基因擴(kuò)增儀(PCR儀)測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)規(guī)范

JJF 201 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng) 校準(zhǔn)規(guī)范 1 范圍范圍 本規(guī)范適用于 48 孔或 96 孔孔板結(jié)構(gòu)的測(cè)量范圍為 0 120 的多通道基因擴(kuò) 增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)或者單通道基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫儀的的校準(zhǔn) 其他孔 板結(jié)構(gòu)和溫度范圍的基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)的溫度校準(zhǔn)可以參考本規(guī)范 2 引用文件 本規(guī)范引用下列文件 JJF 1071 2000 國(guó)家計(jì)量校準(zhǔn)規(guī)范編寫(xiě)規(guī)則 JJF 1007 2007 溫度計(jì)量名詞術(shù)語(yǔ)及定義 JJF 1527 2015 聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范 YY T 1173 2010 聚合酶鏈反應(yīng)分析儀 ITS 90 1990年國(guó)際溫標(biāo) 凡是注日期的引用文件 僅注日期的版本適用于本規(guī)范 凡是不注日期的引用文 件 其最新版本 包括所有的修改單 適用于本規(guī)范 3 術(shù)語(yǔ)術(shù)語(yǔ) 3 1 基因擴(kuò)增儀 PCR儀 即聚合酶鏈反應(yīng)分析儀 polymerase chain reaction analyzer 基于PCR 聚合酶鏈反應(yīng) 技術(shù)原理 模擬DNA或RNA的復(fù)制過(guò)程 在模板 引 物 校驗(yàn)和沒(méi)等存在的條件下 特異擴(kuò)增已知序列 對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)分析的儀器設(shè)備 YY T 1173 2010 3 2 3 2 基因擴(kuò)增儀 PCR儀 測(cè)溫系統(tǒng) temperature measuring system for Polymerase chain reaction analyzer 用于基因擴(kuò)增儀 PCR儀 的專用溫度校準(zhǔn)裝置 3 3 溫度校準(zhǔn)專用等溫塊與配件 isothermal block and accessory for temperature calibration 與標(biāo)準(zhǔn)恒溫槽配套使用并提供基因擴(kuò)增儀測(cè) PCR儀 溫系統(tǒng)溫度校準(zhǔn)的潔凈溫 場(chǎng)的輔助裝置 3 4 溫度校準(zhǔn)專用等溫塊測(cè)試孔 testing hole for temperature calibration 模擬基因擴(kuò)增儀控溫塊內(nèi)的結(jié)構(gòu) 提供基因擴(kuò)增儀 PCR儀 測(cè)溫系統(tǒng)探頭布放 插孔的專用等溫塊 3 5 基因擴(kuò)增儀溫度校準(zhǔn)專用等溫塊標(biāo)準(zhǔn)溫度驗(yàn)證孔 temperature validate hole 基因擴(kuò)增儀等溫塊中提供放置標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)的固定位置 3 6 溫度測(cè)量范圍 range for temperature measurement 在準(zhǔn)確度要求內(nèi) 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)所能實(shí)現(xiàn)的上下限溫度f(wàn)范圍 3 7 示值誤差 indication error 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在溫度測(cè)量范圍內(nèi)所能達(dá)到的最大溫度誤差 3 8 溫度分辨力 temperature resolution 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)顯示在末尾上變化一個(gè)計(jì)數(shù)順序?qū)?yīng)的輸入變化溫度值 4 概述概述 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng) 是一種用于基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 實(shí)時(shí)溫度校 準(zhǔn)的傳感系統(tǒng) 通常由多通道測(cè)溫傳感器 測(cè)溫模塊 數(shù)據(jù)采集模塊 數(shù)據(jù)線 顯示 器 計(jì)算機(jī) 組成 圖 1 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)測(cè)溫結(jié)構(gòu)示意圖 5 計(jì)量特性計(jì)量特性 5 1 示值誤差 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)的的溫度示值誤差最大允許誤差 0 20 5 2 溫度測(cè)量范圍 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)的溫度測(cè)量范圍應(yīng)覆蓋 30 100 5 3 溫度分辨力 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)的溫度分辨力應(yīng)小于等于 0 01 5 4 功能性檢查 5 4 1 外觀 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)應(yīng)外觀良好 各通道溫度傳感器外形應(yīng)完好 無(wú) 彎折 無(wú)斷裂 潔凈無(wú)污染 溫度傳感器封裝良好 引線接插件必須接觸良好 溫度 傳感器所使用的保護(hù)管及引線應(yīng)能承受相應(yīng)的使用溫度 5 4 2 顯示功能 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)顯示功能的檢查應(yīng)在電源接通情況下進(jìn)行 測(cè)溫 系統(tǒng)各通道溫度值應(yīng)符合溫度分辨力要求 其顯示數(shù)以及圖像應(yīng)清晰 小數(shù)點(diǎn)和狀態(tài) 顯示應(yīng)正確 如有測(cè)溫系統(tǒng)超出測(cè)溫范圍或傳感器發(fā)生故障 軟件應(yīng)實(shí)時(shí)顯示其相應(yīng)的通道號(hào) 6 校準(zhǔn)條件校準(zhǔn)條件 6 1 環(huán)境條件 6 1 1 環(huán)境溫度 15 35 環(huán)境濕度 85 RH 6 1 2 電測(cè)儀器設(shè)備的環(huán)境條件應(yīng)滿足其相應(yīng)要求 6 1 3 校準(zhǔn)時(shí) 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)供電電壓應(yīng)在正常工作的范圍內(nèi) 共 恒溫設(shè)備和電測(cè)一起使用的電源條件應(yīng)滿足相應(yīng)的使用要求 6 2 測(cè)量用標(biāo)準(zhǔn)器及配套設(shè)備 測(cè)量用標(biāo)準(zhǔn)器及配套設(shè)備見(jiàn)表 3 表 3 測(cè)量用標(biāo)準(zhǔn)器及配套設(shè)備 序號(hào)設(shè)備名稱技術(shù)要求用途備注 1 二等標(biāo)準(zhǔn) 鉑電阻溫度計(jì) 測(cè)量范圍 189 3442 419 527 溫度標(biāo) 準(zhǔn)器 2電測(cè)設(shè)備 0 005 級(jí) 電測(cè)設(shè)備配接標(biāo)準(zhǔn)器后 最 小分辨力相當(dāng)于 0 001 配套電 測(cè)設(shè)備 也可使用 滿足要求 的其他測(cè) 量標(biāo)準(zhǔn) 溫度范圍溫度均勻性溫度波動(dòng)性 3 恒溫槽及 PCR 測(cè)溫 專用等溫塊及 配件 20 150 0 03 0 01 10 min 提供基 因擴(kuò)增 儀測(cè)溫 系統(tǒng)專 用均勻 溫場(chǎng) 使用標(biāo)準(zhǔn) 鉑電阻做 測(cè)量標(biāo)準(zhǔn) 時(shí) 工作 區(qū)域深度 不小于 300mm 無(wú)自重結(jié) 構(gòu)的基因 擴(kuò)增儀測(cè) 溫系統(tǒng)需 配套使用 壓條 4水三相點(diǎn)瓶U 0 002 k 2測(cè)量標(biāo) 準(zhǔn)鉑電 阻的水 三相點(diǎn) 值 7 校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法 7 1 校準(zhǔn)項(xiàng)目 a 溫度示值誤差 b 測(cè)溫范圍 c 溫度分辨力 7 2 校準(zhǔn)方法 7 2 1 校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備 a 開(kāi)啟電測(cè)設(shè)備進(jìn)行預(yù)熱 預(yù)熱時(shí)間至少 20min 或滿足其使用說(shuō)明書(shū)的相應(yīng)要求 b 將標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)放入預(yù)先凍制好的水三相點(diǎn)瓶中 測(cè)量其水三相點(diǎn)值 將 新測(cè)得的水三相點(diǎn)值輸入配套電測(cè)設(shè)備使用 c 按恒溫槽和使用說(shuō)明書(shū)的要求使其處于正常工作狀態(tài) 并保證工作區(qū)域的液面 處于規(guī)定的位置 d 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)主機(jī)開(kāi)機(jī)預(yù)熱 進(jìn)入測(cè)量狀態(tài) e 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)專用等溫塊 如圖 2 放置于恒溫槽內(nèi) 推薦在等溫 塊溫度孔內(nèi)注入 15 L 的導(dǎo)熱油以保障更好的溫度傳導(dǎo)性 需保證等溫塊在恒溫槽內(nèi) 所需的液面浸沒(méi)深度符合下表要求 局浸式等溫塊全浸式等溫塊 浸沒(méi)深度 180mm 180mm 圖 2 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)專用等溫塊示意圖 f 將基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)放入 PCR 測(cè)溫專用等溫塊 如圖 3 標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì) 插入 PCR 測(cè)溫專用等溫塊專用驗(yàn)證孔內(nèi) 保證標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻感溫部件與等溫塊底部保持 水平 將恒溫槽設(shè)定在所需校準(zhǔn)的溫度點(diǎn) 將等溫塊與恒溫槽一起溫度穩(wěn)定 1 小時(shí)后 監(jiān)控的標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)顯示基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)裝置溫度波動(dòng)度小于 0 01 10min 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)裝置方可進(jìn)行校準(zhǔn) 圖 3 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在等溫塊內(nèi)校準(zhǔn)溫度示值誤差原理圖 7 2 2 校準(zhǔn)過(guò)程 7 2 2 1 溫度示值誤差 a 校準(zhǔn)溫度示值誤差的溫度點(diǎn)一般選擇 30 50 60 70 90 95 用戶有要求時(shí) 可按用戶要求選擇校準(zhǔn)點(diǎn) b 將基因擴(kuò)增儀測(cè)溫模塊與測(cè)溫系統(tǒng)主機(jī)相連 使其處于正常工作狀態(tài) 將基因 擴(kuò)增儀模塊放入基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)專用等溫塊中 溫度傳感器配合放置于等溫 塊測(cè)試孔內(nèi) 保證測(cè)溫傳感器與等溫塊貼合緊密 并上蓋絕熱棉 無(wú)自重功能的基因 擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)須在測(cè)溫模塊上加壓封條 參見(jiàn)圖 3 同時(shí)將標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)放入 恒溫槽中 標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)插入 PCR 測(cè)溫專用等溫塊專用驗(yàn)證孔內(nèi) 浸沒(méi)恒溫介質(zhì) 深度不小于 180mm c 將恒溫槽設(shè)定在被校準(zhǔn)溫度點(diǎn)上 恒溫槽實(shí)際溫度最大偏差不超過(guò) 0 20 以二等標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)示值為準(zhǔn) 穩(wěn)定 30min 以上 分別讀取標(biāo)準(zhǔn)器和基因擴(kuò)增 儀測(cè)溫系統(tǒng)每個(gè)通道的溫度值 連續(xù) 4 次測(cè)量 并計(jì)算相應(yīng)的平均值 標(biāo)準(zhǔn)器 t 1 測(cè)試點(diǎn) a1 ta1 測(cè)試點(diǎn) a2 ta2 測(cè)試點(diǎn) an tan 標(biāo)準(zhǔn)器 t 2 測(cè)試點(diǎn) a1 ta1 測(cè)試點(diǎn) a2 ta2 測(cè)試點(diǎn) an tan 標(biāo)準(zhǔn)器 t 3 測(cè)試點(diǎn) a1 ta1 測(cè)試點(diǎn) a2 ta2 測(cè)試點(diǎn) an tan 標(biāo)準(zhǔn)器 t 4 測(cè)試點(diǎn) a1 ta1 測(cè)試點(diǎn) a2 ta2 測(cè)試點(diǎn) an tan 在測(cè)量過(guò)程中 恒溫槽溫度變化不超過(guò) 0 01 d 根據(jù)上述 c 的測(cè)量要求 依次測(cè)量在 30 50 60 70 90 95 狀態(tài)下 標(biāo)準(zhǔn)器和基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)各通道 a1 an 點(diǎn)的溫度示值 e 溫度校準(zhǔn)點(diǎn)也可以根據(jù)客戶的要求 按照上述方法進(jìn)行測(cè)量 7 2 2 2 溫度測(cè)量范圍 按照 7 2 2 1 中的 b 和 c 的要求 分別測(cè)量基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在溫度測(cè)量常規(guī)下 限 30 和常規(guī)上限 95 狀態(tài)下的示值誤差 溫度測(cè)量上限和溫度下限也可以根據(jù)生產(chǎn)廠家標(biāo)注的溫度測(cè)量范圍 按照上述方 法進(jìn)行測(cè)量 7 2 2 3 溫度分辨力 a 按照 7 2 2 1 中的 b 和 c 的要求 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)測(cè)溫模塊放入恒溫槽中 的基因擴(kuò)增儀校準(zhǔn)專用等溫塊溫度驗(yàn)證孔內(nèi) 將恒溫槽與等溫塊一起設(shè)定在 90 恒 溫 30min 以上 測(cè)量基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)顯示穩(wěn)定在 90 狀態(tài)下的示值 t1 記錄下此 時(shí)標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)示值 1 T b 根據(jù)被校準(zhǔn)基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)標(biāo)稱顯示的溫度分辨力 D1 緩慢調(diào)整恒溫槽 的設(shè)定溫度 直至被?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)顯示值穩(wěn)定在 t1 D1 記錄下此時(shí)標(biāo) 準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)示值 T2 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)放入恒溫槽中的基因擴(kuò)增儀校準(zhǔn)專用 等溫塊 恒溫 10min 以上 測(cè)量基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在 90 狀態(tài)下的示值 2 T c 按照步驟 a 和步驟 b 重復(fù)連續(xù) 4 次測(cè)量 并記錄數(shù)據(jù) 并計(jì)算 4 次測(cè)量和 1 T 的平均值 2 T d 溫度分辨力 率 應(yīng)按 計(jì)算 1 2TT 7 3 校準(zhǔn)結(jié)果的處理 7 3 1 溫度示值誤差按下式計(jì)算 tta at 式中 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)溫度示值誤差 at 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng) a1 an 通道 4 次溫度測(cè)量的平均值 a t 標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì) 4 次測(cè)量得到的溫度測(cè)量的平均值 t 依據(jù) JJG160 的規(guī)定 換算標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì) 4 次測(cè)量得到的溫度值 并計(jì)算其的 平均值 t a 依據(jù) JJG160 的規(guī)定 換算標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì) 4 次測(cè)量得到的溫度值 并計(jì)算 其的平均值 t 1234 4ttttt b 計(jì)算基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng) a1 an 通道 4 次溫度測(cè)量的平均值 1234 4 aaaaa ttttt c 計(jì)算基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)各通道 a1 an 的示值誤差 修約到 0 01 ata tt 7 3 2 溫度分辨力 率 按下式計(jì)算 2 T 1 T 其中 為溫度分辨力 按照標(biāo)稱溫度分辨力 D1 的有效位數(shù)修約 4 4 2 3 2 2 2 1 22 TTTTT 為等溫塊在恒溫槽內(nèi)穩(wěn)定在 90 00 時(shí) 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)各通道 2 T 單次測(cè)量的溫度示值的 4 次平均值 按照標(biāo)稱溫度分辨力 D1 2 T 的有效位數(shù)修約 4 4 1 3 1 2 1 1 11 TTTTT 為基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)各通道單次測(cè)量的溫度示值 T2 D1 時(shí)標(biāo)準(zhǔn) 1 T 鉑電阻溫度計(jì)示值的 4 次平均值 按照標(biāo)稱溫度分辨力 D1 的 1 T 有效位數(shù)修約 a 計(jì)算基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)各通道 a1 an 的示值誤差 按照標(biāo)稱溫度分辨力 D1 的有效位數(shù)修約 2 T 1 T b 計(jì)算基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)某通道 4 次測(cè)量結(jié)果的平均值 按照標(biāo)稱溫度分辨力 D1 的有效位數(shù)修約 4 4321 8 校準(zhǔn)結(jié)果的表達(dá) 校準(zhǔn)結(jié)果應(yīng)在校準(zhǔn)證書(shū)上反映 校準(zhǔn)證書(shū)應(yīng)至少包括以下信息 a 標(biāo)題 校準(zhǔn)證書(shū) b 實(shí)驗(yàn)室名稱和地址 c 進(jìn)行校準(zhǔn)的地點(diǎn) 如果與實(shí)驗(yàn)室的地址不同 d 證書(shū)的唯一性標(biāo)識(shí) 如編號(hào) 每頁(yè)及總頁(yè)數(shù)的標(biāo)識(shí) e 客戶的名稱和地址 f 被校對(duì)象的描述和明確標(biāo)識(shí) g 進(jìn)行校準(zhǔn)的日期 如果與校準(zhǔn)結(jié)果的有效性和應(yīng)用有關(guān)時(shí) 應(yīng)說(shuō)明被校對(duì)象 的接收日期 h 如果與校準(zhǔn)結(jié)果的有效性應(yīng)用有關(guān)時(shí) 應(yīng)對(duì)被校樣品的抽樣程序進(jìn)行說(shuō)明 i 校準(zhǔn)所依據(jù)的技術(shù)規(guī)范的標(biāo)識(shí) 包括名稱及代號(hào) j 本次校準(zhǔn)所用測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的溯源性及有效性說(shuō)明 k 校準(zhǔn)環(huán)境的描述 l 各校準(zhǔn)項(xiàng)目檢查結(jié)果的說(shuō)明 m 對(duì)校準(zhǔn)規(guī)范的偏離的說(shuō)明 n 校準(zhǔn)證書(shū)簽發(fā)人的簽名 職務(wù)或等效標(biāo)識(shí) o 校準(zhǔn)結(jié)果僅對(duì)被校對(duì)象有效的聲明 p 未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室書(shū)面批準(zhǔn) 不得部分復(fù)制證書(shū)的聲明 附錄 A 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)原始記錄 委托單位 校準(zhǔn)記錄編號(hào) 產(chǎn)品名稱 外觀狀況 制造單位 型號(hào) 規(guī)格 樣品編號(hào) 校準(zhǔn)地點(diǎn) 環(huán)境溫度 環(huán)境濕度 RH 主要計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)器具 名 稱型號(hào)規(guī)格 最大允許誤 差 準(zhǔn)確度等 級(jí) 不確定度 儀器編號(hào)證書(shū)編號(hào) 復(fù)檢 校 日期 1 溫度示值誤差 測(cè)量 項(xiàng)目 校準(zhǔn)溫度示值誤差 通道號(hào)305060709095 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 本次溫度示值誤差校準(zhǔn)擴(kuò)展不確定度 U k 2 2 測(cè)量范圍為 3 溫度分辨力 讀數(shù)順序 示值 1234平均值 溫度分辨力 基因擴(kuò)增儀 測(cè)溫系統(tǒng) 2 T 基因擴(kuò)增儀 測(cè)溫系統(tǒng) 1 T 2 T 1 T 附錄 B 證書(shū)內(nèi)頁(yè)格式 1 溫度測(cè)量范圍 2 溫度示值誤差 測(cè)量項(xiàng)目校準(zhǔn)溫度示值誤差 通道號(hào)305060709095 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 溫度分辨力 本次溫度示值誤差校準(zhǔn)擴(kuò)展不確定度 U k 2 3 溫度分辨力 備注 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)采樣周期或采樣頻率 附錄 C 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)示值誤差 測(cè)量結(jié)果不確定度評(píng)定實(shí)例 C 1 概述 C 1 1 測(cè)量環(huán)境 溫度 15 35 環(huán)境濕度 85 RH C 1 2 主要標(biāo)準(zhǔn)器 二等鉑電阻溫度計(jì) 1594 測(cè)溫電橋 C 1 3 配套設(shè)備 深井恒溫槽 配套基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)專用等溫塊 C 1 4 被校對(duì)象 PCR 溫度實(shí)時(shí)檢測(cè)系統(tǒng) 0 120 U 0 13 k 2 其技術(shù)指標(biāo)見(jiàn)表 1 表 C 1 基因擴(kuò)增儀 PCR 儀 測(cè)溫系統(tǒng)技術(shù)指標(biāo) 分辨率 0 01 測(cè)溫范圍 10 105 最大允許誤差 0 20 C 1 5 測(cè)量方法 在常規(guī)測(cè)量上限溫度 95 用比較法進(jìn)行測(cè)量 按恒溫槽和使用說(shuō)明 書(shū)的要求使其處于正常工作狀態(tài) 并保證工作區(qū)域的液面處于規(guī)定的位置 全浸式基 因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)專用等溫塊放置于恒溫槽內(nèi) 推薦在等溫塊溫度孔內(nèi)注入 15 L 的導(dǎo)熱油以保障更好的溫度傳導(dǎo)性 需保證等溫塊在恒溫槽內(nèi)所需的液面浸沒(méi)深度符 合要求 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)主機(jī)開(kāi)機(jī)預(yù)熱 進(jìn)入測(cè)量狀態(tài) 將基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng) 放入 PCR 測(cè)溫專用等溫塊 標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)插入 PCR 測(cè)溫專用等溫塊專用驗(yàn)證孔 內(nèi) 保證標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻感溫部件位置與等溫塊底部保持水平 將恒溫槽設(shè)定在所需校準(zhǔn) 的溫度點(diǎn) 將等溫塊與恒溫槽一起溫度穩(wěn)定 1 小時(shí)后 監(jiān)控的標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)顯示 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn)裝置溫度波動(dòng)度小于 0 01 10min 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)校準(zhǔn) 裝置方可進(jìn)行溫度校準(zhǔn) C 2 數(shù)學(xué)模型 1 t i t s t e t 式中 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在校準(zhǔn)溫度點(diǎn)的示值誤差值 t 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)在校準(zhǔn)溫度點(diǎn)的示值平均值 i t 標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)在校準(zhǔn)溫度點(diǎn)顯示的實(shí)際溫度值 s t 基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)專用等溫塊與標(biāo)準(zhǔn)恒溫槽實(shí)際溫度的偏差 e t C 3 靈敏系數(shù) 方差 C3 1 靈敏系數(shù) 1 1 1 1 c i t t 2 c s t t 3 c e t t C3 2 方差 2 3 2 2 2 1 2 esic tuctuctuctu 2222 esi tututu C 4 標(biāo)準(zhǔn)不確定度來(lái)源 C 4 1 輸入量導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度的評(píng)定 i t i tu 輸入量導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度由 4 個(gè)分量構(gòu)成 i t i tu C 4 1 1 由被?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 1i tu C 4 1 2 由恒溫槽和等溫塊提供溫場(chǎng)不均勻性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 2i tu C 4 1 3 由被校基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)分辨力引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度 3i tu C 4 1 4 由恒溫槽和等溫塊插入深度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 4i tu C 4 2 輸入量導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度的評(píng)定 s t s tu 輸入量導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度由 4 個(gè)分量構(gòu)成 s t s tu C 4 2 1 由標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 1s tu C 4 2 2 由電測(cè)設(shè)備誤差引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 2s tu C 4 2 3 由測(cè)量電流引起的自熱效應(yīng)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度 3s tu C 4 2 4 由標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻穩(wěn)定性的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 4s tu C 4 3 輸入量導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度的評(píng)定 e t e tu 輸入量導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)不確定度由 1 個(gè)分量構(gòu)成 e t e tu 即標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻示值和等溫塊測(cè)試孔內(nèi)部實(shí)際溫度的偏差 e tu C 5 標(biāo)準(zhǔn)不確定度的評(píng)定 C 5 1的評(píng)定 i tu C 5 1 1 的評(píng)定 1i tu 被?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度 采用 A 類不確定度評(píng) 1i tu 定方法 在重復(fù)性條件下 對(duì)被?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)的 1 號(hào)通道進(jìn)行 10 次測(cè)量 測(cè)到 10 次的示值 測(cè)量值分別為 94 85 94 85 94 86 94 86 94 85 94 85 94 85 94 85 94 85 94 85 在該通道測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)偏差為 0 003 110 10 1 i ii tt s 實(shí)際測(cè)量中以 2 次測(cè)量結(jié)果的平均值作為測(cè)量結(jié)果 則 0 002 1i tu2 s C 5 1 2的評(píng)定 2i tu 由恒溫槽和等溫塊提供溫場(chǎng)不均勻性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 采用 B 類標(biāo) 2i tu 準(zhǔn)不確定度評(píng)定方法 恒溫槽內(nèi)配套專用等溫塊提供的溫場(chǎng)均勻性在 95 時(shí)可以達(dá)到 則區(qū)間半寬 0 015 該分布服從均勻分布 k 故3 0 015 0 009 2i tu3 C 5 1 3 的評(píng)定 3i tu 由被校基因擴(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)分辨力引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度 采用 B 類標(biāo)準(zhǔn)不確 3i tu 定度評(píng)定方法 被?；驍U(kuò)增儀測(cè)溫系統(tǒng)分辨力為 0 01 則區(qū)間半寬 0 01 2 0 005 該分布服從 均勻分布 故 0 005 0 003 3i tu3 C 5 1 4的評(píng)定 4i tu 由等溫塊插入恒溫槽深度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 采用 B 類標(biāo)準(zhǔn)不確定度評(píng) 4i tu 定方法 由等溫塊插入恒溫槽深度引入的垂直溫度均勻性為 0 005 則區(qū)間半寬 0 005 2 0 0025 該分布服從均勻分布 故 0 0025 0 001 4i tu3 C 5 2 的評(píng)定 s tu C 5 2 1的評(píng)定 1s tu 由標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 采用 B 類標(biāo)準(zhǔn)不確定 2s tu 度評(píng)定方法 標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)在 95 時(shí) U 0 005 k 2 0 005 2 0 0025 2s tu C 5 2 2的評(píng)定 2s tu 由電測(cè)設(shè)備誤差引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 采用 B 類標(biāo)準(zhǔn)不確定度評(píng)定方法 3s tu 標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)每次使用前測(cè)得的 Rtp值 用同一臺(tái)測(cè)溫電橋測(cè)量該標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻 在 95 時(shí)的溫度值 3s tu 95 t s t S h dtdWWu 0 003 0038741229 0 38440 24 4732128 0001 0 C 5 2 3 的評(píng)定 3s tu 由測(cè)量電流引起的自熱效應(yīng)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度 采用 B 類標(biāo)準(zhǔn)不確定度評(píng) 4s tu 定方法 95 恒溫槽內(nèi) 由于在較高溫度流動(dòng)介質(zhì)的恒溫槽中 自熱影響可以忽略不計(jì) 則 0 000 4s tu C 5 2 4 的評(píng)定 4s tu 由標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻穩(wěn)定性的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量 采用 B 類標(biāo)準(zhǔn)不確定度評(píng)定方法 5s tu 由于標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)的 W95可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)檢定證書(shū)中獲得 引起溫度的 不確定度可以用周期穩(wěn)定性來(lái)評(píng)估 0 014 按均勻分布估計(jì) k 則3 0 008 5s tu C 5 3 的評(píng)定 e tu 全浸式等溫塊測(cè)試孔內(nèi)部與恒溫槽實(shí)際溫度的偏差