園藝生物技術(shù)復(fù)習(xí)題——基因工程部分講訴

1、基因工程部分基本概念1、基因：能夠表達(dá)和產(chǎn)生蛋白質(zhì)和 RNA的DNA序列，是決定遺傳性狀的功能單位。2、基因組： 細(xì)胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。3、基因工程： 有目的的通過分子克隆技術(shù)，人為的操作改造基因，改變生物遺傳性狀的系 列過程。4、轉(zhuǎn)化： 指質(zhì)粒 DNA 或以它為載體構(gòu)建的重組 DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過程。DNA 分子，在體外經(jīng)過包裝成5、感染： 以噬菌體、粘性質(zhì)粒和真核細(xì)胞病毒為載體的重組 具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，才能感染適當(dāng)?shù)募?xì)胞，并在細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)增。6、轉(zhuǎn)導(dǎo)：指以噬菌體為載體，在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移DNA的過程，有時(shí)也指在真核細(xì)胞之間通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細(xì)胞DNA 的

2、過程。7、轉(zhuǎn)染： 指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程。8 DNA變性：在物理或化學(xué)因素的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價(jià)鍵則不受影響。9、DNA復(fù)性：當(dāng)促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合形成DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)。10、分子克?。?在體外對(duì) DNA 分子按照即定目的和方案進(jìn)行人工重組，將重組分子導(dǎo)入合適宿主，使其在宿主中擴(kuò)增和繁殖，以獲得該DNA分子的大量拷貝。11、RFLP即限制性片段長度多態(tài)性，個(gè)體之間DNA的核苷酸序列存在差異，稱為DNA多態(tài)性。若因此而改變了限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)則可導(dǎo)致相應(yīng)的限制性片段的長度和數(shù)量發(fā) 生

3、變化，稱為 RFLP。12、PCR技術(shù)： 聚合酶鏈反應(yīng)，它是一種模擬天然DNA復(fù)制過程，在有 DNA模板、DNA聚合酶(Taq酶)、RNA引物和四種dNT P的情況下，通過高溫變性(90C 95C, 1 2min ), 低溫退火(25C 37C, 1 2min )，中溫延伸(60C 75C, 90 sec-5min),這樣反復(fù)循環(huán)的過程中，在體外擴(kuò)增特異性DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。13、RT-PCR反轉(zhuǎn)錄PCR，先將 mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,然后再以cDNA為模板，用 PCR方法加以擴(kuò)增。DNA 后，產(chǎn)生相同的粘14、同尾酶： 有些限制性內(nèi)切酶雖然識(shí)別序列不完全相同，但切割 性末端，稱為同

4、尾酶。15、克隆載體： 為使插入的外源 DNA 序列被擴(kuò)增而特意設(shè)計(jì)的載體稱為克隆載體。16、表達(dá)載體： 為使插入的外源 DNA 序列可轉(zhuǎn)錄翻譯成肽鏈而特意設(shè)計(jì)的載體稱為表達(dá)載體。17、質(zhì)粒： 細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外能自主地進(jìn)行復(fù)制的遺傳單位。18、染色體組性： 染色體組型是指生物體細(xì)胞所有可測定的染色體特征總稱。包括染色體總數(shù)、染色體組數(shù)、每條染色體大小和形態(tài)、著絲點(diǎn)的位置等。19、帶型：用染色體分帶技術(shù)體所產(chǎn)生的明顯的染色帶暗帶）和未染色的明帶相間的帶紋，使染色體呈現(xiàn)鮮明的個(gè)體性的技術(shù)。20、RAPD 隨機(jī)引物擴(kuò)增多態(tài)性 DNA( Random Amplified Polymor

5、phic DNA，RAPE)是在 PCR技術(shù)的基礎(chǔ)上， 以一系列不同的， 隨機(jī)排列的寡聚核苷酸單鏈為引物，與變性后的模板鏈退火，在 DNA 聚合酶的作用下，合成一段新的互補(bǔ)DNA 鏈。21、衛(wèi)星 DNA： 真核生物基因組酶切、離心后，在主帶附近會(huì)出現(xiàn)（AT）含量很高的簡單高度重復(fù)序列。22、AFLP 擴(kuò)增片段長度多態(tài)性 Amplified fragment length polymorphism（AFLP是在隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性（RAPD）和限制性片段長度多態(tài)性（RFLP技術(shù)上發(fā)展起來的DNA 多態(tài)性檢測技術(shù)。23、基因芯片技術(shù)：是指通過微陣列（Microarray）技術(shù)將高密度 DNA片段陣列通過

6、高速機(jī)器人或原位合成方式以一定的順序或排列方式使其附著在如玻璃片等固相表面，以熒光標(biāo)記的DNA 探針，借助堿基互補(bǔ)雜交原理，進(jìn)行大量的基因表達(dá)及監(jiān)測等方面研究的最新革命性技術(shù)。24、Southern印跡雜交：是根據(jù)毛細(xì)管作用的原理，使在電泳凝膠中分離的DNA片段轉(zhuǎn)移并結(jié)合在適當(dāng)?shù)臑V膜上，然后通過與已標(biāo)記的單鏈DNA或RNA探針的雜交作用以檢測這些被轉(zhuǎn)移的DNA片段的技術(shù)。25、Northern印跡雜交：指將RNA分子變性及電泳分離后、從電泳凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物上進(jìn)行核酸雜交的方法又稱為 Northern RNA 印跡雜交等。26、限制性核酸內(nèi)切酶 （restriction endonuclea

7、se, RE）是識(shí)別 DNA的特異序列（48bp）,并在識(shí)別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶?；炯夹g(shù)1、介紹限制性內(nèi)切酶的切割方式限制性內(nèi)切酶的切割方式有三種類型分別是（在對(duì)稱軸5側(cè)切割產(chǎn)生5粘端）、（在對(duì)稱軸3側(cè)切割產(chǎn)生3粘端（在對(duì)稱軸處切割產(chǎn)生平段）。2、列舉基因工程常用工具類工具酶功能限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別特異序列，切割 DNADNA連接酶催化DNA中相鄰的5 磷酸基和3 羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，使DNA切口封合或使兩個(gè) DNA分子或片段連接DNA聚合酶I 合成雙鏈cDNA分子或片段連接 缺口平移制作高比活探針 DNA序列分析 填補(bǔ)3 末端Klenow片段又名DNA聚合酶1大片

8、段，具有完整 DNA聚合酶1的 I 3 聚 合、315外切活性，而無 W 3外切活性。常用于 cDNA第二 鏈合成，雙鏈DNA 3 末端標(biāo)記等反轉(zhuǎn)錄酶 合成cDNA 替代DNA聚合酶1進(jìn)行填補(bǔ)，標(biāo)記或 DNA序列分析多聚核苷酸激酶催化多聚核苷酸5 羥基末端磷酸化，或標(biāo)記探針末端轉(zhuǎn)移酶在3 羥基末端進(jìn)行同質(zhì)多聚物加尾堿性磷酸酶切除末端磷酸基3、簡介目的基因獲取方法.化學(xué)合成法：已知目的基因的核苷酸序列或其產(chǎn)物的氨基酸序列 .基因組 DNA 文庫(genomic DNA library).cDNA 文庫(cDNA library).聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,

9、 PCR)4、探針的標(biāo)記法?答：、缺口平移法：此法是利用適當(dāng)濃度的DNase I在DNA雙鏈上隨機(jī)切割單鏈，造成單鏈切口。切口處產(chǎn)生一個(gè)5末端和3末端，3末端就可以作為引物，在大腸桿菌DNA聚合酶I的催化下，以互補(bǔ)的 DNA單鏈為摸板，依次將 dNTP連接到切口的3末端的羥基上,合成新的DNA單鏈；同時(shí)DNA聚合酶I的53的核酸外切酶活性在切口處將舊鏈從5末端逐步切除，新合成鏈不斷延伸，從而使原DNA 分子上的部分核苷酸殘基被標(biāo)記的核苷酸所取代。、隨機(jī)引物法：隨機(jī)引物是人工合成的長度為6個(gè)寡核苷酸殘基的寡聚核苷酸片段的混合物。對(duì)于任何一個(gè)用作探針的DNA片段，隨機(jī)引物混合物中都會(huì)有一些六核苷酸

10、片段可以與之結(jié)合，起到DNA合成引物的作用。 將這些引物與變性的 DNA單鏈結(jié)合后，以4種dNTP（其中一種是標(biāo)記物標(biāo)記的dNTP）為底物，合成與探針 DNA互補(bǔ)的切帶有標(biāo)記物的DNA探針。、PCR標(biāo)記法：在PCR反應(yīng)底物中，將一種 dNTP換成標(biāo)記物標(biāo)記的 dNT P,這樣標(biāo)記的dNTP就在PCR反應(yīng)的同時(shí)摻入到新合成的DNA鏈上。、末端標(biāo)記法：只是將 DNA片段的一端進(jìn)行標(biāo)記。5、分子克隆中常用的工具酶及良好載體的條件？DNA分子內(nèi)特定的堿基順答：（1）、常用的工具酶 、 限制性核酸內(nèi)切酶：是細(xì)菌產(chǎn)生的一類能識(shí)別和切割雙鏈序的核酸水解酶。、DNA連接酶：將兩段 DNA分子拼接起來的酶。、D

11、NA聚合酶：催化單核苷酸鏈延伸。、產(chǎn)物DNA又稱互補(bǔ)DNA。、末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶：將脫氧核糖核酸加到DNA的3末端。逆轉(zhuǎn)錄酶：依賴于 RNA的DNA聚合酶，這是一種有效的轉(zhuǎn)錄RNA成為DNA的酶,、依賴DNA的RNA聚合酶：識(shí)別特異性啟動(dòng)子,RNA轉(zhuǎn)錄。堿性磷酸酶：催化去除 DNA、RNA等的5磷酸基團(tuán)。2）、良好載體的條件即多克隆 、必須有自身的復(fù)制子；、 載體分子上必須有限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn), 位點(diǎn)，以供外源 DNA插入；、載體應(yīng)具有可供選擇的遺傳標(biāo)志，以區(qū)別陽性重組子和陰性重組子；、載體分子必須有足夠的容量；、可通過特定的方法導(dǎo)入細(xì)胞；、對(duì)于表DNA 調(diào)控元達(dá)載體還應(yīng)具備與宿主

12、細(xì)胞相適應(yīng)的啟動(dòng)子、前導(dǎo)順序、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)等 件。6、舉出基因文庫構(gòu)建中對(duì)重組子篩選的3 種方法并簡述過程?？股乜剐院Y選、抗性的插入失活、蘭-白斑篩選或PCR篩選、差式篩選、DNA探針多數(shù)克隆載體均帶有抗生素抗性基因 （抗氨芐青霉素、 四環(huán)素）。當(dāng)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌中后，該菌便獲得抗性，沒有轉(zhuǎn)入的不具有抗性。但不能區(qū)分是否已重組。在含有兩個(gè)抗性基因的載體中，如果外源DNA片段插入其中一個(gè)基因并導(dǎo)致該基因失活,如pUC質(zhì)粒含LacZ基因（編碼3就可用兩個(gè)分別含不同藥物的平板對(duì)照篩選陽性重組子。半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物 X-gal（5溴-4-氯-3-吲哚-3D-半乳糖苷）產(chǎn)生藍(lán)色，從而使

13、菌株變藍(lán)。當(dāng)外源 DNA插入后，LacZ基因不能表達(dá)，菌株呈白色，以此來篩選重組細(xì)菌。7、介紹基因工程的宿主細(xì)胞必須具備的條件。便于重組 DNA 分子的導(dǎo)入；能使重組DNA分子穩(wěn)定存在于細(xì)胞中;便于重組體的篩選;遺傳性穩(wěn)定高，易于擴(kuò)大培養(yǎng)或發(fā)酵生長;安全性高，無致病性，不會(huì)對(duì)外界環(huán)境造成生物污染;有利于外源基因蛋白表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)的積累，或促進(jìn)外源基因的高效分泌表達(dá)。在遺傳密碼的應(yīng)用上無明顯偏倚性;具有較好的翻譯后加工機(jī)制，便于真核目的基因的高效表達(dá);在理論研究和生產(chǎn)實(shí)踐上有較高的應(yīng)用價(jià)值。綜合能力1、PCR的基本原理?答：PCR是在試管中進(jìn)行的 DNA復(fù)制反應(yīng)，基本原理是依據(jù)細(xì)胞內(nèi) DNA半

14、保留復(fù)制的機(jī)理,以及體外 DNA 分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉(zhuǎn)變的性質(zhì)，人為地控制體外合成系 統(tǒng)的溫度，以促使雙鏈 DNA 變成單鏈，單鏈 DNA 與人工合成的引物退火，然后耐熱 DNA聚合酶以dNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。PCR全過程每一步的轉(zhuǎn)換是通過溫度的改變來控制的。需要重復(fù)進(jìn)行DNA模板解鏈、引物與模板 DNA結(jié)合、DNA聚合酶PCR反應(yīng)的一個(gè)循催化新生DNA的合成，即高溫變性、低溫退火、中溫延伸3個(gè)步驟構(gòu)成環(huán)，此循環(huán)的反復(fù)進(jìn)行，就可使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。DNA模板變性：模板雙鏈 DNA?單鏈DNA, 94C。退火：引物+單鏈 DNA?雜交鏈，引物的Tm

15、值。引物的延伸：溫度至70 C左右，Taq DNA聚合酶以4種dNT P為原料，以目的 DNA為模板，催化以引物3末端為起 點(diǎn)的573 DNA延伸反應(yīng)，形成新生 DNA鏈。新合成的引物延伸鏈經(jīng)過變性后又可作為下一輪循環(huán)反應(yīng)的模板 PCR就是如此反復(fù)循環(huán)，使目的 DNA得到高效快速擴(kuò)增。2、核酸分子雜交的原理?答：具有互補(bǔ)序列的兩條單鏈核酸分子在一定的條件下適宜的溫度及離子強(qiáng)度等）堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合，重新形成雙鏈；在這一過程中， 核酸分子經(jīng)歷了變性和復(fù)性的變化， 以及在復(fù) 性過程中個(gè)分子間鍵的形成和斷裂。雜交的雙方是待測核酸和已知序列。3、藍(lán) -白篩選的原理？答：某些質(zhì)粒帶有大腸桿菌的半乳糖苷酶基

16、因片段，在半乳糖苷酶基因的基因區(qū)外又另外引入了一段含多種單一限制酶位點(diǎn)的DNA序列。這些位點(diǎn)上如果沒有克隆外源性DNA片段,在質(zhì)粒被導(dǎo)入lac-的大腸桿菌后，質(zhì)粒攜帶的半乳糖苷酶基因?qū)⒄１磉_(dá)，與大腸桿菌的半乳糖苷酶基因互補(bǔ)，產(chǎn)生有活性的半乳糖苷酶，加入人工底物X-gal和誘導(dǎo)劑IPTG后，出現(xiàn)藍(lán)色的菌落。如果在多克隆位點(diǎn)上插入外源DNA片段，將使lac Z基因滅活，不能生成半乳糖苷酶，結(jié)果菌落出現(xiàn)白色。由于這種顏色標(biāo)志，重組克隆和非重組克隆的區(qū)分一目了然。4、SANGER雙脫氧鏈終止法的原理?答：DNA鏈中核苷酸以3 ,5磷酸二酯鍵連接，合成 DNA所用的底物是 2-脫氧核苷三磷酸。2 ,3

17、 de與普通dNTP不同，它們在脫氧核糖的3 位置缺少一個(gè)羥基。在DNA聚合酶作用下通過三磷酸基團(tuán)摻入到延伸的DNA鏈中，但由于沒有3羥基，不能同后續(xù)的dNTP形成磷酸二酯鍵，因此，正在延伸的DNA鏈不能繼續(xù)延伸。在DNA合成反應(yīng)混合物的 4種普通dNTP中加入少量的一種 ddNTP,鏈延伸將與偶然發(fā)生但卻十分特異的鏈終止競爭,產(chǎn)物是一系列的核苷酸鏈， 其長度取決于引物末端到出現(xiàn)過早鏈終止位置間的距離。在 4 組獨(dú)立酶反應(yīng)中分別采用4種不同的ddNTP,結(jié)果將產(chǎn)生4組寡核苷酸，它們將分別終止于模板鏈的A、 C、G或T位置。5、PCR引物設(shè)計(jì)的基本要求?答：、引物長度一般為 1530個(gè)核苷酸。過

18、短影響 PCR的特異性，過長會(huì)提高相應(yīng)退火溫度，使延伸溫度超過 TaqDNA聚合酶最適溫度 74C，影響產(chǎn)物的生成。、引物的堿基盡可能隨機(jī)，避免出現(xiàn)嘌呤、嘧啶堿基堆積現(xiàn)象。3端不應(yīng)有連續(xù)3 個(gè) G 和C。否則會(huì)使引物和模板錯(cuò)誤配對(duì)。G+C含量一般占45% -55%。3端和5端引物具有相似的 Tm 值,Tm值計(jì)算公式：Tm= 4(G+C)+ 2(A+T)、引物自身不應(yīng)存在互補(bǔ)序列以避免折疊成發(fā)夾結(jié)構(gòu)。引物的連續(xù)互補(bǔ)序列， 一般不超過3bp。、兩個(gè)引物之間不應(yīng)存在互補(bǔ)序列，尤其應(yīng)避免3端的互補(bǔ)重疊。、引物與非特異擴(kuò)增區(qū)的序列的同源性不超過70，引物 3末端連續(xù) 8 個(gè)堿基在待擴(kuò)增區(qū)以外不能有完全互

19、補(bǔ)序列，否則易導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增。、引物3端堿基是引發(fā)延伸的起點(diǎn)，因此一定要與模板DNA配對(duì)。引物3端最佳堿基選擇是G和C,形成的堿基配對(duì)比較穩(wěn)定。、引物與模板結(jié)合時(shí)，引物的5端最多可以游離十幾個(gè)堿基而不影響PCR反應(yīng)的進(jìn)行。、引物的5端可以修飾，如附加限制酶位點(diǎn)，弓I入突變位點(diǎn)，用生物素、熒光物質(zhì)、地高 辛標(biāo)記,加入其它短序列包括起始密碼子、終止密碼子等6、什么是DNA重組技術(shù)，典型的 DNA重組實(shí)驗(yàn)的基本步驟?DNA 重組技術(shù)也稱為（基因克隆）或（分子克?。Ｗ罱K目的是（把一個(gè)生物體中的遺傳信息 DNA 轉(zhuǎn)入另一個(gè)生物體） 。典型的 DNA 重組實(shí)驗(yàn)通常包含以下幾個(gè)步驟：提取供體生物的目的基

20、因（或稱外源基因），酶接連接到另一 DNA分子上（克隆載體）形成一個(gè)新的重組 DNA分子。 將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞中復(fù)制保存，這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)化。 對(duì)那些吸收了重組 DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。 對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng)，檢測外援基因是否表達(dá)。7、簡單介紹遺傳標(biāo)記的主要類型。遺傳標(biāo)記（Genetic Markers ）是基因型特殊的易于識(shí)別的表現(xiàn)形式。它一般具有較強(qiáng)的多態(tài) 性、表現(xiàn)的共顯性、 不影響重要的農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟(jì)方便、 易于觀察記載等優(yōu)點(diǎn)。在遺傳學(xué)的 建立和發(fā)展過程中起著重要作用。從遺傳學(xué)的建立到現(xiàn)在,遺傳標(biāo)記的發(fā)展主要經(jīng)歷了 個(gè)階段,表現(xiàn)出了 4 種類

21、型。例如、形態(tài)標(biāo)記(Morphological Markers ) 形態(tài)標(biāo)記是指生物的外部特征特性。 包括質(zhì)量性狀作遺傳標(biāo)記和數(shù)量性狀作遺傳標(biāo)記, 人的膚色、 作物的株高、 種子的粒形和動(dòng)物的體重等。 它是最早被使用和研究的一類遺傳標(biāo) 記。在遺傳的分離規(guī)律、 自由組合定律和連鎖交換定律以及群體遺傳學(xué)和數(shù)量遺傳學(xué)的研究 和應(yīng)用等方面發(fā)揮著重要作用。 形態(tài)學(xué)標(biāo)記研究物種是基于個(gè)體性狀描述, 得到的結(jié)論往往 不夠完善,需生物統(tǒng)計(jì)學(xué)知識(shí)進(jìn)行嚴(yán)密的分析。、細(xì)胞標(biāo)記(Cytological Markers)細(xì)胞標(biāo)記主要指染色體組型和帶型。 染色體組型是指生物體細(xì)胞所有可測定的染色體特征總 稱。包括染色體總

22、數(shù)、染色體組數(shù)、每條染色體大小和形態(tài)、著絲點(diǎn)的位置等。它是物種特有的染色體信息之一, 具有很高的穩(wěn)定性和再現(xiàn)性。 對(duì)鑒別真假雜種、 對(duì)研究染 色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異、物種起源和生物的遺傳進(jìn)化等具有重要價(jià)值。、 生化標(biāo)記( Biochemical Markers ) 生化標(biāo)記是指生物的生化特征特性, 主要包括同工酶和貯藏蛋白兩種標(biāo)記。 同工酶是生物體代謝的調(diào)節(jié)者，與特殊的生理功能和細(xì)胞分化相聯(lián)系，也與基因進(jìn)化和物種的演變有關(guān)，因 此，同工酶既可作為生理指標(biāo)又可作為遺傳標(biāo)記在生物群體的遺傳進(jìn)化和分類研究中廣為應(yīng) 用。同工酶研究也有助于探討生物個(gè)體發(fā)育過程中基因表達(dá)與調(diào)控。、DNA 分子標(biāo)記（Mole

23、cular Markers）DNA分子標(biāo)記是能反映生物個(gè)體或種群間，基因組中某種差異特征的 DNA片段。此DNA片段是將基因組DNA經(jīng)過限制性內(nèi)切酶切割和分子雜交或PCR擴(kuò)增后在電泳凝膠上（或雜交膜上）檢測到的。遺傳標(biāo)記的發(fā)展隨遺傳學(xué)和科技的發(fā)展而發(fā)展,總的發(fā)展趨勢為由低級(jí)到高級(jí)、由間接到直接、由粗略到精確。上述前3種遺傳標(biāo)記均為以基因表達(dá)結(jié)果為基礎(chǔ),是對(duì)基因的間接反映,第4種標(biāo)記是DNA水平遺傳變異的反映，是對(duì)基因的直接反應(yīng)。與其它遺傳標(biāo)記相比較，DNA分子標(biāo)記具有諸多優(yōu)點(diǎn):1）能對(duì)生物各發(fā)育時(shí)期的個(gè)體、各組織、器官和細(xì)胞進(jìn)行檢測，直接以DNA的形式表現(xiàn)，不受環(huán)境影響，不存在基因表達(dá)與否的問題;數(shù)量豐富，遍及整個(gè)基因組，可檢測座位幾乎無限;遺傳穩(wěn)定