2025年蘇教新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年蘇教新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、下列有關(guān)生殖性克隆和治療性克隆的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.我國(guó)允許生殖性克隆動(dòng)物，但禁止生殖性克隆人B.生殖性克隆為了產(chǎn)生新個(gè)體，治療性克隆為了治療疾病C.雖然生殖性克隆人存在倫理問(wèn)題，但克隆技術(shù)已經(jīng)成熟D.二者都涉及體細(xì)胞核移植技術(shù)2、北極比目魚(yú)中有抗凍基因；其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)。如圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過(guò)程示意圖，有關(guān)敘述正確的是（）

A.過(guò)程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚(yú)基因組測(cè)序B.將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C.過(guò)程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D.應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)3、下列黏性末端屬于同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割而成的是（）

①②③④A.①②B.①③C.①④D.②③4、已知正常的β珠蛋白基因(以βA表示)經(jīng)MstI限制酶切割后可得到長(zhǎng)度為1．15kb和o．2kb的兩個(gè)片段(其中0．2kb的片段通常無(wú)法檢測(cè)到)，異常的β珠蛋白基因(以βS表示)由于突變恰好在MstI限制酶切割點(diǎn)上，因而失去了該酶切位點(diǎn)，經(jīng)MstI限制酶處理后只能形成一個(gè)1.35kb的DNA片段，如圖l；現(xiàn)用MstI限制酶對(duì)編號(hào)為1、2、3的三份樣品進(jìn)行處理，并進(jìn)行DNA電泳，結(jié)果如圖2，則1、2、3號(hào)樣品的基因型分別是(以βA、βS表示相關(guān)的基因)

A.βSβS、βAβS、βAβAB.βAβA、βAβS、βSβSC.βAβS、βSβS、βAβAD.βAβS、βAβA、βSβS5、下列與胚胎發(fā)育相關(guān)的敘述錯(cuò)誤的有（）

①原腸胚一共具有兩個(gè)胚層；將來(lái)會(huì)逐漸分化形成各種組織；器官等。

②隨著卵裂的進(jìn)行；胚胎中細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積和有機(jī)物總量也顯著增加。

③早期胚胎發(fā)育從原腸胚階段開(kāi)始出現(xiàn)細(xì)胞分化。

④原腸胚進(jìn)一步擴(kuò)大，會(huì)導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎伸展出來(lái)A.1項(xiàng)B.2項(xiàng)C.3項(xiàng)D.4項(xiàng)6、下圖是單克隆抗體制備過(guò)程示意圖；下列相關(guān)敘述，正確的是（）

A.1過(guò)程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱分別為抗原和T淋巴細(xì)胞B.3過(guò)程需要使用纖維素酶和聚乙二醇等物質(zhì)促進(jìn)細(xì)胞融合C.4過(guò)程是為了篩選既能產(chǎn)生單一抗體，又能無(wú)限增殖的細(xì)胞D.D物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或糖類，純度高、特異性強(qiáng)7、懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻。生產(chǎn)上常用灌流式培養(yǎng)避免這些現(xiàn)象出現(xiàn)。灌流式培養(yǎng)是在細(xì)胞培養(yǎng)管內(nèi)，一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基，一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.灌流式培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)貼壁生長(zhǎng)，但不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象B.灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時(shí)進(jìn)行C.過(guò)高的灌流速率會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用，造成培養(yǎng)基浪費(fèi)D.配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)考慮細(xì)胞生存的液體環(huán)境的滲透壓8、下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”和“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A.選用植物細(xì)胞提取DNA時(shí)需研磨破碎細(xì)胞B.鑒定DNA時(shí)，應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進(jìn)行沸水浴C.微量離心管、蒸餾水和移液器在使用前均需進(jìn)行高壓蒸氣滅菌處理D.DNA向著與其所帶電荷相同的電極移動(dòng)，遷移速率與凝膠濃度、DNA的大小和構(gòu)象等有關(guān)評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)9、在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中；果醋的制作往往在果酒制作基礎(chǔ)上進(jìn)行。下圖甲是醋酸發(fā)酵裝置，乙是培養(yǎng)液pH變化曲線圖，下列敘述不正確的是（）

A.發(fā)酵初期不通氣，溶液中沒(méi)有氣泡產(chǎn)生B.中期可以聞到酒香，說(shuō)明進(jìn)行了酒精發(fā)酵C.后期接種醋酸菌，適當(dāng)通氣并保持原有溫度D.圖乙中能正確表示pH變化的曲線是③10、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵過(guò)程中會(huì)生成大量的谷氨酸，經(jīng)加工后可制成味精。在其發(fā)酵過(guò)程中，發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4：1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3：1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選，也可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲得B.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，有利于獲得更多的優(yōu)質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)品C.由題干信息可推知發(fā)酵過(guò)程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的比例D.在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵無(wú)需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件11、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物精子和卵子的發(fā)生以及受精作用的敘述，不正確的是（）A.采集到的精子和卵子相遇即可發(fā)生受精作用B.排卵就是排出成熟卵子的過(guò)程C.卵子形成時(shí)的分裂過(guò)程均在卵巢內(nèi)完成D.卵子受精的標(biāo)志是在卵細(xì)胞膜和透明帶之間觀察到兩個(gè)極體12、豬瘟病毒（CSFV）蛋白質(zhì)外殼上的E2蛋白；對(duì)于病毒入侵細(xì)胞至關(guān)重要。研究人員利用E2蛋白來(lái)制備抗CSFV單克隆抗體的過(guò)程如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.注射E2蛋白后，從小鼠脾臟中獲得的B淋巴細(xì)胞均能產(chǎn)生E2蛋白抗體B.過(guò)程②可使用PEG融合法或滅活病毒誘導(dǎo)法，得到的③不一定是雜交瘤細(xì)胞C.細(xì)胞③經(jīng)一次篩選即可得到足量多的能產(chǎn)生E2蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞D.此過(guò)程生產(chǎn)的單克隆抗體既可用于CSFV的檢測(cè)，也可用于該種豬瘟的治療13、下列關(guān)于土壤中纖維素分解菌的分離與計(jì)數(shù)，敘述正確的是（）A.可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌B.培養(yǎng)基中應(yīng)含大量的葡萄糖或蔗糖提供生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)C.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌D.菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基14、下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞工程操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入瓊脂B.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交都能形成雜種個(gè)體C.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，有著自我更新能力及分化潛能D.動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植15、植物利用硝酸鹽需要硝酸還原酶，現(xiàn)有兩種煙草硝酸還原酶缺失突變體，為探究?jī)煞N突變體的突變是否在同一基因位點(diǎn)上，研究人員將兩種突變體進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交。下列分析正確的是A.誘導(dǎo)兩種突變體進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí)應(yīng)先用纖維素酶和果膠酶酶解得到原生質(zhì)體B.可用高Ca2+-高pH誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，細(xì)胞膜融合是細(xì)胞融合完成的標(biāo)志C.若雜種細(xì)胞能在硝酸鹽培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)，說(shuō)明兩種突變體的突變位點(diǎn)相同D.兩種突變體均不能在以硝酸鹽作為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)16、下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表述錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)環(huán)境中需要O2，不需要CO2B.細(xì)胞要經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織C.培養(yǎng)液通常含有糖類，氨基酸，無(wú)機(jī)鹽，維生素和動(dòng)物血清D.培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)到一定階段后分瓶后才能繼續(xù)增殖評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)17、生物數(shù)據(jù)庫(kù)的知識(shí)與正在迅猛發(fā)展的生物信息學(xué)有關(guān)。什么是生物信息學(xué)________？18、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________19、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：_____、_____、_____、_____等。20、基因表達(dá)載體的組成及其作用。

一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦_(dá)_____________21、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認(rèn)某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認(rèn)，如何通過(guò)蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請(qǐng)教或通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____22、基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)；蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸。有人對(duì)基因工程和蛋白質(zhì)工程的關(guān)系進(jìn)行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較。比較項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程原理中心法則中心法則區(qū)別過(guò)程獲取目的基因→構(gòu)建表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)氨基酸序列→合成DNA→表達(dá)出蛋白質(zhì)實(shí)質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需要的生物類型或生物產(chǎn)品（基因的異體表達(dá)）定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)結(jié)果生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進(jìn)行修改。_________評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共24分)23、如圖是從土壤中篩選纖維素分解菌的流程圖；回答下列問(wèn)題：

（1）土壤取樣時(shí)，一般選擇__________________豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是________________________。

（2）若測(cè)得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51，通過(guò)計(jì)算得知每毫升樣品中有5.1×107個(gè)纖維素分解菌，則該稀釋液的稀釋倍數(shù)為_(kāi)________。

（3）鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入CR染料，它可以與纖維素形成_________色復(fù)合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落（如圖），則降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌落__________。

24、氧化硫硫桿菌（T．t）通過(guò)將單質(zhì)硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進(jìn)行化能合成作用?？茖W(xué)家欲通過(guò)實(shí)驗(yàn)探究硫酸鋅對(duì)T．t產(chǎn)酸量的影響。

實(shí)驗(yàn)材料：氧化硫硫桿菌（T．t）菌液；蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液，配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基(含單質(zhì)硫)，恒溫?fù)u床等。

請(qǐng)分析并回答以下問(wèn)題：

（1）氧化硫硫桿菌的代謝類型為_(kāi)_____________，培養(yǎng)氧化硫硫桿菌（T．t）的液體培養(yǎng)基中的碳源是___________，該培養(yǎng)基從功能上屬于______________培養(yǎng)基。

（2）實(shí)驗(yàn)前，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)氧化硫硫桿菌（T．t）菌液已被雜菌污染，于是在配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基中加入____________，用______________法接種并進(jìn)行純化培養(yǎng)；得到了氧化硫硫桿菌菌落。

（3）實(shí)驗(yàn)步驟：

第一步：對(duì)配制好的培養(yǎng)基再次進(jìn)行______________滅菌處理；以防止雜菌污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

第二步：取三個(gè)錐形瓶（編號(hào)A、B、C）分別加入等量培養(yǎng)基后，再依次分別加入____________________________；

第三步：往A、B、C三組中接種______________后放入恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天。

第四步：每天測(cè)定并記錄各組的硫酸含量。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：如圖所示；據(jù)圖分析實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

實(shí)驗(yàn)結(jié)論：________________________________________________________。25、研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白質(zhì)）均有抑菌作用；兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，該過(guò)程得到的糊狀液體可通過(guò)___________除去其中的固體雜質(zhì)。

（2）篩選乳酸菌A時(shí)可選用平板劃線法或____________接種。對(duì)新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是_______________。實(shí)驗(yàn)前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行____________處理。

（3）培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長(zhǎng)提供______________。電泳法純化乳酸菌素時(shí)，若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子量越大，電泳速度___________。

（4）抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在長(zhǎng)滿致病菌的平板上，會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈?？赏ㄟ^(guò)測(cè)定透明圈的______________來(lái)比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果26、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病?？蒲腥藛T對(duì)此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對(duì)___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過(guò)多的黏多糖無(wú)法及時(shí)清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對(duì)。在上述這一類突變基因的翻譯過(guò)程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長(zhǎng)蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實(shí)驗(yàn)組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并采用___________技術(shù)檢測(cè)導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，檢測(cè)肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_(kāi)____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評(píng)卷人得分五、綜合題(共3題，共15分)27、腸道病毒EV71是RNA病毒；其表面蛋白為VP1～VP4，分別由V1～V4基因控制。為研究VP1～VP4的抗原性，從中篩選出EV71的疫苗抗原，研究人員利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)了上述4種蛋白質(zhì)。如圖是制備V1基因表達(dá)載體的過(guò)程示意圖，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

gus：控制合成的酶使β-葡萄糖苷酸水解為藍(lán)色物質(zhì)。

Kan：卡那霉素抗性基因。

（1）以RNA為模板，通過(guò)4組RT-PCR可分別獲取V1～V4基因（DNA）。RT-PCR所需要的酶有_____，該過(guò)程中子鏈延伸時(shí)所需的能量較為特殊，一般來(lái)自_____。

（2）為方便目的基因與質(zhì)粒的連接，通常將限制酶的切點(diǎn)設(shè)計(jì)在引物上。引物一般為單鏈DNA，新合成子鏈的延伸方向?yàn)?’→3’。PCR獲取V1基因時(shí)，10引物中限制酶切點(diǎn)的堿基序列應(yīng)設(shè)計(jì)為上游引物3’_____5’，下游引物3’_____5’。

（3）用相關(guān)限制酶處理質(zhì)粒和V1基因后，再與_____酶混合，加入大腸桿菌溫育。一段時(shí)間后，將菌液涂布在含有_____和_____的平板上，經(jīng)培養(yǎng)，在平板上長(zhǎng)出白色和藍(lán)色兩種菌落，其中_____菌落含有V1基因表達(dá)載體，判斷依據(jù)是_____。28、大豆凝集素（L）具有防御病害的功能；該蛋白存在于大豆種子的子葉中。研究人員嘗試?yán)玫鞍譒的特性構(gòu)建抗病毒馬鈴薯，進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)。

(1)從大豆抗病品種中獲取L基因，通過(guò)PCR的方法在基因兩側(cè)引入限制酶酶切位點(diǎn)，根據(jù)下圖中T-DNA的結(jié)構(gòu)，引入適宜的酶切位點(diǎn)是_______。通過(guò)______法將酶切；連接產(chǎn)物導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞；獲得多株轉(zhuǎn)基因抗病馬鈴薯。

(2)為研究轉(zhuǎn)基因馬鈴薯抗病毒植株的分子機(jī)理；研究人員利用Taqman探針和反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)，對(duì)轉(zhuǎn)基因馬鈴薯多種防衛(wèi)反應(yīng)基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)：

①提取抗病植株葉片細(xì)胞的_______進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄；獲取cDNA．

②設(shè)計(jì)各種防衛(wèi)基因的引物，利用下圖所示的原理進(jìn)行PCR。Taqman探針的結(jié)構(gòu)如圖所示，由于______，游離探針上的熒光素會(huì)與淬滅劑結(jié)合無(wú)法發(fā)出熒光。在PCR過(guò)程中，Taq酶體現(xiàn)出_______兩種酶活性，在相同擴(kuò)增時(shí)間中，總熒光值與________成正比。

③經(jīng)檢測(cè)，轉(zhuǎn)基因馬鈴薯水楊酸（SA）信號(hào)通路相關(guān)蛋白基因表達(dá)量顯著上升，SA是一種植物抗病有關(guān)的調(diào)節(jié)物質(zhì)。研究人員推測(cè)L儀器檢測(cè)通過(guò)激活SA途徑提升抗病能力，欲驗(yàn)證這一假設(shè)，需要進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)是________。29、重疊延伸PCR技術(shù)是采用具有互補(bǔ)末端的引物；使PCR產(chǎn)物形成了重疊鏈，從而在隨后的擴(kuò)增反應(yīng)中通過(guò)重疊鏈的延伸，將不同來(lái)源的擴(kuò)增片段重疊拼接起來(lái)的技術(shù)，可通過(guò)定點(diǎn)誘變?cè)隗w外改造DNA分子，并將改造后的目的基因?qū)胭|(zhì)粒構(gòu)建目的基因表達(dá)載體。

(1)上圖所示的重疊延伸PCR技術(shù)中，PCR1的引物是_________。PCR4可獲得大量定點(diǎn)誘變目的基因，此時(shí)的引物為_(kāi)_________。PCR3時(shí)模板DNA不能選擇DNA分子③的原因是___________。

(2)為使重疊延伸PCR技術(shù)改造后的目的基因（該基因序列不含圖中限制酶的識(shí)別序列）能與載體正確連接，PCR4時(shí)，應(yīng)在基因上、下游引物的_________端分別添加限制酶_________的酶切位點(diǎn)。

(3)將目的基因、質(zhì)粒及大腸桿菌混合，溫育一段時(shí)間后涂在含四環(huán)素的平板上培養(yǎng)，一段時(shí)間后平板上長(zhǎng)出菌落。這些菌落的菌體內(nèi)_________（填“一定不一定”）含有目的基因，理由是_________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、C【分析】【分析】

1；“治療性克隆”將使人胚胎干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎；體外培養(yǎng)到一定時(shí)期分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞定向分化為所需的特定類型細(xì)胞（如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞），用于治療。

2；生殖性克隆就是以產(chǎn)生新個(gè)體為目的克?。患从蒙臣夹g(shù)制造完整的克隆人。目的是產(chǎn)生一個(gè)獨(dú)立生存的個(gè)體。于此相對(duì)的是研究性克隆或醫(yī)學(xué)性克隆，指的是產(chǎn)生研究所用的克隆細(xì)胞，不產(chǎn)生可獨(dú)立生存的個(gè)體。

【詳解】

A；我國(guó)允許生殖性克隆動(dòng)物；但禁止生殖性克隆人，A正確；

B；生殖性克隆就是以產(chǎn)生新個(gè)體為目的克??；即用生殖技術(shù)制造完整的克隆人，治療性克隆為了治療疾病，B正確；

C；克隆技術(shù)尚未成熟；且生殖性克隆人存在倫理問(wèn)題，C錯(cuò)誤；

D；生殖性克隆和治療性克隆都涉及體細(xì)胞核移植技術(shù)；D正確。

故選C。2、B【分析】【分析】

分析題圖：①表示反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過(guò)程；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；之后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將目的基因?qū)敕呀M織塊；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，將導(dǎo)入目的基因的番茄組織細(xì)胞培養(yǎng)成抗凍番茄植株。

【詳解】

A；圖中①是采用反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過(guò)程；這樣獲取的目的基因不含內(nèi)含子、啟動(dòng)子等結(jié)構(gòu)，因此與比目魚(yú)染色體中的抗凍基因序列不完全相同，不能用于比目魚(yú)基因組測(cè)序，A錯(cuò)誤；

B；將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)相連形成的能表達(dá)的新基因不再是抗凍基因；所以得不到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白，B正確；

C；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；基因表達(dá)載體通常由啟動(dòng)子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法只能將質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，不能對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行篩選，C錯(cuò)誤；

D；利用DNA探針技術(shù)檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入到受體細(xì)胞；利用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否表達(dá)出來(lái)，D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】3、B【分析】【分析】

限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。

【詳解】

限制酶識(shí)別的核苷酸序列往往具有回文結(jié)構(gòu)；切割后形成的黏性末端能夠互補(bǔ)配對(duì)，圖中①③能夠互補(bǔ)，其他的不能互補(bǔ)，所以①③屬于同一種限制酶切割而成的。B正確，ACD錯(cuò)誤。

故選B。4、A【分析】【分析】

電泳是指帶點(diǎn)粒子在電場(chǎng)中向與自身帶相反電荷的電極移動(dòng)的現(xiàn)象。不同的帶點(diǎn)顆粒在同一電廠中涌動(dòng)的速度不同；從而可將不同的DNA片段分開(kāi)。

【詳解】

BD、因?yàn)?.2kb的片段通常無(wú)法檢測(cè)到，所以βA只有一條帶，由于其分子量相對(duì)小，跑得快，電泳帶在下面，可知3號(hào)樣品為βAβA；BD錯(cuò)誤；

C、同理，1號(hào)樣品為βSβS；C錯(cuò)誤；

A、2號(hào)樣品為兩條帶，說(shuō)明既有βA，又有βS；A正確。

故選A。5、D【分析】【分析】

胚胎發(fā)育過(guò)程：（1）卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加。（2）桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎[之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞]。（3）囊胚：細(xì)胞開(kāi)始分化，其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔[注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來(lái)，這一過(guò)程叫孵化]。（4）原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層，下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔[細(xì)胞分化在胚胎期達(dá)到最大限度]。

【詳解】

①原腸胚發(fā)育分化形成內(nèi)；中、外三個(gè)胚層；并逐漸分化為各種組織、器官，①錯(cuò)誤；

②隨著卵裂的進(jìn)行；卵裂球細(xì)胞的體積變小，卵裂球的體積基本不變或略有減小，有機(jī)物總量減少，②錯(cuò)誤；

③早期胚胎發(fā)育從囊胚階段開(kāi)始出現(xiàn)細(xì)胞分化；且不可逆，③錯(cuò)誤；

④囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大；會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎從其中伸展出來(lái)，④錯(cuò)誤。

故選D。6、C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；1過(guò)程注射的物質(zhì)是抗原；用于激發(fā)機(jī)體的特異性免疫過(guò)程，A細(xì)胞是經(jīng)免疫后產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；3過(guò)程是促進(jìn)細(xì)胞融合；該過(guò)程中可以使用化學(xué)誘導(dǎo)試劑聚乙二醇，但不需要纖維素酶，B錯(cuò)誤；

C；4過(guò)程是在多孔培養(yǎng)板上進(jìn)行篩選；目的是為了篩選既能產(chǎn)生單一抗體，又能無(wú)限增殖的細(xì)胞，C正確；

D；D物質(zhì)是單克隆抗體；其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，具有純度高、特異性強(qiáng)，可大量制備等優(yōu)點(diǎn)，D錯(cuò)誤。

故選C。7、A【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：（1）概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。（2）原理：細(xì)胞增殖。（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

【詳解】

A；懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞不出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象；A錯(cuò)誤；

B；懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻；而灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時(shí)進(jìn)行，B正確；

C；過(guò)高的灌流速率；培養(yǎng)的細(xì)胞沒(méi)有及時(shí)利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用，造成培養(yǎng)基浪費(fèi)，C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞外液的滲透壓是相對(duì)穩(wěn)定且適宜的；配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)考慮細(xì)胞生存的液體環(huán)境的滲透壓，D正確。

故選A。8、A【分析】【分析】

DNA對(duì)酶；高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)；但是對(duì)DNA沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒(méi)有影響。

【詳解】

A；利用植物組織提取DNA時(shí)；須先破碎細(xì)胞，破碎細(xì)胞時(shí)需添加食鹽和洗滌劑進(jìn)行研磨來(lái)瓦解細(xì)胞膜，A正確；

B；鑒定DNA時(shí)；將絲狀物溶于2mol/L的NaCl溶液后加入二苯胺試劑，在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，B錯(cuò)誤；

C；PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水在使用前都必須進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理；移液器不需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理，C錯(cuò)誤；

D；一定pH下DNA分子可帶上正或負(fù)電荷；在電場(chǎng)作用下，向著與所帶電荷相反的電極移動(dòng)，遷移速率與凝膠濃度、DNA的大小和構(gòu)象等有關(guān)，D錯(cuò)誤。

故選A。二、多選題(共8題，共16分)9、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

果酒制作的原理：

（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O；

（2）在無(wú)氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；若發(fā)酵初期不通入氣體；由于錐形瓶中含有少量空氣，溶液中酵母菌也可通過(guò)有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳，即使沒(méi)有空氣，酵母菌也能通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳，因此有氣泡產(chǎn)生，A錯(cuò)誤；

B；中期可以聞到酒香；說(shuō)明有酒精產(chǎn)生，即進(jìn)行了酒精發(fā)酵，B正確；

C；由于醋酸菌是嗜氧菌；也是嗜溫菌，因此后期接種醋酸菌，需通氣并適當(dāng)升高溫度，C錯(cuò)誤；

D；醋酸發(fā)酵過(guò)程中；發(fā)酵液的pH會(huì)進(jìn)一步降低，因此圖乙中能正確表示pH變化的曲線是②，D錯(cuò)誤。

故選ACD。10、A:C【分析】【分析】

微生物發(fā)酵指的是利用微生物；在適宜的條件下，將原料經(jīng)過(guò)特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過(guò)程。谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，為異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

A；用于發(fā)酵的谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選；也可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；

B；發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過(guò)程；B錯(cuò)誤；

C；由題意可知“在其發(fā)酵過(guò)程中；發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4∶1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3∶1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，說(shuō)明在發(fā)酵過(guò)程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的比例以保證先獲得大量谷氨酸棒狀桿菌，在獲得大量發(fā)酵產(chǎn)物的目的，C正確；

D；谷氨酸棒狀桿菌為需氧菌；其發(fā)酵過(guò)程需要適宜的溫度和pH，所以在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件，D錯(cuò)誤。

故選AC。11、A:B:C【分析】【分析】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段：準(zhǔn)備階段1-精子獲能；剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動(dòng)物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力；準(zhǔn)備階段2-卵子的準(zhǔn)備，動(dòng)物排出的可能是初級(jí)卵母細(xì)胞也可能是次級(jí)卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具備與精子受精的能力。卵細(xì)胞形成過(guò)程，其中減數(shù)第一次分裂是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，場(chǎng)所在卵巢；減數(shù)第二次分裂是在受精過(guò)程中完成的，場(chǎng)所在輸卵管中。受精作用完成的標(biāo)志：在卵黃膜和透明帶之間的間隙可以觀察到兩個(gè)極體（一個(gè)是第一極體，還有一個(gè)是第二極體）

【詳解】

A；采集到的精子必需經(jīng)過(guò)獲能處理；卵細(xì)胞必需發(fā)育到減數(shù)第二次分裂的中期才具有受精能力，A錯(cuò)誤；

B；排卵就是卵細(xì)胞從卵泡中排出；可能是初級(jí)卵母細(xì)胞或次級(jí)卵母細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；卵細(xì)胞形成時(shí)的分裂過(guò)程在卵巢和輸卵管中完成；C錯(cuò)誤；

D；在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個(gè)極體；說(shuō)明卵細(xì)胞已經(jīng)完成了受精，這是判斷卵細(xì)胞是否受精的重要標(biāo)志，D正確。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】12、A:C【分析】【分析】

將漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合；經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)或體外培養(yǎng)，獲得大量的特異性抗體的技術(shù)，稱為單克隆抗體的制備。

【詳解】

A；注射E2蛋白后；從小鼠脾臟中獲得的B淋巴細(xì)胞有多種，不一定能產(chǎn)生E2蛋白抗體，A錯(cuò)誤；

B；過(guò)程②可使用PEG融合法或滅活病毒誘導(dǎo)法；得到的③可能是雜交瘤細(xì)胞，或者是融合的B細(xì)胞或是融合的骨髓瘤細(xì)胞，B正確；

C；細(xì)胞③要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；經(jīng)過(guò)多次篩選，才可獲得足量多的能產(chǎn)生E2蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D；豬瘟病毒（CSFV）的檢測(cè)采用抗原-抗體雜交技術(shù)；抗CSFV的單克隆抗體能與豬瘟病毒（CSFV）蛋白質(zhì)外殼上的E2蛋白結(jié)合，故此過(guò)程生產(chǎn)的單克隆抗體可用于CSFV的檢測(cè)，D正確。

故選AC。13、A:D【分析】【分析】

纖維素分解菌能合成和分泌纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可以篩選出纖維素分解菌。

【詳解】

A；木材、秸稈中富含纖維素；故可以從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌，A正確；

B；應(yīng)該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌；只有纖維素分解菌能夠存活，B錯(cuò)誤；

C；接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理；接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理，培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法處理，C錯(cuò)誤；

D；菌落只能在固體培養(yǎng)基中形成；菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基，D正確。

故選AD。14、A:B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞融合、核移植技術(shù)等技術(shù)；其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分。干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能。

【詳解】

A；在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)；培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分，A錯(cuò)誤；

B；動(dòng)物細(xì)胞融合不能形成雜種個(gè)體；形成的是雜種細(xì)胞，而植物體細(xì)胞雜交能形成雜種個(gè)體，兩者都能形成雜種細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等；存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能，C正確；

D；動(dòng)物體細(xì)胞分化程度較高；全能性較低，因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，D正確。

故選AB。15、A:D【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交過(guò)程：1；酶解法去壁獲取原生質(zhì)體；2、人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；3、再生出新細(xì)胞壁；標(biāo)志著原生質(zhì)體融合完成；4、經(jīng)脫分化和再分化過(guò)程，通過(guò)組織培養(yǎng)把雜種細(xì)胞培育成雜種植株。

【詳解】

A；植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠；因此先用纖維素酶和果膠酶酶解得到原生質(zhì)體，A正確；

B；植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是再生形成新的細(xì)胞壁；B錯(cuò)誤；

C；若雜種細(xì)胞能在硝酸鹽培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)；說(shuō)明兩種突變體的植物體細(xì)胞雜交后代能夠合成硝酸還原酶，即兩種突變體的突變基因位點(diǎn)不同，雜交后未突變的基因重新組合在一起，控制了硝酸還原酶的合成，C錯(cuò)誤；

D；據(jù)題可知；植物利用硝酸鹽需要硝酸還原酶，兩種突變體煙草硝酸還原酶都缺失，因此均不能在以硝酸鹽作為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，D正確。

故選AD。16、A:B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。②營(yíng)養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度：適宜溫度。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，培養(yǎng)環(huán)境中需要O2，也需要CO2（用來(lái)維持培養(yǎng)液的pH）；A錯(cuò)誤；

B；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要脫分化；植物細(xì)胞要經(jīng)過(guò)脫分化才形成愈傷組織，B錯(cuò)誤；

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中常用含糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清的液體培養(yǎng)基；C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象而停止分裂增殖；故培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)到一定階段后要用胰蛋白酶處理，分瓶后才能繼續(xù)增殖，D正確。

故選AB。三、填空題(共6題，共12分)17、略

【分析】【詳解】

生物信息學(xué)是研究生物信息的采集、處理、存儲(chǔ)、傳播,分析和解釋等各方面的學(xué)科，也是隨著生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的迅猛發(fā)展，生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)相結(jié)合形成的一門(mén)新學(xué)科，生物信息學(xué)主要是核酸和蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)處理和分析。【解析】生物信息學(xué)是研究生物信息的采集、處理、存儲(chǔ)、傳播,分析和解釋等各方面的學(xué)科，也是隨著生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的迅猛發(fā)展，生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)相結(jié)合形成的一門(mén)新學(xué)科18、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒?huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。19、略

【分析】略【解析】營(yíng)養(yǎng)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓氣體環(huán)境20、略

【分析】略【解析】目的基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子終止子啟動(dòng)子上游RNA聚合酶終止子下游轉(zhuǎn)錄標(biāo)記21、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過(guò)蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過(guò)程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥22、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，其結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)?！窘馕觥康鞍踪|(zhì)工程的結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共24分)23、略

【分析】【分析】

1；選擇培養(yǎng)基是指通過(guò)培養(yǎng)混合的微生物；僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。

2；分解纖維素的微生物的分離的實(shí)驗(yàn)原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖能被微生物利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

3；統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：

（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：

①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板；在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；

②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；

③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。

（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）：

①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)；培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。

②操作：

a；設(shè)置重復(fù)組；增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。

b；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確；一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M；其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】

（1）土壤取樣時(shí)；一般選擇纖維素豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的數(shù)量。

（2）若測(cè)得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51，通過(guò)計(jì)算得知每毫升樣品中有5.1×107個(gè)纖維素分解菌，則由每mL樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M可得，該稀釋液的稀釋倍數(shù)＝5.1×107÷51×0.1=105。

（3）鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入CR染料；它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落，透明圈越大說(shuō)明降解纖維素能力越強(qiáng)，所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌落1。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合流程圖，考查微生物的分離和培養(yǎng)，解題關(guān)鍵是識(shí)記土壤微生物分離的原理及方法；識(shí)記培養(yǎng)基的種類及作用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥坷w維素增加纖維素分解菌的數(shù)量105紅①24、略

【分析】【分析】

微生物接種常用的兩種方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）

結(jié)合題意“氧化硫硫桿菌通過(guò)將單質(zhì)硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進(jìn)行化能合成作用”可知，氧化硫硫桿菌的代謝類型為自養(yǎng)需氧型；由于該菌可以進(jìn)行化能合成作用，可以利用液體培養(yǎng)基中的無(wú)機(jī)碳或CO2；可以其作為液體培養(yǎng)基中的碳源；該培養(yǎng)基中含有單質(zhì)硫，對(duì)生長(zhǎng)的菌類具有選擇作用，在功能上屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）

培養(yǎng)微生物應(yīng)用固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；故應(yīng)在配置好的液體培養(yǎng)基中加入瓊脂；對(duì)微生物進(jìn)行純化培養(yǎng)的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）

第一步；對(duì)培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌；

第二步；由于本實(shí)驗(yàn)的目的是通過(guò)實(shí)驗(yàn)探究硫酸鋅對(duì)T．t產(chǎn)酸量的影響，則實(shí)驗(yàn)的自變量為硫酸鋅的有無(wú)及其含量，實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循對(duì)照與單一變量原則，故本步驟應(yīng)在三個(gè)錐形瓶中分別加入等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液；

第三步；遵循無(wú)關(guān)變量一致原則，故往A；B、C三組中接種等量的氧化硫硫桿菌（T．t）后放入恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天。

（4）

據(jù)圖分析；與對(duì)照（蒸餾水組）相比，低濃度硫酸鋅對(duì)氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無(wú)明顯作用，高濃度硫酸鋅對(duì)氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查培養(yǎng)基的制作和微生物的接種方法，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)室的微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)的理解與掌握。熟記相關(guān)知識(shí)并能結(jié)合術(shù)語(yǔ)分析作答是解題關(guān)鍵?！窘馕觥浚?）自養(yǎng)需氧型無(wú)機(jī)碳或CO2選擇培養(yǎng)基。

（2）瓊脂平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）高壓蒸汽等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液等量的氧化硫硫桿菌（T．t）

（4）低濃度硫酸鋅對(duì)氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無(wú)明顯作用，高濃度硫酸鋅對(duì)氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用25、略

【分析】【詳解】

(1)植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等。具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來(lái)決定。柚皮易焦糊，宜采用壓榨法提取柚皮精油。壓榨過(guò)程中得到的糊狀液體需用過(guò)濾法除去其中固定雜質(zhì)。

(2)篩選、純化培養(yǎng)某一特定微生物時(shí)，常用平板劃線法或稀釋涂布平板法。為防止雜菌的污染，需對(duì)器具培養(yǎng)基等進(jìn)行消毒滅菌處理，培養(yǎng)基宜采用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行高溫滅菌處理，而超凈工作臺(tái)常使用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒處理。

(3)微生物培養(yǎng)過(guò)程中為微生物的生長(zhǎng)提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮豐富的物質(zhì)。電泳法純化特定生物成分，是利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，這些不同使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中不同分子的分離。當(dāng)待分離分子所帶電荷相同時(shí)，分子量越大，電泳速度越慢。

(4)抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)；在長(zhǎng)滿致病菌的平板上，會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。

【點(diǎn)睛】【解析】①.壓榨②.過(guò)濾③.稀釋涂布平板法(或：稀釋混合平板法)④.高壓蒸汽滅菌鍋⑤.消毒⑥.氮源⑦.越慢⑧.直徑(或：大小)26、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對(duì)的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過(guò)程，該過(guò)程還需要tRNA來(lái)運(yùn)轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個(gè)氨基酸的三個(gè)相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過(guò)程。

基因工程中檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變，說(shuō)明其沒(méi)有發(fā)生堿基對(duì)的增添和缺失，因?yàn)檫@兩者改變會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度改變，因此推測(cè)其基因突變是由于堿基對(duì)替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長(zhǎng)蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測(cè)該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對(duì)使翻譯過(guò)程繼續(xù)。

（3）本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時(shí)保證在不同的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實(shí)驗(yàn)組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對(duì)照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長(zhǎng)IDUA蛋白量比其他實(shí)驗(yàn)組都多，說(shuō)明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實(shí)驗(yàn)可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對(duì)突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀，進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時(shí)，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細(xì)胞內(nèi)都沒(méi)有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無(wú)法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無(wú)明顯差異。【解析】(1)替換減少。

(2)識(shí)別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過(guò)程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無(wú)明顯差異五、綜合題(共3題，共15分)27、略

【分析】【分析】

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的，PCR實(shí)際上