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實(shí)驗(yàn)室生物安全
LaboratoryBiosafety
2021/6/271目錄一、實(shí)驗(yàn)室生物安全概念二、實(shí)驗(yàn)室生物安全級別三、實(shí)驗(yàn)室生物安全設(shè)備四、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理2021/6/272實(shí)驗(yàn)室生物安全事件2003年以來,新加坡、臺(tái)灣和北京相繼發(fā)生實(shí)驗(yàn)室人員SARS病毒感染傳播事件。2021/6/273實(shí)驗(yàn)室生物安全事件歷史上,立克次體的命名。2021/6/274職業(yè)HIV感染OccupationallyacquiredAIDScasesorHIVinfectionsreportedinCDCthrough1992
OccupationNo.(%)ofoccupationaltransmissions
Laboratorytechnician25(24.8)Nurse26(25.7)Physician13(12.8)Medicaltechnician/paramedic7(6.9)Dentist/dentaltechnician6(5.9)Healthaide/attendant6(5.9)Housekeeper/maintenanceworker6(5.9)Morguetechnician3(3.0)Technician/therapist3(3.0)Respiratorytherapist2(2.0)Surgicaltechnician2(2.0)OtherHCW2(2.0)Total100
AdaptedfromD.L.Sewell,Clinicalmicrobiologyreviews,1995,389-4052021/6/275實(shí)驗(yàn)室生物安全事件布氏桿菌引起的實(shí)驗(yàn)室感染(北京,杭州)腎病綜合癥出血熱的實(shí)驗(yàn)室感染世界范圍內(nèi)共有126例感染。(自1985年)中國數(shù)次感染,導(dǎo)致曾經(jīng)一段時(shí)間的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物荒。2021/6/276實(shí)驗(yàn)室感染概況80%是不明原因的感染。20%感染的原因是明確的。80%是由工作人員操作失誤引起的;20%是由設(shè)備故障引起的。導(dǎo)致感染最多的4種實(shí)驗(yàn)室事故溢出和潑灑針頭和注射器銳器、碎玻璃動(dòng)物或動(dòng)物體外寄生蟲的咬傷或抓傷2021/6/277什么是生物危害?biohazard生物危害Biologicalhazard:指有害或有潛在危害的生物因子對人、環(huán)境、生態(tài)和社會(huì)造成的危害或潛在危害。Abiologicalhazardorbiohazardisanorganism,orsubstancederivedfromanorganism,thatposesathreattohumanhealth.2021/6/278Bioterrorismisterrorismbyintentionalreleaseordisseminationofbiologicalagents(bacteria,viruses,ortoxins);thesemaybeinanaturally-occurringorinahuman-modifiedform.Biologicalwarfare(BW),alsoknownasgermwarfare,istheuseofpathogens(bacteria,viruses,orotherdisease-causingagents)asbiologicalweapons(orbioweapons).2021/6/279實(shí)驗(yàn)室生物危害實(shí)驗(yàn)室生物危害:指在微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室研究過程中對人、環(huán)境、生態(tài)和社會(huì)造成的危害和對環(huán)境造成的污染。2021/6/2710生物安全的概念實(shí)驗(yàn)室生物安全概念:避免危險(xiǎn)生物因子造成實(shí)驗(yàn)室人員暴露,向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施。生物安全三個(gè)方面:
人類的健康安全;人類賴以生存的農(nóng)業(yè)生物安全;與人類生存有關(guān)的環(huán)境生物安全。生物安全涉及到多個(gè)學(xué)科和領(lǐng)域:預(yù)防醫(yī)學(xué)、環(huán)境保護(hù)、植物保護(hù)、野生動(dòng)物保護(hù)、生態(tài)、農(nóng)藥、林業(yè)等。2021/6/2711實(shí)驗(yàn)室生物安全的概念實(shí)驗(yàn)室生物安全主要考慮:通過在實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、使用個(gè)體防護(hù)設(shè)施、嚴(yán)格遵從標(biāo)準(zhǔn)化的工作及操作程序和規(guī)程等方面采取綜合措施,確保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對象的感染,確保周圍環(huán)境不受實(shí)驗(yàn)對象的污染。2021/6/2712二、實(shí)驗(yàn)室生物安全級別2021/6/2713感染性微生物的危險(xiǎn)度等級分類2021/6/2714BSC:生物安全柜;GMT:微生物學(xué)操作技術(shù)規(guī)范。BSL-4BSL-3BSL-2BSL-12021/6/2715生物安全水平分級根據(jù)生物因子危害程度和采取的防護(hù)措施,將生物安全防護(hù)水平(biosafetylevel,BSL)分為4級(BSL-1、BSL-2BSL-2、BSL-3、BSL-4表示);動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示。一級實(shí)驗(yàn)室一般適用于對健康成年人無致病作用的微生物;二級適用于對人和環(huán)境有中等潛在危害的微生物;三級適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素;四級適用于對人體具有高度的危險(xiǎn)性,通過汽溶膠途徑傳播或傳播途徑不明、目前尚無有效疫苗或治療方法的致病微生物或其毒素2021/6/2716一級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室
BSL-1
實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物,如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等。
E.coli2021/6/2717BSL-1實(shí)驗(yàn)室1)普通建筑物,防節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物。2)每個(gè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)洗手池,宜靠近出口處。3)實(shí)驗(yàn)室門口設(shè)掛衣裝置,個(gè)人便裝與工作服分開。4)實(shí)驗(yàn)室各表面平整、易清潔、不滲水、耐腐蝕。5)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面防水,耐腐蝕、耐熱。6)櫥柜和實(shí)驗(yàn)臺(tái)牢固,保持一定距離以便于清潔。7)如有可開啟的窗戶,應(yīng)設(shè)置紗窗。8)保證工作照明,避免不必要的反光和強(qiáng)光。9)有適當(dāng)?shù)南驹O(shè)備。2021/6/2718典型的一級生物安全水平實(shí)驗(yàn)室不需要特殊的一級和二級屏障、除需要洗手池外,依靠標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作即可獲得基本的防護(hù)水平。2021/6/2719二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室
BSL-2
實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。
hepatitisA,B,andC,influenzaA,Lymedisease,denguefever,Salmonella,mumps,Bacillussubtilis,measles,MRSA,VRSA
2021/6/2720BSL-2實(shí)驗(yàn)室1)滿足BSL-1的要求。2)實(shí)驗(yàn)室門帶鎖并可自動(dòng)關(guān)閉,門應(yīng)有可視窗。3)應(yīng)有足夠的存儲(chǔ)空間擺放物品以方便使用。在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域外還應(yīng)當(dāng)有供長期使用的存儲(chǔ)空間。4)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用專門的工作服,戴乳膠手套。5)在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域外有存放個(gè)人衣物的條件。2021/6/2721BSL-2實(shí)驗(yàn)室6)建筑內(nèi)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器。7)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配備生物安全柜。8)設(shè)洗眼設(shè)施,必要時(shí)應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。9)通風(fēng),如使用窗戶自然通風(fēng)應(yīng)有防蟲紗窗。10)有可靠的電力和應(yīng)急照明,必要時(shí)設(shè)備用電源。11)實(shí)驗(yàn)室出口有在黑暗中可明確辨認(rèn)的標(biāo)識(shí)。2021/6/2722BSL-2實(shí)驗(yàn)室在處理危險(xiǎn)度2級或更高危險(xiǎn)度級別的微生物時(shí),在實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國際通用的生物危害警告標(biāo)志。2021/6/2723典型的二級生物安全水平實(shí)驗(yàn)室2021/6/2724三級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室BSL-3
實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有預(yù)防傳染的疫苗。
anthrax;WestNilevirus;Easternequineencephalitis;SARS;tuberculosis;RockyMountainspottedfever;andyellowfever.
2021/6/2725BSL-3實(shí)驗(yàn)室在建筑物中自成隔離區(qū)或?yàn)楠?dú)立建筑物。由清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)組成。污染區(qū)和半污染區(qū)之間應(yīng)設(shè)緩沖間。污染區(qū)與半污染區(qū)之間、半污染區(qū)和清潔區(qū)之間應(yīng)設(shè)置傳遞窗。我國的第一個(gè)P3實(shí)驗(yàn)室建于1987年,當(dāng)時(shí)主要用于艾滋病研究。2021/6/2726某 BSL3實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)圖2021/6/2727BSL-3實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)表面應(yīng)光滑、耐腐蝕、防水;所有縫隙應(yīng)可靠密封,防震、防火。圍護(hù)結(jié)構(gòu)外圍墻體應(yīng)有適當(dāng)?shù)目拐鸷头阑鹉芰?。天花板、地板、墻間交角均為圓弧形且可靠密封。不應(yīng)有可開窗戶;內(nèi)設(shè)窗戶應(yīng)防破碎、防漏氣。出入口處應(yīng)采用防止節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物的設(shè)計(jì)。2021/6/2728BSL-3實(shí)驗(yàn)室送排風(fēng)系統(tǒng)獨(dú)立的送排風(fēng)系統(tǒng)以控制氣流方向和壓力梯度。送風(fēng)口和排風(fēng)口的布置對面分布,上送下排。送排風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)為直排式,不得采用回風(fēng)系統(tǒng)。應(yīng)安裝風(fēng)機(jī)和生物安全柜啟動(dòng)自動(dòng)聯(lián)鎖裝置。2021/6/2729BSL-3實(shí)驗(yàn)室環(huán)境參數(shù)相對室外大氣壓,污染區(qū)為-40Pa,并與生物安全柜等裝置內(nèi)氣壓保持安全合理壓差。2021/6/2730BSL-3實(shí)驗(yàn)室其他實(shí)驗(yàn)室所需壓力設(shè)備不應(yīng)影響室內(nèi)負(fù)壓梯度。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置通訊系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)記錄等資料應(yīng)通過計(jì)算機(jī)等發(fā)送至實(shí)驗(yàn)室外。清潔區(qū)設(shè)置淋浴裝置。2021/6/2731典型的三級生物安全水平實(shí)驗(yàn)室2021/6/2732四級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室BSL-4
實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人體具有高度的危險(xiǎn)性,通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明,目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。
BolivianandArgentinehemorrhagicfevers,Marburgvirus;Ebolavirus;Lassafever;Crimean-Congohemorrhagicfever,andothervarioushemorrhagicdiseases.2021/6/2733BSL-4實(shí)驗(yàn)室P4實(shí)驗(yàn)室是指生物安全四級實(shí)驗(yàn)室,專門用于開展烈性傳染病的研究,是全球生物安全最高級別的實(shí)驗(yàn)室,目前國內(nèi)尚無一家。P4實(shí)驗(yàn)室的安全措施比P3實(shí)驗(yàn)室更嚴(yán)格,研究人員入內(nèi)不僅要穿全封閉的防護(hù)服,還要攜帶氧氣瓶。中國軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院在建準(zhǔn)P4實(shí)驗(yàn)室。中科院武漢病毒所P4實(shí)驗(yàn)室2010年完成。2021/6/2734與外界溝通2021/6/2735動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的生物安全參照BSL1-4實(shí)驗(yàn)室的要求,還應(yīng)考慮動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程產(chǎn)生的潛在生物危害的防護(hù)。應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的種類、身體大小、生活習(xí)性、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡冗x擇專用于動(dòng)物的生物安全柜、動(dòng)物飼養(yǎng)設(shè)施、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施、消毒設(shè)施和清洗設(shè)施等。
2021/6/2736生物安全設(shè)備分類1.超凈臺(tái)2.通風(fēng)櫥3.生物安全柜
2021/6/2737
超凈臺(tái)正壓柜氣流從頂部或底部經(jīng)過過濾器后從操作區(qū)正面流向工作臺(tái)面,被樣品污染的氣流排出柜外,沒有循環(huán)氣流。超凈臺(tái)保護(hù)樣品不受污染,適用于普通實(shí)驗(yàn)室或1級生物安全水平中對人員和環(huán)境無保護(hù)要求的實(shí)驗(yàn)。
2021/6/2738通風(fēng)櫥是實(shí)驗(yàn)室,特別是化學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種大型設(shè)備。用途是減少實(shí)驗(yàn)者和有害氣體的接觸。通風(fēng)櫥是保護(hù)人員防止有毒化學(xué)煙氣危害的一級屏障。它可以作為作為重要的安全后援設(shè)備,像在化學(xué)實(shí)驗(yàn)過程失敗,化學(xué)煙霧、塵埃和有毒氣體產(chǎn)生時(shí)有效排出有害氣體,保護(hù)工作人員和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。
2021/6/2739生物安全柜BiologicalSafetyCabinets生物安全柜的要求:顆粒經(jīng)HEPA過濾去除氣流為層流氣流有方向HEPA(HighefficiencyparticulateairFilter),高效空氣過濾器,達(dá)到HEPA標(biāo)準(zhǔn)的過濾網(wǎng),對于0.1um和0.3um的有效率達(dá)到99.998%,HEPA網(wǎng)的特點(diǎn)是空氣可以通過,但細(xì)小的微粒卻無法通過。2021/6/2740ClassI生物安全柜可開啟前窗在負(fù)壓下操作表面風(fēng)速在0.36m/s,排出的氣體經(jīng)HEPA過濾保護(hù)操作人員和環(huán)境適用于要求生物安全等級1、2、3的工作適用于樣品不需保護(hù)的實(shí)驗(yàn)工作2021/6/2741ClassII生物安全柜2021/6/2742所有的二級生物安全柜同一級生物安全柜一樣,能夠保護(hù)操作人員和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境免受危害。二級安全柜也能夠保護(hù)產(chǎn)品樣本在微生物操作過程中免受污染。二級生物安全柜可以在一、二、三級生物安全水平的生物因子操作中使用。2021/6/2743ClassII生物安全柜的分類2021/6/2744ClassII生物安全柜空氣流向2021/6/2745
CLASSIII生物安全柜(手套柜)
全封閉的、氣密結(jié)構(gòu)的通風(fēng)柜;通過橡膠手套進(jìn)行操作;柜內(nèi)保持至少120Pa的負(fù)壓;供氣通過HEPA抽入內(nèi);外排的氣流經(jīng)過雙層HEPA過濾或經(jīng)HEPA后再經(jīng)燃燒處理。
CLASSIII型BSC適用于BSL3、BSL4的生物實(shí)驗(yàn)。
2021/6/2746生物安全柜放置五個(gè)遠(yuǎn)離點(diǎn)(氣流)門風(fēng)扇空調(diào)開著的窗戶人員活動(dòng)頻繁的區(qū)域擺放要求穩(wěn)固的平臺(tái)或支架兩側(cè)、后面和上端留30cmAirRegister設(shè)備首選位置候選位置工作臺(tái)設(shè)備2021/6/2747反面教材2021/6/2748生物安全柜的使用操作者在移動(dòng)雙臂進(jìn)出安全柜時(shí),應(yīng)該垂直地緩慢進(jìn)出前面的開口。Ⅱ級生物安全柜前面的進(jìn)氣格柵不能被阻擋。放入柜內(nèi)的物品應(yīng)采用70%酒精來清除表面污染。2021/6/2749生物安全柜的使用所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺(tái)后部靠近工作臺(tái)后緣的位置,并使其在操作中不會(huì)阻擋后部格柵??僧a(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備(例如混勻器、離心機(jī)等)應(yīng)靠近安全柜的后部放置。廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品,應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè)。2021/6/2750生物安全柜的使用干凈的物品理想的工作臺(tái)擺放被污染的區(qū)域廢棄物托盤垃圾袋2021/6/2751生物安全柜內(nèi)接種針的滅菌紅外電熱接種環(huán)滅菌器2021/6/2752生物安全柜的使用在每次使用前后,要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺(tái)面和內(nèi)壁要用消毒劑進(jìn)行擦拭,所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里任何微生物。在使用生物安全柜時(shí)應(yīng)穿著個(gè)體防護(hù)服。在進(jìn)行一級和二級生物安全水平的操作時(shí),可穿著普通實(shí)驗(yàn)服。2021/6/2753高效空氣過濾工作人員安全無渦流單向流空氣實(shí)驗(yàn)對象不受污染手套箱式操作口通風(fēng)櫥無是是否否I級有是否否否II級有是是是否III級有是是是是生物安全裝置異同2021/6/2754對各級生物安全水平實(shí)驗(yàn)室的要求生物安全柜生物安全級別一級二級三級四級Ⅰ級不需要隨意需要不需要Ⅱ級不需要最好有需要需要,在防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室中使用Ⅲ級不需要不需要最好有需要,在安全柜室使用2021/6/2755個(gè)人防護(hù)裝備實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服面部及身體保護(hù)手套鞋呼吸防護(hù)2021/6/2756個(gè)體防護(hù)裝備
裝備避免的危害安全性特征實(shí)驗(yàn)服、隔離衣、連體衣污染衣服·背面開口
·罩在日常服裝外塑料圍裙污染衣服·防水鞋襪碰撞和噴濺·不露腳趾護(hù)目鏡碰撞和噴濺·防碰撞鏡片(必須有視力校正或外戴視力校正眼鏡)
·側(cè)面有護(hù)罩安全眼鏡碰撞·防碰撞鏡片(必須有視力校正)
·側(cè)面有護(hù)罩面罩碰撞和噴濺·罩住整個(gè)面部
·發(fā)生意外時(shí)易于取下2021/6/2757個(gè)體防護(hù)裝備
裝備避免的危害安全性特征防毒面具吸入氣溶膠·在設(shè)計(jì)上包括一次性使用的、整個(gè)面部或一半面部空氣凈化的、整個(gè)面部或加罩的動(dòng)力空氣凈化(poweredairpurifying,PAPR)的以及供氣的防毒面具手套直接接觸微生物·得到微生物學(xué)認(rèn)可的一次性乳劃破膠、乙烯樹脂或聚腈類材料
·保護(hù)手
·網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)
2021/6/2758四、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理
實(shí)驗(yàn)室及其人員生物安全管理,按國務(wù)院令(第424號(hào))《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》于2004年11月起施行。2021/6/2759管理制度實(shí)驗(yàn)室內(nèi)設(shè)置和準(zhǔn)入在主實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)合理設(shè)置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)。非實(shí)驗(yàn)有關(guān)人員和物品不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室工作人員、外來合作者、進(jìn)修和學(xué)習(xí)人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室及其崗位之前必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室主任的批準(zhǔn)。2021/6/2760實(shí)驗(yàn)室工作人員資格和培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須是受過專業(yè)教育的技術(shù)人員。在獨(dú)立工作前須在中高級實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員指導(dǎo)下進(jìn)行上崗培訓(xùn),達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn),方可開始工作實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須被告知實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)并接受實(shí)驗(yàn)室安全教育,自愿從事實(shí)驗(yàn)室工作實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的所有制度、規(guī)定和操作規(guī)程2021/6/2761實(shí)驗(yàn)室特殊管理對可能的危險(xiǎn)因素,制定保證安全的工作程序。事前進(jìn)行有效的培訓(xùn)和模擬訓(xùn)練。對于意外事故要能夠提供包括緊急救助或?qū)I(yè)性保健治療的措施,足以應(yīng)付緊急情況。實(shí)驗(yàn)室事故處理及上報(bào)。2021/6/2762實(shí)驗(yàn)室生物安全管理制度實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度尖銳器具安全使用制度實(shí)驗(yàn)室消毒防護(hù)制度標(biāo)本采集運(yùn)輸制度廢棄物處理制度工作人員防護(hù)制度差錯(cuò)事故處理制度2021/6/2763什么是醫(yī)療廢物?醫(yī)療廢物:醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)在醫(yī)療、預(yù)防、保健以及其他相關(guān)活動(dòng)中產(chǎn)生的具有直接或者間接感染性、毒性以及其他危害性的廢物。2021/6/2764醫(yī)療廢物分類感染性廢物病理性廢物損傷性廢物藥物性廢物化學(xué)性廢物2021/6/2765處置要點(diǎn)醫(yī)療廢物集中處置包裝物要防滲漏、防銳器穿透,明顯標(biāo)識(shí)
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