標(biāo)準(zhǔn)解讀

《WS/T 121-1999 血清載脂蛋白A1及載脂蛋白B免疫透射比濁測(cè)定法》這一標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了使用免疫透射比濁法測(cè)定血清中載脂蛋白A1（Apo A1）和載脂蛋白B（Apo B）的具體方法。該標(biāo)準(zhǔn)旨在為臨床實(shí)驗(yàn)室提供一套標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程，以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)，首先明確了所需試劑及其質(zhì)量要求，包括但不限于抗體、緩沖液等，并對(duì)這些試劑的制備或選擇提出了具體指導(dǎo)。對(duì)于樣本處理部分，則描述了如何正確采集、儲(chǔ)存以及準(zhǔn)備待測(cè)血清樣品的過程，強(qiáng)調(diào)了避免溶血等因素干擾的重要性。

在測(cè)定步驟方面，《WS/T 121-1999》詳述了從儀器校準(zhǔn)到最終讀數(shù)記錄的一系列操作細(xì)節(jié)，包括設(shè)定適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件如溫度、時(shí)間等參數(shù)設(shè)置；同時(shí)，還給出了不同濃度范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法，以便于通過比較未知樣本與已知標(biāo)準(zhǔn)品之間的吸光度差異來定量分析目標(biāo)蛋白質(zhì)含量。


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  • 已被廢除、停止使用，并不再更新
  • 1999-12-09 頒布
  • 2000-05-01 實(shí)施
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C50中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T121-1999血清載脂蛋白A1及載脂蛋白B免疫透射比濁測(cè)定法Cuidelinesfortheimmuno-turbidimetricdeterminationofserumapolipoproteinAiandapolipoproteinB1999-12-09發(fā)布2000-05-01實(shí)施中華人民共和國衛(wèi)生部了發(fā)布中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)血清載脂蛋白A，及載脂蛋白B免疫透射比濁測(cè)定法WS/T121-1999中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版北京復(fù)興門外三里河北街16號(hào)郵政編碼:100045電活：68522112中國標(biāo)準(zhǔn)出版社秦皇島印刷廠印刷新華書店北京發(fā)行所發(fā)行各地新華書店經(jīng)售版權(quán)專有不得翻印開本88012301/16印張1/2字?jǐn)?shù)9干字2000年6月第一版2000年6月第一次印刷印數(shù)1-1000書號(hào)：1550662-12871標(biāo)目411-59WS/T121-1999本標(biāo)準(zhǔn)以衛(wèi)生部醫(yī)政司編寫的全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第二版(1997)中所列載脂蛋白A，和載脂蛋白B測(cè)定方法為基礎(chǔ)，并參考美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)批準(zhǔn)的“載脂蛋白免疫測(cè)定法”準(zhǔn)則(NCCLS文件1/L.A15-A,1997)而制定。本標(biāo)準(zhǔn)從2000年5月1日起實(shí)施。本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部醫(yī)政司提出。本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部北京老年醫(yī)學(xué)研究所負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：李健齋、王托、國漢邦、唐蔚青。本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部委托衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心負(fù)責(zé)解釋中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)血清載脂蛋白A及載脂蛋白BWS/T121-1999免疫透射比濁測(cè)定法Guidelinesfortheimmuno-turbidimetricdeterminationofserumapolipoproteinA.andapolipoproteinB范田本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定血清載脂蛋白A,和載脂蛋白B的免疫透射比濁測(cè)定法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于臨床與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室做載脂蛋白A，和載脂蛋白B免疫透射比濁測(cè)定，亦可作為生產(chǎn)廠商生產(chǎn)載脂蛋白A，和載脂蛋白B免疫透射比濁測(cè)定試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)。2測(cè)定原理本法血清中的載脂蛋白A或載脂蛋白B分別與試劑中的特異性羊（或免)抗人載脂蛋白A，或抗人載脂蛋白B抗體相結(jié)合，形成不溶性免疫復(fù)合物，使反應(yīng)液產(chǎn)生混濁，濁度高低反映血清樣品中載脂蛋白A，或載脂蛋白B含量，后者可由校準(zhǔn)血清所作劑量-響應(yīng)曲線算出、免免疫原及抗血清的制備3.1免疫原(抗原)的制備3.1.1從混合新鮮人血清中提取免疫原。3.1.2提取抗原用的人血清必須包括人群樣品中載脂蛋白A，、載脂蛋白B的各種抗原決定位點(diǎn)，包括各種表型的位點(diǎn)變化3.1.3載脂蛋白A，從超速離心制備的人血清高密度脂蛋白提取，用凝膠過濾、離子交換層析或高效液相色譜技術(shù)提純，所得純載脂蛋白A，不得含有高密度脂蛋白中的其他載脂蛋白，特別是載脂蛋白A，應(yīng)達(dá)到免疫純3.1.4載脂蛋白B抗原用超速離心法制備密度在1.0301.050g/ml.部分的低密度脂蛋白3.1.5載脂蛋白八，及載脂蛋白B抗原必須新鮮制備，在一20以下冰凍保存。在存中有潛在的設(shè)失抗原位點(diǎn)的危險(xiǎn)。避免反復(fù)凍融。?。禾峒兊妮d脂蛋白B分子不可逆地聚合.喪失抗原決定位點(diǎn).故只能用純低密度脂蛋白作免疫原.3.2抗血清的制備3.2.1用于免疫比濁測(cè)定的載脂蛋白A，、載脂蛋白B抗體為免抗人或羊抗人血清（多克隆抗體）3.2.2抗血清特異性：應(yīng)用雙相免疫電泳和免疫印跡法監(jiān)定抗血清，要與人血清主要蛋白質(zhì)及其他載脂蛋白無交叉反應(yīng)3.2.3抗血清效價(jià)：用瓊脂雙向擴(kuò)散法測(cè)定，中間孔加正常人血清（載脂蛋白A，或載脂蛋白B濃度1g/L左右)0.01mL，環(huán)繞四周的孔中分別加不同稀釋度(如1：2,1：4,18,1：16,1：32,1：64)的抗血清0.01ml。載脂蛋白A,抗血清效價(jià)應(yīng)不低于16,載脂蛋白B抗血清效價(jià)應(yīng)不低于1

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