WS-T 231-2002 用于紙片擴散法抗生素敏感試驗的脫水Mueller-Hinton瓊脂的檢驗規(guī)程.pdf

C50中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T231一2002用于紙片擴散法抗生素敏感試驗的脫水Mueller-Hintoni瓊脂的檢驗規(guī)程ProtocolsfortheevaluationofdehydratedMueller-Hintonagarinthediskdiffusionprocedureforantimicrobiallsusceptibilitytesting2002-04-20發(fā)布2002-07-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布WS/T231-2002前本標(biāo)準(zhǔn)是在衛(wèi)生部頒發(fā)的全國臨床檢驗操作規(guī)程第二版)的基礎(chǔ)上，參考NCCLS標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合中國國情及衛(wèi)生系統(tǒng)的實際情況和要求而制定。本標(biāo)準(zhǔn)從2002年7月1日起實施。本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部醫(yī)政司提出。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A是標(biāo)準(zhǔn)的附錄，附錄B、附錄C都是提示的附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由北京大學(xué)人民醫(yī)院負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：張正、楊婧、趙曉濤本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部委托衛(wèi)生部臨床檢驗中心負(fù)責(zé)解釋。中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)用于紙片擴散法抗生素敏感試驗的脫水WS/T231-2002Mueller-Hinton瓊脂的檢驗規(guī)程ProtocolsfortheevaluationofdehydratedMueller-Hintonagarinthediskdiffusionprocedureforantimicrobialsusceptibilitytesting1范圍本規(guī)程規(guī)定了評價Mueller-Hinton瓊脂(M-H瓊脂)產(chǎn)品批號的要求，包括制造商評價(M-H瓊脂)產(chǎn)品批號的規(guī)則及評價新的參考培基的規(guī)則、本規(guī)程僅適用于評價紙片擴散法抗生素敏感試驗用M-H瓊脂的檢驗，而不能保證M-H瓊脂在其他試驗中的質(zhì)量，例如瓊脂稀釋或抗生素梯度試驗。材料2.1質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株用ATCC的凍干標(biāo)準(zhǔn)菌株制備質(zhì)控菌株，根據(jù)ATCC的規(guī)定復(fù)蘇菌種。所需的菌種有：金黃色葡萄球菌ATCC25923,大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853,類腸球菌ATCC33186(或ATCC29212），金黃色葡萄球菌ATCC43300和大腸埃希菌ATCC35218。2.2菌林TSA培基培養(yǎng)將質(zhì)控菌種的復(fù)蘇液接種于兩或三個含5%羊血的大豆-酪蛋白消化瓊脂(TSA)平板上，置35環(huán)境中孵育18h24h。2.3肉湯增菌孵育結(jié)束后檢查純度并收獲平板上的全部生長物。在含有15%甘油的大豆-酪蛋白消化肉湯（TSB)中懸浮。(15%TSB的制備：將脫水肉湯培養(yǎng)基30g溶于大約500ml.去離子水中，并添加150mL的甘油，定容至1L,混勾,12115min高壓滅菌)。2.4標(biāo)準(zhǔn)菌株復(fù)蘇接種平板的前一天，將所需的質(zhì)控菌種每種各融化一瓶，接種至含5%羊血的TSA平板上，在35環(huán)境中孵育18h24h。解育后，如果檢查純度滿意，這些菌林就可以用于接種待測M-H培養(yǎng)基，按WS/T1251999紙片法抗菌藥物敏感試驗標(biāo)準(zhǔn)操作。2.5質(zhì)控菌種的更新定期用ATCC的新鮮凍干標(biāo)準(zhǔn)菌株更新財存菌種。試驗方法及流程3.1嚴(yán)格按照我國已有標(biāo)準(zhǔn)(WS/T125)中規(guī)定的步驃和時間進行紙