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.,1,第一類:顯微鏡觀察類實(shí)驗(yàn)(7個(gè)),用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞(1-P7)觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布(1-P26)觀察線粒體和葉綠體(1-P47)觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原(1-P61)觀察細(xì)胞的有絲分裂(1-P115)觀察細(xì)胞的減數(shù)分裂(2-P21)低溫誘導(dǎo)染色體加倍(2-P88)體驗(yàn)制備細(xì)胞膜的方法(1-P40),.,2,實(shí)驗(yàn)1.使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞(1-P7),.,3,鏡筒,壓片夾,載物臺(tái),遮光器與光圈,反光鏡,鏡座,鏡柱,鏡臂,細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,粗準(zhǔn)焦螺旋,物鏡,目鏡,一、顯微鏡的結(jié)構(gòu):,.,4,二、操作指導(dǎo):(顯微鏡的使用),2、取鏡安放,3、對(duì)光,4、放置玻片標(biāo)本,5、觀察,6、高倍顯微鏡的使用,1、顯微鏡的構(gòu)造,(1)使用順序:先低倍后高倍(2)放大倍數(shù):(3)目鏡、物鏡鏡頭長(zhǎng)度與放大倍數(shù)關(guān)系:(4)成像特點(diǎn):低倍鏡/高倍鏡(5)物象移動(dòng)方向與裝片移動(dòng)方向關(guān)系(包括順逆時(shí)針問題)(6)視野光線亮度的調(diào)整與切片顏色、厚度的關(guān)系(7)污染物位置的判斷,若在低倍鏡下看不到細(xì)胞,可改用高倍物鏡繼續(xù)觀察。,.,5,注意:,1)正確使用低倍鏡:取鏡對(duì)光安放裝片下降鏡筒調(diào)焦。下降鏡筒時(shí),必須雙眼注視物鏡和裝片的距離,以免壓壞裝片和碰壞物鏡。2)正確使用高倍鏡:將低倍鏡下看到的物像移到視野中央轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,換用高倍物鏡調(diào)整光圈和反光鏡,使視野亮度適宜調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,直至物像清晰。,.,6,實(shí)驗(yàn)二、觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布(1-p26),實(shí)驗(yàn)原理,吡羅紅,甲基綠,紅色,綠色,主要在細(xì)胞核,線粒體、葉綠體含少量,主要在細(xì)胞質(zhì),.,7,取口腔上皮細(xì)胞制片(0.9%的NaCl涂片烘干)水解沖洗涂片染色觀察(先低倍鏡再高倍鏡/選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域),方法步驟,(8%的HCl,能改變細(xì)胞膜的通透性,同時(shí)使DNA與蛋白質(zhì)分離),人口腔上皮細(xì)胞DNA、RNA分布,洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞DNA、RNA分布,(蒸餾水),.,8,染色10分鐘,.,9,實(shí)驗(yàn)三、觀察線粒體和葉綠體(1-p7),一、實(shí)驗(yàn)原理,1.高等綠色植物的葉綠體存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,葉綠體一般是色的,扁平的形或形,可以用高倍顯微鏡觀察它的形態(tài)和分布。2.健那綠染液是專一性的染線粒體的活細(xì)胞染料??梢允够罴?xì)胞的線粒體呈現(xiàn)色,而細(xì)胞質(zhì)幾乎為無色。,綠,藍(lán)綠,球,橢球,.,10,二、方法步驟與注意事項(xiàng),觀察葉綠體裝片:,取材:,(葉片薄且葉綠體大,數(shù)目少),制片:,載玻片中央滴一滴清水,將葉片放入,加上蓋玻片,制成臨時(shí)裝片(臨時(shí)裝片隨時(shí)保持有水狀態(tài)),觀察:,先倍鏡找到葉片細(xì)胞后高倍鏡觀察葉綠體(形態(tài)和分布)(光強(qiáng)度的變化與葉綠體的位置關(guān)系),繪圖:,用鉛筆畫一個(gè)葉綠體形態(tài)和分布情況清楚的葉肉細(xì)胞,蘚類小葉或黑藻葉或波菜葉稍帶葉肉的下表皮,低,.,11,顯微鏡下的黑藻細(xì)胞,.,12,(2008,廣東)用高倍顯微鏡觀察黑藻葉綠體時(shí),可見葉綠體A具有雙層膜B呈綠色帶狀C內(nèi)部有許多基粒D呈綠色橢球形,【線粒體的觀察通??蛇x用易取材的人的口腔上皮細(xì)胞】,若是水綿細(xì)胞呢?,.,13,觀察植物的質(zhì)壁分離與復(fù)原1,.,14,實(shí)驗(yàn)四、觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原(1-P61),細(xì)胞液濃度外界溶液濃度時(shí):細(xì)胞吸水,質(zhì)壁分離復(fù)原。原生質(zhì)層伸縮性大于細(xì)胞壁伸縮性,因而收縮幅度大,造成質(zhì)壁分離。,1實(shí)驗(yàn)原理,紫色洋蔥磷片葉(液泡大且有顏色易觀察),2、實(shí)驗(yàn)材料及試劑,0.3g/ml的蔗糖溶液,.,15,觀察植物的質(zhì)壁分離與復(fù)原2,.,16,.,17,.,18,某同學(xué)在做“觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原”實(shí)驗(yàn)過程中,分別采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%和50%的蔗糖溶液,1mol/LKNO3溶液和lmol/L的鹽酸溶液制作了4組臨時(shí)裝片,并用顯微鏡隨時(shí)觀察。發(fā)現(xiàn)前3組在23min后發(fā)生部分質(zhì)壁分離,5min后質(zhì)壁分離現(xiàn)象明顯,而第4組無質(zhì)壁分離現(xiàn)象。觀察到前3組出現(xiàn)明顯的質(zhì)壁分離現(xiàn)象后,再過5min觀察,發(fā)現(xiàn)1、2組無變化,而第3組自動(dòng)發(fā)生了質(zhì)壁分離復(fù)原現(xiàn)象。然后對(duì)前2組裝片滴加清水,用顯微鏡觀察,發(fā)現(xiàn)第1組45min后恢復(fù)原狀,而第2組無變化,不能發(fā)生復(fù)原。請(qǐng)分析各組實(shí)驗(yàn)裝片發(fā)生變化的原因。,思考題,如果使用的是一定濃度的尿素或者甘油溶液,其結(jié)果呢?為什么?,.,19,、實(shí)驗(yàn)原理、方法步驟,實(shí)驗(yàn)五:觀察植物細(xì)胞的有絲分裂(1-p115),(1)根尖、莖尖的分生區(qū)、莖形成層、愈傷組織可觀察到有絲分裂。,(2)細(xì)胞核內(nèi)的染色體容易被堿性染料著色,(1)根尖培養(yǎng)(材料)(2)裝片制作:解離漂洗染色制片(順序不能交換)(3)觀察:低倍鏡觀察高倍鏡觀察(4)繪圖:,.,20,、注意事項(xiàng),培養(yǎng)根尖:應(yīng)每天換水(防止水中缺氧爛根),取材:取生長(zhǎng)旺盛、帶有分生區(qū)的根尖,長(zhǎng)度為根尖的2-3mm(時(shí)間:上午10時(shí)至下午2時(shí)最佳),解離:目的:使組織細(xì)胞分離開,殺死并固定細(xì)胞;解離液:15%鹽酸95%酒精溶液11;時(shí)間:室溫3-5分鐘,至根尖酥軟(時(shí)間短則細(xì)胞沒有完全分離,長(zhǎng)則可能使根尖爛掉),漂洗:用清水漂洗10min,目的是洗去組織中的解離液,便于染色(防止酸堿中和)。,.,21,壓片:目的是使細(xì)胞分散開。方法(用鑷子弄碎根尖,蓋上蓋玻片,再放上一塊載玻片,壓片)(壓片過重過猛可能將組織壓碎、壓爛;過輕則細(xì)胞未充分分散開而重疊。),低倍鏡觀察:找到分生區(qū)細(xì)胞(特點(diǎn):細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂),高倍鏡觀察:找各時(shí)期細(xì)胞。可見處于間期的細(xì)胞最多,中期最少。不能看到某個(gè)細(xì)胞連續(xù)分裂的過程,因細(xì)胞在解離時(shí)已被殺死。,染色:染液(0.01g/mL的龍膽紫或0.02g/mL的醋酸洋紅);時(shí)間為35分鐘;目的是使染色體或染色質(zhì)被堿性染料染成深色,便于觀察。,.,22,回顧:(1)解離的目的是什么?如果解離時(shí)間過短會(huì)造成什么后果?(2)如果漂洗不干凈會(huì)有什么結(jié)果?(4)在分生區(qū)能不能看到細(xì)胞正在分裂?有何特點(diǎn)?(5)觀察有絲分裂,視野中處于什么時(shí)期的細(xì)胞最多?為什么?,不能,細(xì)胞排列整齊、呈正方形,如果解離時(shí)間過短,就不能使細(xì)胞之間的連接分開,造成壓片失敗,細(xì)胞不能均勻地在裝片上鋪成一層。,如果漂洗不干凈,沾在洋蔥根尖上的鹽酸與酒精就會(huì)和龍膽紫反應(yīng),造成根尖細(xì)胞染色體不能染上顏色,.,23,A染色體未著上顏色,無法看清B細(xì)胞重疊,看不到染色體C染色體著上顏色,清晰可見D染色體著色很淺,模糊不清甲觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是乙觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是丙觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是,B,D,A,.,24,.,25,.,26,實(shí)驗(yàn)六:觀察細(xì)胞的減數(shù)分裂(2-p21),一、實(shí)驗(yàn)材料,蝗蟲精巢精母細(xì)胞(染色體數(shù)目少,體積大,易觀察)減數(shù)分裂固定裝片等,三、實(shí)驗(yàn)原理,減數(shù)分裂是生物在性母細(xì)胞成熟時(shí)配子形成過程中發(fā)生的一種特殊的細(xì)胞分裂,它包括連續(xù)兩次的細(xì)胞分裂階段:第一次分裂為染色體數(shù)目的減數(shù)分裂,第二次為染色體數(shù)目的等數(shù)分裂。兩次分裂可根據(jù)染色體變化特點(diǎn)分為前期、中期、后期和末期。,.,27,.,28,實(shí)驗(yàn)七:低溫誘導(dǎo)染色體加倍(2-p88),進(jìn)行正常有絲分裂的植物分生組織細(xì)胞,在有絲分裂_期,染色體的_分裂,子染色體在_的作用下,分別移向兩極,最終被平均分配到兩個(gè)子細(xì)胞中去。用低溫處理植物分生組織細(xì)胞,能夠抑制_形成,以至影響_被拉向兩極,細(xì)胞也不能分裂成兩個(gè)子細(xì)胞,于是植物細(xì)胞染色體數(shù)目發(fā)生變化。(秋水仙素類似),一、實(shí)驗(yàn)原理,后,著絲點(diǎn),紡錘體,紡錘體,染色體,.,29,二、實(shí)驗(yàn)過程,1、材料用具洋蔥或大蔥、蒜(均為二倍體,體細(xì)胞中染色體數(shù)為16),培養(yǎng)皿、濾紙、紗布、燒杯、鑷子、剪刀、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、冰箱、卡諾氏液、改良苯酚品紅染液、體積分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸溶液,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液。,.,30,2、方法步驟低溫誘導(dǎo):固定形態(tài):制作裝片:觀察:,培養(yǎng)洋蔥根尖,待根長(zhǎng)出約1cm左右將整個(gè)裝置放入冰箱低溫室內(nèi)(4),誘導(dǎo)培養(yǎng)36小時(shí),剪取誘導(dǎo)處理的根尖約0.5-1cm,放入卡諾氏液浸泡0.5-1小時(shí),以固定形態(tài),然后用體積分?jǐn)?shù)95%酒精沖洗2次,解離漂洗染色制片(同有絲分裂),.,31,3、注意事項(xiàng)1)低溫處理必須在培養(yǎng)出1cm左右不定根之后。如若生根前就送進(jìn)冰箱,低溫抑制新陳代謝也就抑制了根尖分生區(qū)的形成,不會(huì)發(fā)生根尖分生區(qū)的有絲分裂受低溫影響的過程。2)剪取根尖時(shí)間一般在中午10點(diǎn)左右,此時(shí)分裂旺盛,受低溫影響較大,實(shí)驗(yàn)效果明顯。3)染色時(shí)間要嚴(yán)格控制,不足時(shí)染色體看不清,染色過度,染色體一團(tuán)糟,無法分辨。,.,32,第二類:驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)(2個(gè)),檢測(cè)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)(1-p18)葉綠體色素的提取和分離(1-p97),.,33,實(shí)驗(yàn)八:檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)(1-p18),1、實(shí)驗(yàn)原理:,.,34,.,35,2、實(shí)驗(yàn)材料還原糖:應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨等脂肪:選擇富含脂肪的種子,如花生、蓖麻種子(實(shí)驗(yàn)前一般需浸泡3-4小時(shí))蛋白質(zhì)(二肽、多肽):可選富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清等,葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。,.,36,3、實(shí)驗(yàn)步驟,1)可溶性還原糖的鑒定原理:-CHO+Cu(HO)2加熱-COOH+Cu2O磚紅色,制備組織樣液:,檢測(cè)樣液:,加入2ml組織樣液加入1ml新配制斐林試劑(淡藍(lán)色)水浴煮沸2min左右,觀察顏色變化:,(淡藍(lán)色棕色磚紅色),空白對(duì)照問題,.,37,3)蛋白質(zhì)鑒定原理:-CO-NH-(類似雙縮脲H2NOC-NH-CONH2結(jié)構(gòu))與Cu2+作用形成紫色絡(luò)合物雙縮脲反應(yīng),制備樣液:,檢測(cè)與觀察:,取2ml樣液加入雙縮脲試劑A液1ml(0.1g/ml的NaOH溶液,創(chuàng)設(shè)堿性環(huán)境)搖勻加入雙縮脲試劑B液(0.01g/ml的CuSO4溶液,提供Cu2+)4滴,搖勻觀察(紫色),.,38,(NH2-CO-NH-CO-NH2)(雙縮脲),.,39,斐林試劑與雙縮脲試劑有何區(qū)別?,.,40,2)脂肪檢測(cè)與鑒定,染色:,滴蘇丹染液2-3滴與花生子葉切片上染色2-3min后吸去染液滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色洗去多余酒精,再滴蒸餾水1-2滴,蓋蓋玻片,觀察:,低倍鏡高倍鏡(橘黃色(紅色)脂肪顆粒),制作切片:,.,41,生物組織中脂肪的鑒定,.,42,.,43,在生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,對(duì)實(shí)驗(yàn)材料的選擇敘述中,錯(cuò)誤的是()A甘蔗莖的薄壁組織、甜菜的塊根、馬鈴薯塊莖等,都含有較多的糖且近于白色,因此可以用予進(jìn)行可溶性還原糖的鑒定B花生種子含脂肪多且子葉肥厚,是用于脂肪鑒定的理想材料C大豆種子蛋白質(zhì)含量高,是進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定的理想植物組織材料D雞蛋清含蛋白質(zhì)多,是進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定的動(dòng)物材料,A,.,44,下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)一操作步驟的敘述中,正確的是()A用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液,可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定B脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染成橘黃色的脂肪滴C鑒定可溶性還原糖時(shí),要加入斐林試荊甲液搖勻后,再加入乙液D用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A液與B液要混合均勻后,再加入含樣品的試管中,且必須現(xiàn)混現(xiàn)用,(蘇丹使細(xì)胞中出現(xiàn)著色的顆粒),B,.,45,實(shí)驗(yàn)九:葉綠體色素的提取和分離(1-p97),.,46,實(shí)驗(yàn)九:葉綠體中色素的提取和分離1實(shí)驗(yàn)原理:(1)色素提?。海?)色素分離:,葉綠體中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑無水乙醇(丙酮)中,用無水乙醇提取色素。,葉綠體中色素在層析液(汽油)中的溶解度不同,溶解度高的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快,溶解度低的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得慢,這樣,葉綠體中的色素就在擴(kuò)散過程中分離開來。,(紙層析法),.,47,2實(shí)驗(yàn)方法步驟:(1)提取色素:(2)制備濾紙條(3)色素分離紙層析法(4)觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果(5)整理、洗手,稱取5g新鮮綠色葉片,剪碎放入研缽中,向其中加入少許碳酸鈣和二氧化硅,再加mL無水乙醇,進(jìn)行迅速充分研磨,將研磨液倒入漏斗中過濾出色素液。(尼龍膜),.,48,胡蘿卜素(橙黃色),葉黃素(黃色),葉綠素a(藍(lán)綠色),葉綠素b(黃綠色),.,49,問題:1.色素提取原理?色素分離方法是什么?2.某同學(xué)在做葉綠體中色素提取實(shí)驗(yàn)時(shí),收集到的色素提取液是淡綠色的,分析原因可能是()研磨不充分,色素未能充分提取出來丙酮加入太多,稀釋了色素提取液丙酮加的太少,色素未提取出來未加CaCO3粉末葉綠素分子已經(jīng)被破壞A.B.C.D.,A,請(qǐng)解釋:色素帶不整齊、色素帶異常、濾紙上無色素帶、色素帶只有2條(或3條),.,50,3.在葉綠體色素的分離實(shí)驗(yàn)中,要使色素帶清晰又整齊,應(yīng)采取的措施有哪些?,定性濾紙要干燥剪去濾紙條一端兩角濾液細(xì)線畫細(xì)、直、齊重復(fù)畫線蓋上培養(yǎng)皿蓋,.,51,第三類實(shí)驗(yàn):探究類實(shí)驗(yàn)(7個(gè)),探究影響酶活性的因素(1-p83)探究酵母菌的呼吸方式(1-p91)模擬探究細(xì)胞表面及與體積的關(guān)系(1-p110)探究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)扦插枝條生根的作用(3-p51)探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化(3-p68)土壤中動(dòng)物類群豐富度的研究(3-p75)設(shè)計(jì)并制作生態(tài)缸,觀察其穩(wěn)定性(3-p112),.,52,實(shí)驗(yàn)十一:探究影響酶活性的因素(1-p83),(高效性、專一性、溫度、pH),.,53,(一)比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率,1、實(shí)驗(yàn)原理:,新鮮肝臟中含有過氧化氫酶,和Fe3+一樣,能催化過氧化氫分解成水和氧,但二者效率不一樣。,2、實(shí)驗(yàn)方法與步驟,(1)取兩支潔凈的試管并編號(hào)1號(hào)、2號(hào),各注入2ml過氧化氫溶液,(2)向1號(hào)試管內(nèi)滴入2滴肝臟研磨液;向2號(hào)對(duì)照試管內(nèi)滴入2滴氯化鐵溶液。,(3)堵住試管口,輕輕地振蕩兩支試管,使試管內(nèi)的物質(zhì)混合均勻。觀察并記錄哪支試管產(chǎn)生的氣泡多。,(4)將點(diǎn)燃但無火焰的衛(wèi)生香分別放入1、2號(hào)試管內(nèi)液面的上方,觀察并記錄哪支衛(wèi)生香燃燒猛烈。,(常溫、高溫),.,54,4、注意事項(xiàng),肝臟要新鮮,并要研磨(不新鮮的肝臟中,過氧化氫酶的活性會(huì)由于細(xì)菌的破壞而降低。研磨液效果好,因?yàn)樗黾舆^氧化氫酶與過氧化氫的接觸面積),滴加氯化鐵溶液和肝臟研磨液不能合用一支滴管。,過氧化氫有腐蝕性;實(shí)驗(yàn)注意安全。,實(shí)驗(yàn)時(shí)將點(diǎn)燃的衛(wèi)生香插入試管處,不要插入太深,防止受潮熄滅。,3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論,兩支試管均有氣泡產(chǎn)生,但1號(hào)試管產(chǎn)生得快而且多,兩支衛(wèi)生香均燃燒,但1號(hào)試管口的更猛烈。以上的一組對(duì)比實(shí)驗(yàn)可以證明酶的高效性。,.,55,(二)探索淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的水解作用,1、實(shí)驗(yàn)原理:,淀粉和蔗糖都沒有還原性,淀粉酶將淀粉水解成的麥芽糖則具有還原性;蔗糖水解產(chǎn)生的葡萄糖和果糖都具有還原性,但淀粉酶不能將蔗糖水解。,2、實(shí)驗(yàn)材料:,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液;質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2的新鮮淀粉酶溶液。,.,56,3、實(shí)驗(yàn)方法與步驟,(1)取兩支潔凈的試管,編號(hào),然后向1號(hào)管注入2ml可溶性淀粉溶液和2ml新鮮淀粉酶溶液。向2號(hào)管注入2ml蔗糖溶液和2ml新鮮淀粉酶溶液。,(2)輕輕振蕩兩支試管,使試管內(nèi)的液體混合均勻,然后將試管的下半部浸到600C左右的熱水中,保溫5min。(控制溫度1),(3)取出試管,各加入2ml斐林試劑。,(4)將兩支試管的下半部放進(jìn)盛有熱水的大燒杯中,用酒精燈加熱,煮沸并保持1min(控制溫度2),(5)觀察并記錄兩支試管內(nèi)的變化。,.,57,5、注意事項(xiàng),(1)做好本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵是蔗糖的純度和新鮮程度;,4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析,1號(hào)有磚紅色沉淀,2號(hào)沒有顏色變化。即淀粉被淀粉酶水解,而蔗糖沒有被水解。酶作用有專一性。,.,58,下列關(guān)于探索淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的作用實(shí)驗(yàn)的敘述中正確的是()A淀粉酶能否催化淀粉和蔗糖的水解,是通過有無還原糖特定的顏色反應(yīng)而證明的B本實(shí)驗(yàn)有兩次控制溫度,目的是一樣的C本實(shí)驗(yàn)也可用碘液替代斐林試劑的作用D蔗糖的純度與新鮮程度如何并不影響實(shí)驗(yàn),A,.,59,(三)探索影響酶活性的因素,1、實(shí)驗(yàn)原理,2、方法步驟,(略),.,60,A、溫度對(duì)酶活性的影響,(1)取3支試管編上號(hào),并且分別注入2ml可溶性淀粉溶液。(2)將3支試管分別放入60左右的溫水、沸水和冰塊中,維持各自的溫度5min。(3)在3支試管中各注入1ml新鮮的淀粉酶溶液,搖勻后,維持各自的溫度5min。(4)在3支試管中各滴入1滴碘液,然后搖勻。(5)觀察并記錄這3支試管中溶液顏色的變化情況。,酶溶液最好也先分別在特定的溫度下保溫,確保反應(yīng)一開始就是在所要求的溫度條件下進(jìn)行。另不宜使用斐林試劑為檢測(cè)試劑,也不宜用過氧化氫酶為研究對(duì)象。,(相互對(duì)照),.,61,B、pH對(duì)酶活性的影響,(1)取三支潔凈的試管,編號(hào),分別注入1ml過氧化氫酶溶液(可用質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%的新鮮肝臟研磨液替代),()振蕩這3支試管,使試管內(nèi)的液體混合均勻。用點(diǎn)燃但無火焰的衛(wèi)生香來檢測(cè)氧氣的生成情況,()在3支試管中分別加入鹽酸、蒸餾水、氫氧化鈉各1ml,(3)在3支試管中各加入2ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)3%的過氧化氫溶液,本實(shí)驗(yàn)最好也將過氧化氫溶液事先調(diào)至統(tǒng)一pH,以保證反應(yīng)開始便達(dá)預(yù)設(shè)pH,另最好不要使用淀粉酶做實(shí)驗(yàn),.,62,探究溫度對(duì)酶活性影響的實(shí)驗(yàn),需要進(jìn)行如下步驟:取3支試管,編號(hào)并各注入2mL淀粉溶液;向各試管注入lmL淀粉酶溶液;向各試管滴1滴碘液;將3支試管分別放在60的熱水、沸水和冰塊中維持溫度5min;觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。以上步驟最合理的實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)為,實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵應(yīng)是先確保反應(yīng)所要求的條件,然后才讓酶與底物相遇,.,63,實(shí)驗(yàn)十二:探究酵母菌的呼吸方式(1-p91),探究的基本思路:提出問題作出假設(shè)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)(包括選擇實(shí)驗(yàn)材料和器具、確定實(shí)驗(yàn)步驟、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)記錄表格等)實(shí)施實(shí)驗(yàn)分析與結(jié)論表達(dá)與交流,.,64,1.實(shí)驗(yàn)原理(1)酵母菌是單細(xì)胞真菌屬于兼性厭氧菌。(2)CO2的檢測(cè)CO2使澄清石灰水變渾濁CO2使溴麝香草酚藍(lán)(BTB)水溶液由藍(lán)變綠再變黃(3)酒精的檢測(cè)橙色的重酪酸鉀溶液在酸性條件下與酒精發(fā)生反應(yīng),變成灰綠色。,.,65,2.實(shí)驗(yàn)用具(略),.,66,3.實(shí)驗(yàn)步驟,(1)配制酵母菌培養(yǎng)液(等量原則)置于A、B錐形瓶(2)組裝有氧呼吸和無氧呼吸裝置圖,放置在25-35環(huán)境下培養(yǎng)8-9小時(shí)。(3)檢測(cè)CO2的產(chǎn)生(4)檢測(cè)酒精的產(chǎn)生a.取2支試管編號(hào)b.各取A、B錐形瓶酵母菌培養(yǎng)液濾液2毫升,注入試管c.分別滴加0.5毫升重酪酸鉀-濃硫酸溶液,輕輕震蕩、混勻.,4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略),.,67,酵母菌廣泛用于發(fā)酵,為研究酒精發(fā)酵的產(chǎn)物,某研究小組設(shè)計(jì)了如圖裝置。1號(hào)、2號(hào)試管中均加入3mL蒸餾水和少許0.1BTB溶液至藍(lán)綠色。下列有關(guān)評(píng)價(jià)合理的A.1號(hào)管可以去除或?qū)?號(hào)管中BTB液換成澄清石灰水B.該裝置無法檢驗(yàn)CO2的生成,仍需再補(bǔ)充其他裝置C.溫度偏高,導(dǎo)致發(fā)酵管內(nèi)O2少,酵母菌繁殖速度減慢,不利于發(fā)酵D.為使發(fā)酵管中盡量少的含有O2,應(yīng)先將葡萄糖液煮沸,待冷卻后加入鮮酵母,再加少許石蠟油,使之浮于混合液表面E.若研究有氧呼吸,則需增加相同裝置,不時(shí)通氣且不覆蓋油膜F.只要對(duì)有氧呼吸裝置通氣,1號(hào)管中BTB溶液變色將快于2號(hào)G.實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),兩組的酒精產(chǎn)量、PH、CO2/O2的比值會(huì)有差異,D、E、G,.,68,測(cè)量結(jié)果(表),9:27,4:8,1:1,結(jié)論:,瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減??;NaOH擴(kuò)散的體積與整個(gè)瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。,實(shí)驗(yàn)十三:模擬探究細(xì)胞表面積與體積的關(guān)系(p-110),.,69,十四:探究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)扦插枝條生根的作用(3-p51),.,70,方案設(shè)計(jì):一提出問題:不同濃度的生長(zhǎng)素類似物,促進(jìn)插條生根的最適濃度是多少呢?二作出假設(shè):濃度的可以使插條基部的薄壁組織細(xì)胞恢復(fù)分裂能力,產(chǎn)生愈傷組織,長(zhǎng)出。三設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn):選擇生長(zhǎng)素類似物配制生長(zhǎng)素類似物母液設(shè)置生長(zhǎng)素類似物的濃度梯度制作插條分組處理插條進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察記錄分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出結(jié)論。配制生長(zhǎng)素類似物母液:5mg/ml(用蒸餾水配制,加少許無水乙醇以促進(jìn)溶解)插條處理方法:浸泡法或沾蘸法,NAA,(或2、4-D等),月季,(或楊等),適宜,NAA,(或2、4-D等),大量不定根,.,71,實(shí)驗(yàn)過程:一材料用具:(略),二方法步驟:,1.設(shè)置生長(zhǎng)素類似物的濃度梯度:將生長(zhǎng)素類似物母液分別配成濃度為0.2、0.4、0.6、08、1、2、3、4、5mg/ml的溶液,另有清水做空白對(duì)照。2.制作插條:枝條剪成長(zhǎng)約5-7cm的插條,插條的形態(tài)學(xué)上端為平面,下端要削成斜面,留34個(gè)芽。3.分組處理:將制作好的插條,分成N組(每組不少于3個(gè)枝條),分別將其基部浸泡在上述不同濃度溶液以及清水中,處理幾小時(shí)至一天。4.培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):設(shè)置N個(gè)相同的水培裝置,加入等量的完全營(yíng)養(yǎng)液,在相同的外界條件下,分別培養(yǎng)上述處理過的插條,注意保持溫度為25-30,預(yù)實(shí)驗(yàn),空白對(duì)照、相互對(duì)照,.,72,濃,度,生,根,數(shù),時(shí),間,三觀察現(xiàn)象:定期觀察每組實(shí)驗(yàn)材料的生根狀況,并記錄結(jié)果。,.,73,誤區(qū)警示:1.在本實(shí)驗(yàn)中,生長(zhǎng)素類似物的功能與其促進(jìn)根生長(zhǎng)的功能是一回事嗎?2.在本實(shí)驗(yàn)中,若在適宜濃度范圍內(nèi)不能生出不定根,請(qǐng)分析可能的原因?,在本實(shí)驗(yàn)中,生長(zhǎng)素類似物的功能是促進(jìn)扦插枝條生根,與其促進(jìn)生長(zhǎng)的功能不是一回事。促進(jìn)扦插枝條生根是指刺激枝條的一端生出許多不定根,而不只是刺激不定根的生長(zhǎng)。,可能是枝條質(zhì)量和規(guī)格不好(如沒有芽)、枝條倒插等。,.,74,實(shí)驗(yàn)十五:探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化(3-p68),方案設(shè)計(jì)一、提出問題培養(yǎng)一種酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的?二、猜想假設(shè)酵母菌種群的數(shù)量隨時(shí)間呈_型增長(zhǎng)變化。三、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)全班同學(xué)分成甲、乙、丙等若干實(shí)驗(yàn)組。分別用等量培養(yǎng)液,在相同適宜環(huán)境中培養(yǎng)等量酵母菌。每天用血球計(jì)數(shù)板,采用抽樣檢測(cè)的方法計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量并作記錄,連續(xù)7天。7天后,各組向全班匯報(bào)本小組7天的數(shù)據(jù),算出每一天數(shù)據(jù)的全班平均值,根據(jù)平均值畫出酵母菌種群數(shù)量的增長(zhǎng)曲長(zhǎng)。,S,.,75,實(shí)驗(yàn)過程一、材料用具菌種、無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液、試管、血球計(jì)數(shù)板(2mm2mm0.1mm方格)、滴管、顯微鏡等。二、方法步驟和記錄1、取相同試管若干支,分別加入5ml肉湯培養(yǎng)液,塞上棉塞。2、用高壓鍋進(jìn)行_滅菌后冷卻至室溫,標(biāo)記甲、乙、丙等。3、將酵母菌母液分別加入試管各5ml,搖勻后用_計(jì)數(shù)起始酵母液個(gè)數(shù),做好記錄。4、將各試管送進(jìn)恒溫箱,_下培養(yǎng)7天。,高壓蒸汽,血球計(jì)數(shù)板,25,.,76,三、現(xiàn)象觀察每天同一時(shí)間,各組取出本組的試管,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù),并作記錄,連續(xù)觀察7天。,(天),.,77,四、實(shí)驗(yàn)結(jié)論1、根據(jù)表格平均值作出培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量7天中的變化曲線。,2、培養(yǎng)液酵母菌種群數(shù)量隨時(shí)間呈_型增長(zhǎng)變化。,S,.,78,五、實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)(略)誤區(qū)警示1、從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),應(yīng)將試管_幾次,以便使酵母菌均勻分布,提高計(jì)數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性。2、對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌應(yīng)計(jì)數(shù)_兩邊上的菌體數(shù),另兩邊不計(jì)數(shù)。,振蕩,同側(cè)相鄰,.,79,課后思考題1、如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多,難以數(shù)清,應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措施?2、本探究需要設(shè)置對(duì)照嗎?如果需要,請(qǐng)討論說明怎樣設(shè)計(jì);如不需要,請(qǐng)說明理由。,搖勻試管取1ml酵母菌培養(yǎng)液稀釋幾倍后,再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),所得數(shù)值乘以“n2.5104”,即為1ml酵母菌原液中酵母菌個(gè)數(shù)。,不需要。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹荚谔骄颗囵B(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化,只要分組重復(fù)實(shí)驗(yàn),獲得平均數(shù)值,求得準(zhǔn)確即可。,.,80,實(shí)驗(yàn)十六:土壤中動(dòng)物類群豐富度的研究(3-p75),.,81,方

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