唾液淀粉酶活性的測定

影響唾液淀粉酶活性的研究摘要：討論了不同條件下唾液淀粉酶的活性差異，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，影響唾液淀粉酶活性的因素很多，必須在適宜的條件下，才能發(fā)揮最佳催化作用；淀粉酶具有高度專一性，其活性受溫度、值、激活劑及抑制劑、酶濃度以及作用時(shí)間等多種因素的影響；每個(gè)人產(chǎn)生唾液淀粉酶的量不同，活性強(qiáng)弱也有差異。關(guān)鍵詞：淀粉酶；活性；溫度；抑制劑；激活劑；專一性2影響唾液淀粉酶的活性的因素（1） 實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察淀粉在水解過程中遇碘后溶液顏色的變化。觀察溫度、pH、激活劑與抑制劑對唾液淀粉酶活性的影響。（2） 實(shí)驗(yàn)原理人唾液中淀粉酶為-淀粉酶，在唾液腺細(xì)胞中合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉水解，經(jīng)過一系列被稱為糊精的中間產(chǎn)物，最后生成麥芽糖和葡萄糖。變化過程如下：淀粉紫色糊精紅色糊精麥芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、紅色糊精遇碘后分別呈藍(lán)色、紫色與紅色、麥芽糖和葡萄糖遇碘不變色。淀粉與糊精無還原性，或還原性很弱，對班氏試劑呈陰性反應(yīng)。麥芽糖與葡萄糖是還原性糖，與班氏試劑共熱后生成紅棕色氧化亞銅的沉淀。唾液淀粉酶的最適溫度為37-40C，最適pH為6.8.偏離此最適環(huán)境時(shí)，酶的活性減弱。低濃度的Cl-離子能增加淀粉酶的活性，是它的激活劑。Cu2+等金屬離子能降低該酶的活性，是它的抑制劑。（3） 器材及試劑1、 器材：試管、酒精燈、燒杯、恒溫水浴鍋、量筒、冰浴、玻璃棒、試管夾、白磁板、試管架、鐵三腳架、唾液淀粉酶2、 試劑：1淀粉溶液、碘液、班氏試劑、0.4HCl溶液、0.1的乳酸溶液、1NaCl溶液、1CuSO4溶液、0.1淀粉溶液（4） 操作步驟1、 淀粉酶活性的檢測：取一只試管，注入1淀粉溶液5mL與稀釋的唾液0.5-2mL?；靹蚝蟛迦?支玻璃棒，將試管連同玻璃棒置于37C水浴中。不是的用玻璃棒從試管中取出1滴溶液，滴加在白磁板上，隨即滴加1滴碘液，觀察溶液呈現(xiàn)的顏色。此實(shí)驗(yàn)延續(xù)至溶液僅表現(xiàn)碘被稀釋后的微黃色為止。記錄淀粉在水解過程中，遇碘后溶液顏色的變化。向上面的剩余溶液中加2mL班氏試劑，放入沸水中加熱10分鐘左右，觀察現(xiàn)象2、 pH對酶活性的影響：取4支試管，分別加入0.4鹽酸、0.1乳酸、蒸餾水與1碳酸鈉各2mL，再向以上四支試管中各加2mL1淀粉溶液及2mL淀粉酶試劑，在沸水浴中加熱，根據(jù)生成紅棕色沉淀的多少，說明淀粉水解的強(qiáng)弱。3、 溫度對酶活性的影響：取3支試管，各加3mL1淀粉溶液；另取3支試管，各加1mL淀粉酶液。將此6支試管分為3組，每組中盛淀粉溶液與淀粉酶液的試管各1支，三組試管分別置于0C、37C與70C的水浴中。5分鐘后，將各組中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中，繼續(xù)維持原溫度條件5min后，立即加2滴碘液，觀察溶液顏色的變化。根據(jù)觀察結(jié)果說明溫度對 酶活性的影響。4、 激活劑與抑制劑對酶活性的影響：取3支試管，按下表加入各種試劑?；靹蚝?，置于37C水浴中的保溫。從1號(hào)試管中用玻璃棒取出1滴溶液，置于白磁板上用碘液檢查淀粉的水解程度。待1號(hào)試管內(nèi)的溶液遇碘不再變色后，立即取出所有的試管，各加碘液2滴，觀察溶液顏色的變化，并解釋之。管號(hào)1231NaCl（mL）11CuSO4（mL）1蒸餾水（mL）1淀粉酶液（mL）1110.1淀粉溶液（mL）333（5） 、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論1.加入班氏試劑后2. PH值對酶活性影響：1號(hào)深紅色，2號(hào)為紅棕色，3號(hào)為磚紅色，4號(hào)為偏藍(lán)。因?yàn)镻H1時(shí)，超出了淀粉酶有效PH范圍，使得酶完全失活，淀粉沒有被分解。2號(hào)是因?yàn)镻H=5時(shí)，不是淀粉酶的最適范圍。3號(hào)是因?yàn)镻H7時(shí)，為淀粉酶分解的最適PH，淀粉被酶迅速分解生成麥芽糖和葡萄糖。而4號(hào)則是因?yàn)镻H9超出了淀粉酶的適宜PH，活性受到或者是部分失活，使淀粉分解較慢。 3.溫度對酶的影響：1號(hào)顯紫紅色，2號(hào)為淡黃色，3號(hào)為深藍(lán)色。當(dāng)溫度為0度時(shí)，蛋白質(zhì)分子的熱運(yùn)動(dòng)減慢，即酶分子的活性受到了抑制，使酶的活性降低了，淀粉分解減慢，生成紫紅色的糊精；2號(hào)處于37度，接近人體溫度，酶的活化性能較高，淀粉被分解成麥芽糖和葡萄糖就越快，所以是淡黃色，而當(dāng)溫度為70度時(shí)，由于酶是蛋白質(zhì)，遇到高溫時(shí)會(huì)失活，所以淀粉沒有被分解。4.激活劑和抑制劑對酶的影響：3號(hào)作為對照實(shí)驗(yàn)組，顯紅棕色，1號(hào)顯淺黃色，2號(hào)顯深藍(lán)色。因?yàn)樵?號(hào)溶液中，NaCl對酶的活性在增加作用，激活了淀粉酶，淀粉酶迅速把淀粉分解成麥芽糖和葡萄糖，滴加碘液時(shí)，溶液顯淺黃色，而對照組顯示紅棕色，表明淀粉被分解成了糊精，在1號(hào)中，溶液中的淀粉沒有被分解遇碘變藍(lán)，通過對比1和3號(hào)，2和3號(hào)，由顏色的變化，判斷淀粉水解程度為132,說明了NaCl具有激活作用，CuSO4具有抑制作用。結(jié)論： 酶催化特定化學(xué)反應(yīng)的蛋白質(zhì)、RNA或其復(fù)合體。是生物催化劑，能通過降低化學(xué)反應(yīng)的活化能加快反應(yīng)速率，但不改變反應(yīng)的平衡點(diǎn)。絕大多數(shù)酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。具有催化效率高、專一性強(qiáng)、作用條件溫和等特點(diǎn)。 PH可以影響酶蛋白的結(jié)構(gòu)、酶的活性部位的解離狀態(tài)、輔酶的解離以及底物分子的解離，從而影響酶與底物的結(jié)合以及對底物的催化效力。溫度升高是通過對酶結(jié)構(gòu)破壞，從而抵消了酶促反應(yīng)速率隨溫度升高而升高的趨勢。我們可以看出PH和溫度都通過影響了酶的結(jié)構(gòu)來影響酶促反應(yīng)速率。抑制劑和激活劑也均是通過影響酶的結(jié)構(gòu)來影響酶的活性。參考文獻(xiàn)：1周錦蘭,張開誠.實(shí)驗(yàn)化學(xué)M.武漢:華中科技大學(xué)出版社,2006:310-311.3許冰,原媛,趙文獻(xiàn).pH值對酶活性影響的實(shí)驗(yàn)觀察J.臨床合理用藥雜志,2010,3(10):35-35.4馮攸科.唾液淀粉酶活性的最適溫度質(zhì)疑J.中等醫(yī)學(xué)教育 1996(03). 5楊玉萍.幾種環(huán)境條件對唾液淀粉酶活性的影響期刊論文-新鄉(xiāng)學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版).6陳電容.生物化學(xué)與生化藥品M鄭州：鄭州大學(xué)出版社，2004：28 .7尚渤程(云南省昆明市第一中學(xué)6s0031) 黎一葦(云南大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)中心650091) 生物學(xué)教學(xué)2009年（第34卷）第12期.8石淵淵生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)M.開封：河南大學(xué)出