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第四章骨髓其他檢查編輯制作陳婷梅第四章骨髓其他檢查第一節(jié)

骨髓組織病理學(xué)檢查骨髓活體組織檢查(骨髓活檢),是觀察骨髓組織結(jié)構(gòu)、補(bǔ)充骨髓涂片檢查的一種方法。受干抽和稀釋的影響小,能通曉骨髓組織病理學(xué)全貌,對(duì)某些血液疾病、骨髓局灶性病變?yōu)樘卣鞯募膊?,如再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征、骨髓纖維化、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、轉(zhuǎn)移瘤、淀粉樣變性等,骨髓活檢尤為重要。第四章骨髓其他檢查骨髓穿刺和骨髓活檢比較骨髓穿刺骨髓活檢取材方式用骨髓穿刺針抽吸骨髓液,涂片行瑞-姬染色后備檢用骨髓活檢針取得一條骨髓組織,固定包埋切片后行姬姆薩等染色后備檢優(yōu)點(diǎn)1.操作較簡(jiǎn)便2.涂片中細(xì)胞分布均勻,胞體舒展,染色良好,較易分辨各系原始和幼稚細(xì)胞及其微細(xì)結(jié)構(gòu)3.易于識(shí)別巨型變,巨幼樣變和小巨核細(xì)胞4.細(xì)胞化學(xué)染色效果好,結(jié)果可量化1.保持造血組織的天然結(jié)構(gòu),便于判斷紅髓和脂肪組織的比例2.可全面了解骨髓增生程度,有核細(xì)胞密度及其布局3.可避免骨髓稀釋4.對(duì)骨髓纖維化、毛細(xì)胞白血病有確診作用,能提示骨髓增生異常綜合征向急性粒細(xì)胞白血病的轉(zhuǎn)化,對(duì)“干抽”有鑒別作用缺點(diǎn)1.造血組織的天然結(jié)構(gòu)遭到破壞,無(wú)法判斷紅髓與黃髓的比例2.若抽吸過(guò)猛,易致骨髓液稀釋3.若遇“干抽”不能分析1.有核細(xì)胞群集,不易區(qū)分原始和幼稚細(xì)胞的類型2.難以觀察細(xì)胞內(nèi)的微細(xì)結(jié)構(gòu)3.細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果難以量化第四章骨髓其他檢查一、骨髓活檢的適應(yīng)證第四章骨髓其他檢查二、骨髓活檢標(biāo)本的制備和觀察采用髂后上棘,皮膚經(jīng)消毒、采用髂后上棘,皮膚經(jīng)消毒局麻后,將套上針芯的的骨髓活檢針加壓刺過(guò)皮膚,進(jìn)入骨皮質(zhì),感覺阻力減弱再推進(jìn)1cm左右,抽出針芯,骨髓抽吸涂片;套上活動(dòng)套管,插回針芯,再將活檢針推進(jìn)2~3cm,針管順時(shí)針和逆時(shí)針各旋轉(zhuǎn)3~5圈,使針管內(nèi)的骨髓組織與周圍脫離;拔出活檢針,取出活動(dòng)套管,插入針芯推出骨髓組織,標(biāo)本立即放入Bouin固定液后送檢。取材主要制備程序包括固定、脫水、塑料包埋以及切片。骨髓活組織切片的染色除可采用常規(guī)的Giemsa染色、MGG染色、HGF染色以及HE染色外,還可進(jìn)行一些特殊染色。標(biāo)本制備和染色紅系在骨髓組織中成簇存在,位于小梁間區(qū)靜脈竇四周,其中央有一至兩個(gè)巨噬細(xì)胞。原始粒細(xì)胞和早幼粒細(xì)胞一般單個(gè)散在分布,分布于骨小梁旁區(qū);巨核細(xì)胞位于小梁間區(qū),在血竇附近單個(gè)存在,不發(fā)生群集現(xiàn)象。淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、單核細(xì)胞常定位于造血組織的小動(dòng)脈和小靜脈四周。血細(xì)胞定位第四章骨髓其他檢查三、骨髓活檢切片的檢查(一)切片與涂片的血細(xì)胞形態(tài)學(xué)比較由于半薄切片僅切下胞體的某一切面,在顯微鏡下觀察骨髓切片上的單個(gè)血細(xì)胞形態(tài)時(shí),其形態(tài)呈現(xiàn)與骨髓涂片不同的特點(diǎn)(二)骨髓活檢切片的觀察內(nèi)容骨髓組織活檢切片的觀察內(nèi)容主要包括骨小梁—骨髓造血組織—脂肪組織的全面觀察、造血細(xì)胞的形態(tài)與定位、間質(zhì)結(jié)構(gòu)的觀察,切片內(nèi)有無(wú)人為所致的骨髓形態(tài)改變以及外來(lái)惡性細(xì)胞等。(三)骨髓活檢切片觀察的結(jié)論1.活檢切片內(nèi)出現(xiàn)顯著的特征性改變,且與骨髓涂片完全吻合,即可得出明確的診斷性意見。2.切片見非特異性組織形態(tài)改變,而不能作肯定或否定意見,可描述組織形態(tài)學(xué),提出補(bǔ)充檢查建議。3.切片活組織像在正常范圍內(nèi),可報(bào)告為“正?;虼笾抡5墓撬杌罱M織像”。第四章骨髓其他檢查四、常見血液系統(tǒng)疾病的骨髓活檢特點(diǎn)(一)骨髓活檢的臨床價(jià)值1.全面了解骨髓的組織結(jié)構(gòu)、間質(zhì)成分的組織病理學(xué)全貌,準(zhǔn)確判斷骨髓增生程度、粒/紅比例及骨髓內(nèi)鐵儲(chǔ)存情況,對(duì)于某些血液病有明確的診斷價(jià)值。2.發(fā)現(xiàn)骨髓穿刺涂片檢查不易發(fā)現(xiàn)的病理變化,對(duì)某些僅能導(dǎo)致骨髓局部病變?yōu)樘卣鞯募膊∪绻撬枥w維化、骨髓壞死、淀粉樣變性、肉芽腫病及多發(fā)性骨髓瘤等,骨髓活檢尤為重要。。3.為明確“干抽”原因,探討其是否為骨髓增生低下、骨髓纖維組織增生、或髓腔因增生極度活躍引起“塞實(shí)”所致,骨髓活檢具有重要意義。4.對(duì)各種急、慢性白血病和骨髓增生異常綜合征的確診和預(yù)后判斷有重要價(jià)值,對(duì)骨髓轉(zhuǎn)移癌、惡性組織細(xì)胞病、戈謝病和尼曼一匹克病等的診斷陽(yáng)性率比骨髓涂片高。5.協(xié)助診斷慢性骨髓增生性疾病,如真性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥等。第四章骨髓其他檢查(二)常見血液系統(tǒng)疾病的骨髓活檢特點(diǎn)1.紅細(xì)胞系增生異常骨髓活檢標(biāo)本中粒/紅比值小于1.5∶1,且細(xì)胞增生明顯活躍,即為紅細(xì)胞系增生活躍。2.粒細(xì)胞系增生異常如果粒/紅比值升高,而且骨髓切片中原始細(xì)胞占優(yōu)勢(shì),以急性白血病最為常見。3.淋巴細(xì)胞系增生異常骨髓活檢對(duì)惡性淋巴瘤分型以及是否累及骨髓是必不可少的,霍奇金病骨髓浸潤(rùn)活檢可發(fā)現(xiàn)R-S細(xì)胞;非霍奇金淋巴瘤的瘤細(xì)胞多數(shù)呈灶狀分布,浸潤(rùn)病變區(qū)均見纖維增生,即合并骨髓纖維化,較典型癌細(xì)胞可分為四種類型。4.其他造血系統(tǒng)疾?。?)骨髓增生異常綜合征(MDS)(2)多發(fā)性骨髓瘤(3)惡性組織細(xì)胞?。?)骨髓纖維化第四章骨髓其他檢查第二節(jié)

造血干/祖細(xì)胞體外半固體培養(yǎng)第四章骨髓其他檢查粒-單核系祖細(xì)胞培養(yǎng)

體外經(jīng)過(guò)分離獲得的單個(gè)造血干/祖細(xì)胞在造血生長(zhǎng)因子作用下,在半固體瓊脂上形成由不同成熟階段的粒細(xì)胞和單核細(xì)胞組成的細(xì)胞集落,稱為粒-單系集落形成單位(CFU-GM)。第四章骨髓其他檢查紅系祖細(xì)胞培養(yǎng)

紅系祖細(xì)胞培養(yǎng)包括早期紅系祖細(xì)胞(BFU-E)和晚期紅系祖細(xì)胞(CFU-E)。在培養(yǎng)體系中以甲基纖維素為支持物,在適量HGFs刺激下,使骨髓中造血干/祖細(xì)胞形成BFU-E和CFU-E,CFU-E的集落培養(yǎng)所用HGFs主要為EPO,BFU-E的集落培養(yǎng)主要聯(lián)合應(yīng)用EPO、IL-3。第四章骨髓其他檢查巨核系祖細(xì)胞培養(yǎng)

巨核系祖細(xì)胞(CFU-Meg,BFU-Meg)包括幼稚巨核系祖細(xì)胞的爆式集落形成單位(BFU-MK)和成熟巨核系祖細(xì)胞的集落形成單位(CFU

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