《規(guī)?；驁龆鄤?dòng)物鏈球菌病診斷與防治技 術(shù)規(guī)程》

ICS01.040.65

CCSB04TB

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/NAIA×××-××××

規(guī)?；驁龆鄤?dòng)物鏈球菌病診斷與防治技

術(shù)規(guī)程

Technicalproceduresfordiagnosisandpreventionofmulti-animal

streptococcaldiseaseinlarge-scalesheepfarms

(征求意見稿)

××××-××-××發(fā)布××××-××-××實(shí)施

寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會發(fā)布

發(fā)布

規(guī)?；驁龆鄤?dòng)物鏈球菌病診斷與防治技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了規(guī)?；驁龆鄤?dòng)物鏈球菌病診斷與防治技術(shù)的術(shù)語和定義、診斷、預(yù)防和治療。

本文件適用于規(guī)模羊場多動(dòng)物鏈球菌病的防治。其他羊場參照執(zhí)行。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用

文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）

適用于本文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法。

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1多動(dòng)物鏈球菌?。⊿treptococcuspluranimalium）：是指由多動(dòng)物鏈球菌引發(fā)羊的一種呈現(xiàn)多種

臨床表現(xiàn)的傳染病。

4試劑與材料

4.1試劑配制

4.1.15%脫纖維羊血培養(yǎng)基：豆粉瓊脂培養(yǎng)基38.0g溶解于950mL蒸餾水中,121℃高壓滅菌20

min,冷至50-55℃時(shí)無菌操作加入50mL預(yù)溫至37℃的無菌脫纖維羊血，混勻，傾入無菌平皿，4℃

保存。

4.1.25%脫纖維羊血的MH瓊脂培養(yǎng)基：牛肉粉6.0g，可溶性淀粉1.5g，酸水解酪蛋白17.5g，

瓊脂17.0g溶解于950mL蒸餾水中,121℃高壓滅菌20min,冷至50-55℃時(shí)無菌操作加入50mL預(yù)

溫至37℃的無菌脫纖維羊血，混勻，傾入無菌平皿，4℃保存。。

5儀器與設(shè)備

5.1CO2恒溫培養(yǎng)箱。

5.2酒精燈。

5.3載玻片。

5.4蓋玻片。

2

5.5草酸銨結(jié)晶紫。

5.6碘液。

5.795%乙醇。

5.8番紅染色液。

5.9顯微鏡。

6診斷

6.1流行病學(xué)調(diào)查

多動(dòng)物鏈球菌可造成牛、羊、馬、犬、羊駝等多種動(dòng)物、多個(gè)組織器官感染。長途運(yùn)輸、飼養(yǎng)

環(huán)境變化、氣候變化等因素可誘發(fā)多動(dòng)物鏈球菌病的發(fā)生。可通過呼吸道和消化道等途徑傳播。

6.2臨床癥狀診斷

肺炎型：體溫升高、四肢乏力、行動(dòng)困難、呼吸急促、咳嗽。

6.3病理變化診斷

全身多處可見水泡，肺組織腫脹，表面淤血、出血。

6.4病原檢查

6.4.1樣本采集

肺炎型：按照GB/T14926執(zhí)行。如果24h內(nèi)不能送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，-20℃保存。樣品解凍時(shí)，置于38

℃～40℃水浴解凍。

6.4.2分離培養(yǎng)操作方法

將采集的肺臟組織表面消毒后，剪取肺臟深部組織一小塊，然后無菌操作條件下接種于脫纖維

羊血固體培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，無菌操作條件下挑取單菌落接種

在新的5%脫纖維羊血固體培養(yǎng)基上，5%CO2培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)24h后，觀察菌落形態(tài)，并挑取單菌

落進(jìn)行革蘭氏染色，鏡檢。

6.4.3菌落觀察

觀察到散在的淡灰色、透明，小針狀菌落，菌落周圍呈現(xiàn)溶血現(xiàn)象。經(jīng)革蘭氏染色后，鏡檢觀

察到呈鏈狀的革蘭氏陽性菌。

6.4.4藥敏試驗(yàn)

參照CLSI2018版指南進(jìn)項(xiàng)藥物敏感性試驗(yàn)研究。采用Kirby—Bauer法，將菌液的濃度調(diào)整至0.5

個(gè)麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)，無菌操作將菌液均勻涂布于含5%脫纖維羊血的MH瓊脂培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基表面干

燥后將藥敏紙片貼于培養(yǎng)基表面，置于37℃、5%CO2恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)12h后測量抑菌圈的直徑，肺

炎鏈球菌ATCC49619作為質(zhì)控菌株，每種藥物做三個(gè)重復(fù)。

6.5結(jié)果判定

符合6.1、6.2和6.3的特征判斷為疑似病例。

同時(shí)符合4.6或4.7的特征判斷為確診病例。

7預(yù)防和治療

7.1預(yù)防

加強(qiáng)飼養(yǎng)及環(huán)境衛(wèi)生管理，定期消毒，定期監(jiān)測。不從疫區(qū)或發(fā)病區(qū)引進(jìn)羊。羊只引進(jìn)后應(yīng)隔

離觀察并采取應(yīng)激預(yù)防措施，確保無病后方可混群。

7.2治療

7.2.1單一藥物治療：可使用阿米卡星、慶大霉素、紅霉素、美羅培能、氨芐西林舒巴坦、頭

孢他啶、替加環(huán)素、米諾環(huán)素等藥物，使用劑量參照說明書。