2025年人教B版選擇性必修三生物下冊階段測試試卷

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教B版選擇性必修三生物下冊階段測試試卷680考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、科學家將葡萄糖異構酶的第138位甘氨酸用脯氨酸替代，結果它的最適溫度提高了10～12℃，據分析，脯氨酸替代甘氨酸后，由于引入了一個吡咯環(huán)側鏈，剛好填充于138位甘氨酸附近的空洞，使蛋白質空間結構更具剛性，從而提高了酶的熱穩(wěn)定性。下列說法正確的是（）A.蛋白質工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對象的差異B.對葡萄糖異構酶的改造需要進行蛋白質結構的設計C.蛋白質工程操作過程中，不需要酶和載體作為工具D.經蛋白質工程改造后的葡萄糖異構酶熱穩(wěn)定性提高這一性狀不可遺傳2、處理生活垃圾的有效方法之一是用微生物對其進行降解。下圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過程。相關分析正確的是（）

A.篩選所用培養(yǎng)基中的碳源應為牛肉膏和蛋白胨B.將菌液接種到培養(yǎng)基的方法是平板劃線法C.菌落①與菌落②透明圈大小不同的原因是其對碘的分解能力不同D.擴大培養(yǎng)時用不加瓊脂的液體培養(yǎng)基效果更好3、下列對動物細胞核移植技術的敘述，錯誤的是（）A.動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植B.體細胞核移植的過程中可通過顯微操作去除卵母細胞中的核C.體細胞核移植過程中通常采用MⅡ期卵母細胞作為受體細胞D.培養(yǎng)重組細胞時為了創(chuàng)造無菌、無毒的環(huán)境，通常添加一定量的血清4、下列與土壤中尿素分解菌的分離與計數相關的敘述，正確的是（）A.可以通過設置空白對照組來檢驗培養(yǎng)基是否受到了雜菌的污染B.對樣品中的尿素分解菌進行計數時可采用平板劃線法進行接種C.統計尿素分解菌的數目時應該選擇菌落數多的培養(yǎng)基進行計數D.尿素分解菌合成的脲酶將尿素分解成氨后會使培養(yǎng)基pH下降5、我國科學家在進行抗蟲棉的培育過程中獨創(chuàng)了“花粉管通道法”，該方法有多種操作方式。下圖表示花粉管通道法介導植物基因轉移。下列相關說法正確的是（）

A.花粉管通道法無需等到雌蕊成熟B.花粉管通道法后續(xù)需要植物組織培養(yǎng)C.花粉管通道法可用于玉米等單子葉植物的轉基因培育D.外源DNA不需要構建基因表達載體，就能借助花粉管通道進入受體細胞并表達6、草莓是無性繁殖的作物，它感染的病毒很容易傳播給后代。病毒在草莓體內逐年積累，會導致產量降低，品質變差。下圖是育種工作者選育高品質草莓的流程圖。下列有關敘述正確的是（）

A.甲常選用莖尖作為外植體，原因是其幾乎未感染病毒B.C兩個過程都必須經愈傷組織階段才能萌生成幼苗C.用75%的酒精溶液對甲進行消毒處理后還需用蒸餾水多次沖洗D.判斷兩種選育方法的效果都需要通過病毒接種實驗評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)7、下列防止生物武器的措施，正確的是（）A.通過立法，禁止生物武器的生產和擴散B.捕殺敵人投放的帶菌的小動物C.大力發(fā)展生物武器，以牙還牙D.根據生物武器的類型采取相應措施8、下列關于治療性克隆和生殖性克隆的說法，正確的是（）A.使用病人自己的細胞產生胰島細胞以治療糖尿病屬于治療性克隆B.將一個克隆的胚胎植入一個女性子宮發(fā)育出嬰兒的過程屬于生殖性克隆C.治療性克隆屬于無性生殖，生殖性克隆屬于有性生殖D.治療性克隆和生殖性克隆技術均需要應用到動物細胞培養(yǎng)和核移植9、為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理，下列敘述不合理的是（）A.將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率B.涂布用的菌濃度應控制在30~300個/mLC.需通過預實驗考察輻射時間對存活率的影響，以確定最佳誘變時間D.挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，給純化后進行降解效率分析10、在單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細胞（即瘤細胞和B淋巴細胞的融合細胞）的篩選是必不可少的步驟。篩選雜交瘤細胞所用的HAT培養(yǎng)基成分和細胞增殖時所需的核苷酸的兩條形成途徑（D途徑，S途徑）如下表所示。已知融合所用的瘤細胞是經毒性培養(yǎng)基選出的中間合成途徑缺失株，即只有起始合成途徑，效應B細胞有兩條核苷酸合成途徑。若僅考慮細胞的兩兩融合，下列說法錯誤的是（）。HAT培養(yǎng)基成分水，糖類、無機鹽、次黃嘌呤、氨基糖呤（葉酸拮抗劑），胸腺嘧啶脫氧核苷等起始合成途徑（D途徑）由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，葉酸作為重要的輔酶參與這一過程中間合成途徑（S建徑）利用次黃嘌呤一鳥嘌呤磷酸核苷轉移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相應的核苷酸

A.HAT培養(yǎng)基中瘤細胞可利用氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸B.雜交瘤細胞能被篩選的原因為既具備增殖能力，又可進行S途徑C.篩選出來的雜交瘤細胞分泌的均為同一種特異性抗體D.在放入HAT培養(yǎng)基之前的融合細胞的培養(yǎng)液中，有D途徑的細胞有3種11、黃粉蟲可以吞食；降解塑料；利用黃粉蟲腸道微生物對白色污染進行生物降解，是一種綠色環(huán)保的處理工藝。下圖是從黃粉蟲腸道中分離、純化目的微生物的過程，相關敘述正確的是（）

A.富集培養(yǎng)基中含有酵母膏、蛋白胨、瓊脂等，蛋白胨能提供所需的碳源、氮源和維生素B.分離、純化目的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源C.將轉接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱長期保存D.與傳統填埋、焚燒相比，黃粉蟲腸道微生物對白色污染的降解不會造成二次污染12、下列有關生物技術安全性和倫理問題的觀點，合理的是（）A.對轉基因技術，我們應該趨利避害，理性看待B.我國禁止生殖性克隆和治療性克隆C.我國不發(fā)展、不生產、不儲存生物武器，并反對其擴散D.對基因檢測應該保護個人遺傳信息的隱私權評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)13、下圖表示哺乳動物精子和卵細胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應和__________反應。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細胞進行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。14、體細胞核移植技術存在的問題：

克隆動物存在著健康問題、表現出______缺陷等。15、通常將DNAD的羥基（—OH）成為_______________端，而磷酸基團的末端成為___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向總是從_________________延伸。16、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結構和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進入人體后容易失效。嘗試根據本節(jié)課所學知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。17、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()18、我國是一個愛好和平的國家，也是曾經遭受生物武器傷害的國家。我國政府對生物武器的態(tài)度是什么？我們?yōu)槭裁凑J同這種態(tài)度？__________19、隨著現代科技的發(fā)展，有些新的致病微生物被發(fā)現，它們的危害可能更大。通過互聯網或圖書館搜集近年發(fā)現的致病微生物的相關資料，分析和歸納這些資料__________。評卷人得分四、實驗題(共4題，共12分)20、在釀酒；釀醋、制作腐乳、酸奶過程中都要涉及各種微生物；請回答下列問題。

（1）釀酒利用的微生物是酵母菌，制作過程中，酵母菌先在有氧條件下大量繁殖，然后再進行酒精發(fā)酵，檢測酒精的原理是：橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與酒精發(fā)生化學反應，變成________________色。如果葡萄酒釀造過程中葡萄汁中含有醋酸菌，在酒精發(fā)酵旺盛時，醋酸菌不能將葡萄汁中的糖發(fā)酵為醋酸，原因是_______________________________________________________。

（2）醋酸發(fā)酵時溫度一般應控制為_______________。

（3）在臭豆腐的制備過程中，常用的微生物主要是________________，在此過程中，豆腐相當于微生物生長的______________________。

（4）民間制作腐乳時，豆腐塊上生長的微生物，在制作時一般要加鹽、酒，若加入的酒精濃度（含量）過低，會出現什么現象？__________________________________。

（5）在腌制泡菜的過程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，用水封壇的作用是__________________________，欲檢測泡菜在腌制過程中產生的亞硝酸鹽含量，使用檢測試劑后顏色變?yōu)開____________。21、隨著游泳運動的普及；游泳池水質安全問題越來越受到人們的重視。在游泳池池水凈化中，常用的方法是用氯或含有效氯化合物進行氯化消毒。氯化消毒后池水中的游離性余氯可保證持續(xù)消毒效果，但游離性余氯含量過高會影響人體健康。國家標準規(guī)定的人工游泳池水質指標衛(wèi)生標準包括游離性余氯0.3~1.0mg/L；菌落形成單位不得超過200個/mL等指標。研究人員對某地學校、酒店、健身會所、社區(qū)等場所游泳池水進行抽樣監(jiān)測，其中，對游泳池水活細菌總數進行檢測的實驗步驟如下：

①采樣瓶的預處理：在采樣瓶中加入適量的Na2S2O3溶液后對采樣瓶進行滅菌處理。

②采樣：在客流高峰時段進行采樣。采集位置在水下30cm左右；取水500mL。

③接種：用滅菌吸管吸取水樣1mL；注入滅菌培養(yǎng)皿中。將熔化并冷卻至45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內，每皿15mL。立即旋搖培養(yǎng)皿，使水樣和培養(yǎng)基充分混勻。平行重復若干實驗組。

④計數：待瓊脂凝固后翻轉培養(yǎng)皿；置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統計各組平板上菌落數，并求平均值。

回答下列問題：

(1)檢測游泳池活細菌總數時，不宜用細菌計數板在顯微鏡下直接計數，原因是_____________

(2)Na2S2O3具有還原性，可消除水樣中的殘余氯。據此分析步驟①中在采樣瓶中添加Na2S2O3溶液，對檢測的意義是_____________。

(3)步驟③中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿時，應在____________附近進行。為使實驗數據更準確，應至少設置____________個實驗組。步驟③中還應增加對照組，下列不宜作為對照組的是______________。

a．15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

b．1m無菌水+15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

c．1mL蒸餾水+15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

(4)步驟④中，統計的菌落數往往比活菌的實際數目少，這是因為_____________。若觀察到培養(yǎng)后的培養(yǎng)皿中的菌落連成一片，則該培養(yǎng)皿不宜計數。出現成片的菌落的原因可能步驟③中_____________操作不妥當造成的。

(5)不同季度微生物檢測結果如下表所示，第三季度合格率下降的可能原因包括____________。

a．氣溫升高b．客流量增加。

c．檢測的場館數多d．泳池氯化時間過長。季度檢測場館數合格場館數合格率（%）一3434100.0二403895.0三39932982.5四3636100.0

根據檢測結果，要進一步加強第三季度的場館管理。下列屬于提升游泳池水質安全性的合理建議有____________。

a．強制要求個人淋浴后入池b．增加游泳池水質監(jiān)測的頻次。

c．游泳池裝設水循環(huán)過濾裝置d．每日在臨近開館前氯化消毒22、玉米是重要的糧食作物；其葉片細胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調節(jié)功能?？蒲腥藛T成功培育出超量表達P蛋白轉基因玉米，所用DNA片段和Ti質粒的酶切位點如圖所示，請回答下列問題：

(1)強啟動子是一段有特殊結構的DNA片段，能被_______識別并結合，驅動基因的持續(xù)轉錄，如將強啟動子插入到玉米葉綠體某基因內部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達，應優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質粒切開后構建重組表達載體。T-DNA在該實驗中的作用是_______。

(2)將農桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進行篩選，此物質屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對沒有分化的_______團，經液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。23、番茄果實在成熟的過程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細胞壁破損，從而使果實變紅變軟，但不利于保鮮?？茖W家利用基因工程得到轉基因番茄，大大延長果實保質期。操作流程如下，回答下列問題：

（1）利用RT—PCR技術即逆轉錄—多聚酶鏈式反應制備PG基因，最好從番茄的_____細胞中提取mRNA，此技術所需要的酶主要有_____。

（2）據圖可知，轉基因番茄主要通過抑制PG基因的_____過程；使PG合成量減少，從而延長果實保質期。

（3）圖中的農桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存，而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉化的所需農桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因導入番茄細胞的方法稱為_____。要檢測感染農桿菌后的番茄細胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標記的PG基因的單鏈作為探針進行檢測，理由是_____。

（5）在將轉化的番茄細胞通過植物組織培養(yǎng)技術形成番茄幼苗過程中，培養(yǎng)基_____（填“要”或“不要”）添加有機營養(yǎng)物質，原因是_____。評卷人得分五、綜合題(共3題，共18分)24、CTAB法是一種提取植物DNA的方法。CTAB是一種陽離子去污劑；能與核酸形成復合物，在高鹽（＞0．7mol/LNaCl）濃度下可溶，在低鹽（0．1～0．5mol/LNaCl）濃度下復合物就因溶解度降低而沉淀，而大部分的蛋白質及多糖等仍溶解于溶液中。通過有機溶劑抽提，去除蛋白質等雜質后，加入異丙醇獲得的沉淀為CTAB與核酸復合物，用體積分數為75％的乙醇洗滌可去除CTAB，具體流程如下，請回答下列問題：

（1）臘梅新鮮嫩葉在液氮中更易于研磨的原因_______________，該實驗不選用老葉而用新鮮嫩葉為材料的原因是_______________。

（2）過程①中，CTAB提取液中NaCl濃度為1．4mol/L，其目的是_______________。氯仿—異戊醇，其密度均大于水，能使蛋白質變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。過程②中加入氯仿異戊醇離心后，NA主要存在于A中，則A為_____________（填上清液或沉淀物）。過程③加入異丙醇出現沉淀的主要原因是_______________。

（3）過程④用體積分數為75％的乙醇洗滌后的沉淀物中含有RNA，為得到較為純凈的DNA，可先用一定濃度的______________溶液溶解沉淀物，然后加入_______________酶，再重復步驟______________（填圖中序號），最后在上清液中加入冷卻的、體積分數為_______________；可以得到純凈的DNA。

（4）下面是某同學設計的DNA鑒定實驗的主要步驟：

①取一支20mL的試管，向其中先后加入2mol·L﹣1的NaCl溶液5mL和少量絮狀沉淀；用玻棒攪拌使其溶解。

②向試管中加入4mL二苯胺試劑；混勻后觀察溶液是否變藍。

請指出上面實驗步驟中的兩個錯誤：_______________、_______________。25、農業(yè)生產上有一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解；長期使用會污染土壤。為修復被污染的土壤，可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細菌。已知該除草劑（含氨有機物）在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明。請回答下列問題：

(1)制備土壤浸出液時需將浸出液進行稀釋處理，原因是_____。

(2)為了選育出能降解該除草劑的細菌，選擇的培養(yǎng)基配方是_____（填寫選項即可）。

a、葡萄糖b、除草劑c、氮源d、剛果紅e、瓊脂f、無機鹽g；蒸餾水。

(3)若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數，可采用的接種方法是_____。將104倍的稀釋液分別涂布到3個平板上培養(yǎng)，每個平板均接種了0．1mL樣品。培養(yǎng)后平板的菌落數分別是210、230、190，則每毫升土壤溶液中活菌數的理論值為_____個。該統計結果應該低于活菌的實際數目，原因是_____。

(4)在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，單菌落周圍的透明帶越大，其降解除草劑的能力越強。但該培養(yǎng)基中出現了少數無透明帶菌落，據此可推測這部分微生物具有_____能力。26、某個高溫日；某校三位高中學生相約去吃冰激凌，之后兩人都出現腹瀉現象，于是他們懷疑冰激凌中的大腸桿菌含量超標。老師建議他們利用學過的有關微生物培養(yǎng)的知識對此冰激凌進行檢測。經過一番資料查閱，他們提出了如下實驗設計思路。

立即去賣冰激凌的小店再買一個同樣品牌的同種冰激凌；配制伊紅—亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基（該培養(yǎng)基可用來鑒別大腸桿菌，生長在此培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落呈深紫色，并有金屬光澤）、滅菌、倒平板；取10mL剛融化的冰激凌作為原液，然后進行梯度稀釋，稀釋倍數為取每個濃度的冰激凌液各0．1mL；用涂布平板法進行接種，每個濃度涂3個平板，一共培養(yǎng)18個平板；在適宜溫度下培養(yǎng)48h，統計菌落數目。

（1）請你從下面幾個角度對這三位同學的思路進行評議。

①他們只打算對一個冰激凌進行檢測，理由是：兩個人吃過冰激凌后，都拉肚子了，所以再檢測一個就足以說明問題。你同意這樣的觀點嗎？為什么？______

②有沒有必要對冰激凌原液進行梯度稀釋？為什么？______【提示：我國衛(wèi)生部門規(guī)定了飲用水標準；1mL自來水中細菌總數不可以超過100個（37℃培養(yǎng)24h），1000mL自來水中大腸桿菌菌落數不能超過3個（37℃培養(yǎng)48h）】

③他們認為，在用該方法統計菌落數目時不需要設計對照組，所以只準備培養(yǎng)18個平板。你認為在這項檢測中是否需要對照組？為什么？________

（2）下圖所示為4種菌落分布圖，一般不能由涂布平板法得到的是__________。

（3）在完善實驗設計思路后，三位同學進行了實驗。培養(yǎng)結果顯示，除了深紫色菌落，還有其他菌落存在，這說明了什么？如果以菌落數代表樣品中的大腸桿菌數量，則統計結果比實際值是偏多還是偏少？為什么？____________

（4）如果實驗結果顯示，檢測的冰激凌中大腸桿菌含量超標了。接下來他們應該做什么？____________________參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

蛋白質工程就是通過對蛋白質化學；蛋白質晶體學和蛋白質動力學的研究；獲得有關蛋白質理化特性和分子特性的信息，在此基礎上對編碼蛋白質的基因進行有目的的設計和改造，通過基因工程技術獲得可以表達蛋白質的轉基因生物系統，這個生物系統可以是轉基因微生物、轉基因植物、轉基因動物，甚至可以是細胞系統。

【詳解】

A；蛋白質工程和基因工程都要對基因進行操作；其操作對象相同，A錯誤；

B；對葡萄糖異構酶的改造屬于蛋白質工程；需要進行蛋白質結構的設計，B正確；

C；蛋白質工程要通過基因工程實施；需要酶和載體作為工具，C錯誤；

D；蛋白質工程通過基因修飾或基因合成；由于是對基因進行的改造，遺傳物質已經改變，屬于可遺傳的變異，D錯誤。

故選B。2、D【分析】為了篩選出高效降解淀粉菌種；該培養(yǎng)基應以淀粉為唯一碳源，由于培養(yǎng)基中含有淀粉，而以淀粉為唯一碳源的微生物能產生淀粉酶分解淀粉，淀粉被分解后與碘液不呈現藍色，因而隨著淀粉被分解，藍色褪去出現透明圈。

【詳解】

A；篩選所用培養(yǎng)基應以淀粉作為唯一的碳源；這樣才能將降解淀粉的菌種篩選出來，A錯誤；

B；由培養(yǎng)基上的單個菌落可知；將菌液接種到培養(yǎng)基的方法是稀釋涂布法，B錯誤；

C；由于培養(yǎng)基中的唯一碳源是淀粉；而淀粉遇碘液會變藍，故菌落①與②周圍透明圈的大小不同原因可能是兩個菌群對淀粉的分解能力不同，C錯誤；

D；液體培養(yǎng)基可增大溶氧量；也能增加菌種與營養(yǎng)物質的接觸面積，故擴大培養(yǎng)時用不加瓊脂的液體培養(yǎng)基效果更好，D正確。

故選D。3、D【分析】動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核；移入一個已經去掉細胞核的卵細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。哺乳動物核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植。

【詳解】

A；哺乳動物體細胞分化程度高；體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植，A正確；

B；體細胞核移植時通常用去核的卵母細胞做受體細胞；去除卵母細胞核時，可采用顯微操作法，B正確；

C；MⅡ期的卵母細胞已經成熟；可以作為核移植的受體細胞，C正確；

D；培養(yǎng)動物細胞時；為了保證細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，需要對培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進行無菌處理，還需要向培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，D錯誤。

故選D。4、A【分析】【分析】

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗中；需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計數的關鍵是經梯度稀釋后的稀釋倍數要合適，計數時通常選擇菌落數在30-300之間的實驗組平板進行計數。

【詳解】

A；該實驗可設置空白對照組；以檢驗培養(yǎng)基是否受到雜菌污染，同時也能確定培養(yǎng)基是否符合要求，A正確；

B；對樣品中的尿素分解菌進行計數時可采用平稀釋涂布平板法進行接種；B錯誤；

C；統計尿素分解菌的數目時；以菌落數在30--300以上的平板進行計數，求其平均值，C錯誤；

D；尿素分解菌合成的脲酶可催化尿素分解成氨；從而會使培養(yǎng)基pH升高，據此通常在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑來鑒別尿素分解菌，D錯誤。

故選A。

【點睛】5、C【分析】【分析】

花粉管通道法：在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液；利用植物在開花；受精過程中形成的花粉管通道，將外源DNA導入受精卵細胞，并進一步地被整合到受體細胞的基因組中，隨著受精卵的發(fā)育而成為帶轉基因的新個體。

【詳解】

A；授粉過程需要在雌蕊成熟后；因此，花粉管通道法應該在雌蕊成熟時才能進行，A錯誤；

B；花粉管通道法將外源DNA導入受精卵；可以直接實現轉基因植物的自然生成，無需組織培養(yǎng)，B錯誤；

C；玉米等單子葉植物的轉基因培育可使用花粉管通道法；C正確；

D；要讓目的基因進入受體細胞后能穩(wěn)定存在并得到復制和表達；不管采用什么導入方法，都需要構建重組載體才能實現，故外源DNA也需要構建基因表達載體，才能借助花粉管通道進入受體細胞并表達，D錯誤。

故選C。6、A【分析】【分析】

1；植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下；將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其產生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。

2；基因工程是指按照人們的愿望；進行嚴格的設計，通過體外DNA重組和轉基因技術，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品；基因工程是在DNA分子水平上進行設計和施工的，又叫做DNA重組技術。

【詳解】

A；方法一為植物組織培養(yǎng)；選擇莖尖作為組織培養(yǎng)材料的原因是該部位細胞的含毒量少，甚至不帶毒，誘導更容易獲得脫毒苗，A正確；

B；可將甲制作成為人工種子；人工種子是將植物離體培養(yǎng)產生的體細胞胚、芽、愈傷組織等包埋在含有營養(yǎng)成分和保護功能的物質中而制成的，在條件適宜時，人工種子可以發(fā)芽成苗，故A過程不經過愈傷組織階段也能萌生成幼苗，B錯誤；

C；對外植體的消毒通常采用體積分數為70%的酒精和5%次氯酸鈉溶液；消毒后需用無菌水進行沖洗，C錯誤；

D；方法二為用基因工程選育高品質草莓；其選育方法的效果需要通過病毒接種實驗，方法一無病毒苗應根據植株性狀檢測，不需要接種病毒，D錯誤。

故選A。二、多選題(共6題，共12分)7、A:B:D【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑，以及經過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

生物武器的特點：1、單位面積效應大；2、有特定的傷害對象；3、具有傳染性；4、危害時間久；5、不易被發(fā)現和鑒定；6、使用者本身易受傷害；7、生物武器造價低，技術難度不大，隱秘性強，可以在任何地方研制和生產。

生物武器的局限性：1；生物武器主要指病原微生物；所以它們的生存、繁殖、死亡易受環(huán)境條件（如溫度）的影響。2、還受地形、風向等多種條件影響。3、生物武器使用時不易控制，使用不當可危害本方安全。

【詳解】

生物武器是多種多樣的；對于不同的生物武器應用不同的防治方法，但總的原則是禁止生物武器的生產和擴散，因此ABD正確，C錯誤。

故選ABD。8、A:B:D【分析】【分析】

1；“治療性克隆”將使人胚胎干細胞（簡稱ES細胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細胞移植到去核卵母細胞中構建形成重組胚胎；體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞（如神經細胞、肌肉細胞和血細胞），用于治療。

2；生殖性克隆就是以產生新個體為目的克隆。即用生殖技術制造完整的克隆人。目的是產生一個獨立生存的個體。于此相對的是研究性克隆或醫(yī)學性克??；指的是產生研究所用的克隆細胞，不產生可獨立生存的個體。

【詳解】

A；由分析可知；使用病人自己的細胞產生胰島細胞以治療糖尿病屬于治療性克隆，A正確；

B；生殖性克隆就是以產生新個體為目的克隆。即用生殖技術將一個克隆的胚胎植入一個女性子宮發(fā)育出嬰兒的過程；B正確；

C；克隆是無性生殖；C錯誤；

D；由分析可知；治療性克隆和生殖性克隆技術均需要應用到動物細胞培養(yǎng)和核移植，D正確。

故選ABD。9、A:B【分析】【分析】

培養(yǎng)基的配制：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。微生物的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。預實驗可以為正式實驗進一步的摸索條件；可以檢驗實驗設計的科學性和可行性，避免人力；物力和財力的浪費。

【詳解】

A；培養(yǎng)基應先滅菌再分裝于培養(yǎng)皿中；A符合題意；

B、涂布用的菌濃度應控制在106倍；以避免菌種重疊而不能得到單菌落，B符合題意；

C；輻射劑量和誘變時間都是正式實驗的無關變量；可通過預實驗確定，C不符合題意；

D；石油降解菌能分解石油獲得碳源；形成菌落，挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，給純化后進行降解效率分析，以獲得能高效降解石油的菌種，D不符合題意。

故選AB。10、A:C:D【分析】【分析】

誘導植物細胞原生質體融合物理方法包括離心；振動、電激；化學方法用聚乙二醇，誘導動物細胞融合除了以上物理化學方法可用生物方法，即滅活的病毒。

在HAT培養(yǎng)基中；氨甲蝶呤是葉酸的拮抗劑阻斷DNA合成的主途徑，未融合的瘤細胞；融合的瘤細胞--瘤細胞不能合成次黃嘌呤磷酸核糖轉化酶，合成DNA的S途徑也不能進行，所以最終死亡。

HAT培養(yǎng)基中篩選出的雜交瘤細胞；經選擇性培養(yǎng)在適宜條件下可無限增值，然后進行單克降抗體檢測，篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細胞。

【詳解】

A；HAT培養(yǎng)基中含葉酸拮抗劑；其中不能進行D途徑，A錯誤；

B；雜交瘤細胞為瘤細胞和B淋巴細胞的融合細胞；既具備增殖能力，又可在HAT培養(yǎng)基中進行S途徑，B正確；

C；最終篩選出來的可能有多種雜交瘤細胞；分泌的可能不是同一種特異性抗體，還需進行進一步篩選，C錯誤；

D；僅考慮細胞的兩兩融合；在放入HAT培養(yǎng)基之前的融合細胞的培養(yǎng)液中，會有融合的B淋巴細胞—瘤細胞、融合的B淋巴細胞—B淋巴細胞、融合的瘤細胞—瘤細胞、未融合的B淋巴細胞、未融合的瘤細胞等多種形式的細胞，這幾種形式的細胞均可進行D途徑，D錯誤。

故選ACD。11、B:D【分析】【分析】

1；分離菌株的思路:

(1)自然界中目的菌株的篩選:

①依據：根據它對生存環(huán)境的要求；到相應的環(huán)境中去尋找。

②實例：PCR技術過程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶；就是從熱泉中篩選出來的Taq細菌中提取出來的。

(2)實驗室中目的菌株的篩選:

①原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)；溫度、pH等）；同時抑制或阻止其他微生物生長。

2；統計菌落數目的方法：

(1)稀釋涂布平板法（間接）：

①當樣品的稀釋庋足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。

②通過統計平板上的菌落數來推測樣品中大約含有的活菌數。

(2)利用顯微鏡直接計數。

【詳解】

A；富集培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基；不應含有瓊脂，A錯誤；

B；分離、純化能降解PVC塑料膜的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源；B正確；

C；轉接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱臨時保存；對于需要長期保存的菌種，可用甘油管藏的方法，C錯誤；

D；如果對白色污染進行傳統填埋、焚燒容易造成二次污染；黃粉蟲腸道微生物對白色污染的降解不會，D正確。

故選BD。12、A:C:D【分析】【分析】

1；轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統穩(wěn)定性的影響）。

2；治療性克隆：指利用克隆技術產生特定細胞和組織（皮膚、神經或肌肉等）用于治療性移植。

3；生殖性克隆：指將克隆技術用于生育目的；即用于產生人類個體。

4；中國政府：禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆。

【詳解】

A；對轉基因技術；我們應該趨利避害，理性看待，A正確；

B；中國政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆，B錯誤；

C；中國在任何情況下不發(fā)展、不生產、不儲存生物武器；并反對生物武器及其技術和設備的擴散，C正確；

D；對基因檢測應該保護個人遺傳信息的隱私權；D正確。

故選ACD。三、填空題(共7題，共14分)13、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復制；②是減數分裂，③是精細胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點：（1）精子的減數兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機能衰退；多數哺乳動物卵子的形成和在卵巢內的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶，透明帶反應和卵細胞膜反應是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產生的時期是初情期；雌性動物卵泡細胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細胞進行減數第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點睛】

本題考查卵細胞的形成過程和受精作用等相關知識，意在考查學生識記相關細節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應卵細胞膜反應初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用14、略

【解析】遺傳和生理15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能從頭開始合成，而只能從3，端延伸DNA子鏈的5，端向3，端16、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質工程技術替換少數氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|工程技術替換少數氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質。17、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤。【解析】錯誤18、略

【分析】【詳解】

我國是一個愛好和平的國家，也是曾經遭受生物武器傷害的國家，如在抗日戰(zhàn)爭中就遭受到了日軍發(fā)動的細菌戰(zhàn)的傷害，由于生物武器致病能力強、攻擊范圍廣，因而我們深知生物武器不僅能對我國、甚至會對整個人類造成毀滅性的災難，因此我國政府在1998年6月重申了我國對生物武器的態(tài)度，即為不發(fā)展、不生產、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術和設備的擴散。【解析】我國是一個愛好和平的國家，由于生物武器致病能力強、攻擊范圍廣，生物武器不僅能對我國、甚至會對整個人類造成毀滅性的災難，因此我國政府在1998年6月重申了我國對生物武器的態(tài)度，即為：

在任何情況下不發(fā)展、不生產、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術和設備的擴散。19、略

【分析】【詳解】

致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，從一個宿主轉移到另一個宿主，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。同時近年來由于溫室效應加劇，也會使致病微生物的繁殖周期變短，可能會使危害性更大，因此我們需要積極開展科學研究，掌握防范的措施和防范，實現最好的防護，目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用?！窘馕觥恐虏∥⑸锸侵缚梢郧址溉梭w，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用。四、實驗題(共4題，共12分)20、略

【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。在有氧條件下可生產二氧化碳和水，無氧條件下可生產酒精和二氧化碳。

2；腐乳制作中用鹽腌制的目的：①鹽能抑制微生物的生長；避免豆腐塊腐敗變質；②加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，在后期制作過程中不會過早酥爛；③有調味作用。

（1）

檢測酒精的原理是：橙色的重鉻酸鉀溶液；在酸性條件下與酒精發(fā)生化學反應，變成灰綠色。醋酸菌是好氧型細菌，而果酒發(fā)酵是無氧環(huán)境(或醋酸菌需要在有氧且溫度是30～35℃條件下，才能將糖轉化為醋酸或因為酒精發(fā)酵時的缺氧環(huán)境能抑制醋酸菌生長，且醋酸菌的發(fā)酵需要充足的氧氣），所以在酒精發(fā)酵旺盛時，醋酸菌不能將葡萄汁中的糖發(fā)酵為醋酸；

（2）

酵母菌的異化作用類型為兼性厭氧型；即在有氧條件下可生成水和二氧化碳，在無氧條件下生成酒精和二氧化碳；醋酸發(fā)酵的主要菌種是醋酸菌，醋酸菌的最適宜溫度是30-35℃，故醋酸發(fā)酵時溫度一般應控制為30～35℃；

（3）

豆腐的發(fā)酵中參與的微生物很多如青霉；酵母、曲霉、毛霉等；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物將豆腐中的營養(yǎng)基質如蛋白質、脂肪等分解；豆腐相當于培養(yǎng)基，能提供毛霉等菌種生長的條件；

（4）

民間制作腐乳時；豆腐塊上生長的微生物，在制作時一般要加鹽；酒（酒的含量一般控制在12%左右），若加入的酒精濃度（含量）過低，會出現不足以抑制微生物的生長，導致豆腐腐敗變質的現象；

（5）

泡菜的制作的菌種是乳酸菌；屬于厭氧型細菌，用水封壇的作用是隔絕空氣，制造無氧環(huán)境，為乳酸菌的發(fā)酵提供無氧環(huán)境；在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮反應生成重氮鹽，重氮鹽與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料。

【點睛】

本題主要考查果酒的制作、腐乳的制作、腌制泡菜等知識點，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯系，形成知識網絡結構的能力；能運用所學知識，準確判斷問題的能力?！窘馕觥浚?）灰綠醋酸菌是好氧型細菌；而果酒發(fā)酵是無氧環(huán)境(或醋酸菌需要在有氧且溫度是30～35℃條件下，才能將糖轉化為醋酸或因為酒精發(fā)酵時的缺氧環(huán)境能抑制醋酸菌生長，且醋酸菌的發(fā)酵需要充足的氧氣）

（2）30—35℃

（3）毛霉培養(yǎng)基。

（4）不足以抑制微生物生長；使豆腐腐敗變質。

（5）制造無氧環(huán)境玫瑰紅色21、略

【分析】【分析】

統計菌落數目的方法：（1）顯微鏡直接計數法①原理：利用特定細菌計數板或血細胞計數板；在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法：用計數板計數；③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計數法（活菌計數法）①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

（1）

測定培養(yǎng)液中游泳池活細菌總數可以使用稀釋涂布平板法進行計數；而顯微鏡直接計數獲得的結果包含活菌和死菌的總數。

（2）

氯化消毒后池水中的游離性余氯可保證持續(xù)消毒效果，Na2S2O3具有還原性，可消除水樣中的殘余氯，對游泳池水活細菌總數進行檢測，步驟①中在采樣瓶中添加Na2S2O3溶液；可以避免殘留氯殺菌。

（3）

微生物培養(yǎng)時應注意無菌操作；故步驟③中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿時，應在酒精燈火焰附近進行；為使實驗數據更準確，應至少設置3個實驗組；微生物培養(yǎng)時應注意避免雜菌污染，由于蒸餾水中含有較多的雜質和微生物，故不宜用作對照組，故選c。

（4）

步驟④中；用稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目少，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落；出現成片的菌落的原因可能是水樣與培養(yǎng)基沒有混勻，是步驟③中旋搖操作不充分造成的。

（5）

a；氣溫升高會導致微生物繁殖加快；導致合格率降低，a正確；

b、客流量增加，攜帶的微生物增多，導致合格率降低，b正確；

c；由于不同場館分別計數；故檢測的場館數多不是導致合格率降低的原因，c錯誤；

d；泳池氯化時間過長會殺滅更多的微生物；不是導致合格率降低的原因，d錯誤。

故選ab。

根據檢測結果，要進一步加強第三季度的場館管理，可增加游泳池水質監(jiān)測的頻次、游泳池裝設水循環(huán)過濾裝置，強制要求個人淋浴后入池不現實，每日在臨近開館前氯化消毒，余氯含量過高會影響人體健康，故選bc?！窘馕觥?1)顯微鏡直接計數獲得的結果包含活菌和死菌的總數。

(2)避免余氯殺菌。

(3)酒精燈火焰3c

(4)當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落旋搖

(5)abbc

22、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質——抗原—抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動子是RNA聚合酶識別并結合的位點；能驅動基因的轉錄；如將強啟動子插入到玉米葉綠體某基因內部，則會破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達，則需要強啟動子和P基因不被破壞，因此應優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質粒切開后構建重組表達載體。農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實驗中的作用是將強啟動子和P基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細胞染色體DNA上，因此將農桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入G418進行篩選，此物質屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場所，線粒體是細胞有氧呼吸的主要場所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對沒有分化的薄壁細胞團；經液體懸浮培養(yǎng)可以分散成胚性單細胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細胞可以發(fā)育成胚狀體，再繼續(xù)發(fā)育成轉基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數以及玉米的基因型等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染?！窘馕觥?1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強啟動子和P基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染23、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA??分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）利用RT—PCR技術即逆轉錄—多聚酶鏈式反應制備PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果膠使細胞壁破損，從而使果實變紅變軟，說明PG基因在果肉中表達量較高，所以最好從番茄的果肉細胞中提取mRNA，此技術所需要的酶主要有逆轉錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）；

（2）據圖可知；轉基因番茄PG基因與反向連接PG基因的轉錄產物mRNA1和mRNA2相結合形成雙鏈，從而抑制PG基因的翻譯過程，使PG合成量減少，從而延長果實保質期；

（3）分析表達載體的構建過程圖可知；目的基因插入到圖中農桿菌的四環(huán)素抗性基因上，導致農桿菌失去了四環(huán)素的抗性，所以圖中農桿菌能夠在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生存，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉化的所需農桿菌；

（4）圖中是利用農桿菌將反向連接PC基因導入番茄細胞的；此方法稱為農桿菌轉化法。不能用標記的PG基因的單鏈作為探針進行檢測番茄細胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，理由是番茄細胞內原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會與該探針形成雜交帶；

（5）將轉化的番茄細胞通過植物組織培養(yǎng)技術形成番茄幼苗過程中；需要在培養(yǎng)基中添加有機營養(yǎng)物質，原因是該培養(yǎng)過程中植物細胞不能進行光合作用（或光合作用很弱）。

【點睛】

本題結合圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記植物組織培養(yǎng)的過程及應用，能結合圖中信息準確答題?！窘馕觥抗饽孓D錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）翻譯卡那霉素四環(huán)素農桿菌轉化法不能番茄細胞內原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會與該探針形成雜交帶要該培養(yǎng)過程中植物細胞不能進行光合作用（或光合作用很弱）五、綜合題(共3題，共18分)24、略

【分析】【分析】

實驗原理：提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學方法分離具有不同物理或化學性質的生物大分子。對于DNA的粗提取而言；就是要利用DNA與RNA；蛋白質和脂質等在物理和化學性質方面的差異，提取DNA，去除其他成分。1.DNA的溶解性（1）DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用這一特點，選擇適當的鹽濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質沉淀，或者相反，以達到分離目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步的分離。2.DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解蛋白質，但是對DNA沒有影響。大多數蛋白質不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響。3.DNA的鑒定在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

（1）臘梅新鮮嫩葉在液氮中更易于研磨的原因冷凍后的細胞易破碎；而且低溫下各種物質不易被降解。該實驗不選用老葉而用新鮮嫩葉為材料的原因是新葉細胞分裂旺盛，細胞中DNA含量較高。

（2）由題干信息“CTAB是一種陽離子去污劑；能與核酸形成復合物，在高鹽（＞0.7mol/LNaCl）濃度下可溶”可知，過程①中，CTAB提取液中NaCl濃度為1.4mol/L，其目的是溶解CTAB與核酸的復合物。氯仿-異戊醇，其密度均大于水，能使蛋白質變性沉淀，與水和DNA均不相溶，這說明過程②中加入氯仿-異戊醇離心后，DNA主要存在于A中，則A為上清液。過程③加入異丙醇出現沉淀的主要原因是CTAB與核酸的復合物因溶解度降低而沉淀。

（3）去除沉淀物中的RNA需要使用RNA酶使其分解；故可先用一定濃度的NaCl溶液溶解沉淀物，然后加入RNA酶，再重復步驟②（填圖中序號），最后在上清液中加入冷卻的；體積分數為95%的酒精，可以得到純凈的DNA。

（4）DNA鑒定需要沸水浴加熱；并且鑒定過程中需要設置對照實驗。

【點睛】

熟知DNA提取與鑒定得的流程是解答本題的關鍵，本題考查學生能正確提取信息和利用信息的能力。【解析】冷凍后的細胞易破碎新葉細胞分裂旺盛，細