藥物毒理學(xué)：化學(xué)致癌作用

1、化學(xué)致癌作用Chemical Carcinogenesis,Toxicology,What is there that is not poison? All things are poison and nothing (is) without poison. Solely the dose determines that a thing is not a poison. Paracelsus (1493-1541) You too can be a toxicologist in two easy lessons, each of ten years. Arnold Lehman (1900-

2、1979) Few disciplines can point to both basic sciences and direct applications at the same time. Toxicology the study of the adverse effects of xenobiotics may be unique in this regard. Michael A. Gallo,化學(xué)物與機(jī)體 有害的交互作用,吸收 分布 代謝 終毒物 排泄 毒動(dòng)學(xué),靶器官 分子 細(xì)胞 器官 毒效學(xué),外源化學(xué)物 暴露,毒 效 應(yīng),毒性（Toxicity）化學(xué)物引起有害作用的固有能力,Can

3、cer Cell,？,？,癌癥是一類(lèi)嚴(yán)重影響人類(lèi)健康和生命的疾病,癌癥已成為人類(lèi)死亡的第一位或第二位的原因，每年全世界約有700萬(wàn)人死于癌癥 我國(guó)惡性腫瘤在各種死因中排列第二位，城市已排列首位,毒理學(xué)中“癌”的概念是廣義的，包括：,上皮組織的惡性變（癌） 間葉組織的惡性變（肉瘤） 良性腫瘤,遺傳因素和環(huán)境因素在疾病發(fā)生中的相互作用,癌癥的病因（Causes of Cancer）,Proportion of cancer deaths attributed to various environmental factors. Doll and Peto, 1981.,概念（Concepts）,化學(xué)

4、致癌/化學(xué)致癌作用（Chemical carcinogenesis）化學(xué)物質(zhì)引起正常細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化并發(fā)展成腫瘤的過(guò)程 化學(xué)致癌物（Chemical carcinogen） 具有化學(xué)致癌作用的化學(xué)物質(zhì)稱(chēng)為化學(xué)致癌物,化學(xué)致癌研究的重要?dú)v史事件-1,化學(xué)致癌研究的重要?dú)v史事件-2,Outline,化學(xué)致癌機(jī)制（Mechanisms of chemical carcinogenesis） 化學(xué)致癌物的分類(lèi)（Classifications of chemical carcinogen） 化學(xué)物致癌性的鑒定（Identification of chemical carcinogen）,Part 1.

5、化學(xué)致癌機(jī)制,遺傳機(jī)制學(xué)派（genetic theory) 親電子劑學(xué)說(shuō) 體細(xì)胞突變學(xué)說(shuō) 癌基因?qū)W說(shuō) 多階段學(xué)說(shuō) 非遺傳機(jī)制學(xué)派（non-genetic theory) 細(xì)胞異常增生 免疫抑制 內(nèi)分泌激素失衡 表觀遺傳改變等（Epigenetic Change）,化學(xué)致癌的癌基因?qū)W說(shuō),癌基因（Oncogene）,一類(lèi)能引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化及癌變的基因，是化學(xué)致癌物作用的主要靶分子，在細(xì)胞癌變過(guò)程中起關(guān)鍵作用。 細(xì)胞原癌基因(PROTO-ONCOGENE)：本身是正常的細(xì)胞基因，是一類(lèi)調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)分化的基因，在進(jìn)化過(guò)程中高度保守，在胚胎期或組織的再生和修復(fù)過(guò)程中表達(dá)，通常處于靜止?fàn)顟B(tài)，在化學(xué)致癌物、

6、某些物理因素和生物因素的作用下被激活而進(jìn)行表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞分裂增殖，引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化，最終形成腫瘤。發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的原癌基因才被稱(chēng)為癌基因。,原癌基因的活化方式,原癌基因突變 外源基因插入 染色體易位與基因重排 基因缺失 原癌基因擴(kuò)增 DNA甲基化程度降低,原癌基因產(chǎn)物,生長(zhǎng)因子: PDGF(sis) 生長(zhǎng)因子受體: EGF(erbB) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)組分: Ras(ras) 細(xì)胞周期蛋白: cyclinD(bcl-1) 細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白: Bcl-2(bcl-2) 轉(zhuǎn)錄因子: Myc(myc),原癌基因的分類(lèi),抑癌基因（Tumor suppressor gene）,作用方式與癌基因相反，它們?cè)谡＜?xì)胞中起

7、著抑制細(xì)胞增殖和促進(jìn)分化的作用，在環(huán)境致癌因素的作用下，抑癌基因發(fā)生純合缺失或失活亦會(huì)引起細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化而致癌。抑癌基因必須一對(duì)等位基因丟失或突變后失活，才能對(duì)細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化起作用，故又稱(chēng)為隱性癌基因（recessive oncogene）。,腫瘤抑制基因（抑癌基因）,P53,野生型P53：腫瘤抑制基因作用。其表達(dá)產(chǎn)物p53蛋白參與細(xì)胞周期G1/S交界處檢查點(diǎn)（checkpoint）的檢查機(jī)制，負(fù)責(zé)檢查細(xì)胞基因組的完整性。如果DNA有損傷，則p53使細(xì)胞阻滯于G1期，以使其修復(fù)，如修復(fù)失敗，則p53啟動(dòng)細(xì)胞發(fā)生凋亡。 突變性P53：癌基因的作用。促進(jìn)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，抑制細(xì)胞凋亡。在多種腫瘤中高表

8、達(dá)。,Apoptosis,野生型p53的功能,致癌過(guò)程中涉及的兩組基因比較,DNA保真性相關(guān)基因,含有30億個(gè)堿基對(duì)，20,000-25,000個(gè)蛋白質(zhì)編碼基因的人類(lèi)基因組經(jīng)常遭受內(nèi)源性活性代謝產(chǎn)物、治療藥物和大量環(huán)境致突變物的攻擊而使完整性受到影響。 在維持細(xì)胞基因組完整性中，DNA損傷修復(fù)機(jī)制扮演著重要的角色。 DNA損傷修復(fù)機(jī)制包括直接修復(fù)、堿基切除修復(fù)、核苷酸切除修復(fù)、雙鏈斷裂修復(fù)和交聯(lián)修復(fù)。,人類(lèi)切除核酸酶的六種因子,Hanahan和Weinsberg提出正常細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榘┘?xì)胞的6種能力，還將遺傳不穩(wěn)定性列為另一獲得性能力。,Hanahan D, Weinberg RA. The ha

9、llmarks of Cancer. Cell. 2000.,致腫瘤發(fā)生過(guò)程的五種平行途徑 A.所有腫瘤發(fā)生過(guò)程中需獲得的六種能力及相關(guān)的機(jī)制； B.六種能力的獲得在不同的腫瘤發(fā)生中迥異。,Hanahan D, Weinberg RA. The hallmarks of Cancer: The Next Generation. Cell. 2010.,Multi-Stage theory of Carcinogenesis,化學(xué)致癌的多階段學(xué)說(shuō),YJ Surhr. Mutation Research, 428, 305327.,正常細(xì)胞經(jīng)過(guò)遺傳學(xué)改變的積累，才能轉(zhuǎn)變?yōu)榘┘?xì)胞，癌癥的發(fā)生是多階段

10、過(guò)程，至少包括引發(fā)(initiation) 、促長(zhǎng)(promotion)和進(jìn)展(progression)階段。,Schematic representation of multi-stage carcinogenesis.,引發(fā)劑、促長(zhǎng)劑、進(jìn)展劑,致癌性多環(huán)芳烴和巴豆油誘發(fā)小鼠皮膚乳頭瘤(小鼠皮膚兩階段致腫瘤試驗(yàn)),足量引發(fā)劑可誘發(fā)腫瘤 一次單用引發(fā)劑不誘發(fā)腫瘤 促長(zhǎng)劑本生不誘發(fā)腫瘤 一次用引發(fā)劑后給予促長(zhǎng)劑可誘發(fā)腫瘤 促長(zhǎng)劑必須多次重復(fù) 引發(fā)作用不可逆 促長(zhǎng)劑僅在引發(fā)劑后才發(fā)揮作用,是指化學(xué)物或其活性代謝產(chǎn)物與DNA作用，導(dǎo)致體細(xì)胞突變成引發(fā)細(xì)胞（initiated cell）的階段。引發(fā)是

11、一個(gè)遺傳毒性事件。 Initiation involves an irreversible change in a normal cell (usually an alteration of the genome) allowing for unrestricted growth. (Handbook of Toxicology 2002),引發(fā)階段（Initiation）,引發(fā)是遺傳毒性事件,引發(fā)劑本身有致癌性，大多數(shù)是致突變物，沒(méi)有可檢測(cè)的閾劑量，其作用的靶主要是原癌基因和腫瘤抑制基因。,引發(fā)階段至少有三個(gè)重要的生物學(xué)事件,前致癌物（pro-carcinogen）,DNA損傷（DNA加合物

12、、鏈斷裂等）,細(xì)胞死亡,無(wú)法修復(fù)的 較大損傷,正常細(xì)胞,引發(fā)細(xì)胞,基因突變等 （錯(cuò)誤修復(fù)）,損傷修復(fù)（無(wú)誤修復(fù)）,致癌物代謝,DNA修復(fù),細(xì)胞增殖固定突變,終致癌物 (ultimate-carcinogen),Initiation,促長(zhǎng)階段（Promotion）,引發(fā)細(xì)胞增殖成為癌前病變或良性腫瘤的過(guò)程。 Promotion is expansion of the initiated cells to form an actively proliferating multi-cellular premalignant tumor cell population.,細(xì)胞異常增生 細(xì)胞周期調(diào)控紊亂

13、 表觀遺傳修飾 DNA甲基化 組蛋白修飾 染色質(zhì)重塑 非編碼的RNA對(duì)轉(zhuǎn)錄的調(diào)控等,促長(zhǎng)階段主要是非遺傳機(jī)制,Promotion,進(jìn)展階段（Progression）,從引發(fā)細(xì)胞群(癌前病變、良性腫瘤)轉(zhuǎn)變成惡性腫瘤的過(guò)程。在進(jìn)展期腫瘤獲得生長(zhǎng)，侵襲和轉(zhuǎn)移。 Progression is the irreversible process which produces a new clone of tumor cells with increased proliferative capacity.,Progression,多階段致癌的形態(tài)學(xué)和生物學(xué)特征,人結(jié)腸癌多階段模型（Vogelstein等，

14、1988）,染色體： 改 變： 基 因：,腫瘤轉(zhuǎn)化,腫瘤發(fā)展,致癌物攝取與分布,正常細(xì)胞,引發(fā) 遺傳學(xué)改變,生物轉(zhuǎn)化 生物活化 DNA損傷 改變的生長(zhǎng)控制 表觀遺傳作用 細(xì)胞增殖,前腫瘤細(xì)胞或細(xì)胞群,腫瘤細(xì)胞,轉(zhuǎn)化 遺傳學(xué)改變,癌基因活化 腫瘤抑制基因滅活 細(xì)胞增殖 凋亡降低 DNA修復(fù),促長(zhǎng) 克隆表達(dá),腫瘤細(xì)胞,促長(zhǎng) 克隆表達(dá),自分泌刺激 對(duì)抗增殖信號(hào)不敏感 能量穩(wěn)態(tài)改變 凋亡降低 細(xì)胞間交互作用降低 克隆表達(dá),良性腫瘤,細(xì)胞增殖 凋亡降低 基因組不穩(wěn)定性 免疫反應(yīng)降低 新血管生成,惡性腫瘤 侵襲、轉(zhuǎn)移,進(jìn)展 遺傳學(xué)改變 雜合性,無(wú)限增殖潛力,Part 2. 化學(xué)致癌物的分類(lèi),根據(jù)致癌作用模

15、式/機(jī)制分類(lèi) 根據(jù)化學(xué)性質(zhì)分類(lèi) 基于證據(jù)權(quán)重的致癌物分類(lèi)： IARC分類(lèi)，US EPA分類(lèi),IARC基于證據(jù)權(quán)重的化學(xué)致癌物分類(lèi),IARC根據(jù)對(duì)人類(lèi)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致癌性資料，以及在實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)和人類(lèi)其它有關(guān)的資料(包括癌前病變、腫瘤病理學(xué)、遺傳毒性、結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系、代謝和動(dòng)力學(xué)、理化參數(shù)及同類(lèi)的生物因子)進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，將環(huán)境因子和類(lèi)別、混合物及暴露環(huán)境與人類(lèi)癌癥的關(guān)系分為下列四組： 組1，對(duì)人類(lèi)是致癌物。對(duì)人類(lèi)致癌性證據(jù)充分者屬于本組。 組2，對(duì)人類(lèi)是很可能或可能致癌物。又分為兩組，即組2A和組2B。 組2A，對(duì)人類(lèi)很可能(probably)是致癌物，指對(duì)人類(lèi)致癌性證據(jù)有限，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致癌性證據(jù)充分。

16、 組2B，對(duì)人類(lèi)是可能(possible)致癌物，指對(duì)人類(lèi)致癌性證據(jù)有限，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致癌性證據(jù)并不充分；或指對(duì)人類(lèi)致癌性證據(jù)不足，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致癌性證據(jù)充分。 組3，現(xiàn)有的證據(jù)不能對(duì)人類(lèi)致癌性進(jìn)行分類(lèi)。 組4，人類(lèi)可能非致癌物。,IARC評(píng)價(jià)的各類(lèi)致癌因素的數(shù)量變化,Caprolactam,IARC vs. US EPA,歐共體（EEC）,已知為人類(lèi)致癌物，認(rèn)為是人類(lèi)致癌物，證據(jù)不足以進(jìn)行滿(mǎn)意的評(píng)價(jià),根據(jù)致癌作用模式/機(jī)制分類(lèi),*某些無(wú)機(jī)化學(xué)物被分類(lèi)為遺傳毒物，因?yàn)橛袚p傷DNA的證據(jù)；其它的可能經(jīng)表觀遺傳學(xué)機(jī)制起作用如改變DNA多聚酶的保真度。 Hayes AW. Principles and

17、Methods of Toxicology. 5rd ed. Raven Press, New York, 2008,Part 3. 化學(xué)物致癌性的鑒定,哺乳動(dòng)物致癌試驗(yàn)（Long-term carcinogenicity study）：鑒定哺乳動(dòng)物化學(xué)致癌物的標(biāo)準(zhǔn)體內(nèi)試驗(yàn)。 與研究致癌作用有關(guān)的其他試驗(yàn) 用于致癌物篩選的短期試驗(yàn) 哺乳動(dòng)物短期致癌試驗(yàn)（有限體內(nèi)致癌試驗(yàn)） 轉(zhuǎn)基因小鼠在致癌作用研究中的應(yīng)用,Long-term carcinogenicity study,目的： 確定受試化學(xué)物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的致癌性 劑量反應(yīng)關(guān)系 誘發(fā)腫瘤的靶器官,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇 劑量設(shè)定與實(shí)驗(yàn)分組 染毒途徑 實(shí)驗(yàn)期

18、限 結(jié)果觀察與分析,1.試驗(yàn)動(dòng)物,常規(guī)選用大鼠和小鼠，也可用倉(cāng)鼠。 品系：應(yīng)選擇較敏感、自發(fā)腫瘤率低、生活力強(qiáng)及壽命較長(zhǎng)的品系。NCI推薦Fischer344大鼠和B6C3F1小鼠 性別：應(yīng)使用同等數(shù)量的雌雄兩種性別的動(dòng)物。 年齡：使用剛離乳的動(dòng)物。,2.劑量選擇和動(dòng)物數(shù)量,3個(gè)劑量組和1個(gè)對(duì)照組，每組至少雌雄各50只動(dòng)物，希望在出現(xiàn)第一個(gè)腫瘤時(shí)，每組還有不少于25只動(dòng)物。 美國(guó)NCI推薦以最大耐受劑量(MTD)為高劑量。最大耐受劑量是由90天毒性試驗(yàn)來(lái)確定的，此劑量應(yīng)使動(dòng)物體重減輕不超過(guò)對(duì)照組的10%，并且不引起死亡及導(dǎo)致縮短壽命的中毒癥狀或病理?yè)p傷。 ICH（人用藥物注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)

19、議）（1995）提出，高劑量選擇可以根據(jù)：毒性終點(diǎn)，即最大耐受劑量(MTD)；藥代動(dòng)力學(xué)終點(diǎn)，嚙齒動(dòng)物血漿AUC（時(shí)量曲線(xiàn)下面積）為人的25倍；選擇吸收飽和劑量；藥效學(xué)終點(diǎn)，不應(yīng)產(chǎn)生生理學(xué)和內(nèi)穩(wěn)態(tài)紊亂；最大可行劑量，受試物在飼料中最高含量為5%。限制劑量為1500mg/kg體重/天。,2.劑量選擇和動(dòng)物數(shù)量,中、低劑量組則按等比級(jí)數(shù)下推，如分別為上一個(gè)劑量水平的1/2或1/3。低劑量組應(yīng)不影響動(dòng)物的正常生長(zhǎng)、發(fā)育和壽命，即不產(chǎn)生任何毒效應(yīng)。但低劑量組應(yīng)高于人的接觸劑量，一般不低于高劑量的10%。對(duì)照組除不給受試物外，其它條件均與試驗(yàn)組相同。,4.試驗(yàn)期限,ICH（1997）建議參考下面幾條準(zhǔn)則

20、： 一般情況下，試驗(yàn)期限小鼠和倉(cāng)鼠應(yīng)為18個(gè)月，大鼠為24個(gè)月；然而對(duì)于某些生命期較長(zhǎng)或自發(fā)腫瘤率低的動(dòng)物品系，小鼠和倉(cāng)鼠可持續(xù)24個(gè)月，大鼠可持續(xù)30個(gè)月。 當(dāng)最低劑量組或?qū)φ战M存活動(dòng)物只有25%時(shí)，可結(jié)束試驗(yàn)，對(duì)于有明顯性別差異的試驗(yàn)，則試驗(yàn)結(jié)束的時(shí)間對(duì)不同的性別應(yīng)有所不同，在某種情況下因明顯的毒性作用，只造成高劑量組動(dòng)物過(guò)早死亡，此時(shí)不應(yīng)結(jié)束試驗(yàn)。,3.染毒途徑,應(yīng)盡可能模擬人體可能的接觸途徑：經(jīng)口、經(jīng)皮膚和吸入。,5.觀察與結(jié)果分析,一般觀察 病理學(xué)檢查 結(jié)果分析：統(tǒng)計(jì)腫瘤發(fā)生情況，計(jì)算腫瘤發(fā)生率 腫瘤發(fā)生率（%）=（實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)患腫瘤的動(dòng)物數(shù)/有效動(dòng)物總數(shù)）100%,致癌試驗(yàn)陽(yáng)性的判斷

21、標(biāo)準(zhǔn)（WHO）,對(duì)于對(duì)照組也出現(xiàn)的一種或數(shù)種腫瘤，試驗(yàn)組腫瘤發(fā)生率增加； 試驗(yàn)組發(fā)生對(duì)照組沒(méi)有的腫瘤類(lèi)型； 試驗(yàn)組腫瘤發(fā)生早于對(duì)照組； 與對(duì)照組比較，試驗(yàn)組每個(gè)動(dòng)物的平均腫瘤數(shù)增加。,Cost,大鼠：20.00元/只； 飼養(yǎng)費(fèi)：1.00元/只.天 購(gòu)買(mǎi)動(dòng)物及動(dòng)物飼養(yǎng)兩項(xiàng)費(fèi)用： 20.00*400+1.00*400*24*30=296000(元) 時(shí)間成本： 1(分鐘/只)*400(只)=400(分鐘) 實(shí)驗(yàn)條件要求較高，人力、經(jīng)費(fèi)及時(shí)間耗費(fèi)巨大,以下情況考慮做哺乳動(dòng)物致癌試驗(yàn),其他化學(xué)物？,哪些藥物需要進(jìn)行該試驗(yàn)： ICH guideline on the need for carcinoge

22、nicity studies of pharmaceuticals S1A,與研究致癌作用有關(guān)的其他試驗(yàn),用于致癌物篩選的短期試驗(yàn) 基因突變?cè)囼?yàn)：鼠傷寒沙門(mén)氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames試驗(yàn))，培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞TK或HPRT正向突變?cè)囼?yàn)； 染色體畸變?cè)囼?yàn)：體外細(xì)胞系細(xì)胞遺傳學(xué)分析，小鼠骨髓微核試驗(yàn)，大鼠骨髓染色體畸變?cè)囼?yàn)； 原發(fā)性DNA損傷：DNA加合物，鏈斷裂，DNA修復(fù)誘導(dǎo)(細(xì)菌SOS反應(yīng)，大鼠肝UDS誘導(dǎo))，SCE試驗(yàn)； 體外細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)：敘利亞地鼠胚胎細(xì)胞，Bal b/c 3T3 細(xì)胞。 哺乳動(dòng)物短期致癌試驗(yàn)（有限體內(nèi)致癌試驗(yàn)） 小鼠皮膚腫瘤誘發(fā)試驗(yàn) 小鼠肺瘤誘發(fā)試驗(yàn) 大鼠肝轉(zhuǎn)化灶誘發(fā)試驗(yàn)

23、 雌性大鼠乳腺癌誘發(fā)試驗(yàn) 轉(zhuǎn)基因小鼠在致癌作用的研究 轉(zhuǎn)癌基因小鼠 腫瘤抑制基因敲除小鼠 轉(zhuǎn)穿梭質(zhì)粒的轉(zhuǎn)基因小鼠,陽(yáng)性結(jié)果提示可能致癌,陰性結(jié)果不能排除致癌,研究致癌中特定基因的作用,體外細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn),是體外遺傳毒理學(xué)試驗(yàn)，體外細(xì)胞轉(zhuǎn)化是一個(gè)重要的遺傳學(xué)終點(diǎn)。 靶細(xì)胞：最常用的細(xì)胞系是金黃地鼠胚胎細(xì)胞、Bal b/c 3T3細(xì)胞或乳鼠肺細(xì)胞；其次是小鼠胚胎細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、前列腺細(xì)胞、肺細(xì)胞；第三是大鼠胚胎細(xì)胞、肺成纖維細(xì)胞、氣管上皮細(xì)胞、肝上皮細(xì)胞，人胚胎細(xì)胞、氣管上皮細(xì)胞。 細(xì)胞轉(zhuǎn)化的判別標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞形態(tài)學(xué)、錨著依賴(lài)性、轉(zhuǎn)移和侵襲、裸鼠成瘤。,16HBE細(xì)胞的體外惡性轉(zhuǎn)化-1,A：16HBE

24、；B：T-16HBE；C：16HBE（軟瓊脂）；D：T-16HBE（軟瓊脂）,16HBE細(xì)胞的體外惡性轉(zhuǎn)化-2,將T-16HBE細(xì)胞接種于裸鼠右側(cè)腋皮下，數(shù)周后可見(jiàn)瘤塊生長(zhǎng)。 瘤體體積=0.5LW2 瘤體重量 組織病理學(xué)檢查,16HBE細(xì)胞的體外惡性轉(zhuǎn)化-3,嚙齒類(lèi)致癌試驗(yàn)結(jié)果的外推,被評(píng)為致癌物的化學(xué)物比例（Ames et al, 2000）,Ames BN and Gold LS (2000),Paracelsus to parascience: The dose (trace) makes the poison. Half of all chemicals, whether natural or synthetic, are positive in high-dose rodent cancer tests. These results are unlikely to be relevant at the low doses of human exposure.,“Model of action” and “Key events”,毒作用模式（model of action, MOA）是指證據(jù)權(quán)重支持的可能導(dǎo)致毒性有關(guān)終點(diǎn)的一組事件。 關(guān)鍵事件（key events）是指