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課時作業(yè)38微生物的培育與應用時間:45分鐘滿分:100分一、選擇題(每小題5分,共60分)1.eq\a\vs4\al(2022·濰坊摸底)下列關(guān)于微生物分別和培育的敘述,錯誤的是()A.微生物培育前,需對培育基進行消毒B.測定土壤樣品中的細菌數(shù)目,常用菌落計數(shù)法C.分別土壤中不同的微生物,要接受不同的稀釋度D.分別能分解尿素的細菌,要以尿素作為培育基中的唯一氮源解析:微生物培育前,需對培育基進行滅菌,而不是消毒;測定土壤樣品中的細菌數(shù)目,常用菌落計數(shù)法;分別土壤中不同的微生物,要接受不同的稀釋度,以便能從中選擇出菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù);分別能分解尿素的細菌,要以尿素作為培育基中的唯一氮源。答案:A2.(2022·合肥四校質(zhì)檢)下列有關(guān)培育基和菌種鑒定的敘述不正確的是()A.植物組織培育常用的是固體培育基B.可利用固體培育基上菌落的特征來推斷和鑒別細菌的類型C.利用剛果紅培育基上是否形成透亮?????圈來篩選纖維素分解菌D.在無氮培育基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌解析:在只含有尿素作為氮源的培育基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌。答案:D3.(2022·東城區(qū)檢測)欲從土壤中分別出能分解尿素的細菌,下列試驗操作中不正確的是()A.將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋B.同一濃度的土壤稀釋液應至少涂布三個平板C.可將未接種的培育基在相同條件下培育作為對比D.用加入剛果紅指示劑的培育基可篩選出分解尿素的細菌解析:本題考查微生物的分別與培育,意在考查考生的試驗分析力量。為了獲得單個菌落,應將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋,A正確;為了使結(jié)果更加精確?????,同一濃度的土壤稀釋?至少要涂布3個平板進行重復試驗,然后計算平均值,B正確;加入剛果紅的培育基用來篩選纖維素分解菌,D錯誤。答案:D4.無菌技術(shù)包括以下幾個方面的敘述,其中錯誤的是()A.對試驗操作的空間、操作者的衣著和手進行滅菌B.將用于微生物培育的培育皿、接種用具和培育基等進行滅菌C.為避開四周環(huán)境中微生物的污染,試驗操作應在酒精燈火焰四周進行D.試驗操作時應避開已經(jīng)滅菌處理的材料用具與四周物品相接觸解析:無菌操作技術(shù)的第一方面是:對試驗操作的空間,操作者的衣著和手進行清潔和消毒。其次、三、四方面分別是選項B、C、D。答案:A5.為了保持菌種的純潔需要進行菌種的保藏,下列有關(guān)敘述不正確的是()A.對于頻繁使用的菌種,可以接受臨時保藏的方法B.臨時保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培育基上C.臨時保藏菌種簡潔被污染或產(chǎn)生變異D.對于需要長期保存的菌種,可以接受低溫-4℃解析:對于需要長期保存的菌種,可接受甘油管藏法,即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后滅菌,將1mL培育的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在-20℃答案:D6.有關(guān)平板劃線操作的敘述不正確的是()A.第一步灼燒接種環(huán)是為了避開接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物B.每次劃線前,灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種C.在其次區(qū)域內(nèi)劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液D.劃線結(jié)束后,灼燒接種環(huán),能準時殺死接種環(huán)上的菌種,避開細菌污染環(huán)境和感染操作者解析:純化大腸桿菌的平板劃線中,接種環(huán)取菌種前灼燒的目的是避開接種環(huán)可能存在的微生物污染培育物,以后每次劃線前灼燒接種環(huán)為了殺死上次劃線后殘留的菌種,劃線結(jié)束仍需灼燒接種環(huán),是避開細菌污染環(huán)境和感染操作者,從其次次劃線開頭,每次劃線時接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端。答案:C7.(2022·衡陽模擬)下列關(guān)于大腸桿菌的培育中敘述不正確的是()A.在大腸桿菌培育過程中,除考慮養(yǎng)分條件外,還要考慮pH、溫度和滲透壓等條件B.在微生物培育操作過程中,為防止雜菌污染,需對培育基和培育皿進行消毒C.若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù),要想所得估量值更接近實際值,除應嚴格操作、多次重復外,還應保證待測樣品稀釋的稀釋度D.使用過的培育基及其培育物必需經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄解析:本題主要考查微生物培育和無菌操作的相關(guān)學問。培育過程中,除養(yǎng)分條件要滿足需要外,還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件是否適宜;滅菌是使用猛烈的理化因素殺死物體內(nèi)外全部的微生物,所以,對培育基和培育皿進行滅菌而不是消毒;使用稀釋涂布平板法時要保證樣品稀釋比例合適,這樣才會有更科學的數(shù)據(jù);有的大腸桿菌會釋放一種猛烈的毒素,并可能導致腸管消滅嚴峻癥狀,所以使用過的培育基及其培育物必需經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄,以防止培育物的集中。答案:B8.在對纖維素分解菌進行選擇培育時用液體培育基的目的是()A.用液體培育基可獲得大量菌體B.纖維素分解菌適宜在液體培育基上生長C.用液體培育基可以充分利用培育基中的養(yǎng)分物質(zhì)D.用液體培育基可獲得高純度的纖維素分解菌解析:液體培育基有利于纖維素分解菌的生長和繁殖。答案:A9.(2022·西城模擬)下列關(guān)于微生物培育和利用的敘述不正確的是()A.利用稀釋涂布平板法只能分別微生物不能對微生物進行計數(shù)B.接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落C.以尿素為唯一氮源且含酚紅的培育基可選擇和鑒別尿素分解菌D.用大白菜腌制泡菜的過程中亞硝酸鹽含量變化是先增加后削減解析:接種劃線可以將菌體分散,最終得到單個菌體細胞,經(jīng)過培育可以得到單個菌落;用稀釋涂布平板法可以分別微生物也可以對微生物進行計數(shù);在泡菜的腌制過程中,開頭亞硝酸鹽含量增加,10天后含量開頭下降;以尿素為唯一氮源且含酚紅的培育基可選擇和鑒別尿素分解菌。答案:A10.下列關(guān)于微生物的培育和分別的敘述中,不正確的是()A.細菌能在液體培育基中以二分裂方式快速擴增B.噬菌體或大腸桿菌可在蛋白胨培育基中增殖C.滅菌的目的是毀滅與培育菌競爭的雜菌D.稀釋涂布法分散細菌得到單菌落的效果更好解析:細菌繁殖方式是二分裂方式,噬菌體是沒有細胞結(jié)構(gòu)的病毒,需要在活細胞中才能生活,在蛋白胨培育基中不能增殖;滅菌的目的是防止雜菌和培育菌發(fā)生競爭。答案:B11.如圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的挨次為1、2、3、4、5。下列操作方法正確的是()A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B.劃線操作須在火焰上進行C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌解析:在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌,接種環(huán)的滅菌方法是在火焰上灼燒,接種時劃線操作是在火焰邊進行。在5個區(qū)域中,只要有單個活細菌,通過培育即可獲得所需菌落。答案:D12.(2022·合肥一檢)制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的下列操作中,不正確的是()A.操作流程是計算、稱量、溶化、滅菌和倒平板B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同倒入燒杯中再加水、去紙C.滅菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%瓊脂,并使其溶解D.將培育基冷卻到約50℃解析:瓊脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中,熔化后再滅菌。答案:C二、非選擇題(共40分)13.(14分)炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者,可依據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過試驗確診。(1)細菌培育:采集疑似患者的樣本,分別培育,獲得可疑菌落。(2)細菌鑒定:試驗流程如圖所示①對配制的液體培育基等需實行________方法滅菌;試驗所用液體培育基的碳源為________(填“無機碳”或“有機碳”)。②選擇可疑菌落制片后,用________觀看,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。③接種可疑菌后,35℃培育24小時,液體培育基變渾濁,緣由是________,對比組試管中應加入________,與試驗組同時培育6小時后,若試驗組液體培育基的渾濁度比對比組________(填“高”或“低”④對排解的疑似患者及易感人群,可接種炭疽桿菌疫苗,刺激機體產(chǎn)生相應抗體。與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細胞除T細胞、B細胞外,還有________。解析:①培育基應用高壓蒸汽方法進行滅菌。炭疽桿菌同化類型為異養(yǎng)型,應選有機碳作為其碳源。②微生物個體小,肉眼觀看不到,必需借助顯微鏡才能觀看到菌體特征。③在液體培育基中,細菌大量繁殖會導致培育液變渾濁;該試驗中試驗變量為是否加入噬菌體,所以對比組除不加噬菌體外,其他處理都應當和試驗組保持全都(即應加入不含噬菌體的生理鹽水)。噬菌體可破壞細菌細胞,從而使培育液變清。④在特異性免疫過程中,吞噬細胞參與了對抗原的處理與呈遞,漿細胞是直接產(chǎn)生抗體的細胞。答案:(2)①高壓蒸汽(100kPa蒸汽)有機碳②顯微鏡③細菌大量繁殖等量生理鹽水低④吞噬細胞、漿細胞14.(16分)為了探究土壤中的微生物對尿素是否有分解作用和,設計了以下試驗,并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。培育基成分如下表所示,試驗步驟如下圖所示。請分析回答問題:KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂1.4g2.1g0.2g1g10g15g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000mL(1)簡述土壤中可分解尿素的細菌的鑒定方法及原理:____________________。(2)培育基中加入尿素的目的是篩選________,這種培育基屬于________培育基。(3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培育基中的________和________,試驗中需要振蕩培育,緣由是________________________________________________________________________。(4)轉(zhuǎn)入固體培育基時,常接受________接種,獲得單菌落后連續(xù)篩選。(5)試驗結(jié)束后,使用過的培育基應當進行________處理后,才能倒掉。解析:尿素是培育基中的唯一氮源,因此原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠在此培育基上生長。由于細菌合成的脲酶將尿素分解為氨,pH上升,故在以尿素為唯一氮源的培育基中加入的酚紅指示劑將變成紅色;這種培育基屬于選擇培育基,可篩選目的菌;目的菌生長所需的氮源和碳源分別來自培育基中的尿素和葡萄糖;振蕩培育的目的是供應氧氣;固體培育基培育時的接種方法常用稀釋涂布平板法或平板劃線法;倒掉培育基之前應對其進行滅菌處理。答案:(1)在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑,細菌合成的脲酶將尿素分解為氨,pH上升,使酚紅指示劑變?yōu)榧t色(2)目的菌選擇(3)尿素葡萄糖為目的菌供應氧氣(4)稀釋涂布平板法(或平板劃線法)(5)滅菌15.(10分)下面是探究如何從土壤中分別自生固氮菌與計數(shù)的試驗,完成下列問題:(1)試驗原理:農(nóng)田的表層土壤中,自生固氮菌的含量比較多。將用表層土制成的稀泥漿,接種到無氮培育基上進行培育。在這種狀況下,只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種方法,可以將自生固氮菌與其他細菌分別開來。(2)材料用具:農(nóng)田的表層土壤、無氮培育基、牛肉膏蛋白胨培育基、盛9mL無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培育皿、盛90mL無菌水的錐形瓶、恒溫箱。(3)方法步驟:①倒平板:分別將無氮培育基、牛肉膏蛋白胨培育基倒平板,操作過程應在火焰旁。②制備土壤稀釋液:取土樣10g加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中,充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液1mL,轉(zhuǎn)至9mL的無菌水的大試管中,依次稀釋到107稀釋度。③涂布:依據(jù)由107~103稀釋度的挨次分別吸取0.1mL進行平板涂布,每個稀釋度下,無氮培育基一般應至少涂布________個平板,牛肉膏蛋白胨培育基涂布1個平板。④培育:放入恒溫箱內(nèi),在28~30℃⑤細菌的計數(shù):當菌落數(shù)目穩(wěn)定時,選取菌落數(shù)為______的平板進行計數(shù)。假如測試的平均值為50,則每克樣品中的菌落數(shù)是________(稀釋度是105)。(4)猜測結(jié)果:相同稀釋度下,牛肉膏蛋白胨培育基平板上的菌落數(shù)應多于無氮培育基上的數(shù)目。請說明緣由_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

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