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PAGEPAGE6課題1微生物的試驗室培育(建議用時:30分鐘)考點基本目標發(fā)展目標1.微生物培育基的種類及功能1,2,311,12,13,14,152.無菌技術(shù)4,5,6,73.制備牛肉膏蛋白胨固體培育基84.純化大腸桿菌的兩種接種方法的比較9,10[基本目標]1.不同的微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的需求各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物的養(yǎng)分物質(zhì)的描述中,不正確的是()A.氮源物質(zhì)為該微生物供應(yīng)必要的氮元素B.碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C.水是該微生物的養(yǎng)分要素之一D.無機鹽是該微生物不行缺少的養(yǎng)分物質(zhì)B解析對于無機碳源CO2來說,只能作為碳源物質(zhì)而不能作為能源物質(zhì)。2.自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培育基的主要差別是()A.碳源 B.氮源C.無機鹽 D.生長因子A解析自養(yǎng)微生物能夠利用二氧化碳和水合成有機物,不利用現(xiàn)成的含碳有機物,而異養(yǎng)微生物只能利用現(xiàn)成的含碳有機物,所以它們的培育基的主要差別是碳源不同。3.微生物培育過程中,肉眼鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據(jù)是()A.細菌的大小、形態(tài)、顏色B.菌落的大小、形態(tài)、顏色C.有無鞭毛D.培育基的不同B解析微生物的鑒別與分別一般要用固體培育基,由于不同微生物在固體培育基上長出菌落的形態(tài)、顏色等各不相同,所以可以作為鑒別的標準。而一個細菌細胞很小,肉眼無法看到其顏色、形態(tài)等。4.在微生物的試驗室培育中,下列各項操作中不須要在無菌條件下進行的是()A.配制培育基 B.倒平板C.接種 D.培育A解析配制培育基時不須要無菌操作,因為配制后的培育基須要進行高壓蒸汽滅菌。5.以下部位不含有微生物的是()A.洗干凈的臉上B.洗完澡后的皮膚C.刷完牙后的口腔D.灼燒之后的接種環(huán)D解析用清水洗臉、洗澡、刷牙只是起清潔作用,達不到滅菌效果,只有灼燒過的接種環(huán)才是真正無菌的。6.消毒和滅菌是兩個不同的概念,滅菌是指徹底殺滅微生物使其恒久丟失生長繁殖的實力,消毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害。下列哪些事物適用于消毒處理()①皮膚②飲用水③牛奶④注射器⑤培育皿⑥接種環(huán)⑦培育基⑧果汁⑨醬油⑩手術(shù)刀A.①②③⑧⑨ B.④⑤⑥⑦⑩C.①②④⑤⑥⑧ D.以上全部A解析消毒指用比較溫柔的方法殺死微生物的養(yǎng)分細胞,適用于那些不耐高溫的液體,如③牛奶、⑧果汁、⑨醬油,這樣可以使其中的養(yǎng)分成分不被破壞;另外對要求不是很嚴格的,如①皮膚、②飲用水,也用消毒的方法處理。而對于④注射器、⑤培育皿、⑥接種環(huán)、⑦培育基、⑩手術(shù)刀等,必需進行滅菌處理。7.金黃色葡萄球菌有很強的致病性,還可能引起食物中毒。下述試驗結(jié)束后的做法錯誤的是()A.對接種環(huán)進行灼燒處理B.帶菌培育基須經(jīng)加熱后才能倒掉C.帶菌培育基須經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉D.接種后雙手須經(jīng)肥皂洗凈,再用70%的酒精棉球擦拭B解析加熱不肯定能完全殺滅金黃色葡萄球菌的孢子和芽孢,所以帶菌培育基須要滅菌,不能加熱后倒掉。8.牛肉膏蛋白胨培育基中需加入瓊脂這一志向的凝固劑,下列關(guān)于瓊脂的說法,不正確的是()A.不被所培育的微生物分解利用,對所培育的微生物無毒害作用B.在微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)C.瓊脂凝固點低,利于微生物的生長D.瓊脂在滅菌過程中不會被破壞,透亮度好,凝固力強C解析在液體培育基中加入凝固劑如瓊脂后,可制成瓊脂固體培育基,它是試驗室中最常用的培育基之一。固體培育基中可形成肉眼可見的單個細胞繁殖而來的子細胞群體,即菌落,用于微生物的分別、計數(shù)和菌種鑒定等。瓊脂作為一種志向的凝固劑,是由其性質(zhì)確定的,瓊脂不會被微生物利用且對微生物無毒害作用;只起固化作用,對微生物的生長不會產(chǎn)生作用;在滅菌過程中不會被破壞,透亮度好,凝固力強;瓊脂在98℃以上可溶解于水,在45℃以下凝固,所以在微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)。9.在微生物的試驗室培育過程中,下列關(guān)于平板劃線操作的敘述,正確的是()A.運用已滅菌的接種環(huán)、培育皿,操作過程中不再滅菌B.打開含菌種的試管須要通過火焰滅菌,取出菌種后需立刻塞好棉塞C.將沾有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線即可D.最終應(yīng)將平板倒置,放入培育箱中培育D解析運用已滅菌的接種環(huán)、培育皿,操作過程中仍要滅菌;打開含菌種的試管須要通過火焰滅菌,取出菌種后含菌種的試管須要再次通過火焰滅菌后再塞好棉塞;將沾有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線后灼燒接種環(huán),冷卻后從第一區(qū)劃線末端起先向其次區(qū)域內(nèi)劃線,重復(fù)上述過程,完成三、四、五區(qū)域內(nèi)的劃線,留意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)的相連;為防止皿蓋上的水珠落入培育皿造成污染,應(yīng)將平板倒置,放入恒溫培育箱中培育。10.平板劃線法和稀釋涂布平板法是常用的兩種接種方法。下列相關(guān)敘述中錯誤的是()A.平板劃線法要求連續(xù)多劃幾次,且除了第一次劃線外,每一次劃線的起點都是上一次劃線的終點B.除了第一次劃線須要將接種環(huán)灼燒滅菌外,以后的劃線不用滅菌即可劃線C.假如菌液原來濃度不高,則可以適當降低稀釋倍數(shù)D.充分稀釋和連續(xù)劃線的目的都是為了使形成的菌落是由單個細菌繁殖而成B解析平板劃線法連續(xù)劃線的目的是降低細菌的濃度,所以除了第一次劃線外,以后每次劃線的起點都是上一次劃線的終點,A項正確;每一次劃線后灼燒的目的是殺死接種環(huán)上殘留的菌種,使每次劃線的菌種都來自上次劃線末端,B項錯誤;稀釋倍數(shù)要依據(jù)菌液的濃度而定,假如菌液的濃度太大,則須要更高的稀釋倍數(shù),否則就可以適當降低稀釋的倍數(shù),C項正確;稀釋涂布平板法中的充分稀釋及平板劃線法中的連續(xù)劃線,目的都是為了保證菌落是由單個細菌繁殖而成,D項正確。[發(fā)展目標]11.下列有關(guān)微生物試驗室培育的敘述,不正確的是()A.在熔化瓊脂時,須要限制火力并不斷攪拌,以免發(fā)生焦糊B.灼燒、高壓蒸汽滅菌、紫外線照耀等都屬于無菌技術(shù)C.樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計時,接種方法應(yīng)采納劃線法D.用平板培育基培育微生物時,應(yīng)將平板倒過來放置C解析瓊脂熔化時簡單糊底,須要用玻璃棒不斷攪拌,以免發(fā)生焦糊;灼燒、高壓蒸汽滅菌屬于滅菌,紫外線照耀是常用的消毒方法,都屬于無菌技術(shù);統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)量時,接種方法應(yīng)采納稀釋涂布平板法;用平板培育基培育微生物時,應(yīng)將平板倒過來放置,防止冷凝水污染培育基。12.為了保持菌種的純凈,須要進行菌種的保藏,下列有關(guān)敘述不正確的是()A.對于頻繁運用的菌種,可以采納臨時保藏的方法B.臨時保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培育基上C.臨時保藏的菌種簡單被污染或產(chǎn)生變異D.對于須要長期保存的菌種,可以采納低溫-4℃保藏的方法D解析對于須要長期保存的菌種,可采納甘油管藏法,即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后滅菌,將1mL培育的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在-20℃的冷凍箱中保存。13.為探究大葉木姜子多糖的抑菌效果,探討人員將下列4種菌分別用無菌水稀釋成菌懸液,于固體培育基上制成含菌平皿,在平皿上放置經(jīng)不同濃度大葉木姜子多糖溶液浸泡2~3小時的濾紙片,培育一段時間后,測定各供試菌的抑菌圈直徑,結(jié)果如下表。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.金黃色葡萄球菌與另外三種菌的主要區(qū)分是沒有核膜B.制備含菌平皿可用稀釋涂布平板法或平板劃線法C.每個濃度每種菌重復(fù)多次試驗,所得數(shù)據(jù)取平均值D.大葉木姜子多糖對黑曲霉抑制效果最差B解析金黃色葡萄球菌屬于細菌,沒有核膜包被的細胞核,其余三種微生物都是真菌,A項正確;依據(jù)題干,接種運用的是菌懸液,探究的是大葉木姜子多糖的抑菌效果,應(yīng)當運用稀釋涂布平板法接種,B項錯誤;為避開試驗誤差,每個濃度每種菌重復(fù)多次試驗,所得數(shù)據(jù)取平均值,C項正確;黑曲霉在含有不同濃度的大葉木姜子多糖的濾紙上產(chǎn)生的抑菌圈的直徑最小,抑制效果最差,D項正確。14.為了檢測飲用水中是否含有某種細菌,配制的培育基的配方如下:蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊紅美藍蒸餾水10g5g5g2g0.4g0.065g1000ml將培育基pH調(diào)至7.2(1)該培育基所含碳源有____________________________,其功能是____________________________________________________________。(2)該培育基所含氮源有________,其功能是_______________________________。(3)該培育基除含碳源、氮源外,還含有微生物須要的養(yǎng)分物質(zhì)是_____________。(4)該細菌在同化作用上的代謝類型是________型。(5)該培育基可用來鑒別哪種細菌()A.霉菌 B.酵母菌C.大腸桿菌 D.乳酸菌解析依據(jù)培育基的配方,該培育基用于培育異養(yǎng)微生物,含C、H、O、N的蛋白胨既是碳源,又是氮源。培育微生物需碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子等養(yǎng)分物質(zhì)。各種微生物繁殖的最適pH是不同的,大多數(shù)細菌相宜在中性至微堿性(pH為7.0~7.5)環(huán)境中生長,而酵母菌和霉菌則相宜在偏酸性(pH為4.5~6.0)環(huán)境中生長,伊紅—美藍培育基可用來鑒定是否含有大腸桿菌。答案(1)乳糖、蔗糖、蛋白胨主要用于構(gòu)成微生物的細胞物質(zhì)和供應(yīng)能源物質(zhì)(2)蛋白胨主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物(3)水、無機鹽(或K2HPO4)(4)異養(yǎng)(5)C15.據(jù)報道,從部分企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品中檢出葡萄球菌超標,“細菌門”事務(wù)引起公眾普遍關(guān)注。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂,在含卵黃的固體培育基上形成的菌落四周會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。某愛好小組欲檢測某果汁類食品中是否含有葡萄球菌,進行了如下試驗?;卮鹣铝袉栴}:(1)配制培育基:稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂等,加入蒸餾水,攪拌加熱至完全溶解后調(diào)整pH,分裝到錐形瓶后進行____________,在無菌狀態(tài)下加入卵黃液搖勻后馬上倒平板。培育基中的牛肉膏和蛋白胨為葡萄球菌生長和繁殖供應(yīng)____________________________。葡萄球菌能耐受高濃度的NaCl溶液,所以在配制培育基時加入高濃度的NaCl溶液可以將它分別出來,此培育基屬于________培育基。(2)接種:取待檢測果汁2.5mL加入22.5mL滅菌生理鹽水,制成接種樣液。①試驗組:將接種樣液用平板劃線法接種在含卵黃的固體培育基上。②比照組:將______________用平板劃線法接種在含卵黃的固體培育基上或不接種作為________比照。(3)培育:將上述接種后的培育皿同時放在36℃(4)視察:培育基表面______________________。(5)結(jié)論:①若培育基上________________________,則該果汁類食品中含有葡萄球菌。②若培育基上________________________,則該果汁類食品中不含有葡萄球菌。解析(1)培育基的制備流程:計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。培育基中的牛肉膏可以為葡萄球菌的生長和繁殖供應(yīng)氮源、磷酸鹽和維生素,蛋白胨可以為葡萄球菌的生長和繁殖供應(yīng)碳源、氮源和維生素。加入高濃度NaCl溶液的培育基可以抑制大多數(shù)微生物的生長繁殖,因此該培育基屬于選擇培育基。(2)比較試驗組和比照組可知,試驗的自變量為是否接種樣液。比照組接種無菌生理鹽水,或不接種,為空白
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