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分子生物學復習重點第一章1、蛋白質的三維結構稱為構象(conformation),指的是蛋白質分子中所有原子在三維空間中的排布,并不涉及共價鍵的斷裂和生成所發(fā)生的變化。2、維持和穩(wěn)定蛋白質高級結構的因素有共價鍵(二硫鍵)和次級鍵,次級鍵有4種類型,即離子鍵、氫鍵、疏水性相互作用和范德瓦力。3、蛋白質的二級結構是指肽鏈中局部肽段的構象,它們是完整肽鏈構象(三級結構)的結構單元,是蛋白質復雜的立體結構的基礎,因此二級結構也可以稱為構象單元。α螺旋、β折疊是常見的二級結構。4、一些肽段有形成α螺旋和β折疊兩種構象的可能性(或形成勢),這類肽段被稱為兩可肽。5、兩個或幾個二級結構單元被連接肽段連接起來,進一步組合成有特殊幾何排列的局域立體結構,稱為超二級結構(介于二、三級結構間)。超二級結構的基本組織形式有αα,βαβ和ββ等3類6、蛋白質家族(family):一類蛋白質的一級結構有30%以上同源性,或一級結構同源性很低,但它們的結構和功能相似,它們也屬于同一家族。例如球蛋白的氨基酸序列相差很大,但屬于同一家族。超家族(superfamily):有些蛋白質家族之間,一級結構序列的同源性較低,但在許多情況下,它們的結構和功能存在一定的相似性。這表明它們可能存在共同的進化起源。這些蛋白質家族屬于同一超家族。7、結構域是一個連貫的三維結構,是可互換并且半獨立的功能單位,在真核細胞中由一個外顯子編碼,由至少40個以上多至200個殘基構成最小、最緊密也最穩(wěn)定的結構,作為結構和功能單位,會重復出現(xiàn)在同一蛋白質或不同蛋白質中。8、蛋白質一級結構所提供的信息有哪些?α螺旋、β折疊各自的特點?第二章1、DNA是由脫氧核糖核苷酸組成的長鏈多聚物,是遺傳物質。具有下列基本特性:①具有穩(wěn)定的結構,能進行復制,特定的結構能傳遞給子代;②攜帶生命的遺傳信息,以決定生命的產(chǎn)生、生長和發(fā)育;③能產(chǎn)生遺傳的變異,使進化永不枯竭。2、DNA鏈的方向總是理解為從5’—P端到3’—OH端。DNA的一級結構實際上就是DNA分子內堿基的排列順序。3、DNA是雙螺旋結構:主鏈由脫氧核糖和磷酸基團以3’,5’—磷酸二酯鍵交互連接構成的,在雙螺旋的外側,堿基在內側,堿基必須配對。一條鏈繞著另一條鏈旋轉、盤繞,一條鏈上的嘌呤與另一條鏈上的嘧啶相互配對,嘌呤與嘧啶以氫鍵保持在一起。4、雙螺旋DNA熔解成單鏈的現(xiàn)象稱為DNA變性。已經(jīng)變性的DNA在一定條件下重新恢復雙鏈的過程稱為復性。5、染色質是以雙鏈DNA為骨架,與組蛋白(histon)、非組蛋白(non-histon)以及少量的各種RNA等共同組成絲狀結構。在染色質中,DNA和組蛋白的組成非常穩(wěn)定,非組蛋白和RNA隨細胞生理狀態(tài)不同而有變化。6、常染色質是在細胞間期核內染色體折疊壓縮程度較低,處于伸展狀態(tài),堿性染性著色較淺而均勻的那些染色質。主要是單一拷貝和中度重復序列。異染色質是在細胞間期核內染色質壓縮程度較高,處于凝集狀態(tài),堿性染料著色較深的部分。7、核小體是構成真核生物染色質的基本結構單位,是DNA和蛋白質構成的緊密結構形式。8、RNA的種類及其各自的特點?第三章基因和基因組1、基因被定義為轉錄功能單位,是編碼一種可擴散產(chǎn)物的一段DNA序列,其產(chǎn)物可以是蛋白質或RNA。一個完整的基因應該由兩部分組成,即編碼區(qū)和調控區(qū)。2、基因組是一種生物染色體內全部遺傳物質的總和,包括構成基因和基因之間區(qū)域的所有DNA。所謂總和,還應該指該物種的不同DNA功能區(qū)域在DNA分子上結構分布和排列的情況?;蚪M以及基因一般以DNA的長度和序列表示。3、病毒基因組的結構特點:(1)與細菌相比較,病毒的基因組很小,所含遺傳信息量較小,只能編碼少數(shù)的蛋白質。(2)病毒基因組由DNA或RNA組成。核酸的結構可以是單鏈或雙鏈、閉合環(huán)狀或線狀分子。(3)常有基因重疊現(xiàn)象,即同一DNA分子序列可以編碼2種或3種蛋白質分子。4、細菌基因組的一般特點1)基因組通常僅由一條環(huán)狀雙鏈DNA分子組成。但現(xiàn)發(fā)現(xiàn)有越來越多的線形基因組。2)只有一個復制起始點。3)有操縱子的結構。數(shù)個相關(參與一個生化過程)的結構基因串聯(lián)在一起,受同一調控區(qū)調節(jié),合成多順反子mRNA。4)編碼蛋白質的結構基因是單拷貝的,但rRNA基因往往是多拷貝的。5)非編碼的DNA所占比例少,類似病毒基因組。6)基因組DNA具有多種調控區(qū),如復制起始區(qū)、復制終止區(qū)、轉錄啟動子、轉錄終止區(qū)等特殊序列。7)與真核生物類似,具有可移動的DNA序列。5、真核生物基因組特點(1)基因組的分子量大。低等真核生物大約107-108bp,而高等真核生物為5×108-1010bp(2)真核生物細胞往往有很多染色體,一般呈線狀。每個染色體DNA有很多復制起始點。(3)細胞核DNA與蛋白質穩(wěn)定地結合成染色質的復雜結構。染色質內除了含有DNA和組蛋白外,還有大量非組蛋白。(4)由于存在核膜,細胞被分隔成細胞核和細胞質,因此,在基因表達中,轉錄和翻譯在時間和空間上是分隔的,不偶聯(lián)的。(5)基因組的大量序列是非編碼序列,有大量重復序列。(6)真核生物的蛋白質基因往往是單拷貝存在,轉錄產(chǎn)物是單順反子mRNA。(7)存在一些可移動的DNA序列。(8)絕大多數(shù)真核生物基因含有內含子,因而基因編碼區(qū)是不連續(xù)的。(9)真核生物基因內部也可能含有大量的重復序列。6、基因家族:一組功能類似、結構具有同源性的基因稱為基因家族?;蚣易宓姆诸愑卸喾N方式。基因家族各成員在結構上非常類似,具有保守性,如rRNA基因家族,但基因之間的間隔區(qū)可以有很大的長度差異和序列差異。重要的基因家族:rRNA基因家族、5SrRNA基因、組蛋白基因家族、珠蛋白基因家族、生長激素基因家族、超基因。7、超基因(supergene)是指一組由多基因和單基因組成的更大的基因家族。在高等真核細胞中,一個基因簇內含有數(shù)百個功能相關的基因,它們可能是由基因擴增后結構上輕微變化而產(chǎn)生的,這些基因的結構有程度不等的同源性,功能上仍保持原始基因的基本功能,或者進化成具有相關而不同的新功能,這樣的一簇基因稱為超基因家族。有免疫球蛋白超基因家族、核受體超基因家族、細胞因子超基因家族等。8、在初始轉錄產(chǎn)物hnRNA加工產(chǎn)生成熟的mRNA時,被切除的非編碼序列稱為內含子(intron)。在成熟的mRNA或蛋白質中存在的序列稱為外顯子(exon)?;虻牟贿B續(xù)性是真核生物基因所特有的,但不是所有真核生物基因都一定具有這種不連續(xù)性。9、內含子的功能:(1)含有可閱讀框架(ORF),內含子的ORF可能編碼酶或蛋白質,其中包括逆轉錄酶、成熟酶。(2)含有各種剪接信號碼,內含子編碼的成熟酶直接參與內含子本身的剪接功能。(3)對基因表達有影響,內含子對基因表達在多個水平上施加影響。內含子中的增強子序列增加了基因轉錄的起始反應。10、人類基因組計劃(humangenomicproject,HGP)的總體目標是要完成人類全部24條染色體3×109bp序列的分析。具體包括:①人類基因組作圖(遺傳學圖譜、物理圖譜)。②對基因組DNA進行切割和克隆。③測定基因組的全部DNA序列。④基因的鑒定。⑤信息系統(tǒng)的建立、信息的儲存和處理以及相應軟件的開發(fā)。11、結構基因組學(structualgenomics)以全基因組測序為目標的基因結構研究,闡述基因組中基因的位置和結構,為基因功能的研究奠定基礎。12、功能基因組學(functionalgenomics)是利用結構基因組學提供的信息,以大規(guī)模實驗方法及統(tǒng)計與計算機分析,全面系統(tǒng)地分析全部基因的功能。13、蛋白質組(proteome)是一個基因組在特定細胞內所表達的蛋白質。對于一種生物來說,它的基組DNA基本上是恒定的,但蛋白質組是動態(tài)的。也就是不同組織的細胞中蛋白質組是不同的,在同一細胞的不同生長狀態(tài)、病理狀態(tài)下也是不一樣的。蛋白質組只指某一特定時間內的蛋白質集合體。14、生物信息學是用數(shù)理和信息科學的觀點、理論和方法去研究生命現(xiàn)象,組織和分析呈指數(shù)增長的生物學數(shù)據(jù)的一門學科。生物信息學位于生物、計算機、數(shù)學等多個領域的交叉點上,其研究目標是揭示“基因組信息結構的復雜性及遺傳語言的根本規(guī)律”。生物信息學包含了基因組信息學、蛋白質結構模擬和藥物設計等3個組成部分。目前的研究包括下面幾個方面:①相關信息的收集、儲存、管理與提供。②新基因的發(fā)現(xiàn)和鑒定。③非編碼區(qū)的信息結構分析。④大規(guī)模基因功能表達譜的分析。⑤蛋白質分子空間結構預測、模擬和分子設計。⑥藥物開發(fā)。第四章生物大分子的相互作用1、生物大分子之間特異性地、可逆解離地形成復合物的能力是生命活動的基礎,這種特異性的、可逆的相互作用被稱為生物分子的識別。2、參與大分子相互作用的非共價鍵類型(1)疏水性相互作用,(2)范德瓦力,(3)氫鍵,(4)靜電相互作用。3、參與蛋白質相互作用的結構域有:BRCT(breastcancersusceptibilitygeneCterminus)結構域、Lim結構域、SH3結構域、SH2結構域、Bromo結構域、POZ結構域、WW結構域、錨蛋白重復序列(ankyrinrepeat,ANK)的結構域、PH結構域、環(huán)指結構域(ringfingerdomain)。4、蛋白質與RNA的識別以“間接讀出”(indirectreadout)機制為主。所有的RNA結構,包括線狀序列、發(fā)夾、膨泡、內環(huán)、假結、雙螺旋等都可以作為蛋白質專一性識別的靶結構。5、各種DNA結合蛋白,特別是轉錄因子(transcriptionfactors)都含有與DNA相互作用的區(qū)域,稱為DNA結合結構域(DNA-bindingdomain),簡稱結合域。6、對基因進行調節(jié)、控制的蛋白質,如各種普遍性(或基礎)轉錄因子、基因調控因子,相對于作用于它的靶位點DNA序列而言,廣義地稱為反式作用因子(trans-actingfactors)。7、鋅指結構蛋白質是自然界中廣泛分布的一類含鋅蛋白質,構成了一個超家族。鋅指結構家族蛋白,以其形狀和結合鋅的復雜性,特別是鋅指四面體結構,可以分為C2H2,C4和C6等幾種類型。8、亮氨酸周期重復不在于形成一個疏水面,而在于兩個蛋白質的兩個α螺旋之間,依靠亮氨酸周期性側鏈交錯相插,螺旋靠攏,在疏水作用之下形成一個穩(wěn)定的非共價結合的拉鏈結構,即所謂的亮氨酸拉鏈(leucinezipper)。第五章基因工程原理1、基本概念(1)基因工程:是用酶學方法,把天然的或人工合成的、同源或異源的DNA片段與具有復制能力的載體分子(如質粒、噬菌體、病毒等)形成重組DNA分子,再導入不具有這種重組分子的宿主細胞內,進行持久而穩(wěn)定的復制、表達,使宿主細胞產(chǎn)生外源DNA或其蛋白質分子。(2)基因組DNA文庫(P157):是某一生物體的染色體全部DNA序列被隨機切割成適當大小的片段后,插入到載體內構成的DNA文庫。(3)cDNA基因文庫(P160):一群含有重組DNA的細菌,質?;蚴删w的克隆,來自某細胞類型全部的mRNA。(4)扣除文庫(P163):將兩重不同組織來源的mRNA進行比較,用扣除雜交排除相同部分,即共同表達的那部分mRNA,選出剩余有差異的、特異表達的mRNA,構建成cDNA文庫,稱為cDNA扣除文庫。(5)分子雜交(P171):指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度和離子強度)可按堿基配對的原則退火形成雙鏈的過程。(6)PCR技術原理:PCR技術是利用兩種寡核苷酸引物,分別與雙鏈DNA片段的兩端互補,形成DNA聚合酶反應中的模板和引物的關系。(7)物理圖譜:DNA片段上限制性內切酶酶切位點的圖譜,表示各種限制性內切酶識別位點在DNA序列上的線性排列。(8)Southern雜交:用于檢測DNA片段混合物中存在特定序列的技術。又稱Southern印跡。檢驗的目的DNA通常用一種或一種以上的限制性內切酶酶切,得到各種特定長度的片段,在凝膠電泳中依長度分成條帶,DNA片段原位地轉移到NC膜或尼龍膜上。然后,膜上的DNA片段與標記的探針DNA進行雜交,已雜交的DNA片段可通過標記的探針進行放射性或顯色反應定位。(9)Northern雜交(P156):從真核生物的特定組織或發(fā)育階段的細胞分離出全部RNA或mRNA,用變性凝膠電泳分離后轉移到NC膜上。用變性的探針DNA對NC膜上的RNA進行雜交。從顯影或顯色反應判斷陽性雜交的存在。(10)亞克?。≒156):當載體中插入的外源DNA片段太大,難以作某些操作或分析時,需要對該克隆片段作些再切割,將大的DNA片段酶切成較小的片段,然后再與另外的新載體重組,并進行轉化程序,這個過程稱為亞克隆。2、思考題(1)、PCR技術原理的是什么?179答:PCR技術是利用兩種寡核苷酸引物,分別與雙鏈DNA片段的兩端互補,形成DNA聚合酶反應中的模板和引物的關系,這是PCR技術的核心。PCR聚合酶反應體系的一些重要條件包括:模板、一對寡核苷酸引物、4種底物dNTP和TapDNA聚合酶。反應分為3步:雙鏈模板DNA變性、退火和鏈的延伸?;蚬こ讨泄ぞ呙傅姆N類?P141答:限制性內切酶、DNA連接酶、DNA聚合酶、逆轉錄酶、RNA聚合酶。DNA聚合酶的特點?P142答:①需要提供合成模板;②不能起始新的DNA鏈,必須要有引物提供3'-OH;③合成的方向都是5'→3';④除聚合DNA外還有其它功能;⑤以脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)為前體催化合成DNA。熟悉基因工程的載體的種類和特點?答:①種類:質粒載體,λ噬菌體載體,M13噬菌體載體,柯斯質粒載體,細菌人工染色體,酵母人工染色體,動物病毒載體②特點:◆載體DNA是單個復制單元,在宿主細胞內應具有獨立復制能力;◆分子量盡可能的小,便于細胞中分離純化,離體條件下操作;◆含有多種限制行內切酶的單一切點;◆載體內有不影響其復制,生長的非必要區(qū)域;◆具有多種選擇行標記?;蚬こ梯d體的基本要求和特點P142①基本要求:◆載體能夠獨立復制,具有復制起點?!魬哂徐`活的克隆位點和方便的篩選標記?!魬哂泻軓姷膯幼?,能為大腸桿菌RNA聚合酶所識別?!魬哂凶瓒糇?,使啟動子受到控制,只有當誘導時才能進行轉錄?!魬哂泻軓姷慕K止子,只轉錄克隆的基因,所產(chǎn)生的mRNA較為穩(wěn)定。②特點:1.載體DNA是單個復制單元,在宿主細胞內應具有DNA獨立復制能力;2.分子量盡可能的小,以便容易從細胞中分離純化,便于離體條件下操作;3.含有多種限制性內切酶的單一切點。在切點內可以與外源DNA進行連接、重組;4.載體內有不影響其復制、生長的非必要區(qū)域,在此區(qū)域內可以插入、接受外源DNA,外源DNA與載體分子一起復制、擴增;5.具有多種選擇性標志,如營養(yǎng)缺陷型、抗藥性、形成噬菌斑的能力、外源性蛋白的產(chǎn)生等,作為區(qū)分重組的轉化子與非重組轉化子的指標。③基因工程的基本步驟P140目的DNA的獲得;2.載體的選擇與構建;3.目的DNA與載體的重組;4.重組DNA的轉化或轉染等,從而導入宿主細胞;5.篩選含有重組DNA分子的宿主細胞,獲得克隆。(6)DNA文庫構建的基本步驟?P158λ載體DNA和雙臂的制備提取大分子DNA和制備大片段載體與外源DNA重組重組DNA的離體包裝重組DNA的轉化第六章1、名詞解釋DNA半保留復制:在DNA復制時,子代雙鏈DNA中,一條鏈來自親代,而另一條鏈是新合成的。復制叉:復制起始點要形成一個特殊的叉形結構,是復制有關的酶和蛋白質組裝成復合物和新鏈合成的部位。復制子:從復制起始點到終止點的區(qū)域為一個復制子。半不連續(xù)復制:在復制叉上發(fā)生一條新鏈為連續(xù)合成,另一條新鏈為不連續(xù)合成的復制機制,稱為半不連續(xù)復制。前導鏈:在DNA復制時,復制叉上一條連續(xù)合成的鏈。后滯鏈:在DNA復制時,復制叉上一條不連續(xù)合成的鏈。岡崎片段:DNA復制時后滯鏈所合成的短片段。2、思考題1.DNA復制的特征?P195答:①核酸生物合成的一般規(guī)則;②半保留復制;③以復制子為單位進行;④復制的起始點和終止點;⑤具有復制叉結構和復制方向;⑥復制的模型。2.復制過程的幾個階段?(P216)答:第一階段,親代DNA分子超螺旋構象的松弛及螺旋的解旋,使復制的模板展現(xiàn)出來;第二階段,是復制的引發(fā)過程,引物在5→3方向的合成;第三階段,是DNA鏈的延伸過程,在引物RNA合成的基礎上,轉換成DNA鏈的5→3方向的合成;第四階段,是終止過程,復制進行到終止位點ter,有蛋白因子Tus參與,復制即終止。線粒體DNA的復制模式?答:DNA鏈延伸的幾個階段?(P223)答:①雙螺旋DNA的不斷解螺旋;②前導鏈DNA的合成;③后滯鏈模板不斷引發(fā),合成新的RNA產(chǎn)物;④在RNA引物的基礎上由DNA聚合酶合成岡崎片段;⑤除去RNA引物,填補空隙,岡崎片段連接成后滯鏈。5.真核與原核生物的復制相同點與差異之處?(P230)答:相同之處:都是半保留的和半不連續(xù)的復制,復制過程都有引發(fā)、延伸和終止三個階段,要求有模板以及有相應功能的DNA聚合酶和蛋白質參與。不同之處:①真核的每條染色體有多個復制起始位點,而原核只有一個起始位點;②真核染色體在全部復制完成之前,各個起始點上不能開始新一輪復制,受到一種復制的調控;而原核DNA的起始點可以連續(xù)地開始新的復制事件,表現(xiàn)為一個復制子上有多個復制叉存在。6.DNA損傷修復的種類?(P247)答:直接修復、切除修復、重組修復、SOS修復。7.原核DNA聚合酶的一般特性?(P211)答:有單鏈DNA為模板,具有3-OH基的引物,合成的方向總是5-3,由模板決定加上去何種脫氧核苷酸,從引物的3-OH端逐個延長。第七章1、名詞解釋轉錄(P251):以DNA為模板,合成RNA的信息傳遞過程稱為轉錄。反義鏈(P252):在DNA雙鏈中,被RNA聚合酶“閱讀”、含有合成RNA分子信息的這條鏈稱為“模板鏈”或反義鏈。上游順式作用元件:指同一DNA分子中具有轉錄調節(jié)功能的在復制起始點前的特異DNA序列。啟動子(P257):是基因DNA中一段特定的核苷酸序列,是RNA聚合酶在轉錄起始時對模板DNA的識別位點和結合位點,基因轉錄的開始部位。終止子(P269):是基因DNA分子中決定轉錄產(chǎn)物3'-OH端、釋放出已合成RNA分子的位點。2、思考題1.原核生物和真核生物基因轉錄的差異?答:①原核生物只有一種RNA聚合酶負責轉錄所有類型的基因,而真核生物有三種以上的RNA聚合酶,負責不同基因類型的轉錄,合成不同類型的RNA,在細胞核內的位置也不相同。②轉錄產(chǎn)物的差別。真核生物的初始產(chǎn)物很長,包含有內含子序列,成熟mRNA只占其中的小部分。而原核生物的初始產(chǎn)物大多數(shù)為編碼序列,與蛋白質序列成線性關系。③真核生物轉錄產(chǎn)物經(jīng)歷加工、修飾過程,即內含子剪接。5'端帽化和3'多聚A化。這是真核生物中初始轉錄產(chǎn)物的成熟過程,而原核生物的初始轉錄產(chǎn)物直接是成熟的mRNA,很少需要成熟過程。④與基因結構相吻合,原核生物mRNA是多順反子;大多數(shù)真核生物mRNA是單順子結構。一般而言,一個真核的mRNA分子編碼一個蛋白質分子。⑤原核細胞中,轉錄產(chǎn)物直接可以成為蛋白質合成的模板,因而一邊轉錄合成mRNA,一邊翻譯合成蛋白質。熟悉原核生物啟動子的結構與功能、其中的-35區(qū)、-10區(qū)等的結構?①域中的基序并與之結合,啟動轉錄的起始。一般將DNA上的轉錄位點定位+1來排序,其下游(右側)為正值,其上游(左側)為負值。原核生物不同基因的啟動子雖然結構也有一定的差異,但明顯具有共同的特點。◆結構典型,都含有識別(R),結合(B)和起始(I)三個位點;◆序列保守,如-35序列,-10序列結構都十分保守;◆位置和距離都比較恒定;◆直接和多聚酶相結合;◆常和操縱子相鄰;◆都在其控制基因的5′端;◆決定轉錄的啟動和方向。②-35序列又稱為Sextama盒,其保守序列為TTGACA,與-10序列相隔16~19bp。其功能是:◆為RNA聚合酶的識別位點。RNA聚合酶的核心酶只能起到和模板結合和催化的功能,并不能識別-35序列,只有σ亞基才能識別-35序列,為轉錄選擇模板鏈?!?35序列和-10序列的距離是相當穩(wěn)定的,過大或過小都會降低轉錄活性。這可能是因為RNA聚合酶本身的大小和空間結構有關。③-10序列也稱為Pribnow框盒,其保守序列為TATAAT,位于-10bp左右,其中3′端的“T”十分保守。A,T較豐富,易于解鏈。它和轉錄起始位點“I”一般相距5bp。其功能是:◆與RNA聚合酶緊密結合;◆形成開放啟動復合體;◆使RNA聚合酶定向轉錄。3.原核生物轉錄的起始分幾個階段?(P261)答:①核心酶在σ因子參與下接觸到DNA上,形成特異性結合;②起始識別,RNA聚合酶與啟動子結合,形成封閉性起始復合物;③從封閉性轉變?yōu)殚_放性起始復合物,酶結合在-10序列,啟動子活化,并解開雙鏈結構,暴露模板鏈;④形成DNA-酶-底物NTP的三元起始復合物,酶移動到轉錄起始位點,在起始位點加上開頭的幾個核苷三磷酸。4.真核生物基因類型II啟動子的結構與功能?(P281)答:結構:①轉錄起始位點,是RNA合成的開始位置。②基本啟動子,基本啟動子和Inr一起構成核心啟動子。③轉錄起始位點下游元件。④轉錄起始上游元件。5.真核生物基因轉錄的一般規(guī)律?P271答:①典型的真核基因轉錄單元為單順反子,而原核基因轉錄單元為多順反子。②真核生物的RNA聚合酶高度分工。③轉錄的正常進行,除了需要RNA聚合酶以外,還需要許多蛋白質因子的參與。④真核基因DNA的順式作用元件要比原核基因復雜得多。⑤真核基因的轉錄調控以正調控為主。第八章轉錄后加工名詞解釋轉錄后加工(P297):原核生物的tRNA,rRNA轉錄成一個很長的RNA分子后,在酶和蛋白質參與下,切斷、加工成為成熟分子。多順反子:在原核細胞中,通常是幾種不同的mRNA連在一起,相互之問由一段短的不編碼蛋白質的間隔序列所隔開,這種mRNA叫做多順反子mRNA。RNA編輯(P327):RNA編輯是RNA分子上一種轉錄后修飾現(xiàn)象,包括插入、缺失或核苷酸的替換。思考題1、內含子RNA剪接的三種方式?第一類:自我剪切。由于內含子的特殊結構而能自發(fā)地進行剪切。第二類:蛋白質參與剪切的內含子,主要在tRNA前體中發(fā)現(xiàn)。剪切在一系列酶催化下進行。第三類:內含子是snRNP參與剪接的內含子。2、原核生物tRNA前體以幾種方式存在?P297①多個相同tRNA串聯(lián)排列在一起;②不同的tRNA串聯(lián)排列;③tRNA與rRNA混合串聯(lián)排列在一起(圖8—1)。因而RNA前體必須經(jīng)歷加工,在tRNA與一些RNA片段之間先切斷,完成此任務的似乎是RNaseⅢ。然后,RNA片段再進行5’端、3’端加工,某些堿基進行修飾3、真核生物RNA前體的加工過程包括?P301答:真核生物tRNA和rRNA前體的加工包括轉最初始產(chǎn)物中間隔序列的除去、內含子的剪接、5’和3’端修飾、堿基的修飾等。這些過程需要酶和蛋白質的參與。4、RNA前體的剪切過程要通過4個步驟:①首先在5’端切除非編碼的序列,生成41S中間物;②41S的RNA切成32S和20S兩段,分別含有28SrRNA和18SrRNA,32S中還含有5.8SrRNA;③20S剪切成18S;④32S剪切成28SrRNA和5.8SrRNA,它們相互進行堿基配對5、5’端帽子結構具有如下3個功能。(1)對mRNA的保護作用,保護mRNA免受RNase從5’端開始的攻擊。(2)5’端帽子結構使mRNA具有可翻譯能力(translatability,或translatableness)。(3)5’端帽子有利于成熟的mRNA從細胞核輸送到細胞質,只有成熟的mRNA才能進行輸送。第9章1、名詞解釋tRNA荷載作用(P347):氨基酸被活化,共價連接在tRNA上。開放閱讀框架(P355):起始密碼子和下游的終止密碼子之間的序列。肽鏈合成的延伸(P364):指第二個和以后的密碼子編碼的氨基酸不斷進入核糖體,并形成肽鍵的過程。核定位信號(P377):指引一個蛋白質分子從胞質到核內的典型信號序列。共翻譯轉動機制(P379):邊翻譯邊轉運的機制。分子伴侶(P393):在蛋白質折疊或組裝過程中,需要某些蛋白質或肽鏈參與相互作用,幫助達到正確的構象折疊,但又不是折疊或組裝產(chǎn)物的一部分,起幫助作用的蛋白質或肽鏈。分子伴素:非特異性地幫助蛋白質折疊,建立起它的正確結構的蛋白質或肽鏈。遺傳密碼的特點(P337):①遺傳密碼是三聯(lián)密碼;②遺傳密碼無逗號;③遺傳密碼子不重疊;④遺傳密碼具有通用性;⑤遺傳密碼具有簡并性;⑥起始密碼子和終止密碼子。擺動假設要點(P339):①密碼子和反密碼子之間的堿基配對中,密碼子的5端前兩位堿基必須嚴格按照Watson-Crick堿基配對原則同反密碼子配對。②密碼子的第3個核苷酸為A時,由于受到立體化學因素的影響,將產(chǎn)生與G,U和C配對的一組特異構象。滑動搜索模型(P356):是闡述核糖體在帶有5帽子結構的真核生物mRNA上如何啟動翻譯的起始反應。三位點模型(P366):核糖體結合tRNA有三個位點,即P位點、A位點和E位點。信號肽的特點(P379):①幾乎所有的信號肽在整體上都是疏水的。②信號肽一般位于蛋白質的N端,進入膜后被信號肽酶水解,真核細胞信號肽酶位于ER膜,原核細胞位于質膜內側。③信號肽的中部常常由12~14個殘基構成疏水性核,稱為信號肽疏水核。④需要廣義地認識信號肽,應該認為它是初生蛋白質穿過膜所必須的疏水性肽段,它可以位于蛋白質分子的各個部位。⑤信號肽幾乎沒有嚴格的專一性。⑥信號肽可能不是一一直線通過雙脂層膜,而是一種環(huán)狀結構。導肽的特點(P384):①帶正電荷的堿性氨基酸含量較豐富,從它們的分析來看是隨機性的。②不含或基本上不含有負電荷的酸性氨基酸。③羥基氨基酸含量較高。④有形成兩親的α螺旋結構的傾向。2、思考題1.核糖體的組分和立體結構?答:原核和真核生物翻譯的起始?兩者起始反應的比較?(P363)答:相同點:①只在核糖體小亞基上結合荷載的起始tRNA;②在mRNA上必須找到合適的起始密碼子;③在已經(jīng)形成有小亞基、mRNA和起始tRNA的起始復合物之后,大亞基參與形成完整的起始復合物。不同點:①原核細胞中,mRNA首先與小亞基結合,再有起始tRNA加入形成起始復合物。而真核細胞中,起始tRNA首先結合于小亞基,形成四元復合物,然后在多種因子參與下結合mRNA,才形成起始復合物。②小亞基起始復合物在mRNA上尋找起始密碼子的方式不同。翻譯延伸和終止的過程?(P364、P372)答:延伸過程:①進位反應;②轉位反應和肽鍵的形成;③移位反應。終止過程:蛋白質轉運的3種機制?(P376)答:①核孔對特定大分子起選擇性通道的作用,核孔以其充分折疊的構象轉運蛋白質;②分泌蛋白的邊翻譯邊轉運機制;③翻譯后轉運機制。蛋白質前體的共價修飾類型,蛋白質的剪切形式,內含肽的剪切過程?(P387,388,390)答:共價修飾的加工主要包括4種類型:肽鏈N端殘基fMet或Met的切除、二硫鍵的形成、化學修飾和肽的剪切。蛋白質的剪切形式有:前胰島素原、胰凝乳蛋白酶原、凝血酶原的活化,以及蛋白質內含子、外顯子和自我剪切等問題。內含肽的剪切過程:①由內含肽的N端Ser殘基的酰胺鍵,在結構式樣B中Ser,Thr殘基的-OH基的作用下,肽鍵變得不穩(wěn)定,呈順式構象。②C端(下游)外顯肽的Ser/Thr/Cys殘基攻擊上游外顯肽的酯/硫酯鍵,導致N端(上游)外顯肽與內含肽N端分離,而轉移到下游外顯肽的Ser/Thr/Cys的側鏈上,從而形成分支結構。③內含肽C端的Asn環(huán)化,形成琥珀酰亞胺環(huán),導致C端剪切點斷裂。④酰基重組,上下游兩個外顯肽形成天然的肽鍵。6.蛋白質折疊的意義和過程及自動裝配原則?(P391,392)答:意義:在結構上,這個過程使伸展的肽鍵成為特定的三維結構;在功能上,它使無活性的分子具有特定生物學功能的蛋白質分子。自裝配原則:蛋白質在離體就已具有自發(fā)裝配的能力,并且不需要外加能量。自裝配原則只適用于小分子的蛋白質。第11章1、名詞解釋操縱子(P469):基因組中相關的基因聚集、串聯(lián)在一起,共同表達、共同調控,構成一個表達和調控的單元,這種單元稱為操縱子。結構基因(P470):指編碼細胞結構和基本代謝活動所必要的RNA,蛋白質或酶。調控基因(P470):指那些編碼那些控制其他基因表達的RNA或蛋白質的基因。反式作用因子(P470):調控因子在細胞內可以自由移動,尋找和結合到靶位點上,因此稱反作用因子。誘導作用(P470):某種酶或一組酶的合成是對特定物質作出的反應。正調控(P471):若調控因子使靶基因的表達水平上升,這種調控方式稱為正調控。負調控(P471):若調控因子使靶基因的表達水平下降,甚至關閉,這種調控作用稱為負調控。乳糖操縱子的結構(P473):E.coli的乳糖操縱子是乳糖分解代謝的3個基因,lacZ編碼β半乳糖苷酶,lacY編碼β半乳糖透性酶,lacA編碼β半乳糖苷乙酰轉移酶構成的一個典型的操縱子。色氨酸操縱子的結構(P492):包括結構基因(E、D、C、B、A):分別編碼合成色氨酸途徑的酶或酶亞基。以及調控區(qū)域:阻遏基因(R)、啟動子區(qū)(P)、操縱區(qū)(O)、前導肽編碼區(qū)(L),弱化子區(qū)(a)??勺瓒粜偷呢撜{控(P429):調節(jié)基因的產(chǎn)物阻遏蛋白使trp操縱子關閉,這種作用稱為可阻遏型的負調控。它是某些氨基酸等生物合成酶類有關基因表達調控的基本形式。弱化作用(P495):是RNA聚合酶從啟動子出發(fā)(開始轉錄)的轉錄受到衰減子的調控。抗終止作用(P508):抗終止因子pN和pQ依賴于基因內特殊序列和特殊蛋白銀子的相互作用,影響RNA聚合酶對終止位點的識別功能,使RNA聚合酶在終止位點通讀,形成一個較長的mRNA。pN和NusA蛋白如果作用于nut位點,就能引起抗終止作用。2、思考題1.乳糖操縱子的正負調控?(P474)答:某種調控因子的存在,使操縱子的結構基因關閉;而調控因子不存在,能使操縱子的結構基因開啟的調控方式稱為負調控。2.前導肽序列的特點?(P495)答:①前導序列某些區(qū)段富含GC,GC區(qū)段之間容易形成莖環(huán)二級結構,接著有8個U的寡聚區(qū)段構成一個不依賴于ρ因子的終止信號。在一定條件下mRNA合成提前終止,產(chǎn)生162個核苷酸長度的前導RNA。②除了這個終止信號的發(fā)夾結構之外,由1區(qū)和2區(qū)序列構成第二個發(fā)夾結構。其中1區(qū)處于14個氨基酸的前導肽序列中。③3區(qū)也可以與2區(qū)互補,形成另一個由2區(qū)和3區(qū)組成的發(fā)夾結構。一旦2區(qū)與3區(qū)形成二級結構,就會阻遏3區(qū)與4區(qū)之間形成發(fā)夾結構,即不形成終止信號。④前導序列RNA中編碼了一段14個氨基酸的前導肽,在它的前面有5個核糖體的強結合位點,在編碼序列之后有一終止密碼子UGA。⑤前導序列中并列兩個色氨酸密碼子。3.原核生物時序表達在轉錄調控點的3種方式?(P499)答:①幾種新的蛋白因子代替RNA聚合酶原來的σ因子,協(xié)助RNA聚合酶的核心酶識別新的啟動子。②合成新的RNA聚合酶,代替原有的酶,開動一套新的啟動子。③合成新的調控因子,影響RNA聚合酶對轉錄終止信號的行為,如抗終止因子控制不同階段的基因表達。4.λ噬菌體中DNA轉錄的3個階段?(P506)答:①早期基因從PL和PR啟動子開始。②晚早期基因的轉錄。③晚期基因的轉錄。5.溶源化和裂解的命運選擇?(P520)答:①競爭決定于CI阻遏蛋s白與Cro蛋白的比例。如果cI占優(yōu)勢,將建立溶源化;如果cro占優(yōu)勢,感染細胞將進入裂解生長。cII基因產(chǎn)物CII蛋白的濃度決定cI或者cro占優(yōu)勢。②決定λ感染命運的生理條件。6.CI基因在溶源化過程中自我調控?(P514)答:①λ阻遏蛋白低濃度時,能促進它自己的轉錄,產(chǎn)生更多的阻遏蛋白;②高濃度的阻遏蛋白能抑制,關閉自己基因的轉錄;③阻遏蛋白能阻遏Cro基因轉錄。CI阻遏蛋白在低濃度時,Cro轉錄有某些抑制作用;在高濃度時,Cro轉錄完全停止;在更高濃度時,CI嚴重受抑制。原核生物在翻譯水平上的自我調控?第12章1、名詞解釋染色質的重塑:(P545)通常把染色質和單個核小體內發(fā)生的任何可檢測到的變化稱為染色質的重塑。CPG島:(P551)在有一些DNA區(qū)段中,GC堿基對形成二核苷酸序列CpG的密度大,大雨10/100bp,這些富含CpG的區(qū)段稱為CpG島。關卡:II類基因(P551):指真核細胞RNA聚合酶II負責轉錄的基因,一般都是編碼蛋白質的基因。染色質結構域(P542):指基因表達過程中結構發(fā)生改變的區(qū)域,其中至少包括一個活性轉錄單位,有時延伸得更遠。2、思考題(1)染色質的3種狀態(tài)?(P536)答:1.阻遏狀態(tài)。巨大的DNA分子被緊緊地壓縮在細胞核內,這樣的結構不利于基因的表達?;钚誀顟B(tài)。只有處于活性狀態(tài)的染色質,才能導致基因表達。3.激活狀態(tài)。啟動子上結合了積儲轉錄因子,上游元件及增加子結合有激活因子,促使RNA聚合酶等在啟動子區(qū)域形成轉錄復合物。(2)組蛋白對基因活性的影響?(P537)答:1.組蛋白對5SrRNA基因轉錄的影響;2.組蛋白對II類基因轉錄的影響。II類轉錄調控子的類型?(P555)答:1.普遍性轉錄因子;2.組織和細胞特異性的調控因子;3.可誘導的調控因子?;虮磉_的調控(7步)(P529)答:1.染色體和染色質水平上的活化。轉錄水平上的調控,包括基因的開閉,轉錄活性水平的高低。RNA加工水平上的調控,對初始轉錄產(chǎn)物的活化、修飾、選擇性剪接等。4.轉錄后加工產(chǎn)物,如mRNA從細胞核向細胞質轉運過程受到的調控。5.翻譯的控制,選擇哪種mRNA提呈給核糖體翻譯,包括翻譯量的控制。6.蛋白質合成后選擇性地被激活或失活,蛋白質水平上的剪切、活性水平和降解的控制。7.控制mRNA的選擇性降解是基因表達調控的另一重要方面。SD序列:在細菌mRNA起始密碼子AUG上游10個堿基左右處,有一段富含嘌呤的堿基序列,能與細菌16SrRNA3’端識別,幫助從起始AUG處開始翻譯的序列。染色體、DNA、基因這三者的關系:染色體是DNA的主要載體,一般情況下,每個染色體有一個DNA分子,DNA上有很多個基因,基因是有遺傳效應的DNA片斷,基因在染色體上呈線性排列。選擇題復習1.證明DNA是遺傳物質的兩個關鍵性實驗是:肺炎球菌在老鼠體內的毒性和T2噬菌體感染大腸桿菌。這兩個實驗中主要的論點證據(jù)是:(

C

)

(a)從被感染的生物體內重新分離得到DNA,作為疾病的致病劑

(b)DNA突變導致毒性喪失

(c)生物體吸收的外源DNA(而并非蛋白質)改變了其遺傳潛能

(d)DNA是不能在生物體間轉移的,因此它一定是一種非常保守的分子

(e)真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代2.1953年Watson和Crick提出:(

A

)

(a)多核苷酸DNA鏈通過氫鍵連接成一個雙螺旋

(b)DNA的復制是半保留的,常常形成親本—子代雙螺旋雜合鏈

(c)三個連續(xù)的核苷酸代表一個遺傳密碼

(d)遺傳物質通常是DNA而非RNA

(e)分離到回復突變體證明這一突變并非是一個缺失突變3.雙鏈DNA中的堿基對有:(

CD

)

(a)A-U

(b)G-T

(c)C-G

(d)T-A

(e)C-A4.DNA雙螺旋的解鏈或變性打斷了互補堿基間的氫鍵,并因此改變了它們的光吸收特性。以下哪些是對DNA的解鏈溫度的正確描述:(

CD

)

(a)哺乳動物DNA約為45℃,因此發(fā)燒時體溫高于42℃是十分危險的

(b)依賴于A—T含量,因為A-T含量越高則雙鏈分開所需要的能量越少

(c)是雙鏈DNA中兩條單鏈分開過程中溫度變化范圍的中間值

(d)可通過堿基在260mm的特征吸收峰的改變來確定

(e)就是單鏈發(fā)生斷裂(磷酸二酯鍵斷裂)時的溫度5.DNA的變性:(

ACE

)

(a)包括雙螺旋的解鏈

(b)可以由低溫產(chǎn)生(c)是可逆的

(d)是磷酸二酯鍵的斷裂(e)包括氫鍵的斷裂6.在類似RNA這樣的單鏈核酸所表現(xiàn)出的“二級結構”中,發(fā)夾結構的形成:(

AD

(a)基于各個片段間的互補,形成反向平行雙螺旋

(b)依賴于A-U含量,因為形成的氫鍵越少則發(fā)生堿基配對所需的能量也越少

(c)僅僅當兩配對區(qū)段中所有的堿基均互補時才會發(fā)生

(d)同樣包括有像G-U這樣的不規(guī)則堿基配對

(e)允許存在幾個只有提供過量的自由能才能形成堿基對的堿基7.DNA分子中的超螺旋:(

ACE

)

(a)僅發(fā)生于環(huán)狀DNA中。如果雙螺旋在圍繞其自身的軸纏繞后(即增加纏繞數(shù))才閉合,則雙螺旋在扭轉力的作用下,處于靜止

(b)在線性和環(huán)狀DNA中均有發(fā)生。纏繞數(shù)的增加可被堿基配對的改變和氫鍵的增加所抑制

(c)可在一個閉合的DNA分子中形成一個左手雙螺旋。負超螺旋是DNA修飾的前

提,為酶接觸DNA提供了條件

(d)是真核生物DNA有絲分裂過程中固縮的原因

(e)是雙螺旋中一條鏈繞另一條鏈的旋轉數(shù)和雙螺旋軸的回轉數(shù)的總和

8.DNA在10nm纖絲中壓縮多少倍(長度)?(

A

)

(a)6倍

(b)1O倍

(c)40倍

(d)240倍

(e)1000倍

(f)100000倍

9.DNA在30nm纖絲中壓縮多少倍?(

C

)

(a)6倍

(b)10倍

(c)40倍

(d)240倍

(e)1000倍

(f)100000倍10.DNA在染色體的常染色質區(qū)壓縮多少倍?(

E

)(a)6倍

(b)10倍

(c)40倍

(d)240倍

(e)1000倍

(f)100000倍11.DNA在中期染色體中壓縮多少倍?(

F

)

(a)6倍

(b)10倍

(c)40倍

(d)240倍

(e)1000倍

(f)1000O0倍12.組蛋白的凈電荷是:(

A

)

(a)正

(b)中性

(c)負13.核小體的電性是:(

B

)

(a)正

(b)中性

(C)負14.當新的核小體在體外形成時,會出現(xiàn)以下哪些過程?(

C

)

(a)核心組蛋白與DNA結合時,一次只結合一個

(b)一個H32-H42核形成,并與DNA結合,隨后按順序加上兩個H2A—H2B二聚體

(c)核心八聚體完全形成后,再與DNA結合

15.當一個基因具有活性時:(

AC

)

(a)啟動子一般是不帶有核小體的

(b)整個基因一般是不帶有核小體的

(C)基因被核小體遮蓋,但染色質結構已發(fā)生改變以致于整個基因對核酸酶降解更加敏感16.原核細胞信使RNA含有幾個其功能所必需的特征區(qū)段,它們是:(

D

)

(a)啟動子,SD序列,起始密碼子,終止密碼子,莖環(huán)結構

(b)啟動子,轉錄起始位點,前導序列,由順反子間區(qū)序列隔開的SD序列和ORF,

尾部序列,莖環(huán)結構(c)轉錄起始位點,尾部序列,由順反子間區(qū)序列隔開的SD序列和ORF,莖環(huán)結構(d)轉錄起始位點,前導序列,由順反子間區(qū)序列隔開的SD序列和ORF,尾部序列17.tRNA參與的反應有:(

BC

)

(a)轉錄(b)反轉錄(C)翻譯(d)前體mRNA的剪接(e)復制18.氨酰tRNA的作用由(

B

)決定

(a)其氨基酸(b)其反密碼子(c)其固定的堿基區(qū)

(d)氨基酸與反密碼子的距離,越近越好

(e)氨酰tRNA合成酶的活性19.Ⅰ型內含子能利用多種形式的鳥嘌呤,如:(

ABCD

)

(a)GMP

(b)GDP

(c)GTP

(d)dGDP

(e)ddGMP(2’,3’-雙脫氧GMP)20.Ⅰ型內含子折疊成的復雜二級結構:(

ACDE

)

(a)有長9bp的核苷酸配對

(b)對突變有很大的耐受性

(c)形成可結合外來G和金屬離子的“口袋”

(d)使內含子的所有末端都在一起

(e)在剪接過程中發(fā)生構象重組

(f)利用Pl和P9螺旋產(chǎn)生催化中心21.RNaseP:(

ABCE

)

(a)其外切核酸酶活性催化產(chǎn)生tRNA成熟的5’末端

(b)含有RNA和蛋白組分

(c)體內切割需要兩個組分

(d)體外切割需要兩個組分

(e)采用復雜的二級與三級結構形成催化位點22.錘頭型核酶:(ABD

)

(a)是一種具有催化活性的小RNA

(b)需要僅含有17個保守核苷酸的二級結構

(c)不需要Mg2+協(xié)助

(d)可用兩個獨立的RNA創(chuàng)建錘頭型核酶23.Ⅰ型剪接需要(

ABF

)

(a)單價陽離子(b)二價陽離子(c)四價陽離子(d)UlsnRNP

(e)一個腺苷酸分支點(f)一個鳥膘呤核苷酸作為輔助因子24.在Ⅰ型剪接的過程中,(

ADE

)

(a)游離的G被共價加到內含子的5’端

(b)GTP被水解

(c)內含子形成套馬索結構

(d)在第一步,G的結合位點被外來的G占據(jù),而在第二步時,被3’剪接位點的G所取代

(e)被切除的內含子繼續(xù)發(fā)生反應,包括兩個環(huán)化反應25.DNA的復制:(

BD

)

(a)包括一個雙螺旋中兩條子鏈的合成(b)遵循新的子鏈與其親本鏈相配對的原則(c)依賴于物種特異的遺傳密碼(d)是堿基錯配最主要的來源

(e)是一個描述基因表達的過程26.一個復制子是:(

C

)

(a)細胞分裂期間復制產(chǎn)物被分離之后的DNA片段

(b)復制的DNA片段和在此過程中所需的酶和蛋白

(c)任何自發(fā)復制的DNA序列(它與復制起始點相連)

(d)任何給定的復制機制的產(chǎn)物(如:單環(huán))(e)復制起點和復制叉之間的DNA片段27.真核生物復制子有下列特征,它們:(C

)

(a)比原核生物復制子短得多,因為有末端序列的存在

(b)比原核生物復制子長得多,因為有較大的基因組

(c)通常是雙向復制且能融合

(d)全部立即啟動,以確保染色體在S期完成復制

(e)不是全部立即啟動,在任何給定的時間只有大約15%是有活性的28.下述特征是所有(原核生物、真核生物和病毒)復制起始位點都共有的是:(

ACD

)

(a)起始位點是包括多個短重復序列的獨特DNA片段

(b)起始位點是形成穩(wěn)定二級結構的回文序列

(c)多聚體DNA結合蛋白專一性識別這些短的重復序列

(d)起始位點旁側序列是A-T豐富的,能使DNA螺旋解開

(e)起始位點旁側序列是G—C豐富的,能穩(wěn)定起始復合物29.下列關于DNA復制的說法是正確的有:(

DEF

)

(a)按全保留機制進行

(b)接3’→5’方向進行

(c)需要4種dNMP的參與

(d)需要DNA連接酶的作用

(e)涉及RNA引物的形成

(f)需要DNA聚合酶Ⅰ30.滾環(huán)復制:(BDE

)

(a)是細菌DNA的主要復制方式

(b)可以使復制子大量擴增

(c)產(chǎn)生的復制子總是雙鏈環(huán)狀拷貝

(d)是噬菌體DNA在細菌中最通常的—種復制方式

(e)復制子中編碼切口蛋白的基因的表達是自動調節(jié)的31.標出下列所有正確的答案:(

BC

)

(a)轉錄是以半保留的方式獲得兩條相同的DNA鏈的過程

(b)DNA依賴的DNA聚合酶是負責DNA復制的多亞基酶

(c)細菌轉錄物(mRNA)是多基因的

(d)σ因子指導真核生物的hnRNA到mRNA的轉錄后修飾

(e)促旋酶(拓撲異構酶Ⅱ)決定靠切開模板鏈而進行的復制的起始和終止32.哺乳動物線粒體和植物葉綠體基因組是靠D環(huán)復制的。下面哪一種敘述準確地描述了這個過程?(

CD

)

(a)兩條鏈都是從oriD開始復制的,這是一個獨特的二級結構,由DNA聚合酶復合體識別

(b)兩條鏈的復制都是從兩個獨立的起點同時起始的

(c)兩條鏈的復制都是從兩個獨立的起點先后起始的

(d)復制的起始是由一條或兩條(鏈)替代環(huán)促使的

(e)ter基因座延遲一條鏈的復制完成直到兩個復制過程同步33.DNA多聚體的形成要求有模板和一個自由3’—OH端的存在。這個末端的形成是靠:

(

ABDE

)

(a)在起點或岡崎片段起始位點(3’—GTC)上的一個RNA引發(fā)體的合成

(b)隨著鏈替換切開雙鏈DNA的一條鏈

(c)自由的脫氧核糖核苷酸和模板一起隨機按Watson-Crick原則進行配對

(d)靠在3’末端形成環(huán)(自我引發(fā))

(e)一種末端核苷酸結合蛋白結合到模板的3’末端34.對于一個特定的起點,引發(fā)體的組成包括:(

AC

)

(a)在起始位點與DnaG引發(fā)酶相互作用的一個寡聚酶

(b)一個防止DNA降解的單鏈結合蛋白

(c)DnaB解旋酶和附加的DnaC,DnaT,PriA等蛋白

(d)DnaB,單鏈結合蛋白,DnaC,DnaT,PriA蛋白和DnaG引發(fā)酶

(e)DnaB解旋酶,DnaG引發(fā)酶和DNA聚合酶Ⅲ35.在原核生物復制子中以下哪種酶除去RNA引發(fā)體并加入脫氧核糖核苷酸?(

C

)

(a)DNA聚合酶Ⅲ(b)DNA聚合酶Ⅱ(c)DNA聚合酶Ⅰ(d)外切核酸酶MFl(e)DNA連接酶36.λ阻遏蛋白是一種DNA結合蛋白,它屬于以下哪一組?(

)

(a)螺旋—環(huán)-螺旋蛋白(b)螺旋-轉角—螺旋蛋白

(c)鋅指蛋白(d)亮氨酸拉鏈蛋白(e)DNA脫甲基化酶37.λ原噬菌體的晚期基因的表達依靠:(

)

(a)聚合酶,σ因子,σRE,從啟動子PRE起始轉錄

(b)抗終止:N因于允許從啟動子PR開始轉錄的繼續(xù)

(c)抑制:Cro蛋白抑制從啟動子PR開始的轉錄

(d)抗終止:Q因子允許從啟動子PR開始轉錄的繼續(xù)

(e)以上全不對38.裂解細菌的噬菌體具有以下類型:(

)

(a)只有ssRNA

(b)只有dSRNA

(c)只有ssDNA

(d)只有dsDNA

(e)以上全有39.原噬菌體(整合到宿主基因組的噬菌體基因組)是自私DNA。這是因為:(

)

(a)它總是與溶源菌的基因組一起增殖

(b)它獨立于溶源菌的基因組復制

(c)它對病毒顆粒的進一步感染具有免疫力

(d)(a)和(c)對

(e)(b)和(c)對40.一個病毒有一個由單鏈負鏈RNA組成的基因組。以下哪一個過程正確描述了病毒

RNA的產(chǎn)生?(

)

(a)病毒單鏈負鏈RNA直接作為mRNA

(b)先合成雙鏈RNA,而后以新合成的正鏈作為mRNA

(c)先合成單鏈正鏈DNA,而后再轉錄成mRNA

(d)單鏈負鏈RNA病毒的基因組只編碼病毒tRNAs

(e)以上全不對41.溫和噬菌體從溶源到裂解的轉換可用以下哪個過程來描述:(

)

(a)自體調節(jié)的cⅠ基因的表達被Cro蛋白所抑制

(b)cro基因的表達被λ阻遏蛋白所抑制

(c)原噬菌體的復制被轉移因子(TF)介導的DNA聚合酶活性所誘導

(d)轉移σ因子介導的從PR啟動子開始轉錄的誘導

(e)以上全不對42.標出以下所有正確表述:(

C

)

(a)轉錄是以半保留方式獲得序列相同的兩條DNA鏈的過程

(b)依賴DNA的DNA聚合酶是多亞基酶,它負責DNA的轉錄

(c)細菌的轉錄物(mRNA)是多基因的

(d)σ因子指導真核生物hnRNA的轉錄后加工,最后形成mRNA

(e)促旋酶在模板鏈產(chǎn)生缺口,決定

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