2007生物化學試題.doc

四川農(nóng)業(yè)大學碩士研究生課程考試試題課程名稱：高級生物化學(總分100)適用專業(yè)年級：2006級各專業(yè) 主考教師：楊婉身 陳惠 考試時間：2007.1.4考生姓名： 專業(yè) 學號 考生注意：第一、二題答案填寫在答題卡內(nèi)，其余答案寫在答題紙上1. 一、單選題（,每題分，共20分，在答題卡上將選擇的答案用鉛筆涂黑） 1下列各三肽混合物，用陽離子交換樹脂，pH梯度洗脫，哪一個最先被洗下來？A Met-Asp-Gln； B Glu-Asp-Val；C.Glu-Val - Asp； D Met-Glu-Asp2有一個環(huán)肽的組成是Ala，Asp，Gly，Leu2，Val，Met，下列方法中你首先選用什么方法作為你測定這一個肽的序列的第一步？A胰蛋白酶水解 B羧肽酶水解C溴化氰裂解 D氨肽酶水解3下面關于生物大分子沉降系數(shù)的敘述哪一個是錯誤的?A其大小與分子量有關 B其大小與分子形狀有關C與其光吸收值的大小有關 D與其擴散系數(shù)有關下列關于cAMP的論述哪一個是錯誤的?A是由腺苷酸環(huán)化酶催化ATP產(chǎn)生的 B是由鳥苷酸環(huán)化酶催化ATP產(chǎn)生的C可被磷酸二酯酶水解為5-AMP D是細胞第二信息物質5下列關于某一酶的幾個同工酶的敘述哪一項是正確的？A由不同的多聚復合體組成 B對同一底物具有不同的專一性 C對同一底物具有相同的Km值 D電泳遷移率往往相同 6 SDS-PAGE把混合的蛋白質分開，是根據(jù)各種蛋白質的什么性質？豬細小病毒A蛋白質分子帶電性的不同 B分子大小不同C分子極性的不同 D溶解度的不同7下列常見抑制劑中，除哪個外都是不可逆抑制劑：A有機磷化合物 B有機汞化合物C氰化物 D磺胺類藥物8當要把Cys、Ser、Gly和His四種氨基酸吸附于陽離子交換樹脂柱上時，應調(diào)到什么pH值？ ApH 4.0 BpH 6.0 CpH 8.0 DpH10.0 9在下列檢測蛋白質的方法中，哪一種取決于完整的肽鏈？A凱氏定氮法 B雙縮脲反應 C紫外吸收法 D茚三酮法（D）10鐮刀形紅細胞貧血病是異常血紅蛋白純合子基因的臨床表現(xiàn)。-鏈變異是由下列哪種突變造成的：A交換 B插入 C缺失 D點突變 11預測下面哪一種基因組在紫外線照射下最容易發(fā)生突變A雙鏈DNA病毒 B單鏈DNA病毒 C線粒體基因組 D細胞核基因組12酶的活性中心多為一凹穴，其作用是為酶促反應營造一個疏水環(huán)境，這種結構特征是蛋白質分子在哪個結構層次上形成的？A.二級結構 B三級結構 C結構域 D超二級結構 13在酶催化機理中，側鏈基團既是一個很強的親核基團，又是一個很有效的廣義酸堿基團的氨基酸是 AAsp BHis CGlu D Lys14DNA分子中拓撲連環(huán)數(shù)（L）、螺旋總數(shù)（T）、超螺旋數(shù)（W）三個參數(shù)之間的關系為 AL=T+W BL=T-W CT = L +W DW =T+ L 15線粒體蛋白的跨膜運送是一種 A類似細胞膜的吞噬作用 B蛋白質解折疊后的傳送 C膜內(nèi)外同類蛋白質交換傳送D通過對各個蛋白質專一的載體傳送16下面關于多聚酶鏈式反應（PCR）的敘述哪一個是不正確的？A是 Mullis 在1984年發(fā)明的一種體外擴增DNA的技術B根據(jù)DNA復制的基本原則，反應體系中需要加入RNA聚合酶以合成引物C在PCR反應體系中，需要特定引物、四種脫氧核苷酸三磷酸、鎂離子等D需要模板DNA，即待測的DNA片段17別構酶與不同濃度底物發(fā)生作用常呈S型曲線，這說明A別構酶結合一個底物后，與下一個底物的結合能力增強B別構酶催化幾個獨立反應并最后得到終產(chǎn)物C與單條鏈的酶相比，別構酶催化反應的速度較慢D產(chǎn)物的量在不斷增加18下列關于酶的磷酸化敘述錯誤的是A磷酸化和去磷酸化都是酶促反應B磷酸化或去磷酸化可伴有亞基的聚合和解聚C磷酸化只能使酶變?yōu)橛谢钚孕问?D磷酸化反應消耗ATP19 下列關于凝膠層析的敘述哪一項是正確的？A在凝膠層析中分子量小的分子最先流出 B凝膠層析可用于蛋白質分子量的測定 C凝膠層析主要基于蛋白質帶電荷多少而達到分離的目的 D凝膠層析不能用于分子量的測定 20下列關于變構酶的敘述哪一項是錯誤的？A含有多個亞基 B在變構酶激活的情況下，v-S曲線為S形 C變構酶的活性中心與調(diào)節(jié)中心往往位于同一亞基上 D調(diào)節(jié)物可以是底物或其它代謝物 二、是非題（每題分，共20分，在答題卡上將選擇的答案用鉛筆涂黑）1型DNA與型DNA可以互相轉化。2蛋白質分子中個別氨基酸的取代未必會引起蛋白質活性的改變。3因為絲氨酸，蘇氨酸和酪氨酸都是蛋白質磷酸化的位點，因此所有蛋白質激酶均能使蛋白質中這三種氨基酸殘基磷酸化。 4蛋白質亞基與結構域是同義詞。5兩個核酸樣品A和B，如果A的OD260/OD280大于B的OD260/OD280，那么A的純度大于B的純度。6由1g粗酶制劑經(jīng)純化后得到10mg電泳純的酶制劑，那么酶的比活較原來提高了100倍。7限制性內(nèi)切酶切割的DNA片段都具有粘性末端。8在浮液中，即使加ATP、Na+和K+，也測不出Na+，K+-ATP酶活力。9呼吸作用和光合作用均能導致線粒體或葉綠體基質值pH升高。10朊病毒是一類高度保守的糖蛋白和核酸的復合物。11反競爭性抑制劑存在時Vm減少，Km增大。12能改變DNA分子的拓撲連環(huán)數(shù)的酶叫做DNA拓撲異構酶。13與本質為蛋白質的酶不同的是，ribozyme的活性不需要有特定的三維結構。14IP3引起胞內(nèi)Ca2+的動員是其傳遞信號的方式。15DNA局部構象常是DNA結合蛋白之間結合的標志。16酶活力的測定實際上就是酶的定量測定。17蛋白質可逆磷酸化在介導信號物質生理效應中起到中心樞紐的作用。18生物膜中膽固醇的作用是降低膜的流動性。19產(chǎn)生限制性內(nèi)切酶的細菌通過甲基化來保護自身的DNA不被降解。20密碼子不重疊，但基因有可能重疊。三、名詞解釋（任選作6題，多選不計分，56=30）1noncoding RNA（非編碼RNA）是近年來發(fā)現(xiàn)的一類能夠轉錄但不能編碼蛋白質，具有特定功能的RNA分子，在細胞中執(zhí)行著許多功能，其中微RNA（miRNA）和小干擾RNA（siRNA）越來越受到人們的關注與其他RNA作用模式不同的是，他們均對編碼RNA有干擾作用。 2核糖體循環(huán) 指在細胞內(nèi)構成核糖體的大小兩種亞單位（沉淀系數(shù)為50S或60S的大亞單位和30S或40S的小亞單位）與蛋白活體合成開始會合（70S或80S粒子形成），合成后又分離的這一反復循環(huán)而言3信號肽假說 (1)分泌蛋白的結構基因包含有獨一無二的、由高度疏水氨基酸殘基組成的編碼N末端的序列；(2)新去鏈氨基末端信號序列的翻譯以及這段序列出現(xiàn)于核糖體外觸發(fā)核糖體結合到膜上，這是由信號肽序列的疏水性質以及核糖體上有與膜結合的特殊位點的結果；(3)膜結合的核糖體多肽鏈的延伸垂直進行，將新生鏈穿過膜釋放；(4)信號序列在分泌中或分泌后由信號肽酶從多肽鏈上水解除去。其實簡單的說，就是蛋白質分選時候N端的一段蛋白質具有信號作用，故稱信號肽4mulecular chaperone（分子伴侶） 一類可以介導蛋白質正確折疊與裝配，但其本身并不構成被介導蛋白質的組成部分的蛋白因子。5酶聯(lián)免疫分析 是將酶作為標記物質，使之和抗原（或抗體）結合形成酶與抗原（或抗體）復合物，然后再根據(jù)待測抗體（或抗原）與復合物專一且定量的結合關系，通過測定待測抗體（或抗原）結合的標記酶活力，從而計算出抗原或抗體的量。6蛋白質組學研究某一物種、個體、器官、組織、及細胞中的全部蛋白質，獲得整個個體系內(nèi)所有蛋白質組分的生物學和理化參數(shù)，揭示生命規(guī)律的一門科學。7親和標記法 根據(jù)酶與底物特異結合的性質，設計或合成一種含有反應基團的底物類似物作為活性部位基團的標記試劑。這種試劑象底物一樣進入活性部位，接近結合位點，并以其活潑的化學基團與活性部位的某一基團共價結合，而指示出酶活性部位的特征。8Kcat型抑制劑根據(jù)酶與底物特異結合的性質，設計或合成一種含有反應基團的底物類似物作為活性部位基團的標記試劑，這種試劑象底物一樣進入活性部位，接近結合位點，并以其活波的化學基團與活性部位的某一基團共價結合，而指示出酶活性部位的特征。四、問答題（任選作三題，多選不計分，103=30）1闡述生物信息學的介入對核酸、蛋白質結構與功能研究的影響。2何謂guanylate binding protein?請寫出其亞基組成、主要類型及各類型主要功能，并用箭頭圖示 guanylate binding protein偶聯(lián)的受體信號傳遞途徑。G 蛋白:一般是指一類與膜受體偶聯(lián)的異三聚體結合蛋白，其具有和GTP結合并催化GTP水解成GDP的能力，由、三個亞基組成，可充當細胞膜上受體和靶酶之間的信號傳遞體。Gs：能活化腺苷酸環(huán)化酶(ACase)Gi、Go、Gt系列：Gi：抑制ACase、電位門控Ca2+通道和磷脂酰肌醇專一的PLC，活化K+通道和Na+通道等；Go：抑制神經(jīng)元Ca2+通道 Gt：活化cGMP專一的PDEGQ系列：活化磷脂酰肌醇專一的PLCG12系列：功能不詳，可能和活化JNK、Na+/K+交換系統(tǒng)和活化立早基因 轉錄有關3闡述 DNA指紋法(fingerprintting)為什么可用于不同個體基因組的比較？RFLPDNA指紋法是指：由限制性內(nèi)切酶把很大的DNA分子降解成很多長短不同的較小片段，其數(shù)目和長度反映了限制性內(nèi)切酶的切點在DNA分子上的分布，它能作為某DNA或含有這種DNA生物所特有的“指紋”。因為不同個體的等為基因之間堿基代換、重排、插入、缺失等都會引起這種“指紋的多態(tài)性。4一種分子量為150,000d的酶，其活性部位含有一個半胱氨酸殘基。已知使5ml含有1.2mg/ml的酶溶液完全失活需要3.0*10-2mg的碘乙酰胺（ICH2CONH2，分子量185d）.問該酶是由幾個亞基組成的？ 1.25185/3.0*10-2=37000150000/3700045從一種植物中葉中得到了粗酶提取液，每mL含蛋白質32mg。在提取條件下，10uL提取液的催化反應速度為0.14mol/min，取50ml提取液用硫酸胺鹽析分離。將飽和度0.3-0.6的沉淀物溶于10 mL水中，此溶液的蛋白濃度為50mg/mL，從中取出10uL，測定其反應速度為0.65umol/min。計算：1）提取過程中酶的回收百分率；2）酶的提純倍數(shù)。（10分）總活力=單位活性*酶原液總體積比活力=單位活力（u/ml）/單位蛋白質濃度(mg/ml)=總活力（u）/總蛋白質（mg）1）粗提取液的總活力=0.14mol/min（10uL*10-3）50Ml=700IU鹽析后的總活力=0.65mol/min（10uL*10-3）10ML=650IU提取過程中酶的回收百分率=650/700*100%=92.86%2）粗提取液的比活力=0.14mol/min（10uL*10-3）32mg/Ml=7/16鹽析后的比活力=0.65mol/min（10uL*10-3）50mg/mL=1.3酶的提純倍數(shù)=1.37/16=2.976有一個七肽，經(jīng)分析它的氨基酸組成是：Lys,Gly,Arg,Phe,Ala,Tyr,Ser。此肽未經(jīng)胰凝乳蛋白酶處理時，與FDNP反應不產(chǎn)生DNP-氨基酸。經(jīng)胰凝乳蛋白酶(Phe,Tyr,Trp)處理后，此肽斷裂成兩個肽段，其氨基酸組成分別為Ala，Tyr，Ser和Gly，Phe，Lys，Arg。這兩個肽段分別與FDNP反應，可分別產(chǎn)生DNP-Ser和DNP-Lys。此肽與胰蛋白酶（Lys,Arg）反應，同樣能生成兩個肽段，它們的氨基酸組成分別是Arg,Gly和Phe,Tyr,Lys,Ser,Ala。試問此七肽的一級結構是怎樣的？給出分析過程。，并闡述理由。1）此肽未經(jīng)胰凝乳蛋白酶處理時，與FDNP反應不產(chǎn)生DNP-氨基酸：此肽為環(huán)肽2）胰凝乳蛋白酶處理后，此肽斷裂成兩個肽段，其氨基酸組成分別為Ala，Tyr，Ser和Gly，Phe，Lys，Arg：（Ala-Ser）- Tyr或 （Se