)間：地點(diǎn)：編號姓名性別年齡職業(yè)住址蜱叮咬史發(fā)病日期發(fā)熱史臨床診斷采血日期采集量備注送檢單位： 送檢人： 送檢日期：附表2血清標(biāo)本嗜吞噬細(xì)胞無形體抗體檢測登記表編號 姓名 米集時(shí)間 檢測時(shí)間 檢測方法 檢測項(xiàng)目及 結(jié)果備注送檢單位：送檢人： 送檢日期：附表3嗜吞噬細(xì)胞無形體宿主動(dòng)物標(biāo)本米集登記表編號地點(diǎn)鼠種雌/雄體外寄生蟲標(biāo)本種類備注 蜱蚤螨捕鼠日期： 送檢單位：送檢人：送檢日期：附表4嗜吞噬細(xì)胞無形體宿主動(dòng)物標(biāo)本檢測登記表編號動(dòng)物/臟器種類檢測時(shí)間檢驗(yàn)項(xiàng)目及結(jié)果備注16S rRNA groEL IgG 抗體送檢單位：送檢人： 送檢日期：附表5嗜吞噬細(xì)胞無形體媒介蜱米集登記表（布旗法）編號捕獲日期捕獲地點(diǎn)蜱種備注送檢單位：送檢人： 送檢日期：附表6媒介蜱嗜吞噬細(xì)胞無形體檢測登記表編號 捕獲日期 捕獲數(shù)量 捕獲地點(diǎn) 檢驗(yàn)項(xiàng)目及結(jié)果 備注16S rRNA groEL送檢單位：送檢人：