實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)紅細(xì)胞與白細(xì)胞數(shù)量測(cè)定實(shí)驗(yàn)_第1頁(yè)
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1、實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)院:年級(jí):口,號(hào): 名:實(shí)驗(yàn)日期:2015.實(shí)驗(yàn)原理1. 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù), 充入計(jì)數(shù)池中,于顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體 積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù),經(jīng)過(guò)換算求得每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)量。2. 白細(xì)胞計(jì)數(shù)血液經(jīng)白細(xì)胞稀釋液稀釋?zhuān)墒旒t細(xì)胞全被溶解,在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積 內(nèi)白細(xì)胞數(shù),換算出每升血液中白細(xì)胞數(shù)量。.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與步驟1.實(shí)驗(yàn)器材改良Neubauer計(jì)數(shù)板、顯微鏡、蓋玻片、試管、微量吸管、移液管、洗耳 球、生理鹽水、RBC稀釋液、WB(稀釋液(冰乙酸3ml、蒸餾97ml、10g/L亞甲 藍(lán)溶液3滴混合過(guò)濾后備用)2.實(shí)驗(yàn)步驟(1)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

2、1、取紅細(xì)胞稀釋液2.0ml毫升,放入一小試管內(nèi)。2、用微量吸管吸至l0ul處。3、擦去管尖外部余血將血液迅速輕輕吹入盛有紅細(xì)胞稀釋液的試管內(nèi),上清液嗽洗吸管2-3次,立即搖勻。4、將計(jì)數(shù)池與蓋玻片用軟布料擦凈,將蓋玻片覆蓋于計(jì)數(shù)池上。5、用吸管吸取混勻的紅細(xì)胞懸液,充入計(jì)數(shù)池中。6待35分鐘,讓紅細(xì)胞完全下沉后,將計(jì)數(shù)板平放在顯微鏡臺(tái)上,用低倍鏡觀察,如紅細(xì)胞分布均勻即可換高倍鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)。紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的區(qū)域:中心大方格中的5個(gè)中方格(正中一個(gè)和四角各一個(gè))。計(jì)數(shù)原則:數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右的計(jì)數(shù)原則即凡壓在中方格邊線 (雙線)上的紅細(xì)胞,只計(jì)上側(cè)與左側(cè)線上的細(xì)胞,而壓在下側(cè)與右側(cè)線上者不計(jì)入。

3、計(jì)算方式:RBC/L = 5 個(gè)中方格內(nèi) RBC 數(shù)X 5X 10X 200X 106 =5個(gè)中方格內(nèi)RBC數(shù)/100X 1012參考值:男 性:(4.05.5) X 1O12/L 女 性:(3.55.0) X 1O12/L 新生兒:(6.0 7.0) X 1O12/L(2) 白細(xì)胞計(jì)數(shù)1、取小試管一支,加白細(xì)胞稀釋液 0.38ml。并吸取上清液清洗吸管兩次,混勻。2、 用微量吸管準(zhǔn)確吸收末梢血20ul,擦去管外余血,將吸管插入試管中稀 釋液底部,輕輕將血液放出,3、待紅細(xì)胞完全破壞, 待白細(xì)胞下沉。液體變?yōu)樽睾稚?,再次混勻后充池,靜置23min,4個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù),對(duì)壓線細(xì)胞按“數(shù)上不

4、數(shù) 下、數(shù)左不數(shù)右”的原則進(jìn)行計(jì)數(shù)。4、用低倍鏡計(jì)數(shù)四角計(jì)算方式:WBC/L = (4 個(gè)大方格內(nèi) WBC 數(shù)/4) X 10X20X106WBC 數(shù) /2O)X 109=(4個(gè)大方格內(nèi)參考區(qū)間:成年男性:(3.97-9.15)成年女性:(3.69-9.16 ) 兒童:(810)X 1O9/L 嬰兒:(1112)X 1O9/L 新生兒:20 X 1O9/LX 1O9/LX 1O9/L三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果紅細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖:左上角方格右上角方格右下角方格左下角方格正中方格表一紅細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)表左上角方格 右上角方格右下角方格左下角方格正中方格421302248480RBC/L = 5 個(gè)中方格內(nèi) R

5、BC 數(shù)X 5X 10X 200X 106=5個(gè)中方格內(nèi)RBC數(shù)/100X 1012=(42+130+224+84+80)/100X 1012=5.60X 1012本實(shí)驗(yàn)使用的血液標(biāo)本來(lái)自于一52歲男性,成年男性紅細(xì)胞量參考范圍(4.05.5)X 1O12/L。因此實(shí)驗(yàn)測(cè)得數(shù)據(jù)略大于正常范圍。白細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖:右上角方格左下角方格右下角方格左下角方格表一紅細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)表左上角方格右上角方格右下角方格左下角方格518081WBC/L = (4 個(gè)大方格內(nèi) WBC 數(shù)/4) X 10 20 X106=(4個(gè)大方格內(nèi) WBC數(shù)/20) X 109=(51+80+81+103)/20 1(X=

6、15.75X 109103本實(shí)驗(yàn)使用的血液標(biāo)本來(lái)自于一52歲男性,成年白性紅細(xì)胞量參考范圍(3.979.15)X 109/L。因此實(shí)驗(yàn)測(cè)得數(shù)據(jù)遠(yuǎn)大于正常范圍。1.紅細(xì)胞計(jì)數(shù):本實(shí)驗(yàn)使用的血液標(biāo)本來(lái)自于一 52歲男性,測(cè)得紅細(xì)胞量為5.60X 1012 0成年男性紅細(xì)胞量參考范圍(4.05.5) X 1O12/L。因此實(shí)驗(yàn)測(cè)得數(shù)據(jù)略大于正常范圍。就實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)說(shuō),只是略大于正常范圍,應(yīng)當(dāng)可以接受。但是在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中 也出現(xiàn)了一些不規(guī)范的操作或失誤。 比如:在使用移液管時(shí)雙眼未平視液面最底 部與刻度線相切;在使用微量吸管的時(shí)候,吸取血液的量有偏差,而且在吸取上 清液清洗微量吸管時(shí),有少量上清液被吸入膠

7、頭,造成結(jié)果偏差;觀察右下角方 格中的紅細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其中有聚集在一起的紅細(xì)胞團(tuán),推測(cè)可能是血液在微量吸 管中時(shí)間過(guò)長(zhǎng),發(fā)生凝固,亦或是加入紅細(xì)胞稀釋劑后未攪拌均勻。2.白細(xì)胞計(jì)數(shù):本實(shí)驗(yàn)使用的血液標(biāo)本來(lái)自于一52歲男性,測(cè)得白細(xì)胞量為15.75X 109。成年白性紅細(xì)胞量參考范圍(3.979.15)X1O9/L。因此實(shí)驗(yàn)測(cè)得數(shù)據(jù)遠(yuǎn)大于正 常范圍。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果大大超出了預(yù)計(jì)范圍,一般來(lái)說(shuō),此實(shí)驗(yàn)中,白細(xì)胞數(shù)量偏高可 能原因有兩方面:一方面是實(shí)驗(yàn)操作失誤,另一方面是被采血者處于病理狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)中可能出現(xiàn)的失誤有:(1) 用微量吸管吸取血液后未將吸管外周的血液擦拭干凈。(2) 將稀釋后的血液滴至計(jì)數(shù)板上是,血液未充滿玻片與計(jì)數(shù)板之間的空隙,所以實(shí)驗(yàn)時(shí)又多加了一滴,可能造成結(jié)果偏差。(3) 移液管吸取0.

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