[地方標(biāo)準(zhǔn)]-DB33T 217.7-2007 桑蠶種 第7部分：桑蠶種催青技術(shù)規(guī)程.doc

db33/t 217.7浙江省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 發(fā)布2007-04-05實(shí)施2007-03-05發(fā)布桑蠶種第7部分：桑蠶種催青技術(shù)規(guī)程silkworm eggspart 7: technical regulation of silkworm eggs for incubationdb33/t 217.7-2007代替db33/t 315-2001db33浙江省地方標(biāo)準(zhǔn)ics65.020.20b 611db33/t 217.7-2007前 言db33/ 217-2007桑蠶種分為七個(gè)部分：第部分：桑蠶種質(zhì)量；第部分：桑蠶種質(zhì)量檢驗(yàn)規(guī)程；第部分：桑蠶種母蛾檢疫規(guī)程；第部分：桑蠶種繁育技術(shù)規(guī)程；第部分：桑蠶種冷藏保護(hù)技術(shù)規(guī)程；第部分：桑蠶種浸酸技術(shù)規(guī)程；第部分：桑蠶種催青技術(shù)規(guī)程。本部分為db33/ 217-2007桑蠶種系列標(biāo)準(zhǔn)的第7部分。本部分替代db33/t 315-2001桑蠶一代雜交種催青技術(shù)規(guī)程，本部分與db33/t 315-2001相比主要變化如下：擴(kuò)大了適用范圍，本部分也適用于各級(jí)原種的催青；簡(jiǎn)化了術(shù)語和定義，刪去了與其他部分已有規(guī)定的定義，以及“催青積溫”，“補(bǔ)催青”的定義（見第3章）；調(diào)整了“蠶種準(zhǔn)備”內(nèi)容，僅保留了催青設(shè)施的內(nèi)容（見第4章）；刪除了“蠶種出庫(kù)”一章，并在“蠶種催青”一章中，刪除了“催青日期的確定”及“催青積溫”，增加了“催青室消毒”，同時(shí)將“蠶卵解剖及胚胎識(shí)別”調(diào)整為規(guī)范性附錄。（見第5章）；刪除了“補(bǔ)催青”一章，調(diào)整了延遲發(fā)種內(nèi)容，刪去了非催青期的抑制（見第7章）；刪除了孵化率調(diào)查方法及“資料整理與保存”一章。本部分的附錄a為規(guī)范性附錄。本部分由浙江省農(nóng)業(yè)廳提出并歸口。本部分起草單位：浙江省農(nóng)業(yè)廳經(jīng)濟(jì)作物管理局、浙江省蠶種管理站、桐鄉(xiāng)市蠶業(yè)管理站、海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站、湖州市蠶業(yè)技術(shù)推廣站。本部分主要起草人：周金錢、潘美良、朱虹、董瑞華、樓黎靜。本部分所代替的歷次版本發(fā)布情況為：db33/t 315-2001。db33/t 217.7-2007 桑蠶種第7部分：桑蠶種催青技術(shù)規(guī)程1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了桑蠶種催青的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于浙江省范圍內(nèi)桑蠶種的催青。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。db33/ 217.12007桑蠶種質(zhì)量db33/t 217.22007桑蠶種質(zhì)量檢驗(yàn)規(guī)程3 術(shù)語和定義db33/ 217.12007確立的以及下列術(shù)語和定義適用于本部分。3.1催青把解除滯育的蠶卵，保護(hù)在合理的溫度、濕度、光線、空氣等環(huán)境條件下，使胚胎順利地發(fā)育，直至孵化的過程。3.2起點(diǎn)胚胎蠶種可以開始催青的胚胎，一般指丙2胚胎。4 催青設(shè)施4.1 催青用房4.1.1 要求能保溫保濕，受外界氣溫變化影響小，便于通風(fēng)換氣和采光，宜于消毒。4.1.2 數(shù)量根據(jù)蠶種數(shù)量而定。一般1間8m4m3.5m左右的催青室，可容納8000盒10000盒一代雜交種。4.2 附屬用房 催青室應(yīng)有溫濕度控制室、蠶種解剖室，配備催青用具與物品貯藏室等附屬用房。5 蠶種催青5.1 催青準(zhǔn)備5.1.1 催青室消毒應(yīng)在催青開始前10d按蠶室蠶具常規(guī)消毒的方法，完成催青室及催青用具的消毒。并在催青開始前通過升溫開窗，充分排除室內(nèi)消毒殘藥氣味和異味。5.1.2 蠶種到達(dá)催青室后的處理5.1.2.1 核對(duì)蠶種從冷庫(kù)到達(dá)催青室后，按品種、生產(chǎn)單位、批次和制種期別，點(diǎn)清數(shù)量。同時(shí)取樣調(diào)查卵量、良卵率是否符合db33/ 217.12007的規(guī)定。5.1.2.2 裝架一代雜交種先將蠶種平放在催青框，搖平后放到催青架上。每一只催青框上都應(yīng)標(biāo)明蠶種生產(chǎn)單位、制種期、品種名及批次，或標(biāo)明代號(hào)。原種直接將蠶連紙掛上催青架。5.2 蠶卵解剖5.2.1 蠶種到達(dá)時(shí)的解剖所有進(jìn)催青室的蠶種，都應(yīng)以制種批為單位取蠶卵樣品進(jìn)行解剖，以根據(jù)胚胎發(fā)育程度，確定催青用溫。5.2.2 催青過程中的解剖一般從丙2胚胎到戊2胚胎，每日上午7時(shí)左右解剖一次；從戊3胚胎到己3胚胎，每日上午7時(shí)左右和下午3時(shí)左右各解剖1次。5.2.3 蠶卵解剖及胚胎識(shí)別蠶卵解剖及胚胎識(shí)別，按附錄a規(guī)定。5.3 催青標(biāo)準(zhǔn)5.3.1 常規(guī)催青標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)催青標(biāo)準(zhǔn)，見表1。表1 桑蠶種常規(guī)催青標(biāo)準(zhǔn)催青日期1234567891011胚胎代號(hào)丙2丁1、丁2戊1戊2戊3己1己2己3己4己5孵化目的溫度()2022.5242525.5目的濕度（%）7479767681778181868186光 線自 然每日感光18h全日遮光晨56時(shí)感光5.3.2 簡(jiǎn)化催青標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)化催青標(biāo)準(zhǔn)，見表2。表2 桑蠶種簡(jiǎn)化催青標(biāo)準(zhǔn)催青日期1234567891011胚胎代號(hào)丙2丁1 、丁2戊1戊2戊3己1己2己3己4己5孵化目的溫度()22.525.5目的濕度（%）7681光 線自然每日感光18h 全日遮光晨56時(shí)感光注：簡(jiǎn)化催青前段和后段溫差較大，應(yīng)在戊2 胚胎18h后， 以每小時(shí)升高0.5的方法逐步把溫度調(diào)到25.5。5.4 環(huán)境控制5.4.1 每日溫濕度管理根據(jù)當(dāng)日胚胎發(fā)育情況，將溫濕度調(diào)至目的溫濕度。一般在上午10時(shí)前調(diào)節(jié)好。注意感溫均勻。5.4.2 重點(diǎn)胚胎溫度調(diào)節(jié) 5.4.2.1 起點(diǎn)胚胎蠶種到達(dá)催青室后，胚胎基本到達(dá)丙2時(shí)，將溫度逐步升至20開始催青。5.4.2.2 戊3胚胎當(dāng)有95%以上的蠶種到達(dá)戊3胚胎時(shí)，將溫度升至催青目的溫度。5.4.3 空氣調(diào)節(jié)5.4.3.1 換氣時(shí)間催青換氣應(yīng)在室內(nèi)外溫差較小時(shí)進(jìn)行。一般每日上、下午換氣各一次，每次換氣時(shí)間為10min15min。換氣時(shí)間的長(zhǎng)短和次數(shù)，還應(yīng)根據(jù)室內(nèi)外溫差的大小而靈活掌握。5.4.3.2 換氣方法 室內(nèi)外溫差小時(shí)，可采用直接換氣法。室內(nèi)外溫差大時(shí)，可采用間接換氣法；或在換氣前先升高室內(nèi)溫度，然后再打開門窗換氣，并適當(dāng)縮短每次換氣時(shí)間，增加換氣次數(shù)。5.4.4 光線調(diào)節(jié)5.4.4.1 丙2己3胚胎 催青室內(nèi)光線應(yīng)保持均勻一致。一般從丙2胚胎到戊2胚胎，為自然光線；從戊3胚胎到己3胚胎，每日感光18h。5.4.4.2 己4胚胎己4胚胎是須進(jìn)行黑暗保護(hù)的開始階段。當(dāng)有30%蠶種到達(dá)己4胚胎時(shí)，應(yīng)保持室內(nèi)黑暗。己4胚胎也是確定發(fā)種時(shí)間的重要階段，一般己4后多絲量品種約經(jīng)36h，中絲量品種約經(jīng)24h，即可發(fā)種。同時(shí)，己4胚胎又是在有光條件下處理催青蠶種的最后階段，應(yīng)做好按訂購(gòu)蠶種的品種和數(shù)量發(fā)放的準(zhǔn)備。6 蠶種發(fā)放6.1 蠶種分裝 在蠶種遮光保護(hù)前，根據(jù)發(fā)種清單將催青蠶種按要求拆零分裝后分別放置，同時(shí)貼好標(biāo)記。6.2 發(fā)種時(shí)間一般掌握春蠶有98%以上蠶種到達(dá)己5胚胎，夏秋蠶有95%左右的蠶種到達(dá)己5胚胎時(shí)發(fā)種為宜。7 延遲發(fā)種催青開始后，如遇特殊情況，必須推遲發(fā)種時(shí)，可在催青初期，或己5胚胎，采取降低催青溫度，減慢胚胎發(fā)育速度的措施。7.1 催青初期抑制催青初期至丁2胚胎用溫度5，濕度75%保護(hù)，可抑制胚胎發(fā)育10d左右；或用12保護(hù)3d，可使發(fā)種延遲2d。在低溫保護(hù)前后，均需經(jīng)5h6h的中間溫度。7.2 己5胚胎低溫保護(hù)催青蠶種胚胎發(fā)育已超過丁2階段，則按原標(biāo)準(zhǔn)繼續(xù)催青，待全部胚胎到達(dá)己5階段并略有苗蟻時(shí)，用溫度為5，濕度不低于75%保護(hù)，時(shí)間盡可能短，一般應(yīng)不超過5d。在低溫保護(hù)前后，均需經(jīng)5h6h的中間溫度。8 調(diào)查孵化率每期催青結(jié)束，各催青批次均應(yīng)留樣調(diào)查實(shí)用孵化率。實(shí)用孵化率的調(diào)查方法，可參照db33/t 217.22007中5.2.3規(guī)定。附錄a （規(guī)范性附錄）胚胎解剖及識(shí)別a.1 胚胎解剖a.1.1 樣品卵采集以催青批為單位，每個(gè)批次隨機(jī)確定3個(gè)5個(gè)采樣點(diǎn)，每個(gè)點(diǎn)抽取10粒蠶卵，共采集30粒50粒。a.1.2 解剖方法a.1.2.1 解剖液濃度越年種、即時(shí)浸酸種用20%的koh或naoh溶液，冷藏浸酸種用30%的koh或naoh溶液。a.1.2.2 解剖液溫度解剖液煮沸，離開熱源停止發(fā)泡時(shí)的溫度，即是浸漬蠶卵的最適溫度。a.1.2.3 浸漬取一個(gè)批的樣品卵放入銅絲網(wǎng)兜，先在清水中濕潤(rùn)后再浸入解剖液中，當(dāng)卵面顏色變?yōu)槌喽股珪r(shí)取出。在浸漬時(shí)，應(yīng)注意保持解剖液的使用濃度。a.1.2.4 漂洗浸漬后的卵應(yīng)立即放入清水中漂洗，充分漂凈卵表殘存的解剖液。a.1.2.5 解剖將漂洗過的卵放在盛有清水的二重皿中，用吸管不斷沖擊，直至胚胎脫離卵殼。a.1.2.6 整理與鏡檢用吸管吸取胚胎，放在載玻片上。用細(xì)毛筆除去附著在胚胎表面的脂肪球后，將胚胎放在低倍解剖鏡（或體視顯微鏡）下鏡檢。每批鏡檢不少于20只完整胚胎。a.2 胚胎識(shí)別a.2.1 形態(tài)特征根據(jù)胚胎在發(fā)育過程中形態(tài)上的變化，一般將胚胎劃分為15個(gè)階段，并以甲、乙、丙、丁、戊、己作代號(hào)。從甲胚胎到乙2胚胎3個(gè)發(fā)育階段，主要為冷庫(kù)保護(hù)。蠶種催青是從冷庫(kù)領(lǐng)取丙2階段或尚有少量丙1階段胚胎的蠶種開始。催青期各階段胚胎名稱及主要特征，見表a.1。表 a.1 催青期各階段胚胎名稱及主要特征催青日順胚胎代號(hào)胚胎發(fā)育階段主 要 特 征催青前日丙1最長(zhǎng)期前體軀伸長(zhǎng)，頭褶、尾褶更見增大，頭褶凹陷明顯，18個(gè)體節(jié)可以識(shí)別。1丙2最長(zhǎng)期體軀細(xì)長(zhǎng)，頭褶發(fā)達(dá)，凹陷稍深，18個(gè)體節(jié)明顯，在第1、第2體節(jié)正中約見縱溝。2丁1肥厚期體軀長(zhǎng)大，體寬增闊，頭褶邊緣帶方，凹陷深刻，18個(gè)體節(jié)愈見明顯，縱溝全部清楚。丁2突起發(fā)生期體軀更見寬大，頭褶凹陷更深，第2第7體節(jié)開始發(fā)生突起。3戊1突起發(fā)達(dá)前期頭褶先端發(fā)生1對(duì)小突起，第2第7體節(jié)各發(fā)生1對(duì)突起。4戊2突起發(fā)達(dá)后期體軀稍短，體寬略寬，頭褶及第2第7體節(jié)各突起更加發(fā)達(dá)，第8體節(jié)以下開始發(fā)生突起。5戊3縮短期體軀顯著縮短增寬，前端4個(gè)體節(jié)開始縮成頭部，后端2個(gè)體節(jié)開始縮成尾部，腹部一部分突起消失。6己1反轉(zhuǎn)期體軀呈s形，尾端體節(jié)向腹面